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제안 방법
- GOT(glutamic oxaloacetic transaminase)활성도는 37 °C, 340 nm에서 5분간 측정하였고 GPT(glutamic py ruvate transaminase)는 37°C, 340nm에서 3분간 측정하였다. GOT 및 GPT활성은 Johnson and Johnson Ekta- chem분석기 (USA)를 이용하여 측정하였으며, 활성 단위는 단백질 1 mg당 1 unit로 나타내었다.
- HDL-cho- lesterol, LDL-cholesterol, phospholipid의 분석 은 kit(아산제약)를 사용하여 분광광도넙으로 37°C, 550 nm에서 5분간 측정하였다. 또한 이를 이묨하여 심혈관계 질환의 위험도 판정에 사용되는 동맥경화지수 및 HTR(high density lipoprotein cholesterol and total cholesterol r근tio)고} LtIRdow density lipoprotein cholesterol and high density lipoprotein cholesterol ratio)을 산출하였다.
- . Japan)를 사岳하여, 분광광도계 (Beckman DU series-70)로 505 nm에서 측정 하였으며 Lriglycende는 550nm에서 흡광도를측정하여 계산하였다.
- 각 심험군의 쥐에서 간 조직을 적출하여 조식 절편을 제작한 후, paraformaldehyde 1%오} glutaraldehyde 1% 가 포함된 고성 액 에 2시 간 전고정하고 완충용액에 세척한 다음. 2% osmium telroxide용액 에 후고정하였디-.
- 2% osmium telroxide용액 에 후고정하였디-. 고정된 조직절편은 탈수 과정을 거쳐 Lowicryl HM20에 포매하여 Reicurt Yung ultramicrotome으로 초박절편을 제작하였다 제작된 조직의 초박절편들은 grid에 부착하여 lard citrale와uranyl acetate에 이중염색하여 Zeiss EM 109 투고卜전자현미 경 (transmission electron microscope) 으로 관찰하였다.
- powdered mixed diet를 사용하였다. 대조군의 식이 구싱은 casein 20%, AIN-76 mineral mix 3.5%, AIN-76 vitamin mix 1%, DL-methionme 0 18%, a-cellulose 2 0 %. com starch 15%, corn oil 4%, sucrose 51.
- HDL-cho- lesterol, LDL-cholesterol, phospholipid의 분석 은 kit(아산제약)를 사용하여 분광광도넙으로 37°C, 550 nm에서 5분간 측정하였다. 또한 이를 이묨하여 심혈관계 질환의 위험도 판정에 사용되는 동맥경화지수 및 HTR(high density lipoprotein cholesterol and total cholesterol r근tio)고} LtIRdow density lipoprotein cholesterol and high density lipoprotein cholesterol ratio)을 산출하였다.
- 3군으로 나누어 8주 동안 사육하였디-. 본 실험군은 정상 식이군, ethanol 투여군, ethanol과 굼벵이 병용 투여군으로 구분하였다. 사육실의 조건 중 온도는 20- 22°C, 습도는 50%, 채광은 12시간주기 조명이었으며, 물은 자유로이 먹을 수 있도록 하였다.
- 사육실의 조건 중 온도는 20- 22°C, 습도는 50%, 채광은 12시간주기 조명이었으며, 물은 자유로이 먹을 수 있도록 하였다. 사료는 매일 일정한 시간에 일정량믈 주었고, 식 이 섭 취 량과 체중은 일주일에 2번씩 측정하였다.
- 본 실험군은 정상 식이군, ethanol 투여군, ethanol과 굼벵이 병용 투여군으로 구분하였다. 사육실의 조건 중 온도는 20- 22°C, 습도는 50%, 채광은 12시간주기 조명이었으며, 물은 자유로이 먹을 수 있도록 하였다. 사료는 매일 일정한 시간에 일정량믈 주었고, 식 이 섭 취 량과 체중은 일주일에 2번씩 측정하였다.
- 사육이 끝난 실험동물을 12시간 동안 절식시키고 에데르로 마취 시 킨 후 경추탈골법 에 의하여 도살하고, 심 장으로부터 혈 액 을 채 취 하였 다. 채 취 한 헬 엑 은 3000 rpm(4°C) 에서 15분간 원심분리하여 혈청을 분리하고 기타 장기 특히 긴-, 위, 신장, 콩팥은 혈액채취 후 즉시 적출하여 생리식염수로 세척하고 여과지로 표면의 수분을 제거한 후 무게를 측정하였다 장기, 혈청의 시료는 분석 전까지 -70 °C 냉동고에 보관하였다.
- 실험동물의 diet는 각가의 식이재료들을 혼합한 형태인 powdered mixed diet를 사용하였다. 대조군의 식이 구싱은 casein 20%, AIN-76 mineral mix 3.
- 굼벵 이 는 동결건조하여 diet 에 5%첨가하였으며. 에탄올은 Kim과 LeeCU)의 방법에 따라 25% 에탄올을 5 mL/kg, bw/day의 수준으로 stomach tube를 통하여 6주간 경 구 뚜여 하였다 즉, 8주간의 시-육기간 중 1주간은 새로운 혼합분말 사료에 적응 기간을 두고 에탄올을 투여하지 않았으며, 이후 6주간 투여한 후 마지막 1주는 투여하지 않았다.
- 간의 총지질은 Folch 빔으로 추출하였디-. 즉적출된 간 조직 은 무게 측정 후 chloroform-methanol(2 :1, v/v) 용매를 가하여 homogenizer균질화한 다음 3000 rpni에서 10분간 원심분리하고, 상등액을 취하여 감압 건조시킨 후무게를 측정 하여 총지 질 함량을 구하였다. 그후 촘지 질을 chloroform 3 mL에 용헤 한 다음 total cholesterol, HDL- cholesterol, LDL-cholesterol, phospholipid는 효소비식법을 이용한kitCWakci Co.
대상 데이터
- 실험동물은 체중 100 g정도 되는 Sprague-Daw ley 계의 수컷흰쥐를 대한동물센터로부터 분양 받아 일주일간 적응 사육시킨 후 체중에 따른 난괴법에 의하여 각 군 당 10마리씩 3군으로 나누어 8주 동안 사육하였디-. 본 실험군은 정상 식이군, ethanol 투여군, ethanol과 굼벵이 병용 투여군으로 구분하였다.
데이터처리
- 3)Values wilhin the same column with different alphabets are siginificiintly different among groups by Duncan's multiple range test at p<0.05.
- 본 실험에서 얻어진 결괴-의 통계적 유의성은SAS(sta- tisLical analysis system) program을 이용하여 실험군당 평균(mean)土표준편차(SEM)로 표시하였고 각 군의 평균차의 통계적 유의성을 p<0.05 수준에서 Duncan^ multiple range test에 의해 검정하였다.
이론/모형
- GOT 및 GPT활성은 Johnson and Johnson Ekta- chem분석기 (USA)를 이용하여 측정하였으며, 활성 단위는 단백질 1 mg당 1 unit로 나타내었다.
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