현대인의 식생활 습관 변화와 산업화, 도시화에 따른 기후 및 대기 변화가 심해짐에 따라 역류성 인 후두염의 진단이 지속적으로 증가하는 추세이다. 하지만 역류성 인후두염 진단의 gold standard로 알려져 있는 24시간 식도 산도검사는 비용이 많이 들고, 검사시간이 길고, 불편하여 쉽게 이용하기 어렵다. 따라서 본 논문에서는 금 나노입자를 비색표지자로 사용하여 역류성 인후두염을 진단하기 위한 표지자, 펩신을 검출하는 면역스트립 센서를 제작하였다. 이 센서는 면역-크로마토그래피 ...
현대인의 식생활 습관 변화와 산업화, 도시화에 따른 기후 및 대기 변화가 심해짐에 따라 역류성 인 후두염의 진단이 지속적으로 증가하는 추세이다. 하지만 역류성 인후두염 진단의 gold standard로 알려져 있는 24시간 식도 산도검사는 비용이 많이 들고, 검사시간이 길고, 불편하여 쉽게 이용하기 어렵다. 따라서 본 논문에서는 금 나노입자를 비색표지자로 사용하여 역류성 인후두염을 진단하기 위한 표지자, 펩신을 검출하는 면역스트립 센서를 제작하였다. 이 센서는 면역-크로마토그래피 분석법을 기반으로 하여, 타액 내에 펩신이 있을 경우 결합패드의 금 나노입자-항체 중합체와 결합한 후 니트로셀룰로스 막을 따라 전개하며, 막에 고정시킨 펩신 항체와 결합하여 검사선에 붉은색 금 나노입자의 색이 나타나는 원리로 제작되었다. 이러한 검출 원리에서 센서의 성능은 포획항체의 농도에 의존한다. 따라서 본 연구에서는 효소면역분석법을 통해 항원-항체 조합을 최적화하고, 항체의 용량 및 배양시간을 최적화하여 펩신 스트립 센서의 성능을 평가하였다. 또한, 색 분석을 통해 펩신을 정량 분석하였다. 이러한 방법으로 개발된 펩신 면역스트립 센서를 이용하여 농도에 따른 색 변화를 측정하고, 0.64 ng/mm2 포획항체를 배양하였을 때 10 ng/mL의 검출한계를 얻었다. 마지막으로, 생체 시료 (즉, 사람 타액)에서의 펩신 검출을 시도하여 환자군과 비환자군으로 구별하는데 성공하였다.
현대인의 식생활 습관 변화와 산업화, 도시화에 따른 기후 및 대기 변화가 심해짐에 따라 역류성 인 후두염의 진단이 지속적으로 증가하는 추세이다. 하지만 역류성 인후두염 진단의 gold standard로 알려져 있는 24시간 식도 산도검사는 비용이 많이 들고, 검사시간이 길고, 불편하여 쉽게 이용하기 어렵다. 따라서 본 논문에서는 금 나노입자를 비색표지자로 사용하여 역류성 인후두염을 진단하기 위한 표지자, 펩신을 검출하는 면역스트립 센서를 제작하였다. 이 센서는 면역-크로마토그래피 분석법을 기반으로 하여, 타액 내에 펩신이 있을 경우 결합패드의 금 나노입자-항체 중합체와 결합한 후 니트로셀룰로스 막을 따라 전개하며, 막에 고정시킨 펩신 항체와 결합하여 검사선에 붉은색 금 나노입자의 색이 나타나는 원리로 제작되었다. 이러한 검출 원리에서 센서의 성능은 포획항체의 농도에 의존한다. 따라서 본 연구에서는 효소면역분석법을 통해 항원-항체 조합을 최적화하고, 항체의 용량 및 배양시간을 최적화하여 펩신 스트립 센서의 성능을 평가하였다. 또한, 색 분석을 통해 펩신을 정량 분석하였다. 이러한 방법으로 개발된 펩신 면역스트립 센서를 이용하여 농도에 따른 색 변화를 측정하고, 0.64 ng/mm2 포획항체를 배양하였을 때 10 ng/mL의 검출한계를 얻었다. 마지막으로, 생체 시료 (즉, 사람 타액)에서의 펩신 검출을 시도하여 환자군과 비환자군으로 구별하는데 성공하였다.
The number of patients who complain of laryngopharyngeal reflux (LPR) disease is on the gradual increase due to changes in diet, climate, and environment. LPR causes hoarseness, frequent throat clearing, bitter taste in the mouth, referred ear pain, chronic cough, and even larynx cancer. However, th...
The number of patients who complain of laryngopharyngeal reflux (LPR) disease is on the gradual increase due to changes in diet, climate, and environment. LPR causes hoarseness, frequent throat clearing, bitter taste in the mouth, referred ear pain, chronic cough, and even larynx cancer. However, the current gold standard for diagnosis of LPR is the 24 hour pH monitoring test, which is expensive, takes long time, and has low sensitivity. Therefore, appropriate treatment through accurate and rapid diagnosis is necessary. Since pepsin is proteolytic enzyme produced only in the stomach, detection of pepsin in saliva may be a useful tool for effective and non-invasive diagnosis of LPR. Herein, I focus on the development of colorimetric immunochromatographic assay that allows for the detection of pepsin in saliva samples. The strip consists of four main components: sample pad, conjugate pad, membrane, and absorbent pad. The nitrocellulose membrane is separately coated with goat anti-rabbit antibodies (control line) and monoclonal anti-pepsin antibodies (test line). When the pepsin-containing samples are applied to the sample pad, pepsin initially reacts with polyclonal antibody-coated gold nanoparticles, and then reacts with the fixed monoclonal antibody on the membrane. These reactions result in the red change at the test line, whose intensity is proportional to the pepsin concentration. The design parameters examined in this work include the antibody amount loaded to the membrane for immunochromatographic action, and incubation time. To finally, confirm the analytical usefulness of the LPR immunostrip sensor, the sensor was tested for artificial and human (patient and non-patient) saliva samples.
The number of patients who complain of laryngopharyngeal reflux (LPR) disease is on the gradual increase due to changes in diet, climate, and environment. LPR causes hoarseness, frequent throat clearing, bitter taste in the mouth, referred ear pain, chronic cough, and even larynx cancer. However, the current gold standard for diagnosis of LPR is the 24 hour pH monitoring test, which is expensive, takes long time, and has low sensitivity. Therefore, appropriate treatment through accurate and rapid diagnosis is necessary. Since pepsin is proteolytic enzyme produced only in the stomach, detection of pepsin in saliva may be a useful tool for effective and non-invasive diagnosis of LPR. Herein, I focus on the development of colorimetric immunochromatographic assay that allows for the detection of pepsin in saliva samples. The strip consists of four main components: sample pad, conjugate pad, membrane, and absorbent pad. The nitrocellulose membrane is separately coated with goat anti-rabbit antibodies (control line) and monoclonal anti-pepsin antibodies (test line). When the pepsin-containing samples are applied to the sample pad, pepsin initially reacts with polyclonal antibody-coated gold nanoparticles, and then reacts with the fixed monoclonal antibody on the membrane. These reactions result in the red change at the test line, whose intensity is proportional to the pepsin concentration. The design parameters examined in this work include the antibody amount loaded to the membrane for immunochromatographic action, and incubation time. To finally, confirm the analytical usefulness of the LPR immunostrip sensor, the sensor was tested for artificial and human (patient and non-patient) saliva samples.
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