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친화성크로마토그래피로 순수분리한 폐흡충 성충 성분단백질의 성상
Component proteins in crud extract of adult Paragonimus westermani purified by immunoaffinity chromatography using monoclonal antibodes 원문보기

기생충학잡지 = The Korean journal of parasitology, v.29 no.4 = no.71, 1991년, pp.363 - 370  

강신영 (중앙대학교 의과대학 기생충학교실) ,  공윤 (중앙대학교 의과대학 기생충학교실) ,  조승열 (중앙대학교 의과대학 기생충학교실)

초록
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인체감염이 다발하는 폐흡충증의 혈청학적 진단에서 항원으로 사용하는 성충추출액은 여러단계의 질환 이행과정을 진단하는 항원으로서 문제가 있다. 이를 해결하려면 먼저 추출액내의 성분단백질의 성상을 파악할 필요가 있다. 이 연구에서는 폐흡충 성충 추출액으로 면역시킨 BALB/c mice의 비장세포와 SP2/0 형질세포종 세포를 세포융합하여 제작한 단세포군항체를 이용하여 친화성크로마토그래피로 폐흡충 성충의 구성단백질의 일부를 순수분리하고 성상을 관찰하였다. 그 결과는 다음과 같다. 1. 세포융합으로 PFCK-21, PFCK-44, PFCK-136, PFCK-189 등 4종류의 단세포군 항체를 얻었다. 그중 PFCK-21과 PFCK44는 17k Da, PFCK-136은 23, 46, 92 kDa 단백질에 반응하였고 PFCK-189는 여러종류의 단백질에 반응하였다. 2. PFCK-44 단세포군항체를 고리로 친화성 크로마토그래피를 실시하여 분리한 성분 단백질은 disc-PAGE상 4번째에 위치하고 분자량이 17 kDa로 알려진 단밸질이었다. 이 단밸질은 17 kDa의 monomer로 판단하였다. 면역조직화학염색을 실시한 결과 이 단밸질은 장관 상피세포에 반응하고 있었다. 3. PFCK-136 단세포군항체로 순수분리한 단밸질은 disc-PAGE상 1번 단밸질(440 kDa)이었으며 환원성 SDS-PAGE에서는 23 kDa 단밸질이었다. 면역조직화학염색으로 이 단세포군항체는 충란내 세포에 강하게 반응하고 있었다.

참고문헌 (20)

  1. Korean J Parasitol Cho 19 2 151 1981 10.3347/kjp.1981.19.2.151 

  2. Korean J Parasitol Cho 27 1 15 1989 10.3347/kjp.1989.27.1.15 

  3. Korean J Parasitol Choi 24 2 177 1986 10.3347/kjp.1986.24.2.177 

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  7. Jpn J Parasitol Imai 37 398 1988 

  8. Korean J Parasitol Joo 27 1 9 1989 10.3347/kjp.1989.27.1.9 

  9. Joo 27 1 1 1989 

  10. Korean J Parasitol Kim 26 4 239 1988 10.3347/kjp.1988.26.4.239 

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  14. Korean J Parasitol Lee 24 2 187 1986 10.3347/kjp.1986.24.2.187 

  15. J Biol Chem LOWRY 193 1 265 1951 10.1016/S0021-9258(19)52451-6 

  16. Seminars in Resp Med Shim 12 35 1991 10.1055/s-2007-1006223 

  17. Am J Trop Med Hyg Slemenda 39 5 469 1988 10.4269/ajtmh.1988.39.469 

  18. Parasitol Res Sugiyama 75 2 144 1988 10.1007/BF00932714 

  19. J Parasitol Sugiyama 73 2 363 1987 10.2307/3282091 

  20. Methods Enzymol Tsang 92 377 1983 10.1016/0076-6879(83)92032-3 

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