초록 ▼

○ 연구결과
1. 국내 프로폴리스의 생산지 별 유효성분 분석 및 효능 검정을 통한 우수원료 선별
￭위탁연구기관인 한국양봉농업협동조합의 협조로 국내 프로폴리스를 생산지별로 18종 채집하여 총 플라보노이드, 유효성분 정량분석, 항균성 등을 조사 수행
￭생산지별 유효성분 함량분석 결과, 생산지에 따라 색상과 총 플라보노이드 함량, 유효성분함량 등이 각각 다르게 나타났으나 공통적으로 Caffeic acid, Cinnamic acid, Chrysin,Flavone 등의 유효성분과 탄수화물, 단백질, 지방 등의 영양성분, 미네

○ 연구결과
1. 국내 프로폴리스의 생산지 별 유효성분 분석 및 효능 검정을 통한 우수원료 선별
￭위탁연구기관인 한국양봉농업협동조합의 협조로 국내 프로폴리스를 생산지별로 18종 채집하여 총 플라보노이드, 유효성분 정량분석, 항균성 등을 조사 수행
￭생산지별 유효성분 함량분석 결과, 생산지에 따라 색상과 총 플라보노이드 함량, 유효성분함량 등이 각각 다르게 나타났으나 공통적으로 Caffeic acid, Cinnamic acid, Chrysin,Flavone 등의 유효성분과 탄수화물, 단백질, 지방 등의 영양성분, 미네랄 성분을 다량 함유 하였음
￭생산지별 항균활성 분석 결과, 전반적으로 Bacillus subtilis (KCTC 1022)에 대한 항균활성이 가장 높았으며, Salmonella typhimurium (KCTC 2515), Candida albicans (KCTC 7965), Staphylococcus aureus (CCARM 201), Pseudomonas aeruginosa (CCARM 225)에도 높은 활성을 나타냄
￭그러나 기준치 이상의 납이 검출되고 미량의 잔류 농약과 항생물질이 검출되는 시료가 있어 안정성에 대한 주의가 필요함.
2. 국내산 프로폴리스의 생산지별 항산화 효능 평가
￭국내산 프로폴리스의 생산지에 따른 항산화활성을 평가하고자 in vitro 항산화실험을 수행하였으며, 국내산 중 우수시료를 선발하여 국외산과 항산화 활성을 비교 검증하여 시작품 개발을 위한 국내산 프로폴리스를 최종 선발하였음.
￭국내 18개 지역에서 채집된 프로폴리스의 in vitro 항산화활성 시험을 수행한 결과. DPPH radical 소거활성, superoxide anion radical 소거활성, lipid peroxidation 억제효과 실험에서 P12와 P13 지역의 프로폴리스가 높은 활성을 나타내어 우수 국내산 프로폴리스 시료로서 P12와 P13 프로폴리스를 선발하였음.
￭브라질산 프로폴리스(BP)와 중국산 프로폴리스(CP)를 대조군으로 하여 국내에서 선별된 프로폴리스와 비교 실험을 수행하였음.
- in vitro 항산화 실험에서 국내산인 P12와 P13이 BP에 비해 월등히 높은 항산화활성을 나타내었음.
- 사염화탄소(CCl4)에 의한 산화적 손상을 유발한 마우스 모델에서도 국내산 P12와 P13이 외국산 BP, CP에 비해 활성이 뛰어났음.
- 국내산 P12와 P13의 활성은 큰 차이를 나타내지 않았으나, 대체적으로 P12의 활성이 약간 높았음.
- 이러한 결과를 바탕으로 국내 18개 지역에서 채집한 프로폴리스 중 가장 항산화 활성이 뛰어난 P12(강원도 삼척산)를 시작품 제조용 원료로 최종 선발하였음.
3. 프로폴리스의 유효성분 추출율 증대 및 무알콜․수용화 공법개발
￭국산 프로폴리스의 추출물 제조 최적 조건 연구결과, 추출용매는 75% 에탄올, 추출 온도는 40℃, 추출 시간은 8시간으로 나타남.
￭추출된 프로폴리스의 무알콜 수용화 제조방법으로서 75%에탄올에 침지한 후 추출, 여과하여 알칼리 및 유기산 그리고 정제수를 첨가하면서 에탄올 회수하여 무알콜 수용성의 프로폴리스를 제조하는 방법을 확립하였음.
￭본 무알콜․수용성 프로폴리스 제조방법은 추출율 및 유효성분인 플라보노이드의 함량이 개선되었을 뿐 아니라, 물에서 완전히 용해되어 프로폴리스 추출물 고유의 점착성에 따른 사용상의 불편함이 해소되어 건강기능식품 및 가공식품의 원료로서 높은 활용성이 기대됨.
￭국내산중 가장 활성이 우수한 P12(강원 삼척) 지역 프로폴리스를 대량 구매하여 본 공법에 따라 무알콜․수용성 프로폴리스 시작품을 생산하였고, 동물실험 및 임상실험을 위한 시작품을 제작하였음.
4. 프로폴리스 시작품의 동물모델에서 항산화 및 면역활성 보호효과
￭본 연구에서는 항산화 가장 우수한 국내산 프로폴리스(P12)를 이용하여 제조한 무알콜 수용성 프로폴리스 시작품(WEEP)의 생체내 항산화 및 면역시스템 보호효과를 검증하였음.
- 시작품을 경구섭취한 마우스에서는 사염화탄소로 유발된 간조직 및 혈장내의 지질과산화물(MDA)의 양이 유의적으로 감소하였음.
- 시작품은 방사선에 의한 산화적 손상으로부터 면역 및 조혈계(골수세포 및 조혈모세포)를 보호하는 효과가 관찰되었음.
￭이러한 결과는 무알콜 수용성 프로폴리스 시작품이 생체내의 산화적 손상을 억제하고 면역조혈계를 보호하는 효과가 뛰어남을 보여주어 항산화 식품으로서 임상적으로 적용 가능성을 시사하였음.
5. 프로폴리스시작품의 항산화 및 면역활성 보호 임상 시험
￭본 연구에서는 무알콜 수용성 프로폴리스 시작품의 임상 효능 검증을 위하여 운동부하에 의한 산화적 스트레스 및 염증 면역반응 유발 모델에서 시작품의 효능을 검증하였음.
￭2주간 프로폴리스를 섭취시키고 운동유발성 과산화지질 생성 정도 및 항산화 능력을 분석한 결과, 프로폴리스를 섭취한 그룹과 위약군간에 통계적으로 유의한 차이는 관찰되지 않았음.
￭그러나 프로폴리스 섭취군에서 MDA가 처치 전에 비해 낮아지는 경향을 보이고 반면 TAS는 높아지는 경향을 보여 국산 프로폴리스의 항산화 효과가 있는 것으로 사료됨.
￭면역반응과 관련된 염증반응 인자인 IL-6와 TNF-α의 분석결과, 두 집단간에 통계적으로도 유의한 차이나 경향성을 발견하지 못하였으며, 프로폴리스 섭취군의 처치 전후 이들 변인의 변화경향이 없는 것으로 보아 염증반응을 일으킬 만큼 충분한 운동자극에 도달하지 못한 것으로 판단됨.
￭그럼에도 불구하고 항산화 능력이 향상되는 경향으로 보아 국산 프로폴리스가 중정도 강도의 운동 후에도 산화적 스트레스를 감소시키고 항산화 능력을 개선시키는 긍정적인 효과가 있는 것으로 사료됨.
6. 무알콜․수용성 프로폴리스의 시장성 평가
￭무알콜ㆍ수용성 프로폴리스는 일차적으로 건강기능식품에 적용될 수 있고, 나아가 화장품, 의약품, 생활용품까지 확대 및 응용될 수 있을 것으로 평가됨.
￭국내 프로폴리스 건강기능성식품 시장은 2005년 기준으로 약 454억원 정도에 이르는 것으로 추정되고 있으며, 향후 5년 후에는 연평균 12.5%로 성장하여 2010년 910억원의 시장으로 확대될 전망임.
￭시장 확대의 전망에도 불구하고 공급측면에서는 기존의 프로폴리스 업체뿐만 아니라 외국기업들이 이미 국내시장에 프로폴리스 건강기능식품들을 판매하고 있어 신청기업의 입장에서 볼 때 시장상황이 반드시 유리하다고는 볼 수 없음.
￭그러나 최근 조류 독감 바이러스가 유행하면서 항균성 건강보조식품의 시장이 더 커질 것이라는 예측도 있어, 지금까지 주로 판매되고 있는 알코올 프로폴리스가 수용성 프로폴리스에 의해 대체된다면 원료공급자로서 안정된 판로의 확보가 가능할 것으로 판단됨.
￭따라서 이러한 점들을 전체적으로 고려하여 판단할 때 무알콜․수용성 프로폴리스의 시장성은 비교적 긍정적으로 평가됨.

Abstract ▼

1. Selection of excellent Korean propolis raw material by active compound analysis and evaluation of activities, development of production process for non-alcoholic water-soluble product
1) Survey on status of the propolis production in Korea
2) Collection of propolis samples from various regi

1. Selection of excellent Korean propolis raw material by active compound analysis and evaluation of activities, development of production process for non-alcoholic water-soluble product
1) Survey on status of the propolis production in Korea
2) Collection of propolis samples from various regions in Korea
3) Analysis of active compound contents
4) Evaluation of anti-bacterial activities
5) Evaluation of in vitro antioxidant activities
6) Evaluation of in vivo antioxidant activities
7) Enhancement of extraction yields of active compounds of propolis
8) Development of production process for non-alcoholic, water-soluble propolis product
2. Production of non-alcoholic, water-soluble pilot product with Korean propolis, evaluation of in vivo and clinical efficacy, evaluation of marketability, establishment of production system
1) Production of the pilot product by non-alcoholic water-soluble process
2) Evaluation of in vivo antioxidant activities of the pilot product
3) Evaluation of clinical efficacy of the pilot product for the antioxidant and immune-protecting effects.
4) Evaluation of the marketablility of the pilot product
5) Establishment of production system of Korean propolis product

목차 Contents

• 제출문 ... 1
• 요약문 ... 2
• SUMMARY ... 8
• CONTENTS ... 15
• 목차 ... 18
• 제 1 장 서론 ... 23
• 제 1 절 연구개발의 중요성 ... 23
• 1. 연구개발의 목적 ... 23
• 제 2 절 연구개발의 목표 및 내용 ... 25
• 1. 기술개발의 최종 목표 ... 25
• 2. 연차별 연구개발의 목표와 내용 ... 28
• 제 3 절 연구개발의 기대효과 ... 30
• 1. 기술적 측면 ... 30
• 2. 경제 산업적 측면 ... 30
• 3. 농가파급효과 ... 30
• 제 2 장 국내외 기술개발 현황 ... 31
• 제 1 절 기술개요 ... 31
• 1. 프로폴리스의 정의와 구조 ... 31
• 2. 프로폴리스의 주요작용 ... 34
• 3. 프로폴리스의 추출법 ... 36
• 제 2 절 국내의 기술개발현황 ... 37
• 1. 국내외 기술개발 동향 ... 37
• 가. 프로폴리스 추출방법에 대한 동향 ... 37
• 나. 추출된 프로폴리스에 대한 연구 동향 ... 38
• 2. 대체 기술 및 경쟁기술 동향 ... 41
• 3. 향후 기술 전망 ... 42
• 제 3 장 연구개발 수행내용 및 결과 ... 43
• 제 1 절 국내 프로폴리스의 생산지 별 유효성분 분석 및 효능 검정을 한 우수원료 선별 ... 43
• 1. 개요 ... 43
• 2. 연구 방법 ... 44
• 가. 국내 프로폴리스 현황 조사 ... 44
• 1) 국내 프로폴리스 현황조사 ... 44
• 2) 생산지별(수도권, 중부권, 남부권) 프로폴리스 채취 ... 44
• 나. 국내 프로폴리스 유효성분 함량 분석 ... 44
• 1) Total Flavonoids 함량분석 방법 (식품공전) ... 44
• 2) HPLC를 이용한 유효성분의 함량 분석 ... 45
• 3) 국산 프로폴리스의 정량적 분석 ... 46
• 다. 국내 프로폴리스 항균성 평가 ... 46
• 1) 유해균종에 대한 항균활성 억제효과 검증 ... 46
• 2) 항생제 내성 유해균종에 대한 항균활성 억제효과 검증 ... 48
• 3. 연구 결과 ... 51
• 가. 국내 프로폴리스 현황 조사 ... 51
• 1) 국내 프로폴리스 현황조사 ... 51
• 2) 생산지별(수도권, 중부권, 남부권), 계절별로 프로폴리스 채취 ... 53
• 나. 국내 프로폴리스 유효성분 함량 분석 ... 53
• 1) 프로폴리스 시료 준비 ... 53
• 2) Total Flavonoids 함량분석 ... 54
• 3) HPLC를 이용한 유효성분 함량 분석 ... 54
• 4) 국산 프로폴리스의 정량적 분석 ... 62
• 다. 국내 프로폴리스 항균활성 평가 ... 68
• 1) 유해균종에 대한 항균활성 억제효과 검증 ... 68
• 2) 항생제 내성 유해균종에 대한 항균활성 억제효과 검증 ... 75
• 4. 결론 ... 81
• 제 2 절 국내산 프로폴리스의 생산지별 항산화 효능 평가 ... 81
• 1. 개요 ... 81
• 2. 연구 방법 ... 82
• 가. In vitro 항산화 효능 평가 ... 82
• 1) DPPH radical 소거 활성 측정 ... 82
• 2) Superoxide anion radical 소거 활성 측정 ... 82
• 3) 지질과산화 억제 활성 측정 ... 83
• 4) DNA 방어 효과 검색 ... 84
• 나. In vivo 항산화 효능 평가 ... 85
• 1) 실험동물 및 시료 투여 ... 85
• 2) 혈장내의 malondialdehyde(MDA) 측정 ... 85
• 3) 간조직내의 malondialdehyde(MDA) 측정 ... 86
• 4) 혈장내의 glutathione(GHS)의 농도 측정 ... 86
• 3. 연구 결과 ... 86
• 가. 국내산 프로폴리스의 in vitro 항산화 활성 비교 ... 86
• 나. 선별된 국내 프로폴리스와 국외 프로폴리스의 항산화 활성 비교 ... 90
• 1) In vitro 항산화 활성 비교 ... 90
• 가) DPPH 라디칼 소거 활성 ... 90
• 나) Superoxide anion 라디칼 소거 활성 ... 91
• 다) In vitro lipid peroxidation 억제 활성 ... 92
• 라) In vitro 산화적 DNA 손상에 대한 방어효과 ... 93
• 2) In vivo 항산화 활성 비교 ... 94
• 가) 간 조직내의 malondialdehyde(MDA) 감소 효과 ... 94
• 나) 혈장내의 MDA 감소 효과 ... 95
• 다) 혈장내의 glutathione(GSH)의 농도 증가효과 ... 96
• 4. 결론 ... 97
• 제 3 절 프로폴리스의 유효성분 추출율 증대 및 무알콜ㆍ수용화 공법개발 ... 98
• 1. 개요 ... 98
• 2. 연구 방법 ... 100
• 가. 프로폴리스의 유효성분 최적 추출 조건 확립 ... 100
• 나. 무알콜․수용화 (WWEP공법) 공정 개발 ... 101
• 다. 무알콜․수용화 공법에 의한 시작품 제작 ... 101
• 1) 시작품 생산(WEEP, 일진제약) ... 101
• 2) 시작품 평가(식품공전 의거) ... 102
• 3) 임상실험용 시작품 생산 ... 102
• 3. 연구 결과 ... 102
• 가. 프로폴리스의 유효성분 추출율 증대 ... 102
• 나. 무알콜ㆍ수용화 공법 개발 ... 103
• 다. 무알콜ㆍ수용화 공법에 의한 시작품 제작 ... 104
• 1) 시작품 생산 ... 104
• 2) 시작품 평가(식품공전 의거) ... 105
• 3) 임상시험용 시작품 생산 ... 106
• 4. 결론 ... 108
• 제 4 절 프로폴리스 시작품의 동물모델에서 항산화 및 면역활성 보호효과 ... 108
• 1. 개요 ... 108
• 2. 연구 방법 ... 109
• 가. 사염화탄소 투여 마우스에서 지질과산화 억제 효과 측정 ... 109
• 나. 방사선 조사 마우스에서 소핵 형성 측정 ... 110
• 다. 방사선 조사 마우스에서 비집락 형성 측정 ... 110
• 3. 연구 결과 ... 111
• 가. 사염화탄소 투여 마우스의 지질과산화 억제 효과 ... 111
• 1) 간조직 내의 지질과산화율 억제 효과 ... 111
• 2) 혈장 내의 지질과산화율 억제 효과 ... 112
• 나. 방사선 조사 마우스에서 면역조혈계 보호 효과 ... 113
• 1) 골수세포의 염색체 손상(미소핵 형성) 경감 효과 ... 113
• 2) 조혈모세포의 생존 (비장 내 집락 형성) 증가 효과 ... 114
• 4. 결론 ... 115
• 제 5 절 프로폴리스 시작품의 항산화 및 면역 활성 보호 인체시험 ... 116
• 1. 개요 ... 116
• 2. 연구 방법 ... 116
• 가. 인체시험 설계 ... 116
• 나. 피시험자 선정 ... 117
• 다. 시험설계 ... 117
• 1) AT110% 시점 산출을 위한 운동부하검사 실시 ... 117
• 2) AT110% 시점의 산출 ... 118
• 3) 사전검사 ... 118
• 4) 프로폴리스 복용 ... 120
• 5) 사후 검사 ... 120
• 라. 프로폴리스 시작품 투여 방법 ... 120
• 마. 혈액 내 지표의 측정 방법 ... 120
• 1) 혈장의 총 항산화능(TAS) 측정 ... 121
• 2) 혈장 내 Lipid peroxidation 지표(MDA) 측정 ... 121
• 3) 혈액 내 Cytokine 측정 ... 121
• 바. 통계적 처리 ... 121
• 3. 연구 결과 ... 122
• 가. 피험자의 신체적 특성 ... 122
• 나. 혈장 내의 지질과산화물(MDA) 분석 결과 ... 122
• 다. 혈장내 총 항산화능(TAS) 분석 결과 ... 125
• 라. 혈청 내 TNF-α 농도 분석 결과 ... 127
• 마. IL-6의 분석결과 ... 129
• 4. 결론 ... 130
• 제 6 절 무알콜ㆍ수용성 프로폴리스의 시장성 평가 ... 131
• 1. 개요 ... 131
• 2. 연구 방법 ... 131
• 3. 연구 결과 ... 131
• 가. 시장 개요 및 특성 ... 132
• 1) 시장 개요 ... 132
• 2) 시장 특성 ... 133
• 3) 기회 및 위험 요인 ... 134
• 나. 국내외 시장 현황 및 전망 ... 135
• 1) 세계시장 현황 ... 135
• 2) 국내 시장 현황 ... 138
• 4. 결론 ... 139
• 제 4 장 목표달성도 및 관련분야에의 기여도 ... 142
• 제 5 장 연구개발결과의 활용계획 ... 144
• 제 6 장 참고문헌 ... 145
• 끝페이지 ... 150