연구배경: MMR 유전자의 불활성화에 의해 야기되는 유전적 불안정성은 발암기전의 한 부류로 인정되고 있다. 저자들은 비소세포폐암의 발암과정에서의 MSI의 역할을 규명하기 위해 비소세포폐암에서 MSI의 빈도 및 MSI 유무에 따른 임상상의 차이를 조사하였다. 대상 및 방법: 근치적 절제술을 받은 비소세포폐암 20예를 대상으로 하였다. 동결된 폐암조직과 환자의 림프구에서 DNA를 추출한 후 3p와 9p의 15개의 marker들을 대상으로 PCR을 시행하고 7% polyacrylamide gel에서 전기영동한 후 silver 염색을 시행하였다. 암조직과 림프구 DNA의 PCR product의 band를 비교하여 MSI와 LOH를 판정하였다. 결 과: 1) 대상환자들은 남자 19예, 여자 1예였으며 모두 흡연자였고 평균 흡연력은 47 갑년이었다. 폐암의 조직형은 편평상피암 15예, 선암 4예, 대세포암 1예였고, 술후병리학적병기는 I기 6예, II기 5예, IIIA기 7예, IIIB 기 2예였다. 2) 20예 가운데 8예(40%)에서 MSI가 관찰되었으며 3예는 한 개의 marker에서, 5예는 2개 이상의 marker에서 MSI가 관찰되었다. 3) LOH는 10예(50%) 에서 있었으며, LOH 유무에 따른 병기 및 흡연력의 차이가 없었다. 4) 분석한 marker의 10% 이상에서 MSI가 관찰된 MSI-L 종양은 5 예였으며, 대부분의 marker에서 MSI 양성인 MSI-H 종양은 없었다. MSS 종양과 MSI-L 종양은 흡연력, 병기, 폐암 조직형 및 LOH 빈도의 유의한 차이가 없었다. 결 론: 비소세포폐암에서 MSI는 비교적 흔히 관찰되지만 MMR 유전자의 불활성화에 의한 MMP pathway는 비소세포폐암의 주요 발생기전은 아닐 것으로 생각된다. 향 후 비소세포폐암의 발암과정에 있어서 MMP pathway의 역할을 규명하기 위해서는 보다 많은 예를 대상으로 한 연구가 필요할 것으로 생각되며, MSI 발생기전에 관한 추가적인 연구가 필요할 것으로 생각된다.
연구배경: MMR 유전자의 불활성화에 의해 야기되는 유전적 불안정성은 발암기전의 한 부류로 인정되고 있다. 저자들은 비소세포폐암의 발암과정에서의 MSI의 역할을 규명하기 위해 비소세포폐암에서 MSI의 빈도 및 MSI 유무에 따른 임상상의 차이를 조사하였다. 대상 및 방법: 근치적 절제술을 받은 비소세포폐암 20예를 대상으로 하였다. 동결된 폐암조직과 환자의 림프구에서 DNA를 추출한 후 3p와 9p의 15개의 marker들을 대상으로 PCR을 시행하고 7% polyacrylamide gel에서 전기영동한 후 silver 염색을 시행하였다. 암조직과 림프구 DNA의 PCR product의 band를 비교하여 MSI와 LOH를 판정하였다. 결 과: 1) 대상환자들은 남자 19예, 여자 1예였으며 모두 흡연자였고 평균 흡연력은 47 갑년이었다. 폐암의 조직형은 편평상피암 15예, 선암 4예, 대세포암 1예였고, 술후병리학적병기는 I기 6예, II기 5예, IIIA기 7예, IIIB 기 2예였다. 2) 20예 가운데 8예(40%)에서 MSI가 관찰되었으며 3예는 한 개의 marker에서, 5예는 2개 이상의 marker에서 MSI가 관찰되었다. 3) LOH는 10예(50%) 에서 있었으며, LOH 유무에 따른 병기 및 흡연력의 차이가 없었다. 4) 분석한 marker의 10% 이상에서 MSI가 관찰된 MSI-L 종양은 5 예였으며, 대부분의 marker에서 MSI 양성인 MSI-H 종양은 없었다. MSS 종양과 MSI-L 종양은 흡연력, 병기, 폐암 조직형 및 LOH 빈도의 유의한 차이가 없었다. 결 론: 비소세포폐암에서 MSI는 비교적 흔히 관찰되지만 MMR 유전자의 불활성화에 의한 MMP pathway는 비소세포폐암의 주요 발생기전은 아닐 것으로 생각된다. 향 후 비소세포폐암의 발암과정에 있어서 MMP pathway의 역할을 규명하기 위해서는 보다 많은 예를 대상으로 한 연구가 필요할 것으로 생각되며, MSI 발생기전에 관한 추가적인 연구가 필요할 것으로 생각된다.
Purpose: Microsatellite instability(MSI) is frequently used as an indicator of microsatellite mutator phenotype(MMP) tumors. MSI has been observed in a percentage of non-small cell lung cancer(NSCLC). However, its role in tumorigenesis of NSCLC remains unknown. The frequency and pattern of MSI in NS...
Purpose: Microsatellite instability(MSI) is frequently used as an indicator of microsatellite mutator phenotype(MMP) tumors. MSI has been observed in a percentage of non-small cell lung cancer(NSCLC). However, its role in tumorigenesis of NSCLC remains unknown. The frequency and pattern of MSI in NSCLC were evaluated and clinical parameters of MSI-positive tumors with those of MSS(microsatellite stable) tumors were compared. Materials and Methods: Twenty surgically resected NSCLCs were analyzed for 15 microsatellite markers located at chromosomes 3p and 9p. The peripheral blood lymphocytes of patients were used as the source of the normal DNA. Results: 1) Of 20 cases, 8(40%) demonstrated MSI. 2) Instability was observed more frequently in tri- and tetra-nucleotide repeats than in dinucleotide repeats. In all cases, instability appeared as a shift of individual allelic bands. 3) LDH was observed in 10(50%) of 20 tumors analyzed. 4) Of 20 cases, MSI-H tumor(showing MSI in the majority of markers) was absent. There were 5 MSI-L tumors(showing MSI in a greater than 10% of markers). 5) No significant difference was observed between MSI-L tumors and MSI-negative tumors in terms of clinicopathologic features such as pack-year history of smoking, histologic subtype, and(delete) stage of disease. There was also no significant difference in the incidence of LDH in relation to the status of MSI. Conclusion: These data strongly suggest that MSI plays different roles in lung and colon cancer. MMP pathway appears to be far less important in the tumorigenesis of NSCLC, caused mainly by cigarette smoke, with little familial tendency.
Purpose: Microsatellite instability(MSI) is frequently used as an indicator of microsatellite mutator phenotype(MMP) tumors. MSI has been observed in a percentage of non-small cell lung cancer(NSCLC). However, its role in tumorigenesis of NSCLC remains unknown. The frequency and pattern of MSI in NSCLC were evaluated and clinical parameters of MSI-positive tumors with those of MSS(microsatellite stable) tumors were compared. Materials and Methods: Twenty surgically resected NSCLCs were analyzed for 15 microsatellite markers located at chromosomes 3p and 9p. The peripheral blood lymphocytes of patients were used as the source of the normal DNA. Results: 1) Of 20 cases, 8(40%) demonstrated MSI. 2) Instability was observed more frequently in tri- and tetra-nucleotide repeats than in dinucleotide repeats. In all cases, instability appeared as a shift of individual allelic bands. 3) LDH was observed in 10(50%) of 20 tumors analyzed. 4) Of 20 cases, MSI-H tumor(showing MSI in the majority of markers) was absent. There were 5 MSI-L tumors(showing MSI in a greater than 10% of markers). 5) No significant difference was observed between MSI-L tumors and MSI-negative tumors in terms of clinicopathologic features such as pack-year history of smoking, histologic subtype, and(delete) stage of disease. There was also no significant difference in the incidence of LDH in relation to the status of MSI. Conclusion: These data strongly suggest that MSI plays different roles in lung and colon cancer. MMP pathway appears to be far less important in the tumorigenesis of NSCLC, caused mainly by cigarette smoke, with little familial tendency.
* AI 자동 식별 결과로 적합하지 않은 문장이 있을 수 있으니, 이용에 유의하시기 바랍니다.
제안 방법
동결된 폐암조직과 환자의 림프구에서 proteinase K 와 phenol/chloroform 방법으로 genomic DNA를 추출한 후 3p와 9p의 microsatellite marker (이하 marker)들을(Table 1) 이용하여 PCR을 시행하였다. 각 환자의 폐암조직과 림프구의 PCR 생산물 10μl를 쌍으로 하여 7% polyacrylamide gel에서 전기 영동 한 후 silver 염색을 시행하였다.
근치적 절제술을 받은 비소세포폐암 20예를 대상으로 하였다. 동결된 폐암조직과 환자의 림프구에서 DNA 를 추출한 후 3p와 9p의 15개의 marker들을 대상으로 PCR을 시행하고 7% polyacrylamide gel에서 전기영동한 후 silver 염색을 시행하였다. 암조직과 림프구 DNA의 PCR product의 band를 비교하여 MSI와 LOH를 판정하였다.
동결된 폐암조직과 환자의 림프구에서 proteinase K 와 phenol/chloroform 방법으로 genomic DNA를 추출한 후 3p와 9p의 microsatellite marker (이하 marker)들을(Table 1) 이용하여 PCR을 시행하였다. 각 환자의 폐암조직과 림프구의 PCR 생산물 10μl를 쌍으로 하여 7% polyacrylamide gel에서 전기 영동 한 후 silver 염색을 시행하였다.
1과 같이 림프구와 비교하여 암조직에서 새로운 대립유전자가 나타난 경우를 MSI 양성으로 판정하였으며13,14, 암조직의 대립유전자 signal이 림프구의 50%이하로 감소된 경우를 LOH로 판정하였다15,16. 모든 실험은 정확도를 위하여 각 marker 당 2회 이상 분석하였다,
동결된 폐암조직과 환자의 림프구에서 DNA 를 추출한 후 3p와 9p의 15개의 marker들을 대상으로 PCR을 시행하고 7% polyacrylamide gel에서 전기영동한 후 silver 염색을 시행하였다. 암조직과 림프구 DNA의 PCR product의 band를 비교하여 MSI와 LOH를 판정하였다.
저자들은 비소세 포폐 암의 발암과정에 MMP pathway의 역할을 규명하기 위해 근치적 절제술을 받은 비소세포폐암에서 MSI의 빈도와 MSI 유무에 따른 임상상의 차이를 조사하였다.
MMR 유전자의 불활성화에 의해 야기되는 유전적 불안정성은 발암기전의 한 부류로 인정되고 있다. 저자들은 비소세포폐암의 발암과정에서의 MSI의 역할을 규명하기 위해 비소세포폐암에서 MSI의 빈도 및 MSI 유무에 따른 임상상의 차이를 조사하였다.
그러나 폐암의 경우에는 아직 이와 같은 "reference" panel이 확립되어 있지 않다. 저자들은 폐암에서 MSI가 흔히 관찰되는 3p와 9p에 위치하는 markers 들을 사용하여 MSI를 분석 하였다.
대상 데이터
1997년 1월부터 1997년 12월까지 경북대학교병원 에서 비소세포폐암으로 근치적절제술을 받은 환자들 가운데 폐암조직의 DNA와 환자의 림프구 DNA가 냉동 보관된 20예를 대상으로 하였다.
근치적 절제술을 받은 비소세포폐암 20예를 대상으로 하였다. 동결된 폐암조직과 환자의 림프구에서 DNA 를 추출한 후 3p와 9p의 15개의 marker들을 대상으로 PCR을 시행하고 7% polyacrylamide gel에서 전기영동한 후 silver 염색을 시행하였다.
남자 19예, 여자 1예였으며, 평균연령은 62(±8.2) 세였다. 대상환자 20예 모두 흡연자였으며, 평균 흡연력은 47(±17.
데이터처리
에서 MSI가 양성인 MSI-H 종양으로 구분하여13,14 비교하였다. 통계적 분석은 Fisher's exact test로 각 군간의 성적을 비교하였다.
성능/효과
1) 대상환자들은 남자 19예 , 여자 1예였으며 모두 흡연자였고 평균 흡연력은 47 갑년이었다. 폐암의 조직형은 편평상피암 15예, 선암 4예, 대세포암 1예였고, 술 후 병리학적 병기는 Ⅰ기 6예, Ⅱ기 5예, ⅢA기 7예, ⅢB기 2예였다.
폐암의 조직형은 편평상피암 15예, 선암 4예, 대세포암 1예였고, 술 후 병리학적 병기는 Ⅰ기 6예, Ⅱ기 5예, ⅢA기 7예, ⅢB기 2예였다. 2) 20예 가운데 8예 (40%) 에서 MSI가 관찰되었으며 3예는 한 개의 marker에서, 5예는 2개 이상의 marker에서 MSI가 관찰되었다. 3) LOH는 10예 (50%)에서 있었으며, LOH 유무에 따른 병기 및 흡연력의 차이가 없었다.
2) 20예 가운데 8예 (40%) 에서 MSI가 관찰되었으며 3예는 한 개의 marker에서, 5예는 2개 이상의 marker에서 MSI가 관찰되었다. 3) LOH는 10예 (50%)에서 있었으며, LOH 유무에 따른 병기 및 흡연력의 차이가 없었다. 4) 분석한 marker에서 10% 이상예서 MSI가 관찰된 MSI -L 종양은 5예였으며, 대부분의 marker에서 MSI 양성인 MSI-H 종양은 없었다.
3) LOH는 10예 (50%)에서 있었으며, LOH 유무에 따른 병기 및 흡연력의 차이가 없었다. 4) 분석한 marker에서 10% 이상예서 MSI가 관찰된 MSI -L 종양은 5예였으며, 대부분의 marker에서 MSI 양성인 MSI-H 종양은 없었다. MSS 종양과 MSI-L 종양은 흡연력, 병기, 폐암 조직형 및 LOH 빈도의 유의한 차이가 없었다.
3예는 한 개의 marker에서, 5예는 2개 이상의 marker 에서 MSI가 있었다 (Table 3). MSI는 FHIT 유전자 marker인 DS4103에서 20예 가운데 4예 (20%)에서 양성으로 가장 빈도가 높았다 (Table 4).
MSI-L 종양은 5예였으며, MSI-H인 예는 없었다. MSS 종양 12예와 MSI-L 종양 5예의 임상상과 LQH의 빈도는 유의한 차이가 없었다(Table 5).
4) 분석한 marker에서 10% 이상예서 MSI가 관찰된 MSI -L 종양은 5예였으며, 대부분의 marker에서 MSI 양성인 MSI-H 종양은 없었다. MSS 종양과 MSI-L 종양은 흡연력, 병기, 폐암 조직형 및 LOH 빈도의 유의한 차이가 없었다.
LOH가 있었던 경우는 편평상피암 15예, 대세포암 1예였으며, 선암에서는 LOH 가 없었다. 병리학적 병기에 따른 LOH의 빈도는 Ⅰ기는 6예 가운데 5예, Ⅱ기는 5예 가운데 Ⅰ예 , ⅢA기는 7예 가운데 4예로 병기에 따른 차이는 없었으며, LOH 유 • 무에 따른 흡연력의 차이도 없었다.
후속연구
비소세포폐암에서 MSI는 비교적 흔히 관찰되지만 MMR 유전자의 불활성화에 의한 MMP pathway는 비소세포폐암의 주요 발생기전은 아닐 것으로 생각된다. 향후 비소세포폐암의 발암과정에 있어서 MMP pathway의 역할을 규명하기 위해서는 보다 많은 예를 대상으로 한 연구가 필요할 것으로 생각되며, MSI 발생기전에 관한 추가적인 연구가 필요할 것으로 생각 된다.
※ AI-Helper는 부적절한 답변을 할 수 있습니다.