선택한 단어 수는 입니다.
최소 단어 이상 선택하여야 합니다.
최소 단어 이상 선택하여야 합니다.
선택한 단어 수는 30입니다.
최대 10 단어까지만 선택 가능합니다.
최대 10 단어까지만 선택 가능합니다.
문제 정의
- 본 연구에서는 녹차 catechin이 만성카드뮴 중독에 따른 골조직 장애 와 그에 따른 조직 학적 손상을 완화시 킬 수 있는지를 관찰하였다.
제안 방법
- 포매된 조직을 1 Um 두께로 박절하여 toluidine blue염 색을 하였으며 관찰 부위를 결정 한 다음 초 박절은 sorval MT 6000형 초박절기 에 Dupont 다이아몬드 칼로 회백색(40~60 nm)의 간섭색을 나타내는 초박절편을얻었다. Grid에 부착하여 Watson(26) 및 Reynolds 방법(27) 에 의한 uranyl acetate와 lead citrate로 이 중전자염 색을 실시하여 Hitachi H-600 투과전자현미경(Japan)으로 관찰하였다.
- 경골 골밀도 : 경골에서의 골밀도를 관찰한 결과(Fig. 1) 골밀도는 정상군(0.271 ±0.004)에 비하여 Cd-0C군(0.242±0.004)은 11%의 유의적으로 낮았으나 catechin공급군 (Cd-0.25C: 0.256 + 0.005, Cd~ 0.5C: 0.267 ±0.003)은 정 상군 수준의 골밀도를 관찰하였다.
- 경골과 대퇴골에서 골밀도를 관찰한 결과 경골에서 골밀도는 정 상군에 비하여 Cd-OC군은 유의적으로 낮았으나 catechin공급군은 정상군 수준의 골밀도를 관찰하였다. 대퇴골의 골밀도는 정상군에 비해 Cd-OC군은 낮았으나 Cd-0.
- Cd-0C군에서 정상군에 비해 유의성은 없었으나 다소 감소하였다. 경골에서의 골밀도를 관찰한 결과 골밀도는 정상군에 비하여 Cd-OC군은 유의적 으로 낮았으나 catechin공급군은 정 상군 수준의 골밀도를 관찰하였다. 대퇴골의 골밀도를 측정한 결과 정상군에 비해 Cd-OC군은 낮았으나 Cd-0.
- 광학현미경적 관찰:대퇴골 조직의 광학 현미경적 관찰을 위해 각 군의 실험동물을희생시킨 후 오른쪽 대퇴부의 골편을 절취하여 5% 질산(HNO3)용액에서 2~3일간 탈회시킨 후 ethanol 단계 별 농도로 탈수하고 탈알콜시 킨 후 파라핀에 포매하였다. 포매된 조직은 microtome으로 4—5 Jim로 삭정하고 Hematoxylin-Eosin염 색을 한 후 광학현미 경 (Nikon, Japan)으로 관찰하였다.
- 대퇴골과 경골의 카드뮴 함량은 시료의 일정량을 취하여 550℃의 muffle furnace에서 24시간 동안 건식분해 시켜 농질산으로 녹인후 1 N HC1로 희 석 하여 파장 228.8 nm에서 atomic absorption spectrophotomer (AAs, Cambridge, UK) 로측정하였다 (24).
- 또 10주와 20주에는 각각 실험 종료 5일전에 700 ppm의 카드뮴을 1일 1 m札씩 투여 하였으며 카드뮴 비 공급 군에는 동량의 증류수를 경구투여 하였다.
- 식수와 식이는 자유로이 섭 취 케 하며 각각 10주 및 20주간 사육하였다. 또 10주와 20주에는 각각 실험 종료 5일전에 700 ppm의 카드뮴을 1일 1 m札씩 투여 하였으며 카드뮴 비 공급 군에는 동량의 증류수를 경구투여 하였다.
- 실험 20주째 되는 날 오른쪽 대퇴골 및 경골의 골밀도(bone mineral density, 이하 BMD)를 small animal total body option을 가지고 있는 dual energy x-ray absorptiometry(°] 하 DEXA : Lunar DPX-L, USA)를 이용하여 골밀도를 측정 하였다.
- 카드뮴은 50 ppm Cd2+ 농도의 식수로 자유로이 공급하였다. 실험동물은 각기간별로 사육후뼈조직의 형태학적 변화를 관찰하고 20주째 조직학적 변화 및 골밀도를 관찰하여 만성 카드뮴 중독으로 인한 골조직 장애에 미치는 녹차 catechin의 효과를 관찰하였다. 경골과 대퇴골에서의 카드뮴 함량은 10주에서는 catechin 비공급군인 CdT)C군에 비하여 catechin 공급군에서 감소하였으며 cae techin공급수준에 따른 차이는 없었다.
- 즉 카드뮴이 골장해를 초래하고 catechin이 카드뮴 배설을 촉진 시 켜 조직 내에 카드뮴 축적 을 방지 한다는 보고를 고려 해 볼 때 catechin이 골조직 에 카드뮴 축적을 감소시킬것으로 생각된다. 이를 확인코져 catechin과 카드뮴을 병행처리한 경우에 골조직중 카드뮴 함량을 즉정하는 한편 골조직의 형태학적 변화를 관찰코져 하였다.
- 탈회 액은 격 일로 교환하고 침 이 통과할 정도의 경도까지 탈회 하였다. 종료후에는 0.25 M sucrose를 포함한 완충액에 넣어 하룻밤을 냉장실에서 세 척하였다 세척후 1% OSO4 용액 에 후고정 하였으며 다른 조직 과 같은 방법으로 탈수하였다. Propylene oxide로 치 환한 후 Luft 방법 (25) 에 의한 epon 혼합물로 포매 하여 37℃에 12시 간, 60℃에 48시간 동안 방치하여 열중합을 시켰다.
- 실험동물은 100 g 내외의 sprague-Dawly종 흰쥐를 대상으로 카드뮴을 투여하지 않은 정상군과 카드뮴 투여군으로 나누었다. 카드뮴 투여군은 다시 식이내 catechin 공급 수준에 따라 Cd-OC 군(catechin 비공급군), Cd-0.25C군(catechin 2.5 g/kg of diet), Cd-0.5C군(catechin 5 g/kg of diet)으로 나누어 10 및 20주간씩 자유섭 식 시 켰다. 카드뮴은 50 ppm Cd2+ 농도의 식수로 자유로이 공급하였다.
- 포매하였다. 포매된 조직은 microtome으로 4—5 Jim로 삭정하고 Hematoxylin-Eosin염 색을 한 후 광학현미 경 (Nikon, Japan)으로 관찰하였다.
- Propylene oxide로 치 환한 후 Luft 방법 (25) 에 의한 epon 혼합물로 포매 하여 37℃에 12시 간, 60℃에 48시간 동안 방치하여 열중합을 시켰다. 포매된 조직을 1 Um 두께로 박절하여 toluidine blue염 색을 하였으며 관찰 부위를 결정 한 다음 초 박절은 sorval MT 6000형 초박절기 에 Dupont 다이아몬드 칼로 회백색(40~60 nm)의 간섭색을 나타내는 초박절편을얻었다. Grid에 부착하여 Watson(26) 및 Reynolds 방법(27) 에 의한 uranyl acetate와 lead citrate로 이 중전자염 색을 실시하여 Hitachi H-600 투과전자현미경(Japan)으로 관찰하였다.
대상 데이터
- 실험 동물은 무게가 100 g 정도되는 Sprague-Dawley 종숫컷을 구입 하여 실험 시작하기 전 7일간 일정한 환경 (22±1℃, 50±10%)에서 적응시킨 후 Table 1과 같이 식수로 증류수를 공급한 정 상군(Normal group)과 카드뮴 식 수 (50ppm) 를 공급한 카드뮴군으로 나누고 카드뮴 투여 군은 다시 식 이내 catechin의 공급 함량에 따라 catechin을 넣지 않은 Cd-0C迁, catechin-1- 0.25% 공급한 Cd-0.25C군 및 0.5% 공급한 Cd-0.5C 군으로 나누었다.
- 실험동물은 100 g 내외의 sprague-Dawly종 흰쥐를 대상으로 카드뮴을 투여하지 않은 정상군과 카드뮴 투여군으로 나누었다. 카드뮴 투여군은 다시 식이내 catechin 공급 수준에 따라 Cd-OC 군(catechin 비공급군), Cd-0.
데이터처리
- 실험결과에 대한 통계처리는 각 실험군별로 평균 차이가 있는가를 검 증하기 위하여 분산분석 (ANOVA 검 증)을 수행하였으며, 분산분석의 결과 유의성이 발견된 경우 군 간의 유의 도는 Tukey's-HSD test에 의해 분석하였다.
이론/모형
- 25 M sucrose를 포함한 완충액에 넣어 하룻밤을 냉장실에서 세 척하였다 세척후 1% OSO4 용액 에 후고정 하였으며 다른 조직 과 같은 방법으로 탈수하였다. Propylene oxide로 치 환한 후 Luft 방법 (25) 에 의한 epon 혼합물로 포매 하여 37℃에 12시 간, 60℃에 48시간 동안 방치하여 열중합을 시켰다. 포매된 조직을 1 Um 두께로 박절하여 toluidine blue염 색을 하였으며 관찰 부위를 결정 한 다음 초 박절은 sorval MT 6000형 초박절기 에 Dupont 다이아몬드 칼로 회백색(40~60 nm)의 간섭색을 나타내는 초박절편을얻었다.
- 녹차로부터 추출한 식이용 catechine Matsuzaki와 Hata (23)의 방법으로 crude catechin 분말을 조제하여 사용하였다. 순도는 68.
- 탈회는 EDTA(ethylene diamine tetra acetic acid) 탈회 법을 이용하여 조직을 교반기 로 교반하면서 실온에서 탈회 하였다. 탈회 액은 격 일로 교환하고 침 이 통과할 정도의 경도까지 탈회 하였다.
성능/효과
- 전자현미경 관찰한 결과 정상군에서 보여지는 소견은 카드뮴 투여군에서도 잘 유지되어 있었다. 결론적으로 녹차 catechine 만성 카드뮴 중독 횐쥐에서 경골과 대퇴골에서의 카드뮴 축적을 감소시켰으며 골밀도를 정상화시킴으로서 골조직의 변화를 완화시킴을 알 수 있었다.
- 3과 같다. 경 골과 대 퇴 골 모두 10주, ‘20주에서 정 상군에 비해 카드뮴 투여 군 모두가 다소 감소되 었으며 실험 군 간의 유의성은 없었다.
- 5C군이 각각 유의적으로 감소하였다. 경골과 대퇴골 두 뼈조직의 무게변화를 관찰한 결과는 모두 10주, 20주에서 정상군에 비해 카드뮴 투여 군 모두가 다소 감소되었으며 실험군간의 유의성은 없었다. 뼈 조직의 길이를 관찰한 결과 대퇴골, 경골 모두에서 10주, 20주 모두 카드뮴 투여군에서 감소되었으나 catechin을 투여한 군에서는 길이 감소가 다소 완화되었다.
- 대퇴골 골밀도 : 대퇴골의 골밀도를 측정한 결과(Fig. 2) 골밀도는 정상군(0.357±0.007)에 비해 Cd-0C군(0.308±0.007)은 14% 낮았으나 Cd-025C군(0.344 ± 0.008)과 Cd-0.5C군(0.341±0.008)eCd-0C군에 비궁H 각각 12%, 11%씩 높았다.
- 대퇴골에서의 카드뮴 함량은 10주에서 는 catechin 비 공급군인 Cd-0C군에 비하여 catechin 공급군이 유의적으로 감소하였으며 catechin 공급수준에 따른 군간의 차이는 없었다. 20주에는 Cd-OC군에 비하여 Cd-0.
- 대퇴골에서의 카드뮴 함량은 10주에서는 catechin 비 공급군인 Cd-0C군에 비하여 catechin 공급군이 약 44% 씩 감소하였으며 catechin 공급수준에 따른 군간의 차이는 없었다. 20주에는 Cd-0C군(3.
- 경골에서의 골밀도를 관찰한 결과 골밀도는 정상군에 비하여 Cd-OC군은 유의적 으로 낮았으나 catechin공급군은 정 상군 수준의 골밀도를 관찰하였다. 대퇴골의 골밀도를 측정한 결과 정상군에 비해 Cd-OC군은 낮았으나 Cd-0.25C군과 Cd-0.5C군은 Cd-OC군에 비해 유의적으로 높았다. 광학현미 경으로 관찰한 결과 정상군에서 보여지는 소견은 카드뮴 투여군에서도 잘 유지되어 있었다.
- 해면골은 표면적 대 부피의 비 (surface to volume ratio)가 크고 대사율(metabolic turnover)0] 빠르며 또한 골격 손실이 빨리 일어난다. 본 연구에서 대퇴골 조직을 광학현미경과 전자현미경으로 관찰한 결과 정상군에서 골조직은 골세포들이 균질하게 배열되어 있고 골수 세포들이 충실히 성숙된 상태를 유지하고 있었다. 골기질 또한 잘 배열되어 있었다.
- 경골과 대퇴골 두 뼈조직의 무게변화를 관찰한 결과는 모두 10주, 20주에서 정상군에 비해 카드뮴 투여 군 모두가 다소 감소되었으며 실험군간의 유의성은 없었다. 뼈 조직의 길이를 관찰한 결과 대퇴골, 경골 모두에서 10주, 20주 모두 카드뮴 투여군에서 감소되었으나 catechin을 투여한 군에서는 길이 감소가 다소 완화되었다. Cd-0C군에서 정상군에 비해 유의성은 없었으나 다소 감소하였다.
- 뼈조직의 길이를 관찰한 결과(Table 4) 대퇴골, 경골 모두에서 10주, 20주 모두 카드뮴 투여군에서 감소되었으나 catechin을 투여한 군에서는 길이 감소가 다소 완화되었다. Cd-0C군에서 정상군에 비해 유의성은 없었으나 다소 감소하였다.
- 순도는 68.4%였으며 종류별로 비교하였을 때 EGCg(38.56 ±0.06)함량이 가장 높았고 ECG(20.76±0.06), EGC(4.56 + 0.02), EC(4.52± 0.01)순으로 나왔다.
- 즉 피질의 골기질의 분포와 양에서도 이상 소견이 없었고 골세포 및 골모세포 등도 형 태학적 이상이 없었다. 골수 세포의 핵과 과립 에도 이상소견이 없었다(Fig.
※ AI-Helper는 부적절한 답변을 할 수 있습니다.