실험동물에서의 채혈은 기본적인 실험 방법 중에 하나이다. 실험동물을 이용한 채혈은 혈액 분석에 필요한 혈액 양과 채취에 소요되는 시간이 중요하지만 실험동물에게 가해지는 고통이나 상해 및 스트레스 등으로 인한 윤리적인 재고가 대두되고 있다. 설치류는 실험동물 가운데 가장 많은 비중을 차지하는 종으로, 설치류를 이용한 채혈방법에는 안와하정맥총, 안면정맥, 복대정맥, 설하정맥, 미정맥, 심장 채혈 등의 방법이 있다. 일반적으로 마우스의 채혈실험으로 사용되고 있는 방법은 안와하정맥총 채혈법이다. 이는 과정이 용이하고 다량의 혈액 채취량을 확보할 수는 있지만, 실험동물에게 가중되는 고통과 심각한 후유증을 유발할 수 있기 때문에 논쟁이 되고 있다. 또한 안와하정맥총 채혈법은 다른 채혈 방법과 비교했을 때 그 기술 숙련성이 요구되며, 마취가 반드시 필요하다고 권고되어지고 있다. 이 방법에 대안으로 최근 대두되고 있는 안면정맥 채혈방법은 무마취로 가능하기 때문에 손쉽게 연속 채혈이 가능하다는 장점을 가지고 있다. 본 연구에서는 마우스에 대하여 안와하정맥총 채혈과 안면정맥 채혈을 숙련자 그룹과 비숙련자 그룹으로 나누어 채혈을 실시하고 그 결과를 혈액학적 측면, 면역학적인 측면으로 비교 분석하였다. 실험은 6주령 ICR 마우스를 이용하여 2주동안 총 6번으로 진행되었으며, 그룹별 채혈 채취법의 차이를 알아보기 위해 채혈 횟수에 따른 몸무게의 변화, 0.4ml의 채혈 시간을 측정하였다. 채혈이 끝난 후에는 채혈 및 동물 조작에 따른 스트레스 영향을 평가하기 위한 ...
실험동물에서의 채혈은 기본적인 실험 방법 중에 하나이다. 실험동물을 이용한 채혈은 혈액 분석에 필요한 혈액 양과 채취에 소요되는 시간이 중요하지만 실험동물에게 가해지는 고통이나 상해 및 스트레스 등으로 인한 윤리적인 재고가 대두되고 있다. 설치류는 실험동물 가운데 가장 많은 비중을 차지하는 종으로, 설치류를 이용한 채혈방법에는 안와하정맥총, 안면정맥, 복대정맥, 설하정맥, 미정맥, 심장 채혈 등의 방법이 있다. 일반적으로 마우스의 채혈실험으로 사용되고 있는 방법은 안와하정맥총 채혈법이다. 이는 과정이 용이하고 다량의 혈액 채취량을 확보할 수는 있지만, 실험동물에게 가중되는 고통과 심각한 후유증을 유발할 수 있기 때문에 논쟁이 되고 있다. 또한 안와하정맥총 채혈법은 다른 채혈 방법과 비교했을 때 그 기술 숙련성이 요구되며, 마취가 반드시 필요하다고 권고되어지고 있다. 이 방법에 대안으로 최근 대두되고 있는 안면정맥 채혈방법은 무마취로 가능하기 때문에 손쉽게 연속 채혈이 가능하다는 장점을 가지고 있다. 본 연구에서는 마우스에 대하여 안와하정맥총 채혈과 안면정맥 채혈을 숙련자 그룹과 비숙련자 그룹으로 나누어 채혈을 실시하고 그 결과를 혈액학적 측면, 면역학적인 측면으로 비교 분석하였다. 실험은 6주령 ICR 마우스를 이용하여 2주동안 총 6번으로 진행되었으며, 그룹별 채혈 채취법의 차이를 알아보기 위해 채혈 횟수에 따른 몸무게의 변화, 0.4ml의 채혈 시간을 측정하였다. 채혈이 끝난 후에는 채혈 및 동물 조작에 따른 스트레스 영향을 평가하기 위한 코르티솔 수치를 ELISA방법으로 측정하였으며, 혈액학적 검사를 위해 자동혈구분석기를 통해 백혈구, 적혈구 등의 혈액 세포분포를 측정하였다. 스트레스와 면역학적 세포 비교분석을 위해 6번의 채혈 후 마우스의 비장을 적출하여 무게와 길이를 측정하여 비교하였고, 유세포 분석기를 이용하여 비장 세포내 과립구세포와 대식세포의 분포를 확인하였다. 또한 조직손상도 분석은 채혈부위의 조직을 채취하여 조직병리학적 염색을 실시하여 분석하였다. 본 연구에서 두 그룹(숙련자, 비숙련자 그룹)간에 두 채혈 방법을 이용한 채혈 후 체중 변화는 대조군에 비해 차이가 없었다. 안면정맥 채혈은 안와하정맥총 채혈에 비해 동일한 양의 채혈 시간이 상대적으로 적었으며, 특히, 비숙련자의 숙련성이 숙련자와 비교하여 채혈 횟수가 증가할수록 빠르게 향상되는 것을 채혈 시간과 양에서 확인할 수 있었다. 반면, 안와하정맥총 채혈에서 비숙련자의 경우 동물조작의 미숙도에 따라 실험동물의 상해 편차가 크게 나타났고, 숙련성 습득에 다소 긴 시간을 요하였다. 실험을 거듭할수록 안와하정맥총 채혈로 인한 안구 손상이 두 그룹 모두에서 발견되었다. 스트레스 호르몬인 혈액 내 코르티솔 수치도 두 그룹 모두 안와하정맥총 채혈에 비해 안면정맥 채혈에서 전반적으로 낮게 나타났다. 비장의 크기 및 세포의 수 또한 안면정맥 채혈에서 상대적으로 낮았으며, 면역학적으로 스트레스와 연관이 있는 과립구세포와 대식세포 분포를 혈액과 비장에서 확인하였을 때, 이들의 분포가 두 그룹 모두 안면정맥 채혈에서 안와하정맥총 채혈보다 상대적으로 낮았다. 본 실험의 결과를 종합하여 판단하였을 때, 안면정맥 채혈법은 시간대비, 혈액학적 분석, 면역학적 분석 및 윤리적인 면에서 안와하정맥총 채혈보다 우수한 것으로 나타났다. 채혈이 미치는 조직 손상 및 스트레스 지수를 비교해 볼 때 중/장기적인 채혈 및 채혈 횟수를 요하는 실험의 경우 안면정맥 채혈법이 적절하다고 볼 수 있다. 또한, 안면정맥 채혈법은 숙련자 뿐만 아니라 비 숙련자가 실시하더라도 쉽고 빠르게 실험동물을 조작하여 낮은 스트레스로 채혈이 가능하므로 동물 윤리적, 복지적인 실험법으로 보급될 수 있을 것으로 사료된다.
실험동물에서의 채혈은 기본적인 실험 방법 중에 하나이다. 실험동물을 이용한 채혈은 혈액 분석에 필요한 혈액 양과 채취에 소요되는 시간이 중요하지만 실험동물에게 가해지는 고통이나 상해 및 스트레스 등으로 인한 윤리적인 재고가 대두되고 있다. 설치류는 실험동물 가운데 가장 많은 비중을 차지하는 종으로, 설치류를 이용한 채혈방법에는 안와하정맥총, 안면정맥, 복대정맥, 설하정맥, 미정맥, 심장 채혈 등의 방법이 있다. 일반적으로 마우스의 채혈실험으로 사용되고 있는 방법은 안와하정맥총 채혈법이다. 이는 과정이 용이하고 다량의 혈액 채취량을 확보할 수는 있지만, 실험동물에게 가중되는 고통과 심각한 후유증을 유발할 수 있기 때문에 논쟁이 되고 있다. 또한 안와하정맥총 채혈법은 다른 채혈 방법과 비교했을 때 그 기술 숙련성이 요구되며, 마취가 반드시 필요하다고 권고되어지고 있다. 이 방법에 대안으로 최근 대두되고 있는 안면정맥 채혈방법은 무마취로 가능하기 때문에 손쉽게 연속 채혈이 가능하다는 장점을 가지고 있다. 본 연구에서는 마우스에 대하여 안와하정맥총 채혈과 안면정맥 채혈을 숙련자 그룹과 비숙련자 그룹으로 나누어 채혈을 실시하고 그 결과를 혈액학적 측면, 면역학적인 측면으로 비교 분석하였다. 실험은 6주령 ICR 마우스를 이용하여 2주동안 총 6번으로 진행되었으며, 그룹별 채혈 채취법의 차이를 알아보기 위해 채혈 횟수에 따른 몸무게의 변화, 0.4ml의 채혈 시간을 측정하였다. 채혈이 끝난 후에는 채혈 및 동물 조작에 따른 스트레스 영향을 평가하기 위한 코르티솔 수치를 ELISA방법으로 측정하였으며, 혈액학적 검사를 위해 자동혈구분석기를 통해 백혈구, 적혈구 등의 혈액 세포분포를 측정하였다. 스트레스와 면역학적 세포 비교분석을 위해 6번의 채혈 후 마우스의 비장을 적출하여 무게와 길이를 측정하여 비교하였고, 유세포 분석기를 이용하여 비장 세포내 과립구세포와 대식세포의 분포를 확인하였다. 또한 조직손상도 분석은 채혈부위의 조직을 채취하여 조직병리학적 염색을 실시하여 분석하였다. 본 연구에서 두 그룹(숙련자, 비숙련자 그룹)간에 두 채혈 방법을 이용한 채혈 후 체중 변화는 대조군에 비해 차이가 없었다. 안면정맥 채혈은 안와하정맥총 채혈에 비해 동일한 양의 채혈 시간이 상대적으로 적었으며, 특히, 비숙련자의 숙련성이 숙련자와 비교하여 채혈 횟수가 증가할수록 빠르게 향상되는 것을 채혈 시간과 양에서 확인할 수 있었다. 반면, 안와하정맥총 채혈에서 비숙련자의 경우 동물조작의 미숙도에 따라 실험동물의 상해 편차가 크게 나타났고, 숙련성 습득에 다소 긴 시간을 요하였다. 실험을 거듭할수록 안와하정맥총 채혈로 인한 안구 손상이 두 그룹 모두에서 발견되었다. 스트레스 호르몬인 혈액 내 코르티솔 수치도 두 그룹 모두 안와하정맥총 채혈에 비해 안면정맥 채혈에서 전반적으로 낮게 나타났다. 비장의 크기 및 세포의 수 또한 안면정맥 채혈에서 상대적으로 낮았으며, 면역학적으로 스트레스와 연관이 있는 과립구세포와 대식세포 분포를 혈액과 비장에서 확인하였을 때, 이들의 분포가 두 그룹 모두 안면정맥 채혈에서 안와하정맥총 채혈보다 상대적으로 낮았다. 본 실험의 결과를 종합하여 판단하였을 때, 안면정맥 채혈법은 시간대비, 혈액학적 분석, 면역학적 분석 및 윤리적인 면에서 안와하정맥총 채혈보다 우수한 것으로 나타났다. 채혈이 미치는 조직 손상 및 스트레스 지수를 비교해 볼 때 중/장기적인 채혈 및 채혈 횟수를 요하는 실험의 경우 안면정맥 채혈법이 적절하다고 볼 수 있다. 또한, 안면정맥 채혈법은 숙련자 뿐만 아니라 비 숙련자가 실시하더라도 쉽고 빠르게 실험동물을 조작하여 낮은 스트레스로 채혈이 가능하므로 동물 윤리적, 복지적인 실험법으로 보급될 수 있을 것으로 사료된다.
Blood collection is one of the basic experimental methods in sampling researches by using experimental animals. Although the amount of blood and time of blood collection are important for experimental blood collection, ethical aspects due to pain, injury and stress in experimental animals is emergin...
Blood collection is one of the basic experimental methods in sampling researches by using experimental animals. Although the amount of blood and time of blood collection are important for experimental blood collection, ethical aspects due to pain, injury and stress in experimental animals is emerging. There are methods for collecting blood such as the retroorbital plexus, facial vein, saphenous vein, sublingual vein, lateral tail vein, and cardiac puncture in rodents. The most general site used for blood sampling in mice is the retroorbital plexus (RP). It is a controversial issue because the process is easy and can get a lot of blood, but it can cause terrible pain and severe sequelae in experimental animals. In addition, methods of blood collection in RP require skilled techniques and anesthesia compared to other methods of blood collection. As an alternative to the blood collection method in RP, the blood collection method in facial vein (FV) had recently being interested in for the advantage of no need to anesthesia. There has been a comparative analysis of the effects of blood sampling using the RP and FV on stress influence, but no comparative studies have been reported on experienced and novice researchers based on blood collection methods. In this study, the investigator compared and analyzed the hematological and immunological aspects of blood collection between the experienced and novice groups after sampling the RP and FV. Sixty 6weeks-old ICR mice were used for 6 experiments in 2 weeks, and body weight changes were measured according to the number of blood collections and 0.4 ml blood sampling time to determine the difference between the blood collection methods. Free cortisol levels were measured by ELISA to assess the effect of stress on blood collection and animal handling. For comparative analysis of stress and immune cells, the spleens of the mice were collected, weighed and compared after 6 blood samplings. In addition, tissue damage was analyzed on the tissues collected from both of blood collection sites. There were no different changes in body weight between the two groups (experienced and novice) compared to the control groups. Compared to the experienced group, FV is relatively faster in blood collection time compared to RP, and as the number of blood collection increases, the techniques of novice group increase rapidly. On the other hand, in RP, novice group showed great differences in damage to experimental animals due to immaturity of their techniques, and it takes a long time to master the technique. As time passed, both groups showed eye damages caused by retroorbital plexus bleeding. Free cortisol levels (a type of stress hormone) in FV were also lower in the two groups than in RP. The size and cells of the spleen are relatively low in FV than in RP. Because the distribution of granulocytes and macrophages in the blood and spleen is immunologically related to the stress, FV was relatively lower than that of RP. In conclusion, the facial vein collection method is superior to the retroorbital plexus collection method in terms of collection time, hematology analysis, immunology analysis, and the ethics. When comparing tissue damage and blood collection stress indicators, facial vein collection is suitable for experiments that require medium/long-term blood collection and blood collection times. In addition, both of experienced and novice researchers can easily and quickly collect the blood of experimental animals at low stress and so the facial vein collection method can be recommended as an animal welfare method.
Blood collection is one of the basic experimental methods in sampling researches by using experimental animals. Although the amount of blood and time of blood collection are important for experimental blood collection, ethical aspects due to pain, injury and stress in experimental animals is emerging. There are methods for collecting blood such as the retroorbital plexus, facial vein, saphenous vein, sublingual vein, lateral tail vein, and cardiac puncture in rodents. The most general site used for blood sampling in mice is the retroorbital plexus (RP). It is a controversial issue because the process is easy and can get a lot of blood, but it can cause terrible pain and severe sequelae in experimental animals. In addition, methods of blood collection in RP require skilled techniques and anesthesia compared to other methods of blood collection. As an alternative to the blood collection method in RP, the blood collection method in facial vein (FV) had recently being interested in for the advantage of no need to anesthesia. There has been a comparative analysis of the effects of blood sampling using the RP and FV on stress influence, but no comparative studies have been reported on experienced and novice researchers based on blood collection methods. In this study, the investigator compared and analyzed the hematological and immunological aspects of blood collection between the experienced and novice groups after sampling the RP and FV. Sixty 6weeks-old ICR mice were used for 6 experiments in 2 weeks, and body weight changes were measured according to the number of blood collections and 0.4 ml blood sampling time to determine the difference between the blood collection methods. Free cortisol levels were measured by ELISA to assess the effect of stress on blood collection and animal handling. For comparative analysis of stress and immune cells, the spleens of the mice were collected, weighed and compared after 6 blood samplings. In addition, tissue damage was analyzed on the tissues collected from both of blood collection sites. There were no different changes in body weight between the two groups (experienced and novice) compared to the control groups. Compared to the experienced group, FV is relatively faster in blood collection time compared to RP, and as the number of blood collection increases, the techniques of novice group increase rapidly. On the other hand, in RP, novice group showed great differences in damage to experimental animals due to immaturity of their techniques, and it takes a long time to master the technique. As time passed, both groups showed eye damages caused by retroorbital plexus bleeding. Free cortisol levels (a type of stress hormone) in FV were also lower in the two groups than in RP. The size and cells of the spleen are relatively low in FV than in RP. Because the distribution of granulocytes and macrophages in the blood and spleen is immunologically related to the stress, FV was relatively lower than that of RP. In conclusion, the facial vein collection method is superior to the retroorbital plexus collection method in terms of collection time, hematology analysis, immunology analysis, and the ethics. When comparing tissue damage and blood collection stress indicators, facial vein collection is suitable for experiments that require medium/long-term blood collection and blood collection times. In addition, both of experienced and novice researchers can easily and quickly collect the blood of experimental animals at low stress and so the facial vein collection method can be recommended as an animal welfare method.
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