폐암은 전세계적으로 높은 발병율과 사망률을 보이는 암종으로 소세포암종과 비소세포암종으로 구분되어지며, 비소세포암이 75-80%를 차지하고 있다. miR-155의 유전자의 과 발현은 갑상선암, 유방암, 대장암, 자궁 경부암, 췌장선암(PDAC), 폐암 등의 고형암에서 관찰된다. 본 연구에서는 한국인 폐암 환자의 조직에서 특이적으로 발현되는 miRNA의 양상을 양성 폐질환자 와 비교 분석하고, 폐암환자의 임상병리학적 특성과의 상관성을 분석하여 miRNA가 암 진단의 생물표지자로서의 가능성을 조사하여 향후 암의 조기 진단 및 치료, 예후 연구에 기초 자료를 제공하고자 하였다. 파라핀 포매 된 비소세포폐암환자 및 양성 폐 질환자의 블록에서 total RN를의 분리하여, 정량 실시간연쇄중합반응을 통해 miR-155의 발현량을 정량 분석을 실시하였으며, miR-155의 발현과 폐암환자의 임상적 특징과의 상관관계를 분석하였다. 폐암 환자군과 양성 폐질환자의 miR-155의 △Ct 값을 분석한 결과 폐암환자군에서 유의하게 높게 발현되었다(p<0.001). 병리조직학적 분류에 따라서는 편평상피세포암종에서 선암종에 비해 높게 발현되었다. 분화도에 따라서는 저분화 암에서 고분화암에 비해 유의하게 높게 발현되었다(p=<0.001). 또한 miR-155의 과발현은 림프절 전이와도 통계적으로 유의성 나타내었다(p<0.05). 생존분석결과 miR-155의 과발현은 폐암환자의 생존률과 유의한 상관관계를 나타내었다(p<0.05). 본 연구의 결과로 miR-155의 발현은 폐암의 진행 및 전이에 중요한 역할을 할 것으로 생각되며, 폐암의 조기진단과 예후의 예측을 위하여 보다 다양한 종류의 miRNAs에 대한 연구가 이루어져야 할 것으로 판단된다.
폐암은 전세계적으로 높은 발병율과 사망률을 보이는 암종으로 소세포암종과 비소세포암종으로 구분되어지며, 비소세포암이 75-80%를 차지하고 있다. miR-155의 유전자의 과 발현은 갑상선암, 유방암, 대장암, 자궁 경부암, 췌장선암(PDAC), 폐암 등의 고형암에서 관찰된다. 본 연구에서는 한국인 폐암 환자의 조직에서 특이적으로 발현되는 miRNA의 양상을 양성 폐질환자 와 비교 분석하고, 폐암환자의 임상병리학적 특성과의 상관성을 분석하여 miRNA가 암 진단의 생물표지자로서의 가능성을 조사하여 향후 암의 조기 진단 및 치료, 예후 연구에 기초 자료를 제공하고자 하였다. 파라핀 포매 된 비소세포폐암환자 및 양성 폐 질환자의 블록에서 total RN를의 분리하여, 정량 실시간연쇄중합반응을 통해 miR-155의 발현량을 정량 분석을 실시하였으며, miR-155의 발현과 폐암환자의 임상적 특징과의 상관관계를 분석하였다. 폐암 환자군과 양성 폐질환자의 miR-155의 △Ct 값을 분석한 결과 폐암환자군에서 유의하게 높게 발현되었다(p<0.001). 병리조직학적 분류에 따라서는 편평상피세포암종에서 선암종에 비해 높게 발현되었다. 분화도에 따라서는 저분화 암에서 고분화암에 비해 유의하게 높게 발현되었다(p=<0.001). 또한 miR-155의 과발현은 림프절 전이와도 통계적으로 유의성 나타내었다(p<0.05). 생존분석결과 miR-155의 과발현은 폐암환자의 생존률과 유의한 상관관계를 나타내었다(p<0.05). 본 연구의 결과로 miR-155의 발현은 폐암의 진행 및 전이에 중요한 역할을 할 것으로 생각되며, 폐암의 조기진단과 예후의 예측을 위하여 보다 다양한 종류의 miRNAs에 대한 연구가 이루어져야 할 것으로 판단된다.
Lung cancer is currently the most common malignant disease and the leading cause of mortality in the world and non-small cell lung cancer (NSCLC) accounts for 75-80% of lung cancer cases. miR-155 gene was found to be over expressed in several solid tumors, such as thyroid carcinoma, breast cancer, c...
Lung cancer is currently the most common malignant disease and the leading cause of mortality in the world and non-small cell lung cancer (NSCLC) accounts for 75-80% of lung cancer cases. miR-155 gene was found to be over expressed in several solid tumors, such as thyroid carcinoma, breast cancer, colon cancer, cervical cancer, pancreatic ductal adenocarcinoma (PDAC) and lung cancer. The aims of this study were to define the expression of miR-155 in lung cancer and its associated clinic-pathologic characteristics. Total RNA was purified from formalin-fixed, paraffin-embedded NSCLC tissues and benign lung tissues. Expression of miR-155 in human lung cancer tissues were evaluated as mean fold changes of miR-155 in cancer tissues compared to benign lung tissues by quantitative real-time reverse transcriptase polymerase chain reaction (real-time qRT-PCR) and associations of miR-155 expression with clinic-pathologic findings of cancer. Compared with the benign control group, miR-155 expression was significantly overexpressed in NSCLCs (p=<0.001). miR-155 was more overexpressed in squamous cell carcinoma than in adenocarcinoma. Poorly differentiated tumors showed significantly overexpression of miR-155 than well-differentiated tumors (p=<0.001). Overexpression of miR-155 was significantly associated with lymph node metastasis (p=<0.05). In survival analysis for all NSCLC patients, high miR-155 expression was significantly correlated with worse overall survival (p=<0.05). These results suggested that miR-155 might play an important role in lung cancer progression and metastasis.
Lung cancer is currently the most common malignant disease and the leading cause of mortality in the world and non-small cell lung cancer (NSCLC) accounts for 75-80% of lung cancer cases. miR-155 gene was found to be over expressed in several solid tumors, such as thyroid carcinoma, breast cancer, colon cancer, cervical cancer, pancreatic ductal adenocarcinoma (PDAC) and lung cancer. The aims of this study were to define the expression of miR-155 in lung cancer and its associated clinic-pathologic characteristics. Total RNA was purified from formalin-fixed, paraffin-embedded NSCLC tissues and benign lung tissues. Expression of miR-155 in human lung cancer tissues were evaluated as mean fold changes of miR-155 in cancer tissues compared to benign lung tissues by quantitative real-time reverse transcriptase polymerase chain reaction (real-time qRT-PCR) and associations of miR-155 expression with clinic-pathologic findings of cancer. Compared with the benign control group, miR-155 expression was significantly overexpressed in NSCLCs (p=<0.001). miR-155 was more overexpressed in squamous cell carcinoma than in adenocarcinoma. Poorly differentiated tumors showed significantly overexpression of miR-155 than well-differentiated tumors (p=<0.001). Overexpression of miR-155 was significantly associated with lymph node metastasis (p=<0.05). In survival analysis for all NSCLC patients, high miR-155 expression was significantly correlated with worse overall survival (p=<0.05). These results suggested that miR-155 might play an important role in lung cancer progression and metastasis.
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문제 정의
폐암과 miRNA의 발현 양상에 대한 국내연구는 세포주를 대상으로 한 연구가 대부분이고 조직을 대상으로 한 연구는 미비한 실정이다. 이에 본 연구에서는 한국인 폐암 환자의 조직에서 특이적으로 발현되는 miRNA의 양상을 양성 폐질환자 와 비교 분석하고, 폐암 환자의 임상병리학적 특성과의 상관성을 분석하여 miRNA가 암 진단의 생물표지자로서의 가능성을 조사하여 향후 암의 조기진단 및 치료, 예후 연구에 기초 자료를 제공하고자 하였다.
제안 방법
TaqMan MicroRNA Reverse Transcription Kit (Applied Biosystems, Foster City, CA, USA)를 사용하여 RNA 100 ng 에 stem loop RT-primer (5X) 3 μl와 RT Master mix 7 μl, RNase inhibitor (20U/μl) 0.2 μl, RNase-free water 2.8 μl를혼합한 용액 15 μl를 Gene Amp PCR system 9600을 사용하여 16℃에서 30분, 42℃에서 30분, 85℃에서 5분간 반응시켜 cDNA를 합성하였다. 합성된 cDNA는 5배 희석하여 Quanti- tative real time PCR에 사용하였다.
표적 miRNA의 표준화 대조군으로 U6 small RNA (RNU6B) 를 정량 하였고 동일 시료로 Quantitative real time PCR를 3회 반복 시행하여 평균값을 구하여 발현량을 정량화 하였다. U6B발현을 기준으로 하여 생성된 각각의 역치 주기 값(thres- hold cycle value, CT value)들을 표준화 하였으며 이후 표준화된 이 값을 상대치로 환산하였다.
본 연구는 성균관대학교 창원 삼성병원의 IRB 심의(심의번호 2012-scmc-044-00)를거쳐 승인을 획득하였다. 그리고 성별, 연령, 종양의 위치와크기, 전이 유무, 흡연 유무, 병기, 재발 유무 등 각 환자들의임상병리학적 특성을 조사하였다. 폐암환자군은 편평상피암 (squamous cell carcinoma)이 27명, 선암(adenocarcinoma)이 20명이었으며, 분화도에 따라서는 저등도, 중등도, 고등도가각각 10명, 17명, 20명이었다.
평균값으로 하였다. 기준값 보다 낮은 △Ct값은높은 발현으로 분류하였고, 높은 △Ct값은 낮은 발현으로 분류하였다.
폐암의 생성과정에서도 miRNA 는 표적으로 하는 mRNA유전자에 따라 종양유전자 또는 종양 억제유전자로 작용할 수 있으므로 종양에 따라 특이 적으로 변화된 miRNA의 발현 양상을 파악하는 것은 암을 조기에 진단하는데 도움이 될 수 있다고 사료된다. 따라서 본 연구에서는 폐암 환자 조직 47예와 양성 폐질환자 조직 10예를 대상으로 특징적으로 발현하는 miR-155를 선정하여 폐암 환자와 양성 폐질환자에서의 miRNA발현을 비교 분석하였으며, 폐암 환자의 임상병리학적 특성에 따른 miRNA발현의 상관성을 비교 분석하였다.
유전자 발현에 대한 상대적인 정량은 폐암 환자의 △Ct값에서 양성 폐 질환자의 △Ct값을 빼서 구한 ΔΔCt방법을 이용하여 측정하였고, 양성 폐 질환자의 △△Ct값을 ‘1’로 기준하여폐암 환자의 ratio값을 산출하였다(Ratio = 2-△△Ct). Ratio값이 ‘1’보다 낮으면 증폭산물이 일정량으로 증폭되는 cycle수가느리므로 발현율이 낮은 ‘down’를 의미하고 ‘1’보다 높으면증폭산물이 일정량으로 증폭되는 cycle수가 빠르므로 발현율이 높은 ‘over’를 의미한다.
조직학적으로 WHO분류 기준에 따라 각질(keratin)을 형성하고, 중층편평상피와 유사할 경우 편평세포암으로 분류하였으며, 선조직(gland)을 형성하여 섬유기질을 침범하는 특징을보일 경우 선암종으로 분류하였다(Fig. 1).
대조군으로는 양성 폐 질환인탄분섬유증(Anthracofibrosis) 환자 10명의 파라핀 포매 조직을 재료로 사용하였다. 폐암 유형을 확인하기 위하여 hema- toxylin and eosin 염색을 한 후 현미경으로 관찰하여 WHO (World Health Organization)분류에 따라 폐암 유형을 결정하였다. 실험에 사용된 폐암환자군과 양성폐질환자군의 임상적특징은 Table 1, 2에 표시하였다.
합성된 cDNA 2 μl에 TaqMan 2X universal PCR master mix (Applied Biosystems, Foster City, CA, USA) 10 μl, Primer and Probe mix (20X) 1 μl, RNase free water 7 μl를 혼합한 용액 20 μl를 ABI PRISM 7000 sequence detection system (Applied Biosystems, Foster City, CA, USA)을 사용하여 Quantitative real time PCR을 수행하였고 2중 분석으로 miRNA의 발현 정도를 측정하였다. 표적 miRNA의 표준화 대조군으로 U6 small RNA (RNU6B) 를 정량 하였고 동일 시료로 Quantitative real time PCR를 3회 반복 시행하여 평균값을 구하여 발현량을 정량화 하였다. U6B발현을 기준으로 하여 생성된 각각의 역치 주기 값(thres- hold cycle value, CT value)들을 표준화 하였으며 이후 표준화된 이 값을 상대치로 환산하였다.
우리나라에서 폐암과 양성 폐질환자의 miRNA에 대한 연구는 2009년 Son 등의 연구 이후 처음이라 할 수 있다[27]. 하지만 Son 등의 연구에서는 폐암환자의 임상병리학적 특성과 miRNA 에 대한 연구는 없었고 본 연구에서는 이러한 폐암 조직에서 특이적으로 발현되는 miRNA를 조사하고 그 중 폐암 진단에 가능성을 줄 수 있는 표적 miRNA를 선별하였다.
합성된 cDNA는 5배 희석하여 Quanti- tative real time PCR에 사용하였다. 합성된 cDNA 2 μl에 TaqMan 2X universal PCR master mix (Applied Biosystems, Foster City, CA, USA) 10 μl, Primer and Probe mix (20X) 1 μl, RNase free water 7 μl를 혼합한 용액 20 μl를 ABI PRISM 7000 sequence detection system (Applied Biosystems, Foster City, CA, USA)을 사용하여 Quantitative real time PCR을 수행하였고 2중 분석으로 miRNA의 발현 정도를 측정하였다. 표적 miRNA의 표준화 대조군으로 U6 small RNA (RNU6B) 를 정량 하였고 동일 시료로 Quantitative real time PCR를 3회 반복 시행하여 평균값을 구하여 발현량을 정량화 하였다.
대상 데이터
폐암환자군은 편평상피암 (squamous cell carcinoma)이 27명, 선암(adenocarcinoma)이 20명이었으며, 분화도에 따라서는 저등도, 중등도, 고등도가각각 10명, 17명, 20명이었다. 대조군으로는 양성 폐 질환인탄분섬유증(Anthracofibrosis) 환자 10명의 파라핀 포매 조직을 재료로 사용하였다. 폐암 유형을 확인하기 위하여 hema- toxylin and eosin 염색을 한 후 현미경으로 관찰하여 WHO (World Health Organization)분류에 따라 폐암 유형을 결정하였다.
본 연구는 성균관대학교 창원 삼성병원에 내원하여 생검이나 근치수술을 시행하여 조직병리학적으로 폐암으로 진단을받은 47명의 환자를 대상으로 하였다. 본 연구는 성균관대학교 창원 삼성병원의 IRB 심의(심의번호 2012-scmc-044-00)를거쳐 승인을 획득하였다.
파라핀 조직으로부터 total RNA를 분리하기 위하여 RNA paraffin kit (Applied Roche Science, Indianapolis, IN, USA) 를 사용하였다. RNA의 추출은 제조사의 매뉴얼에 따라서 다음과 같이 수행하였다.
데이터처리
Control 에 비해 sample의 유전자 발현량이 얼마나 증감하고 있는 지를 분석하기 위해 ΔCt값을 산출하였다. ΔCt값은 sample 의 Ct값에서 internal control사용된 RNU6B의 Ct 값을 빼서 △Ct을 측정하여 Normalization하였으며, △Ct값이 음의 값이면 증폭되는 cycle수가 빠르기 때문에 유전자 발현량의 증가를 의미하고 △Ct값이 양의 값이면 증폭되는 cycle 수가 느리기 때문에 유전자 발현량의 감소를 의미한다.
MicroRNA발현 변화는 평균 ± 표준편차로 나타내었고 각 임상병리학적 특성에 따른 miRNA의 발현을 보기 위해 두 그룹 간의 비교는 independent t-test를 이용하였고 세 그룹 간의 비교는 one-way ANOVA를 이용하여 분석하였다. 통계학적 분석은 PASW version 19.
통계학적 분석은 PASW version 19.0을 이용하였고 유의수준은 p< 0.05로 하였다.
이론/모형
MicoRNA-155의 발현에 따른 생존분석은 사망이 발생한시점마다 구간생존율을 구하여 이들의 누적으로서 누적생존율을 구하는 Kaplan-Meier모형을 사용하였으며, 기준값은 양성폐질환자의 평균값으로 하였다. 기준값 보다 낮은 △Ct값은높은 발현으로 분류하였고, 높은 △Ct값은 낮은 발현으로 분류하였다.
성능/효과
높은 △Ct값은 낮은 발현으로 분류하였다. Fig. 2 에서 보듯이 Kaplan-Meier모형의 생존분석결과 폐암환자의 5년 생존률은 miR-155의 과 발현이 관찰된 환자에서는 15.8% 였으며, 과 발현이 관찰되지 않은 환자에서는 77.8%로 miR- 155의 과 발현이 관찰된 환자와 비교하여 유의하게 낮은 생존률을 보였다(p=<0.001).
Quantitative real-time PCR을 통해 정량 분석한 결과 miR- 155가 양성 폐 질환자에 비해 발현율이 증가한 것을 확인하였다. miR-155는 염색체 21q21.
종양 크기에 따른 발현은 ≥5 에서<5에 비해 높게 발현되었지만 통계적 유의성은 없었다. 림프절 전이에 따른 발현은 전이된 조직이 전이되지 않은 조직이 보다 발현이 높은 경향을 보였고 통계적 유의성이 있었다(p=0.014). 분화도에 따라서는 분화도가 좋을수록 낮게 발현되었고 분화도가 나쁠수록 높게 발현되었으나 통계적 유의성이 있었다(p<0.
연령에서는 <65에서 ≥65에 비해 높게발현이 되었는데 연령에 대한 miRNA에 대한 연구는 미흡하지만 본 연구에서는 연령층이 낮을수록 높게 발현되는 경향을보였다. 병리조직학적 분류에 따라서 miR-155는 편평상피세포암종에서 높게 발현되어 종양간의 발현차이를 나타내었다. 이러한 결과로 볼 때 암종의 병리조직학적 유형에 따라 miRNA의 작용기전이 다를 것으로 생각되어지며 이와 관련된연구가 진행되어야 할 것으로 사료된다.
024). 병리조직학적 분류에 따라서는 편평상피세포암종에서 선암종에 비해 높게 발현되어 종양의 병리조직학적 유형에 따른 차이를 나타내었으나 통계적 유의성은 없었다. 종양 크기에 따른 발현은 ≥5 에서<5에 비해 높게 발현되었지만 통계적 유의성은 없었다.
보고되었다[12]. 본 연구에서도 폐암환자와 miR-155의 발현빈도에 대한 통계적 유의성은 없었으나 발현 정도는 높게 나타나 흡연이 miR-155의 발현과도 관련이 있을 것으로 사료된다.
014). 분화도에 따라서는 분화도가 좋을수록 낮게 발현되었고 분화도가 나쁠수록 높게 발현되었으나 통계적 유의성이 있었다(p<0.001).
Quantitative real-time PCR을 이용한 miR-155의 발현 양상
양성 폐 질환자와 폐암 환자군에서 miR-155의 발현양상을비교하기 위하여 RNU6B, miR-155의 probe를 이용하여 정량실시간연쇄중합반응을 수행한 결과 양성 폐질환자에 비해 비소세포페암환자에서 miR-155발현율이 높음을 확인하였다. Table 3에서 보듯이 폐암 환자군과 양성 폐질환자의 miR-155 의 △Ct값을 분석한 결과 양성폐질환자의 miR-155의 값은 1.
것으로 사료된다. 연령에서는 <65에서 ≥65에 비해 높게발현이 되었는데 연령에 대한 miRNA에 대한 연구는 미흡하지만 본 연구에서는 연령층이 낮을수록 높게 발현되는 경향을보였다. 병리조직학적 분류에 따라서 miR-155는 편평상피세포암종에서 높게 발현되어 종양간의 발현차이를 나타내었다.
폐암 환자군의 임상병리학적 특성과 miRNA의 발현율과의상관관계를 분석한 결과 성별에 따라서 miR-155는 여성에서남성에 비해 유의하게 높게 발현되었다(p=0.024). 병리조직학적 분류에 따라서는 편평상피세포암종에서 선암종에 비해 높게 발현되어 종양의 병리조직학적 유형에 따른 차이를 나타내었으나 통계적 유의성은 없었다.
폐암 환자군의 임상병리학적 특성과 miRNA의 발현율과의상관관계를 분석한 결과 성별에서 miR-155는 남성에서 여성에 비해 높게 발현되어 miRNA의 발현은 성별에 따라 차이가있을 것으로 사료된다. 연령에서는 <65에서 ≥65에 비해 높게발현이 되었는데 연령에 대한 miRNA에 대한 연구는 미흡하지만 본 연구에서는 연령층이 낮을수록 높게 발현되는 경향을보였다.
후속연구
병리조직학적 분류에 따라서 miR-155는 편평상피세포암종에서 높게 발현되어 종양간의 발현차이를 나타내었다. 이러한 결과로 볼 때 암종의 병리조직학적 유형에 따라 miRNA의 작용기전이 다를 것으로 생각되어지며 이와 관련된연구가 진행되어야 할 것으로 사료된다. 림프절 전이에 따른발현은 Kono, Zhang 등의 연구에 따르면 miR-155의 과 발현이 다양한 암에서 전이를 촉진시킨다고 보고하였다[4, 18, 35].
본 연구에서 miR-155는 전이된 조직이 전이되지 않은 조직보다 높게 발현되어 이전 연구와 비슷한 결과를 나타내었다. 종양의 분화도에 따라서는 분화도가 낮을수록 높은 발현을 보였고 이에 대한 연구는 아직 미흡하기 때문에 이에 대한 연구가지속적으로 이루어져야 될 것이다.
33]. 종양의 증식과 관련된 miRNA들의 목표 유전자와 그 작용기전에 대한 연구가 이루어진다면 종양의 치료에 도움이 될 것으로 사료되며 앞으로 여기에 대한 연구가 더 이루어져 될 것이다.
폐암의 발생병기에 따라서는 병기가 진행됨에 따라 miR- 155의 발현이 증가되어 miR-155는 폐암의 진행과 관련이 있을것으로 사료되며, 그 작용기전에 대한 연구가 더 이루어져야할 것으로 사료된다. 생존 상태에 따라서는 사망한 환자에서생존중인 환자에 비해 과 발현 양상을 보였다.
참고문헌 (36)
Bloomston, M., Frankel, W. L., Petrocca, F., Volinia, S., Alder, H., Hagen, J. P., Liu, C. G., Bhatt, D., Taccioli, C. and Croce, C. M. 2007. MicroRNA expression patterns to differentiate pancreatic adenocarcinoma from normal pancreas and chronic pancreatitis. JAMA. 297, 1901-1908.
Calin, G. A., Dumitru, C. D., Shimizu, M., Bichi, R., Zupo, S., Noch, E., Aldler, H., Rattan, S., Keating, M., Rai, K., Rassenti, L., Kipps, T., Negrini, M., Bullrich, F. and Croce, C. M. 2002. Frequent deletions and down-regulation of micro-RNA genes miR15 and miR16 at 13q14 in chronic lymphocytic leukemia. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 99, 15524-15529.
Calin, G. A., Sevignani, C., Dumitru, C. D., Hyslop, T., Noch, E., Yendamuri, S., Shimizu, M., Rattan, S., Bullrich, F., Negrini, M. and Croce, C. M. 2004. Human microRNA genes are frequently located at fragile sites and genomic regions involved in cancers. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 101, 2999-3004.
Donnem, T., Lonvik, K., Eklo, K., Berg, T., Sorbye, S, W., Al-Shibli, K., Al-Saad, S., Andersen, S., Stenvold, H., Bremnes, R, M. and Busund, L. T. 2011. Independent and tissue-specific prognostic impact of miR-126 in nonsmall cell lung cancer: coexpression with vascular endothelial growth factor-A predicts poor survival. Cancer 117, 3193-3200.
Eis, P. S., Tam, W., Sun, L., Chadburn, A., Li, Z., Gomez, M. F., Lund, E. and Dahlberg, J. E. 2005. Accumulation of miR-155 and BIC RNA in human B cell lymphomas. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 102, 3627-3632.
Faraoni, I., Antonetti, F, R., Cardone, J. and Bonmassar, E. 2009. miR-155 gene: a typical multifunctional microRNA. Biochim. Biophys. Acta. 1792, 497-505.
Fuse, M., Nohata, N., Kojima, S., Sakamoto, S., Chiyomaru, T., Kawakami, K., Enokida, H., Nakagawa, M., Naya, Y., Ichikawa, T. and Seki, M. 2011. Restoration of miR-145 expression suppresses cell proliferation, migration and invasion in prostate cancer by targeting FSCN1. Int. J. Oncol. 38, 1093-1101.
Garzon, R., Fabbri, M., Cimmino, A., Calin, G, A. and Croce, C, M. 2006. MicroRNA expression and function in cancer. Trends. Mol. Med. 12, 580-587.
Gironella, M., Seux, M., Xie, M. J., Cano, C., Tomasini, R., Gommeaux, I., Garcia, S., Nowak, J., Yeung, M. L., Jeang, K. T., Chaix, A., Fazli, L., Motoo, Y., Wang, Q., Rocchi, P., Russo, A., Gleave, M., Dagorn, J. C., Iovanna, J. L., Carrier, A., Pebuseque, M. J. and Dusetti, N. J. 2007. Tumor protein 53-induced nuclear protein 1 expression is repressed by miR-155, and its restoration inhibits pancreatic tumor development. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 104, 16170-16175.
Hayashita, Y., Osada, H., Tatematsu, Y., Yamada, H., Yanagisawa, K., Tomida, S., Yatabe, Y., Kawahara, K., Sekido, Y. and Takhashi, T. 2005. A polycistronic microRNA cluster, miR-17-92, is overexpressed in human lung cancers and enhances cell proliferation. Cancer Res. 65, 9628-9632.
He, H., Jazdzewski, K., Li, W., Liyanarachchi, S., Nagy, R., Volinia, S., Calin, G. A., Liu, C. G., Franssila, K., Suster, S., kloos, R. T., Croce, C. M. and Chapelle, P. 2005. The role of microRNA genes in papillary thyroid carcinoma. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 102, 19075-19080.
Hecht, S. S. 2002. Cigarette smoking and lung cancer: chemical mechanisms and approaches to prevention. Lancet Oncol. 8, 461-469.
Johnson, S. M., Grosshans, H., Shingara, J., Byrom, M., Jarvis, R., Cheng, A., Labourier, E., Reinert, K. L., Brown, D. and Slack, F. J. 2005. RAS is regulated by the let-7 microRNA family. Cell 120, 635-647.
Takamizawa, J., Konishi, H., Yanagisawa, K., Tomida, S., Osada, H., Endoh, H., Harano, T., Yatabe, Y., Nagino, M., Nimura, Y., Mitsudomi, T. and Takahashi, T. 2004. Reduced expression of the let-7 microRNA in human lung cancers in association with shortened postoperative survival. Cancer Res. 64, 3753-3756.
Kim, Y. K., Yu, J. and Han, T. S. 2009. Functional links between clustered microRNAs: suppression of cell-cycle inhibitors by microRNA clusters in gastric cancer. Nucleic. Acids. Res. 37, 1672-1681.
Markou, A., Tsaroucha, E. G., Kaklamanis, L., Fotinou, M., Georgoulias, V. and Lianidou, E. S. 2008. Prognostic value of mature microRNA-21 and microRNA-205 overexpression in non-small cell lung cancer by quantitative real-time RT-PCR. Clin. Chem. 54, 1696-1704.
Metzler, M., Wilda, M., Busch, K., Viehmann, S. and Borkhardt, A. 2004. High expression of precursor microRNA-155/BIN RNA in children with Burkitt lymphoma. Genes. Chromosome. Cancer 39, 167-169.
Kono, H., Nakamura, M. Ohtsuka, T. Nagayishi, Y., Mori, Y., Takahata, S., Aishima, S. and Tanaka, M. 2013. High expression of microRNA-155 is associated with the aggressive malignant behavior of gallbladder carcinoma. Oncol. Rep. 30, 17-24.
Nam, E. J., Yoon, H., Kim, S. W., Kim, H., Kim, Y. T., Kim, J. H., Kim, J. W. and Kim, S. 2008. MicroRNA expression profiles in serous ovarian carcinoma. Clin. Cancer Res. 14, 2690-2695.
Nikiforova, M. N., Tseng, G. C., Steward, D., Diorio, D. and Nikiforov, Y. E. 2008. MicroRNA expression profiling of thyroid tumors: biological significance and diagnostic utility. J. Clin. Endocrinol. Metab. 93, 1600-1608.
Pallante, P., Visone, R., Ferracin, M., Ferraro, A., Berlingieri, M. T., Troncone, G., Chiappetta, G., Liu, C. G., Santoro, M., Negrini, M., Croce, C. M. and Fusco, A. 2006. MicroRNA deregulation in human papillary thyroid carcinomas. Endocr. Relat. Cancer 13, 497-508.
Rinaldi, A., Poretti, G., Kwee, I., Zucca, E., Catapano, C. V., Tibiletti, M. G. and Bertoni, F. 2007. Concomitant MYC and microRNA cluster miR-17-92 (C13orf25) amplification in human mantle cell lymphoma. Leuk. Lymphoma 48, 410-412.
Slaby, O., Svoboda, M., Fabian, P., Smerdova, T., Knoflickova, D., Bednarikova, M., Nenutil, R. and Vyzula, R. 2007. Altered expression of miR-21, miR-31, miR-143 and miR-145 is related to clinicopathologic features of colorectal cancer. Oncology 72, 397-402.
Schetter, A. J., Leung, S. Y., Sohn, J. J., Zanetti, K. A., Bowman, E. D., Yanaihara, N., Yuen, S. T., Chan, T. L., Kwong, D. L., Au, G. K., Liu, C. G., Calin, G. A. Croce, C. M. and Harris, C. C. 2008. MicroRNA expression profiles associated with prognosis and therapeutic outcome in colon adenocarcinoma. JAMA. 299, 425-436.
Sevignani, C., Calin, G. A., Siracusa, L. D. and Croce, C. M. 2006. Mammalian microRNA: a small world for fine-tunung gene expression. Mamm. Genome. 17, 189-202.
Shayan, R. Achen, M. G. and Stacker, S. A. 2006. Lymphatic vessels in cancer metastasis: bridging the gaps. Carcinogensis 9, 1729-1738.
Son, J. W., Kim, Y. J., Cho, H. M., Lee, S. Y., Jang, J. S., Choi, J. E., Lee, J. U., Kang, M. G., Lee, Y. M., Kwon, S. J., Choi, E., Na, M. J. and Park, J. Y. 2009. MicroRNA expression profiles in Korean non-small cell lung cancer. Tuberc. Respir. Dis. 67, 413-421
Stinchombe, T. E., Lee, C. B. and Socinski, M. A. 2006. Current approaches to advanced-stage non-small-cell lung cancer: first-line therapy in patients with a good functional status. Clin. Lung Cancer 4, 111-117.
Torrisani, J., Bournet, B., Rieu, M. C., Bouisson, M., Souque, A., Escourrou, I., Buscail, L. and Cordelier, P. 2009. Let-7 microRNA transfer in pancreatic cancer-derived cells inhibits in vitro cell proliferation but fails to alter tumor progression. Hum. Gene Ther. 20, 831-844.
Volinia, S., Calin, G. A., Liu, C. G., Ambs, S., Cimmino, A., Petrocca, F., Visone, R., Iorio, M., Roldo, C., Ferracin, M., Prueitt, R. L., Yanaihara, N., Lanza, G., Scarpa, A., Vecchione, A., Negrini, M., Harris, C. C. and Croce, C. M. 2006. A microRNA expression signature of human solid tumors defines cancer gene targets. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 103, 2257-2261.
Yan, L. X., Huang, X. F., Shao, Q., Huang, M. Y., Deng, L., Wu, Q. L., Zeng, Y. X. and Shao, J. Y. 2008. MicroRNA miR-21 overexpression in human breast cancer is associated with advanced clinical stage, lymph node metastasis and patient poor prognosis. RNA. 14, 2348-2360
Yu, J., Ohuchida, K., Mizumoto, K., Sato, N., Kayashima, T., Fujita, H., Nakata, K. and Tanaka, M. 2010. MicroRNA, hsa-miR-200c, is an independent prognostic factor in pancreatic cancer and its upregulation inhibits pancreatic cancer invasion but increases cell proliferation. Mol. Cancer 9, 169.
Zhang, G. J., Xiao, H. X., Tian, H. P., Liu, Z. L., Xia, S. S. and Zhou, T. 2013. Upregulation of microRNA-155 promotes the migration and invasion of colorectal cancer cells through the regulation of claudin-1 expression. Int. J. Mol. Med. 31, 1375-1380.
Zhu, H., Dougherty, U., Robinson, V., Mustafi, R., Pekow, J., Kupfer, S., Li, Y. C., Hart, J., Goss, K., Fichera, A., Joseph, L. and Bissonnette, M. 2011. EGFR signals downregulate tumor suppressors miR-143 and miR-145 in Western diet-promoted murine colon cancer: role of G1 regulators. Mol. Cancer Res. 9, 960-975.
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