잎들깨 재배지에서 직$\cdot$간접적으로 피해를 입히는 뿌리썩이선충(Pratylenchus spp.)의 생물학적 방제를 위해서 3종의 선충포식성 곰팡이, Arthrobotrys oligospora, A. conoides와 A. dactyloides의 선충방제 효과를 포장시험을 통하여 검정하였다. 3종의 Arthrobotrys는 1998년 잎들깨 재배지 토양에서 분리하였으며, 이들 곰팡이들은 한천배지상에서 끈끈이그물 또는 수축성 올가미와 같은 특이한 균사구조를 형성하여 뿌리썩이선층을 포획하는 것으로 관찰하였다. 야외포장 실험결과, 대조구에서는 40일 경과 후 식물기생성 선충 및 뿌리썩이선충의 밀도가 약 3.5배 증가한 반면 선충포식성 곰팡이 A. oligospora와 A. conoides 처리구에서는 단지 선충의 밀도가 큰 증감없이 접종 전의 수준을 유지하는 효과를 보였다. 그러나 A. dactyloides 처리구에서는 식물기생성 선충의 밀도를 약 65%, 뿌리썩이 선충의 밀도를 약 53% 감소시켜, 선충포식성 곰팡이의 생물학적 방제효과가 높게 나타났다.
잎들깨 재배지에서 직$\cdot$간접적으로 피해를 입히는 뿌리썩이선충(Pratylenchus spp.)의 생물학적 방제를 위해서 3종의 선충포식성 곰팡이, Arthrobotrys oligospora, A. conoides와 A. dactyloides의 선충방제 효과를 포장시험을 통하여 검정하였다. 3종의 Arthrobotrys는 1998년 잎들깨 재배지 토양에서 분리하였으며, 이들 곰팡이들은 한천배지상에서 끈끈이그물 또는 수축성 올가미와 같은 특이한 균사구조를 형성하여 뿌리썩이선층을 포획하는 것으로 관찰하였다. 야외포장 실험결과, 대조구에서는 40일 경과 후 식물기생성 선충 및 뿌리썩이선충의 밀도가 약 3.5배 증가한 반면 선충포식성 곰팡이 A. oligospora와 A. conoides 처리구에서는 단지 선충의 밀도가 큰 증감없이 접종 전의 수준을 유지하는 효과를 보였다. 그러나 A. dactyloides 처리구에서는 식물기생성 선충의 밀도를 약 65%, 뿌리썩이 선충의 밀도를 약 53% 감소시켜, 선충포식성 곰팡이의 생물학적 방제효과가 높게 나타났다.
For the biological control of the root-lesion nematodes, Pratylenchus spp., which damage directly and indirectly to the leaf perilla, the nematical effect of three nematode-trapping fungi, Arthrobotrys oligospora, A. conoides and A. dactyloides was evaluated in the field. Three species of Arthrobotr...
For the biological control of the root-lesion nematodes, Pratylenchus spp., which damage directly and indirectly to the leaf perilla, the nematical effect of three nematode-trapping fungi, Arthrobotrys oligospora, A. conoides and A. dactyloides was evaluated in the field. Three species of Arthrobotrys were isolated from the culture soil of leaf perilla in 1998 and were observed the capture of the root-lesion nematodes, Pratylenchus spp. by adhesive hyphal networks or constricting rings on agar. At 40 days after treatment, the plant-parasitic nematodes and root-lesion nematode populations were approximately increased 3.5 fold in untreated control plot, while the nematode population in fungi treatment plots was similar to initial population. In the A. dactyloides plot, however, the population of plant-parasitic nematodes and Pratylenchus spp. was approximately reduced 65% and 53%, respectively. Thus, the fungus A. dachyloides should provide as biological agent for the control of Pratylenchus spp.
For the biological control of the root-lesion nematodes, Pratylenchus spp., which damage directly and indirectly to the leaf perilla, the nematical effect of three nematode-trapping fungi, Arthrobotrys oligospora, A. conoides and A. dactyloides was evaluated in the field. Three species of Arthrobotrys were isolated from the culture soil of leaf perilla in 1998 and were observed the capture of the root-lesion nematodes, Pratylenchus spp. by adhesive hyphal networks or constricting rings on agar. At 40 days after treatment, the plant-parasitic nematodes and root-lesion nematode populations were approximately increased 3.5 fold in untreated control plot, while the nematode population in fungi treatment plots was similar to initial population. In the A. dactyloides plot, however, the population of plant-parasitic nematodes and Pratylenchus spp. was approximately reduced 65% and 53%, respectively. Thus, the fungus A. dachyloides should provide as biological agent for the control of Pratylenchus spp.
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문제 정의
본 연구는 남부지방의 잎들깨 재배지에서 잎들께의 생육 저하 및 고사의 원인이 되는 뿌리썩이선충(Pratylenchus spp.)을 방제하기 위해서 3종의 선충포식성 곰팡이, A oligospora, A. dactyloides와 A. coiioides를 잎들깨 재배지 토양에서 분리하였으며, 포장시험을 통하여 생물학적 방제제로서 그 활용 가능성을 검정화있다.
제안 방법
005% acid-fuchsin, 20% liquid phenol, 18% lactic acid, 35% glycerin) 염색법으로 확인하였다[5]. Acid fuchsin-lactophenol 50 mF을 비듬점까지 가열한 후, 잎들깨 뿌리를 1분간 침지하여 뿌리를 염색하였다, 염색된 뿌리는 lactophenol(21.5% liquid phenol, 19% lactic acid, 36.6%이ycwin) 용액에 3일간 침지시켜 탈색하였다.
분리된 곰팡이의 형태적 특성 관찰은 김 등[9]이 보고한 방법에 준하여 실시하였다. Water agar(2%)> 직경 9 cm petri dish에 부어 굳힌 후, 미리 증식시킨 뿌리썩이선충을 약 100마리씩 접종하였으며, 곰팡이를 그 중앙에 접종하였다. 접종 7일 후 해부현미경으로 선충 포식기관(Trapping organ)의 형태 및 크기, 분생포자의 형태, 크기, 가지의 유무, 포자마디(node)의 존재 여부등 그 형태적 특성 관찰을 통화여 선중포식성 곰팡이를 동정하였다[9].
선충 방제효과를 검정하였다. 각 곰팡이 처리구 및 대조구는 10 ㎡으로 각각 3구역씩 설정한 후, 선충 포식성 곰팡이를 처리하기 전에 토양내 선충의 평균밀도를 조사하였다. 이 후, 고체배지 (pellet)에 배양 중식한 선충포식성 곰팡이를 각 처리구당 5 Kg씩 살포한 후, 40일 경과후 각 처리구 및 디조구에서 선충밀도를 조사 비교하였다.
뿌리썩이선충의 감염밀도가 높은 부산 대저동 잎들깨 재배지를 선정하여 고체 배지에 배양된 선충포식성 곰팡이의 선충 방제효과를 검정하였다. 각 곰팡이 처리구 및 대조구는 10 ㎡으로 각각 3구역씩 설정한 후, 선충 포식성 곰팡이를 처리하기 전에 토양내 선충의 평균밀도를 조사하였다.
각 곰팡이 처리구 및 대조구는 10 ㎡으로 각각 3구역씩 설정한 후, 선충 포식성 곰팡이를 처리하기 전에 토양내 선충의 평균밀도를 조사하였다. 이 후, 고체배지 (pellet)에 배양 중식한 선충포식성 곰팡이를 각 처리구당 5 Kg씩 살포한 후, 40일 경과후 각 처리구 및 디조구에서 선충밀도를 조사 비교하였다.
Water agar(2%)> 직경 9 cm petri dish에 부어 굳힌 후, 미리 증식시킨 뿌리썩이선충을 약 100마리씩 접종하였으며, 곰팡이를 그 중앙에 접종하였다. 접종 7일 후 해부현미경으로 선충 포식기관(Trapping organ)의 형태 및 크기, 분생포자의 형태, 크기, 가지의 유무, 포자마디(node)의 존재 여부등 그 형태적 특성 관찰을 통화여 선중포식성 곰팡이를 동정하였다[9]. 동정된 선충포식성 곰팡이는 고체 배지인 pellet에서 대향 배양하였디-.
토양으로부터 선충포식성 곰팡이의 분리는 체취한 토양을 0.75% water agar 배지에 두는 방법으로 실시하였으며[2], 순수 분리된 곰팡이는 corn meal agarfDifco; CMA)에 접종하여 25℃에서 배양하였다. 분리된 곰팡이의 형태적 특성 관찰은 김 등[9]이 보고한 방법에 준하여 실시하였다.
대상 데이터
뿌리썩이선충의 생물적 방제제로 사용된 3종의 선충포식성 곰팡이, Arthrobotnis oligospora, A. conoides 와 A. dacty-loides는 1998년 8〜9월에 부산 대저동 잎들깨 재배지 토양에서분리하였다(Table 1). A.
뿌리에서 분리하였다. 잎들깨 뿌리는 부산 대저동 잎들깨 재배지에서 채취하였으며, 이후 선충 분리전 까지 4℃의 냉장고에 보관하였다. 잎들깨 뿌리를 증류수로 3회 세척한 후, 칼로 잘게 절단하여 증류수 100 m에 침지시켜 25°C, 100 rpm에서 24시간 동안 배양하였다, 이후 뿌리를 제거하고 200 mash를 이용하여 선충을 분리하였다.
이론/모형
75% water agar 배지에 두는 방법으로 실시하였으며[2], 순수 분리된 곰팡이는 corn meal agarfDifco; CMA)에 접종하여 25℃에서 배양하였다. 분리된 곰팡이의 형태적 특성 관찰은 김 등[9]이 보고한 방법에 준하여 실시하였다. Water agar(2%)> 직경 9 cm petri dish에 부어 굳힌 후, 미리 증식시킨 뿌리썩이선충을 약 100마리씩 접종하였으며, 곰팡이를 그 중앙에 접종하였다.
잎들깨 뿌리를 증류수로 3회 세척한 후, 칼로 잘게 절단하여 증류수 100 m에 침지시켜 25°C, 100 rpm에서 24시간 동안 배양하였다, 이후 뿌리를 제거하고 200 mash를 이용하여 선충을 분리하였다. 분리된 뿌리씩이선충은 carrot disc을 이용한 뿌리쌕이선충 배양 방법에 준하여 배양하였다[12]. 분리된 뿌리썩이선충을 1% streptomysin sulfate, 0.
뿌리썩이선충(root-lesion nematode)의 분리 및 배먐뿌리썩 이선충은 Barker의 진동법[1]에 준하여 고사한 잎들깨 뿌리에서 분리하였다. 잎들깨 뿌리는 부산 대저동 잎들깨 재배지에서 채취하였으며, 이후 선충 분리전 까지 4℃의 냉장고에 보관하였다.
01% chlorhexidine용액에 24시간 동안 침지하여 표면을 소독한 후, 화임 살균된 carrot disc에 접종하여 25℃ 항온기에 2개월간 배양하였다. 잎들깨 뿌리의 cortex에 침입한 뿌리썩이선충은 acid fuchsin- lactophenol(0.005% acid-fuchsin, 20% liquid phenol, 18% lactic acid, 35% glycerin) 염색법으로 확인하였다[5]. Acid fuchsin-lactophenol 50 mF을 비듬점까지 가열한 후, 잎들깨 뿌리를 1분간 침지하여 뿌리를 염색하였다, 염색된 뿌리는 lactophenol(21.
성능/효과
dactyloides의 성장 속도는 다른 포식성 곰팡이에 비하여 매우 느린 것으로 알려져 있다[9]. 3종와 선충포식성 곰팡이 pellet 처리에 의한 식물 기생성 선충 및 뿌리썩이선중의 밀도는 대조구와 비교했을 때 상당한 차이를 나타냈었다(Fig. 3). 곰팡이 제제 처리전 토양10g 당 식물기생성 선충의 밀도는 대조구에서 22.
3A). 결론적으로 식물 기생성 선중의 밀도는 대조구 및 A. oligospora와 A. conoides 곰팡이 게제 처리구에서 각각 75, 8.4, 10마리가 즘가한 반면, A. dactyloides 처리구에서는 18.8마리가 감소하였다, 뿌리써이선충의 밀도는 처리전 대조구, A. oligospora, A. conoides와 A dactyloides 처리구에서 각각 7.2, 12.4, 16.4와 22.8마리로 조사되었고, 처리 40일 경과 후에는 대조구에서 31.2 마리, A. oligospora, A. conoides와 A. dactyloides 처리구에서 각각 9.6, 19.2, 12마리로 조사되었다(Fig 3B). 즉, A.
3). 곰팡이 제제 처리전 토양10g 당 식물기생성 선충의 밀도는 대조구에서 22.6마리, A. oligospora 처리구에서는 37.2 마리, A. conoides 처리구에서는 42.8 마리, A. dactyloides에서는 54.8 마리로 각각 조사되었으며, 처리 40일 경과후 토양 10g 당 식물기생성 선충의 밀도는 대조구에서 97.6마리, A. oligospora 처리구에서 45.6마리, A. conoiiks 처리구에서는 52.8마리, A.dactyloides 에서는 36마리로 조사되었다(Fig. 3A). 결론적으로 식물 기생성 선중의 밀도는 대조구 및 A.
부산 대저동 잎들개 재배지에서 채취한 잎 들깨 뿌리 및 토양을 분석한 결과, 상당수의 뿌리썩이선충이 토양 및 뿌리에 기생하고 있는 것을 확인하였다(Fig 1). 잎들깨 재배지에서 확인된 뿌리썩이선중은 다년간 연작재배로 인하여 그밀도가 증가하였으며, 생육저해 및 식물 고사등 이들 선충에 의한 피해가 매우 큰 것으로 생각된다 뿌리썩이선충 {Pratylencus spp.
2B), 죽은 선충 주위에는 많은 분생호자병을 형성하였는데 가지는 형성하지 않고 포자 마디(node)를 형성하였다. 분생포자의 하단부는 A. couoides 와A.dachyloides에 비해 매우 굵고 튼튼하였다. 포자 마디에 약 10〜15개의 분생포자가 둥글게 붙어 있었다.
이상의 결과에 의하면 재배지 토양에 서식하고 있는 식물 기생성 선충 및 뿌리썩이선충의 밀도는 대조구에서 약 3.5배 증가한 반면, A. oligospora와 A. conoides 처리시 선충의 밀도는 거의 변화 없이 일정한 밀도를 유지하였으며, 특히 A. dactyloides 처리구에서는 식물기생성 선충의 밀도가 약 65% 감소하였고, 뿌리씨 이 선충은 약 53% 감소하였다. 이는 선충포식성 곰팡이에 의해 토양내 선충의 밀도가 일정하게 유지되었으며 특히 A.
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