본 연구에서는 국내 농산물과 주변 환경 시료에서 노로바이러스와 위생지표미생물을 오염현황과 오염도를 분석하여 노로바이러스와 위생지표미생물간의 상관성을 보고자 하였으며, 한편으로 노로바이러스의 제어 요인으로 다양한 식품 표면재질에 대해 온·습도 조건에 따라 노로바이러스 대체제의 불활성화정도를 분석하여 실생활에서 노로바이러스를 예방하기 위하여 적절한 식품용기 사용 및 보관방법을 생각해보고자 하였다. 2015년 7월부터 2016년 7월까지 농산물 85건, 토양 85건, 인체분변 85건, 농업용수 85건, 재배지 근처의 하천수 85건과 별도의 하천수 시료 135건에 대해 노로바이러스와 위생지표미생물인 ...
본 연구에서는 국내 농산물과 주변 환경 시료에서 노로바이러스와 위생지표미생물을 오염현황과 오염도를 분석하여 노로바이러스와 위생지표미생물간의 상관성을 보고자 하였으며, 한편으로 노로바이러스의 제어 요인으로 다양한 식품 표면재질에 대해 온·습도 조건에 따라 노로바이러스 대체제의 불활성화정도를 분석하여 실생활에서 노로바이러스를 예방하기 위하여 적절한 식품용기 사용 및 보관방법을 생각해보고자 하였다. 2015년 7월부터 2016년 7월까지 농산물 85건, 토양 85건, 인체분변 85건, 농업용수 85건, 재배지 근처의 하천수 85건과 별도의 하천수 시료 135건에 대해 노로바이러스와 위생지표미생물인 대장균군, 대장균, Male Specific Coliphage(MSC)의 오염도를 조사하였다. semi-nested PCR과 염기서열 분석을 통해, 농업용수 시료에서 2건, 하천수 시료에서 38건으로 총 40건의 시료에서 노로바이러스가 검출되었으며, typing 결과 GⅠ형과 GⅡ형이 각각 6가지의 유전자형에 대해 검출되었다. 하나의 시료에서 GⅠ형과 GⅡ형이 동시에 검출되는 경우도 있었다. 양성 시료는 real-time RT-PCR을 이용하여 정량분석을 한 결과 대체로 L 당 104 copy 정도의 오염 수준을 보였다. 양성으로 검출된 시료의 77.5%가 1월과 2월에 집중적으로 나타나 계절성을 볼 수 있었으나, 6월과 9월에도 각각 1건씩 검출되어 노로바이러스가 환경에 대한 저항성이 강함을 알 수 있었다. 양성 시료의 약 40%는 4℃ 미만에서 검출되었다. 대장균군과 대장균은 효소발색법에 의한 kit를 사용하여 MPN으로 정량 분석하였다. 대장균군의 경우 대부분의 시료가 오염되어 있었으며, 대장균의 경우는 하천수 시료를 제외하고는 약 85% 정도의 시료가 10 MPN 미만의 낮은 오염 수준을 보였다. 농산물과 함께 채취한 환경시료에 대해 대장균군과 대장균간의 상관성분석을 한 결과 하천수의 대장균 오염정도가 농산물과 농업용수의 대장균 오염도에 유의적인 영향이 있었다. 바이러스의 위생지표미생물로 생각되는 male-specific coliphage는 one layer법으로 plaque assay를 진행하여 plaque 계수를 통해 정량 분석하였다. 그 결과 하천수 시료에서만 15건 검출되었으며, 102~105 PFU/L의 범위의 오염 수준을 보였다. 또한 대장균군과 대장균의 오염 수준이 높은 시료에서 검출되었다. 노로바이러스와 위생지표미생물과의 상관성을 분석하기 위해 SPSS 통계프로그램의 피어슨상관분석을 진행한 결과, 농산물 site의 농업용수와 하천수 시료에서 검출된 노로바이러스 양성 시료의 경우 유전자형 GⅠ에 대해 대장균군은 0.290**(P=0.007<0.01), 대장균은 0.507**(P=0.000<0.01)의 유의적인 관계를 보였고, 별도 하천수 site에서는 유전자형 GⅡ에 대하여 대장균군, 대장균 및 MSC가 각각 0.231**(P=0.007<0.01), 0.549**(P=0.000<0.01), 0.884**(P=0.000<0.01)의 유의적인 연관성을 보였다. 실생활에서 주로 쓰이는 식품용기의 표면재질인 스테인리스 스틸, 유리, 플라스틱, 방짜유기에 대해 노로바이러스 대체제인 MS2 bascteriophage의 온·습도 조건에 따른 불활성화 정도를 분석한 결과, 40%, 75%의 2가지의 상대습도조건에 대해서는 MS2 phage의 활성에 큰 영향을 미치지 않는 것으로 보이며, 온도 조건에서는 4℃보다 25℃에서 감소율이 큰 것으로 보아 4℃에서는 MS2 phage가 비교적 안정함을 알 수 있었다. 또한 조건에 따라 다른 재질에 비해 방짜유기에서의 MS2 phage 불활성화정도가 비슷하거나 1log PFU/ml이상의 감소율을 보여 비교적 제어 정도가 높은 것으로 보였다. 그러므로 본 연구를 통해 국내 농산물 및 주변 환경시료로부터 노로바이러스를 검출하고 위생지표미생물과의 상관성을 분석한 결과, 여러 시료 중 하천수 시료가 노로바이러스에 오염이 많이 되어 있는 것을 보았으며, 하천수 시료의 노로바이러스 검출이 위생지표미생물의 오염도와 연관성이 있음을 확인하였다. 다만, 보다 신뢰성을 얻기 위해서는 더 많은 시료의 분석이 필요할 것으로 사료된다. 또한 이러한 노로바이러스를 예방하고 제어하기 위해 습도보다는 온도 조건을 조절하는 것이 중요하며, 굴과 같은 어패류를 대량으로 취급하는 경우에 식기구나 보관 용기로 방짜유기를 사용하면 다른 표면재질의 식품용기에 비해 노로바이러스의 제어정도가 보다 좋을 것으로 사료된다.
본 연구에서는 국내 농산물과 주변 환경 시료에서 노로바이러스와 위생지표미생물을 오염현황과 오염도를 분석하여 노로바이러스와 위생지표미생물간의 상관성을 보고자 하였으며, 한편으로 노로바이러스의 제어 요인으로 다양한 식품 표면재질에 대해 온·습도 조건에 따라 노로바이러스 대체제의 불활성화정도를 분석하여 실생활에서 노로바이러스를 예방하기 위하여 적절한 식품용기 사용 및 보관방법을 생각해보고자 하였다. 2015년 7월부터 2016년 7월까지 농산물 85건, 토양 85건, 인체분변 85건, 농업용수 85건, 재배지 근처의 하천수 85건과 별도의 하천수 시료 135건에 대해 노로바이러스와 위생지표미생물인 대장균군, 대장균, Male Specific Coliphage(MSC)의 오염도를 조사하였다. semi-nested PCR과 염기서열 분석을 통해, 농업용수 시료에서 2건, 하천수 시료에서 38건으로 총 40건의 시료에서 노로바이러스가 검출되었으며, typing 결과 GⅠ형과 GⅡ형이 각각 6가지의 유전자형에 대해 검출되었다. 하나의 시료에서 GⅠ형과 GⅡ형이 동시에 검출되는 경우도 있었다. 양성 시료는 real-time RT-PCR을 이용하여 정량분석을 한 결과 대체로 L 당 104 copy 정도의 오염 수준을 보였다. 양성으로 검출된 시료의 77.5%가 1월과 2월에 집중적으로 나타나 계절성을 볼 수 있었으나, 6월과 9월에도 각각 1건씩 검출되어 노로바이러스가 환경에 대한 저항성이 강함을 알 수 있었다. 양성 시료의 약 40%는 4℃ 미만에서 검출되었다. 대장균군과 대장균은 효소발색법에 의한 kit를 사용하여 MPN으로 정량 분석하였다. 대장균군의 경우 대부분의 시료가 오염되어 있었으며, 대장균의 경우는 하천수 시료를 제외하고는 약 85% 정도의 시료가 10 MPN 미만의 낮은 오염 수준을 보였다. 농산물과 함께 채취한 환경시료에 대해 대장균군과 대장균간의 상관성분석을 한 결과 하천수의 대장균 오염정도가 농산물과 농업용수의 대장균 오염도에 유의적인 영향이 있었다. 바이러스의 위생지표미생물로 생각되는 male-specific coliphage는 one layer법으로 plaque assay를 진행하여 plaque 계수를 통해 정량 분석하였다. 그 결과 하천수 시료에서만 15건 검출되었으며, 102~105 PFU/L의 범위의 오염 수준을 보였다. 또한 대장균군과 대장균의 오염 수준이 높은 시료에서 검출되었다. 노로바이러스와 위생지표미생물과의 상관성을 분석하기 위해 SPSS 통계프로그램의 피어슨상관분석을 진행한 결과, 농산물 site의 농업용수와 하천수 시료에서 검출된 노로바이러스 양성 시료의 경우 유전자형 GⅠ에 대해 대장균군은 0.290**(P=0.007<0.01), 대장균은 0.507**(P=0.000<0.01)의 유의적인 관계를 보였고, 별도 하천수 site에서는 유전자형 GⅡ에 대하여 대장균군, 대장균 및 MSC가 각각 0.231**(P=0.007<0.01), 0.549**(P=0.000<0.01), 0.884**(P=0.000<0.01)의 유의적인 연관성을 보였다. 실생활에서 주로 쓰이는 식품용기의 표면재질인 스테인리스 스틸, 유리, 플라스틱, 방짜유기에 대해 노로바이러스 대체제인 MS2 bascteriophage의 온·습도 조건에 따른 불활성화 정도를 분석한 결과, 40%, 75%의 2가지의 상대습도조건에 대해서는 MS2 phage의 활성에 큰 영향을 미치지 않는 것으로 보이며, 온도 조건에서는 4℃보다 25℃에서 감소율이 큰 것으로 보아 4℃에서는 MS2 phage가 비교적 안정함을 알 수 있었다. 또한 조건에 따라 다른 재질에 비해 방짜유기에서의 MS2 phage 불활성화정도가 비슷하거나 1log PFU/ml이상의 감소율을 보여 비교적 제어 정도가 높은 것으로 보였다. 그러므로 본 연구를 통해 국내 농산물 및 주변 환경시료로부터 노로바이러스를 검출하고 위생지표미생물과의 상관성을 분석한 결과, 여러 시료 중 하천수 시료가 노로바이러스에 오염이 많이 되어 있는 것을 보았으며, 하천수 시료의 노로바이러스 검출이 위생지표미생물의 오염도와 연관성이 있음을 확인하였다. 다만, 보다 신뢰성을 얻기 위해서는 더 많은 시료의 분석이 필요할 것으로 사료된다. 또한 이러한 노로바이러스를 예방하고 제어하기 위해 습도보다는 온도 조건을 조절하는 것이 중요하며, 굴과 같은 어패류를 대량으로 취급하는 경우에 식기구나 보관 용기로 방짜유기를 사용하면 다른 표면재질의 식품용기에 비해 노로바이러스의 제어정도가 보다 좋을 것으로 사료된다.
The purpose of this study was to investigate the correlation between norovirus and hygienic indicator microorganisms by analyzing contamination status and contamination level of norovirus and hygienic indicator microorganisms in domestic agricultural products and environmental samples. On the other ...
The purpose of this study was to investigate the correlation between norovirus and hygienic indicator microorganisms by analyzing contamination status and contamination level of norovirus and hygienic indicator microorganisms in domestic agricultural products and environmental samples. On the other hand, The purpose of this study was to analyze the inactivation level of Norovirus substitute according to temperature and humidity conditions for consider about the proper use and storage method of food container for prevent Norovirus in real life. From July 2015 to July 2016, total 560 samples, which were 85 cases of agricultural products, 85 cases of soils, 85 cases of human feces, 85 cases of agricultural water and 85 cases of river water near the cultivation area and another 135 cases of river water samples were investigated pollution degree of norovirus and indicator microorganisms such like Coliform bacteria, Escherichia coli and Male Specific Coliphage (MSC). Through semi-nested PCR and sequencing, six types of GI and six types of GII-type norovirus were detected from 40 samples, two in agriculture water samples and 38 in river water samples, respectively. In some cases, both GI type and GII type were detected simultaneously in one sample. Quantitative analysis of positive samples using real-time RT-PCR showed approximately 104 copies per liter. 77.5% of positive samples were detected in January and February, but each one sample was detected in June and September, indicating that Norovirus is highly resistant to the environment. And approximately 40% of the positive samples were detected at less than 4℃. Coliform and Escherichia coli were quantitatively analyzed by MPN using an enzyme - based kit. In the case of coliform, most of the samples were contaminated. In the case of E. coli, about 85% of samples except river water samples showed low contamination level of less than 10 MPN. As a result of the correlation analysis between coliform and E. coli for the environmental samples collected with agricultural products, the degree of E. coli contamination in the river water had a significant effect on the coliform contamination of agricultural products and agricultural water. The male-specific coliphage, which is considered to be a hygienic indicator microorganism of the virus, was quantitatively analyzed by plaque assay by one layer method. As a result, only 15 samples were collected from river water samples taken separately and showed a contamination level ranging from 102 to 105 PFU/L. Also, it was detected in samples with high contamination levels of coliform and E. coli. As a result of the Pearson correlation analysis of the SPSS statistical program for analyzing the correlation between norovirus and hygienic indicator microorganisms, the coliform group was 0.290**(P = 0.007 <0.01) for the genotype G I in agricultural water and river water samples detected in agricultural water samples, and E. coli was 0.507**(P = 0.000 <0.01), and the coliform group, E. coli and MSC were 0.231**(P = 0.007 <0.01), 0.549**(P = 0.000 <0.01) and 0.884**(P = 0.000 <0.01), respectively. The degree of inactivation of MS2 bacteriophage, which is a norovirus surrogate for Stainless steel, Glass, Plastic, and Bronze Alloy Yugi, which is the surface material of food containers, is 40% and 75% The relative humidity of MS2 phage did not seem to affect the activity of MS2 phage. MS2 phage seems relatively stable at 4℃ due to the large rate of decrease at 25℃ than at 4℃. In addition, the degree of inactivation of MS2 phage on the Bronze Alloy Yugi was relatively higher than other materials according to the conditions. Therefore, the present study was conducted to detect norovirus from domestic agricultural and environmental samples and to analyze the correlation between norovirus and hygienic indicator microorganisms. As a result, it was found that many river water samples were contaminated with norovirus and correlated with the contamination level of hygienic indicator microorganisms. However, more samples need to be analyzed to obtain more reliability. In addition, it is important to control the temperature condition rather than humidity in order to prevent and control such Norovirus. In the case of handling large amounts of fish and shellfish such as oysters, using Bronze Alloy Yugi containers is consider that better than using other surface materials for control of norovirus.
The purpose of this study was to investigate the correlation between norovirus and hygienic indicator microorganisms by analyzing contamination status and contamination level of norovirus and hygienic indicator microorganisms in domestic agricultural products and environmental samples. On the other hand, The purpose of this study was to analyze the inactivation level of Norovirus substitute according to temperature and humidity conditions for consider about the proper use and storage method of food container for prevent Norovirus in real life. From July 2015 to July 2016, total 560 samples, which were 85 cases of agricultural products, 85 cases of soils, 85 cases of human feces, 85 cases of agricultural water and 85 cases of river water near the cultivation area and another 135 cases of river water samples were investigated pollution degree of norovirus and indicator microorganisms such like Coliform bacteria, Escherichia coli and Male Specific Coliphage (MSC). Through semi-nested PCR and sequencing, six types of GI and six types of GII-type norovirus were detected from 40 samples, two in agriculture water samples and 38 in river water samples, respectively. In some cases, both GI type and GII type were detected simultaneously in one sample. Quantitative analysis of positive samples using real-time RT-PCR showed approximately 104 copies per liter. 77.5% of positive samples were detected in January and February, but each one sample was detected in June and September, indicating that Norovirus is highly resistant to the environment. And approximately 40% of the positive samples were detected at less than 4℃. Coliform and Escherichia coli were quantitatively analyzed by MPN using an enzyme - based kit. In the case of coliform, most of the samples were contaminated. In the case of E. coli, about 85% of samples except river water samples showed low contamination level of less than 10 MPN. As a result of the correlation analysis between coliform and E. coli for the environmental samples collected with agricultural products, the degree of E. coli contamination in the river water had a significant effect on the coliform contamination of agricultural products and agricultural water. The male-specific coliphage, which is considered to be a hygienic indicator microorganism of the virus, was quantitatively analyzed by plaque assay by one layer method. As a result, only 15 samples were collected from river water samples taken separately and showed a contamination level ranging from 102 to 105 PFU/L. Also, it was detected in samples with high contamination levels of coliform and E. coli. As a result of the Pearson correlation analysis of the SPSS statistical program for analyzing the correlation between norovirus and hygienic indicator microorganisms, the coliform group was 0.290**(P = 0.007 <0.01) for the genotype G I in agricultural water and river water samples detected in agricultural water samples, and E. coli was 0.507**(P = 0.000 <0.01), and the coliform group, E. coli and MSC were 0.231**(P = 0.007 <0.01), 0.549**(P = 0.000 <0.01) and 0.884**(P = 0.000 <0.01), respectively. The degree of inactivation of MS2 bacteriophage, which is a norovirus surrogate for Stainless steel, Glass, Plastic, and Bronze Alloy Yugi, which is the surface material of food containers, is 40% and 75% The relative humidity of MS2 phage did not seem to affect the activity of MS2 phage. MS2 phage seems relatively stable at 4℃ due to the large rate of decrease at 25℃ than at 4℃. In addition, the degree of inactivation of MS2 phage on the Bronze Alloy Yugi was relatively higher than other materials according to the conditions. Therefore, the present study was conducted to detect norovirus from domestic agricultural and environmental samples and to analyze the correlation between norovirus and hygienic indicator microorganisms. As a result, it was found that many river water samples were contaminated with norovirus and correlated with the contamination level of hygienic indicator microorganisms. However, more samples need to be analyzed to obtain more reliability. In addition, it is important to control the temperature condition rather than humidity in order to prevent and control such Norovirus. In the case of handling large amounts of fish and shellfish such as oysters, using Bronze Alloy Yugi containers is consider that better than using other surface materials for control of norovirus.
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