한의학에서 근경류(rhizomata)에 분류되어 있으며 각종 보익탕제에 주로 사용되는 대표적 생약인 백출(Baizhu, Atractylodes japonica), 천궁(Chuanxiong, Cnidium officinale), 산약(Shanyao, Discorea japonica) 및 승마(Shengma, Cimicifuga heracleifolia)의 방사선 방호효과를 확인하기 위해서 고선량 및 저선량의 방사선을 마우스에 조사하고 소장움 생존, 내재성 비장집락형성 및 apoptosis 유발 등을 관찰하였다. 방사선조사전 승마 투여 군에서 소장움세포의 생존율을 증가시켰으며 내재성 비장집락 형성 시험에서는 천궁 투여 군에서 평균치의 증가가 관찰되었고 천궁 및 승마는 저선량 방사선에 의한 apoptosis 형성을 억제시켰다. 이상의 결과에서 승마 및 천궁의 방사선 방호효과를 조혈세포의 생존과 회복, 소장움세포 생존을 통하여 확인하였으며 이는 독성이 적은 천연물이라는 관점에서 방사선 방호 식품으로서 적용이 가능할 것으로 사료된다.
한의학에서 근경류(rhizomata)에 분류되어 있으며 각종 보익탕제에 주로 사용되는 대표적 생약인 백출(Baizhu, Atractylodes japonica), 천궁(Chuanxiong, Cnidium officinale), 산약(Shanyao, Discorea japonica) 및 승마(Shengma, Cimicifuga heracleifolia)의 방사선 방호효과를 확인하기 위해서 고선량 및 저선량의 방사선을 마우스에 조사하고 소장움 생존, 내재성 비장집락형성 및 apoptosis 유발 등을 관찰하였다. 방사선조사전 승마 투여 군에서 소장움세포의 생존율을 증가시켰으며 내재성 비장집락 형성 시험에서는 천궁 투여 군에서 평균치의 증가가 관찰되었고 천궁 및 승마는 저선량 방사선에 의한 apoptosis 형성을 억제시켰다. 이상의 결과에서 승마 및 천궁의 방사선 방호효과를 조혈세포의 생존과 회복, 소장움세포 생존을 통하여 확인하였으며 이는 독성이 적은 천연물이라는 관점에서 방사선 방호 식품으로서 적용이 가능할 것으로 사료된다.
We performed this study to determine the effect of Baizhu (Atractylodes japonica), Chuanxiong (Cnidium officinale), Shanyao (Discorea japonica) and Shengma (Cimicifuga heracleifolia), as Oriental rhizomata herbs, on jejunal crypt survival, endogenous spleen colony formation and apoptosis in jejunal ...
We performed this study to determine the effect of Baizhu (Atractylodes japonica), Chuanxiong (Cnidium officinale), Shanyao (Discorea japonica) and Shengma (Cimicifuga heracleifolia), as Oriental rhizomata herbs, on jejunal crypt survival, endogenous spleen colony formation and apoptosis in jejunal crypt cells of mice irradiated with high and low dose of ${\gamma}$-radiation. Shengma was effective in intestinal crypt survival(p<0.05). The frequency of radiation induced apoptosis was also reduced by pretreatment with Chuanxiong and Shengma(p<0.05). Although the mechanisms of this effort remain to be elucidated, these results indicated that Shengma might be a useful radioprotector, especially since it is a relatively nontoxic natural product.
We performed this study to determine the effect of Baizhu (Atractylodes japonica), Chuanxiong (Cnidium officinale), Shanyao (Discorea japonica) and Shengma (Cimicifuga heracleifolia), as Oriental rhizomata herbs, on jejunal crypt survival, endogenous spleen colony formation and apoptosis in jejunal crypt cells of mice irradiated with high and low dose of ${\gamma}$-radiation. Shengma was effective in intestinal crypt survival(p<0.05). The frequency of radiation induced apoptosis was also reduced by pretreatment with Chuanxiong and Shengma(p<0.05). Although the mechanisms of this effort remain to be elucidated, these results indicated that Shengma might be a useful radioprotector, especially since it is a relatively nontoxic natural product.
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문제 정의
본 실험에서는 백출, 천궁, 산약 및 승마의 방사선 방호효과를 확인하기 위해서 고선량 및 저선량의 방사선을 마우스에 조사하고 소장 움 생존, 내재성 비장집락 형성 및 apoptosis 유발 등을 관찰 하였다.
본 연구에서는 한의학에서 근경류(rhizomata)에 분류되어 있으며 각종 보익탕제에 주로 사용되는[12] 대표적 생약인 백출(Baizhu, Atractylodes japonica), 천궁(Chuanxiong, Cnidium officinale), 산약(Shanyao, Discorea japonica) 및 승마 (Shengma, Cimicifuga heracleifolid) 의 방사선 방호효과를 확인하기 위해 서 고선량 및 저선량의 방사선을 마우스에 조사하고 소장 움 생존, 내재성 비장집락 형성 및 apoptosis 유발 등을 관찰하였다.
제안 방법
8 주령 자성 ICR 마우스를 실험군당 4마리씩 정상 대조군, 방사선 조사 대조군과 방사선조사 전복강내 투여군으로 나누었다. 방사선 조사 후 6시간에 마우스를 희생시켜 소장을 채취하고 Camoy's 고정액에 고정하고 각 마우스 당 8〜10개의 소장편을 통상적인 방법에 따라 파라핀 포매하고 절편을 만들어 hematoxylin-eosin 염색 및 DNA fragments 측정을 위하여 in situ apoptosis detection kit (APOPTAG TM, Oncor, Gaithersburg, MD, U.
8 주령의 자성 ICR 마우스를 실험군당 6마리씩 정상 대조군, 방사선 조사대 조군과 시료 병행 투여군으로 나누었으며 마우스 마리당 Img의 용량으로 방사선 조사 전 36 및 12시간 전에 복강 내로 2회 주사하였다. 방사선 조사 후 3.
8 주령의 웅성 ICR 마우스를 실험군 당 9마리로 방사선 조사대 조군과 시료 병행 투여군으로 구분하였다. 마우스 마리당 1mg의 용량으로 방사선 조사 전 36시간과 12시간에 2회복강내로 주사하였다. 방사선 조사 후 9일에 각 실험군의 마우스를 희생시켜 비장을 채취하여 Bouin 고 정액에 2일간 고정하고 표면에 형성된 조혈집락을 실체현미경으로 관찰하였다.
) 사용하는 통상적인 방법으로 peroxidase enzyme 부위를 발색하였다. 마우스 마리당 40개의 소장 움을 광학현미경으로 관찰하였으며, 측정에 사용된 소장움은 움의 편측 세포수가 17개 이상으로 Paneth cell과 내강이 확연히 나타나는 정확히 종절된 움만을 선택하여, 소장 움의 Paneth cell을 제외한 4번째 세포까지를 기저부(base)로 하고, apoptotic cell을 기저부와 전체 소장 움에서 관찰되는 총수로 구분하여 산출하였다. 여러 개의 apoptotic body가 그 크기와 형태를 고려할 때, 한세포의 잔유물로 나타날 때는 한 개의 세포로 측정하였다.
8 주령의 자성 ICR 마우스를 실험군당 6마리씩 정상 대조군, 방사선 조사대 조군과 시료 병행 투여군으로 나누었으며 마우스 마리당 Img의 용량으로 방사선 조사 전 36 및 12시간 전에 복강 내로 2회 주사하였다. 방사선 조사 후 3.5일에 마우스를 희생시켜 소장 부위를 채취하고 각 마우스당 8~10개의 소장편을 통상적인 방법에 따라 파라핀 포매하고 절편을 제작하여 각 마우스당 8개의 종절된 소장 표본의 가장자리에 위치하는 소장 움의 수를 광학현미경으로 측정하였다 .
8 주령 자성 ICR 마우스를 실험군당 4마리씩 정상 대조군, 방사선 조사 대조군과 방사선조사 전복강내 투여군으로 나누었다. 방사선 조사 후 6시간에 마우스를 희생시켜 소장을 채취하고 Camoy's 고정액에 고정하고 각 마우스 당 8〜10개의 소장편을 통상적인 방법에 따라 파라핀 포매하고 절편을 만들어 hematoxylin-eosin 염색 및 DNA fragments 측정을 위하여 in situ apoptosis detection kit (APOPTAG TM, Oncor, Gaithersburg, MD, U. S. A.)를 사용한 in situ DNA end-labeling (ISEL)을 실시하였다. ISEL technique는 표본 슬라이드에 terminal deoxynucleotidyl transferase를 첨가하여 fragmented DNA에 digoxigenin- nucleotides 를 부착시키고 anti-digoxigenin- peroxidase antibody# 면역염색법으로 결합시킨 후 diaminobenzidine(Sigma chemical Co.
마우스 마리당 1mg의 용량으로 방사선 조사 전 36시간과 12시간에 2회복강내로 주사하였다. 방사선 조사 후 9일에 각 실험군의 마우스를 희생시켜 비장을 채취하여 Bouin 고 정액에 2일간 고정하고 표면에 형성된 조혈집락을 실체현미경으로 관찰하였다.
시중에서 구입한 생약을 세절하여, 200g당 증류수 2000ml의 비율로 혼합하고 80℃수조에서 8시간 중 탕 추출한 뒤 고형분을 제거한 현탁액을 200g에서 10분간 원심분리시키고 상층액을 여과하여 감압농축하고 동결 건조시켰다.
실험용 방사선 조사기(Gamma-cell Elan 3000, Nordion International, Canada)를 사용하여 60Co γ선(선량율: 10.9Gy/min)을 소장 움 생존 시험에는 12Gy, 내재성 비장집락 측정시험에는 6.5Gy, apoptosis 측정시험에는 2Gy를 1회 전 신 조사하 였다.
마우스 마리당 40개의 소장 움을 광학현미경으로 관찰하였으며, 측정에 사용된 소장움은 움의 편측 세포수가 17개 이상으로 Paneth cell과 내강이 확연히 나타나는 정확히 종절된 움만을 선택하여, 소장 움의 Paneth cell을 제외한 4번째 세포까지를 기저부(base)로 하고, apoptotic cell을 기저부와 전체 소장 움에서 관찰되는 총수로 구분하여 산출하였다. 여러 개의 apoptotic body가 그 크기와 형태를 고려할 때, 한세포의 잔유물로 나타날 때는 한 개의 세포로 측정하였다.
대상 데이터
8 주령의 웅성 ICR 마우스를 실험군 당 9마리로 방사선 조사대 조군과 시료 병행 투여군으로 구분하였다. 마우스 마리당 1mg의 용량으로 방사선 조사 전 36시간과 12시간에 2회복강내로 주사하였다.
성능/효과
apoptotic cell은 움의 기저부에 주로 형성되었으며 H&E 염 색상에서 핵염색질과 세포질의 농축 및 산호성 세포질의 특성을 나타내었으며, ISEL 염색에서 양성의 세포 및 apoptotic body가 관찰되었다. 정상 대조군에서 움 당 0.
내재성 비장집락 형성은 방사선 조사대 조군에 비하여 방사선 조사 전 천궁복강내 투여군에서 평균 5.9배 증가하였으나 통계처리 유의성은 없었으며 산약의 경우 감소하였다 (표 2).
본 연구에서 고선량, 중간선량 및 저선량 방사선을 조사한 실험법을 적용하여 효과를 관찰한 바방사선조사전 승마 투여군에서 소장 움세포의 생존율을 증가시켰으며 내재성 비장집락 형성시험에 서는 천궁투여군에서 평균치의 증가가 관찰되었고 천궁 및 승마는 저선량 방사선에 의한 apoptosis 형성을 억제시켰다. 이상의 결과에서 승마 및 천궁의 방사선 방호효과를 조혈세포의 생존과 회복, 소장 움세포 생존을 통하여 확인하였으며 이는 독성이 적은 천연물이라는 관점에서 방사선 방호식품으로서 적용이 가능할 것으로 사료된다.
apoptotic cell은 움의 기저부에 주로 형성되었으며 H&E 염 색상에서 핵염색질과 세포질의 농축 및 산호성 세포질의 특성을 나타내었으며, ISEL 염색에서 양성의 세포 및 apoptotic body가 관찰되었다. 정상 대조군에서 움 당 0.091개가 관찰되었으며 방사선 단독 조사군에 비하여 천궁 및 승마 병행 투 여군에서 유의성 있는 감소를 나타냈다 (표 3).
정상 대조군의 공장단면 주변부의 움수는 평균 157개이었으며, 방사선 단독 조사군에서는 평균 20개로 급격히 감소하였다. 방사선 조사 전승마 (p<0.
후속연구
본 연구에서 고선량, 중간선량 및 저선량 방사선을 조사한 실험법을 적용하여 효과를 관찰한 바방사선조사전 승마 투여군에서 소장 움세포의 생존율을 증가시켰으며 내재성 비장집락 형성시험에 서는 천궁투여군에서 평균치의 증가가 관찰되었고 천궁 및 승마는 저선량 방사선에 의한 apoptosis 형성을 억제시켰다. 이상의 결과에서 승마 및 천궁의 방사선 방호효과를 조혈세포의 생존과 회복, 소장 움세포 생존을 통하여 확인하였으며 이는 독성이 적은 천연물이라는 관점에서 방사선 방호식품으로서 적용이 가능할 것으로 사료된다.
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