선택한 단어 수는 입니다.
최소 단어 이상 선택하여야 합니다.
최소 단어 이상 선택하여야 합니다.
선택한 단어 수는 30입니다.
최대 10 단어까지만 선택 가능합니다.
최대 10 단어까지만 선택 가능합니다.
문제 정의
- 본 연구는 앵두 과즙과 ethanol 추출액의 tyrosinase 활성억제효과를 조사하였다. 앵두과즙에 대한 tyrosinase 활성 저해효과는 반응 초기에 가장 높았으나 점차 감소하는 경향을 보였으며 앵두과즙의 농도가 높을수록 높은 저해율을 보였다.
- 고문헌상의 결과로 예측할 때, 알려진 미백효과는 아마도 앵두가 tyrosinase의 작용을 저해하여 피부에서의 melanin 색소 생성을 억제하거나 여드름 등의 피부 질환을 일으킬 수 있는 미생물의 활성을 억제하는 것으로 본다. 따라서 본 연구에서는 고문헌상에서 언급한 미백효과에 영향을 주는 물질을 일차적으로 확인하기 위하여 앵두과즙 및 앵두의 ethanol 추출물의 melanoidine 색소 생성을 촉진하는 tyrosinase의 활성에 대한 억제 효과를 조사하여 그 결과를 보고하는 바이다.
- 앵두과즙이 나타내는 기능성은 서론에서 볼 수 있는 것과 같이 고문헌이나 경험방(經驗方)에 의한 내용 중 피부미용에 대한 효능 효과가 매우 강조되고 있다. 따라서 본 연구는 피 부미용에 직접적인 영향을 끼치는 melanin 색소 생성 억제 효과를 앵두과즙을 이용하여 실험하였다. Melanin 색소는 Fig.
제안 방법
- 앵두를 씨가 깨지지 않게 blander로 마쇄한 다음 압착기로 착즙하여 착즙액을 5기에서 0.01% pectinase(Novo Nordisk Ferment Ltd.)로 2시간 동안 교반하며 반응시킨 다음 80℃ 이상으로 가열하여 실활, 살균 시키고 규조토(No. 300)로 여과한 다음 감압 농축(50 Brix。) 하였다. 농축액은 -18℃ 이하에서 냉동 보관하였으며 실험에 사용할 과즙의 농도는 앵두 100% 착즙농도(8.
- 300)로 여과한 다음 감압 농축(50 Brix。) 하였다. 농축액은 -18℃ 이하에서 냉동 보관하였으며 실험에 사용할 과즙의 농도는 앵두 100% 착즙농도(8.0 Brix。)로 환산하여 10, 20, 및 30%로 희 석한 과즙을 사용하였다.
- 냉동 보관중인 앵두를 해동되기 전에 깨끗이 세척하고 수 분을 제거한 다음, 해동되면서 과즙이 유실되지 않게 추출 용기에 넣고 95, 70 및 50%(v/v)의 ethanol을 각각 앵두와 1 : l(v/w)의 비율로 첨가하고 실온에서 30일 동안 추출하였다. 추출된 앵두 추출액은 앵두의 과육과 추출액을 분리한 다음 과육을 압착시켜 착즙하고 추출액과 합하여 여과지 (Whatman No.
- 4- Dihydroxyphenylalanine) 용액을 1 mL 첨가하여 25℃ (2에서 5 분 동안 반응시켰다. 반응 종료 후 반응을 정지시키기 위해 80℃ 이상 가열하고 25℃ (2로 냉각한 후 475nm에서 흡광도 (A)를 측정 (UV-Visible Spectrophotometer HP8452)하였다. 시료 1 mL에 tyrosinase 용액 0.
- 반응 종료 후 반응을 정지시키기 위해 80℃ 이상 가열하고 25℃ (2로 냉각한 후 475nm에서 흡광도 (A)를 측정 (UV-Visible Spectrophotometer HP8452)하였다. 시료 1 mL에 tyrosinase 용액 0.1 mL 및 인산염 완충용액 0.9 mL를 혼합한 용액을 80℃ (2에서 5분간 가열하여 tyrosinase를 불활성화시킨 것을 사용한 시료의 흡광도(B)와 시료를 첨가 하지 않고 시료대신 증류수를 첨가하고 측정한 흡광도(C)로 다음과 같은 식에 의하여 각각의 tyrosinase 활성 저해율(%)을 구하였다.
- 1에서 보는 바와 같이 tyrosine이 tyrosinase의 작용에 의하여 최종적으로 melanin 생합성까지 이어지는 경로에 의하여 생성된다(22,23). 따라서 melanin 색소는 tyrosinase에 의한 작용으 로 생성이 좌우되므로 그의 작용을 저해하기 위한 방법인 tyrosinase 활성 저해 능력을 앵두 과즙 10, 20 및 30%의 농 도로 하여 실험하였다. Table 1에서 보는 바와 같이 앵두 과 즙의 농도가 높을수록 그 저해율이 증가하였으며, 반응시간이 지날수록 점차 감소하는 경향을 보였다.
- 앵두 과즙의 tyrosinase 활성 저해효과 결과에 따라 그 기 능성을 나타내는 주요 성분이 가장 효과적으로 추출될 수 있도록 최적 추출조건을 확인하기 위해 50, 70 및 95%(v/v) ethanol 추출을 하였다. 각 농도별 ethanol 추출액은 감압 증발 농축시켜 ethanol 만을 제거한 다음 정제수로 1~10 brix0로 각 농도에 따라 희석하고 ethanol 추출물로 하였다.
- 앵두 과즙의 tyrosinase 활성 저해효과 결과에 따라 그 기 능성을 나타내는 주요 성분이 가장 효과적으로 추출될 수 있도록 최적 추출조건을 확인하기 위해 50, 70 및 95%(v/v) ethanol 추출을 하였다. 각 농도별 ethanol 추출액은 감압 증발 농축시켜 ethanol 만을 제거한 다음 정제수로 1~10 brix0로 각 농도에 따라 희석하고 ethanol 추출물로 하였다. Table 2에서 보는 바와 같이 각 농도별 ethanol 추출물의 농도가 증가함에 따라 tyrosinase 활성 저해효과도 증가하는 경향을 보였으며 이 중 70%(v/v) ethanol 추출액에서 얻어진 ethanol 추줄물의 경우 그 농도가 1 brix0일 때 tyrosinase활성 저해율이 50%가 넘는 64.
대상 데이터
- 본 실험에서 사용한 앵두는 6월 초순경에 수확한 조생종인 일출(日出)로서 서울 가락동 농산물 시장에서 구입하였고 과육이 쉽게 물러지는 것을 방지하기 위해 세척하지 않고 -18℃ 이하에서 냉동시켜 보관하며 시료로 사용하였다.
데이터처리
- 실험결과는 ANOVA test를 이용하여 p<0.05수준에서 Duncan's Multiple range test로 유의성을 검증하였다.
- Values within the same column with different alphabets are significantly dilferent(p<0.05) among groups by Duncan's multiple range test.
이론/모형
- 앵두과즙과 ethanol 추출액 및 ethanol 추출액 분획의 tyrosinase 활성 저해율은 kubo의 방법(21)에 따라 시료 1 mL에 tyrosinase 용액 (2,100 unit/mg, Sigma Co. USA) 0.1 mL(6.5 mg/lOmL)와 phospate buffer solution(pH 6.8) 0.9 mL를 혼합하여 25℃ (2에서 10분간 예열한 다음 0.03%의 DOPA(L-3.4- Dihydroxyphenylalanine) 용액을 1 mL 첨가하여 25℃ (2에서 5 분 동안 반응시켰다. 반응 종료 후 반응을 정지시키기 위해 80℃ 이상 가열하고 25℃ (2로 냉각한 후 475nm에서 흡광도 (A)를 측정 (UV-Visible Spectrophotometer HP8452)하였다.
성능/효과
- 조사하였다. 앵두과즙에 대한 tyrosinase 활성 저해효과는 반응 초기에 가장 높았으나 점차 감소하는 경향을 보였으며 앵두과즙의 농도가 높을수록 높은 저해율을 보였다. 앵두 ethanol 추출액의 tyrosinase 활성 저해효과는 ethanol추출액에서 얻어진 추출물의 농도가 높을수록 증가하였으며 70%(v/v) ethanol 추출액에서 가장 높았다.
- 앵두과즙에 대한 tyrosinase 활성 저해효과는 반응 초기에 가장 높았으나 점차 감소하는 경향을 보였으며 앵두과즙의 농도가 높을수록 높은 저해율을 보였다. 앵두 ethanol 추출액의 tyrosinase 활성 저해효과는 ethanol추출액에서 얻어진 추출물의 농도가 높을수록 증가하였으며 70%(v/v) ethanol 추출액에서 가장 높았다. 한편 70%(v/v) ethanol 추출액의 전처리 시료중 ethyl acetate층이 73.
- 한편 tyrosinase에 대한 연구로는 tyrosin이 tyrosi-nase에 의하여 최종적으로 melanin 생성에 관여하고, melanin 의 생성을 억제하는 tyrosinase 저해제의 탐색과 식물체에 대한 tyrosinase 저해 활성 탐색 등의 연구(13-18)및 tyrosinase가 피부의 미백 작용과 노화 억제 작용에 관여 한다는 연구(19,20) 등이 있으나 앵두를 이용한 연구는 전무하다. 고문헌상의 결과로 예측할 때, 알려진 미백효과는 아마도 앵두가 tyrosinase의 작용을 저해하여 피부에서의 melanin 색소 생성을 억제하거나 여드름 등의 피부 질환을 일으킬 수 있는 미생물의 활성을 억제하는 것으로 본다. 따라서 본 연구에서는 고문헌상에서 언급한 미백효과에 영향을 주는 물질을 일차적으로 확인하기 위하여 앵두과즙 및 앵두의 ethanol 추출물의 melanoidine 색소 생성을 촉진하는 tyrosinase의 활성에 대한 억제 효과를 조사하여 그 결과를 보고하는 바이다.
- Table 1에서 보는 바와 같이 앵두 과 즙의 농도가 높을수록 그 저해율이 증가하였으며, 반응시간이 지날수록 점차 감소하는 경향을 보였다. 반응시간 초기에 가장 높은 저해율을 보였다가 반응이 끝나는 시간인 5분이 경과한 후에는 과즙농도가 10%, 20%, 30%에서 각각 34.15%, 52.10%, 65.97%로 과즙의 농도가 높을수록 높은 tyrosinase 활성 저해율을 나타냈다. 따라서 tyrosinase가 피부의 미백작 용과 노화 억제작용에 관여 한다는 조, 이 등(19,20)의 보고에 따라 앵두가 미백 및 melanin 색소 침착방지 등으로 인한 피 부노화 방지 효과에 효과가 있을 것으로 판단된다.
- 각 농도별 ethanol 추출액은 감압 증발 농축시켜 ethanol 만을 제거한 다음 정제수로 1~10 brix0로 각 농도에 따라 희석하고 ethanol 추출물로 하였다. Table 2에서 보는 바와 같이 각 농도별 ethanol 추출물의 농도가 증가함에 따라 tyrosinase 활성 저해효과도 증가하는 경향을 보였으며 이 중 70%(v/v) ethanol 추출액에서 얻어진 ethanol 추줄물의 경우 그 농도가 1 brix0일 때 tyrosinase활성 저해율이 50%가 넘는 64.90%로 가장 높았다. 또한 추출액의 농도가증가함에 따라 71.
- 90%로 가장 높았다. 또한 추출액의 농도가증가함에 따라 71.87%, 89.00%, 93.0%, 99.90%로 가장 높게 나타났다. 이러한 결과는 앵두의 주요 성분(24)중 수분이 일반적인 과일과 같이 88%이상으로 과육의 대부분을 대부분을 차지하기 때문에 앵두를 ethanol 추출하는 과정에서 95%(v/v)이상의 높은 농도일 경우, 앵두 과육의 수분이 초기에 너무 급격하게 용출 되고 그의 조직이 변형됨으로 추출 효율이 떨어진 것으로 예상되며 50%(v/v) 농도의 ethanol농도에서는 너무 낮은 용출 속도로 추출이 이루어진 것으로 판단된다.
- 이러한 결과는 앵두의 주요 성분(24)중 수분이 일반적인 과일과 같이 88%이상으로 과육의 대부분을 대부분을 차지하기 때문에 앵두를 ethanol 추출하는 과정에서 95%(v/v)이상의 높은 농도일 경우, 앵두 과육의 수분이 초기에 너무 급격하게 용출 되고 그의 조직이 변형됨으로 추출 효율이 떨어진 것으로 예상되며 50%(v/v) 농도의 ethanol농도에서는 너무 낮은 용출 속도로 추출이 이루어진 것으로 판단된다. 따라서 앵두의 ethanol 추출액에 대한 tyrosinase 활성 저해 효과로 볼 때 70%(v/v) ethanol 추출에서 앵두의 기능성 성분이 가장 효과적으로 추출된 것으로 판단된다.
- 앵두에 함유되어 있을 것으로 예상되는 기능성 물질의 성질을 알아보기 위하여 앵두의 ethanol 추출액에 대한 tyrosi- nase활성 저해효과가 가장 높았던 70%(v/v) ethanol 추출액을 전처리하고 물, ethyl acetate 및 butanol 분획의 각 단계별 시료를 이용하여 tyrosinase 활성을 측정한 결과 Table 3에서 보는 바와 같이 물분획에서 10.3%, butanol 분획에서 43.2%이었으나 ethyl acetate 분획에서는 73.8%로 가장 높게 나타났다. 이는 앵두에 함유되어있는 tyrosinase 활성 저해물질이 대부분 ethyl acetate의 유기용매에 추출됨을 예상할 수 있고 지금까지의 천연물에서 유래한 tyrosinase 활성 저해제로 알려진 물질인 aloesin, hinokitol, quercetin 등(14)이 앵두에도 함유되어 있을 것으로 예상되어 앵두의 기능성을 나타내는 물질에 대한 추가적인 연구가 필요하다고 사료된다.
후속연구
- 8%의 높은 tyrosinase 활성 저해율을 보였다. 이는 앵두의 특정 성분이 tyrosinase 활성을 저해하는 것으로 판단되어 기능성을 나타내는 물질에 대한 정성 및 정량의 추가적인 연구가 필요하다.
- 8%로 가장 높게 나타났다. 이는 앵두에 함유되어있는 tyrosinase 활성 저해물질이 대부분 ethyl acetate의 유기용매에 추출됨을 예상할 수 있고 지금까지의 천연물에서 유래한 tyrosinase 활성 저해제로 알려진 물질인 aloesin, hinokitol, quercetin 등(14)이 앵두에도 함유되어 있을 것으로 예상되어 앵두의 기능성을 나타내는 물질에 대한 추가적인 연구가 필요하다고 사료된다.
※ AI-Helper는 부적절한 답변을 할 수 있습니다.