선택한 단어 수는 입니다.
최소 단어 이상 선택하여야 합니다.
최소 단어 이상 선택하여야 합니다.
선택한 단어 수는 30입니다.
최대 10 단어까지만 선택 가능합니다.
최대 10 단어까지만 선택 가능합니다.
문제 정의
- 따라서 본 연구의 목적은 우리가 매일 주식으로 사용하며 시중에 광범위하게 유통되고 있는 쇠고기, 돼지고기(생체시료)에 포함되어 있는 상기 3가지 내분비계 장애 물질(환경호르몬 물질)의 잔류량을 동시 정량하고. 보다 좋은 분석 방법의 개발을 퉁하여 또 다른 생체 시료인 어패류, 양서류의 근육, 산모의 모유, 혈액 등의 초 미세 정량까지 발전 시키고저 한다.
제안 방법
- , Manchester, UK) 로 구성되어진 것을 사용하였다. GC/MS 분석을 위한 칼럼은 CP Sil 8 CB cross linked 5% phenyl methylsilicone fused-silica capilary column (25 m x 0.25 mm I.D., 0.12 |im film thickness)을 사용하였다. 오븐 온도는 처음에 150℃에서 1분 동안 머물게 한 후 1분당 7℃씩 올려 190℃까지 올린후 1분 동안 머물게 한 후 다시 1분당 1℃씩 올려 200℃까지 올린후 다시 1분당 10℃씩 올려 305℃까지 올리고 2분 동안 머물게 하였다.
- 1과 같다. Fig. 1에서 머무름 시간 7.11, 6.23-7.00, 24.24, 19.10(분)에서 4개의 봉우리가 얻어졌는데 봉우리 1, 2, 3, 4는 octylphenol, nonylphenol, bis (2-ethythexyl) phthalate와 bis (2-ethylbutyl) phthalate ester의 봉우리로 각각의 표준용액을 개별적으로 주사하여 개 별 질량수를 갖는 GC/MS-SIM 크로마토그램을 통해 확인하였다. 시료를 추출 정제후 GC/MS-SIM 방법을 이용하여 실제 시중에 유통중인쇠고기 돼지고기 시료에서 얻은 크로마토그램은 Fig.
- Octylphenol, nonylphenol, bis (2-ethythexyl) phthalate 의 정량은 추출과 정제후 GC/MS-SIM 방식으로 얻어진 bis (2Ythylbutyl) phthalate ester 내부표준물질과의 봉우리 넓이 비를 측정하여 계산하였고, 각각의 response factor는 5 ppm의 octylphenol, nonylphenol, bis (2-ethythexyl) phthalate의 표준용액과 초기에 첨가시킨 bis (2-ethylbutyl) phthalate ester 5 ppm 내부표준 물질과의 봉우리 넓 이를 비교하여 계산하였다(Table 3). 일반적으로 내부표준물질로는 동위원소로 치환된 fluoranthene-dio, phenanthrene-dio, pyrene-dn 등이 사용되며 보다 더 정확한 정량을 위해서는 동위원소로 치환된 정량화합물질이 사용되나 이들 동위원소 치환 화합물은 매우 고가이며 구입하기가 매우 어렵다.
대상 데이터
- 기 체 크로마토그래 피-질량분석 기로는 Fisons-8000 기 체크로마토그래피 와 Trio-1000 사중극자 분석관(quadrupole) 질량분석기 (Fisons. Inst., Manchester, UK) 로 구성되어진 것을 사용하였다. GC/MS 분석을 위한 칼럼은 CP Sil 8 CB cross linked 5% phenyl methylsilicone fused-silica capilary column (25 m x 0.
- 사용하였으며 분할비는 14:1 이었다. 운반 기체는 헬륨(99.999%)을 사용했고, 유속은 1.0mL/min 로 흘려 주었다. 시료 주입구의 온도.
- Nonylphenol, octylphenol, bis (2-ethythexyl) phth- alate의 표준용액은 Aldrich 특급 시약을 사용하였으며, 특히 bis (2-ethylbutyl)phthalate ester는 묽은 황산 용액에서 다음과 같이 반응시켜 합성하여 사용하였다.
- Silica gel (70-230mesh)-^- 이염화메탄(DCM)오로 세척하여 사용하였다.
-
3. 시료
시료(Table 3)는 전주시와 전라북도 지역의 마아트와 정육점에서 2000년 1월 20일-24까지 수집하여 분쇄기로 분쇄하고 냉동고에서 얼린후 동결건조기 (FD3, HETO, Denmark)로 1 일간 동결 건조한 후 다시 건조기에서 50℃로 2일간 건조시켜 수분이 없도록 완전히 건조한 후 일정 무게를 유지토룩 하고 실온에서 보관하여 사용하였다
. 이때 시료의 수분 함유율은 약 70%였다. - 일반적으로 내부표준물질로는 동위원소로 치환된 fluoranthene-dio, phenanthrene-dio, pyrene-dn 등이 사용되며 보다 더 정확한 정량을 위해서는 동위원소로 치환된 정량화합물질이 사용되나 이들 동위원소 치환 화합물은 매우 고가이며 구입하기가 매우 어렵다. 본연구에서는 같은 phthalate ester류로 bis (2-ethythexyl) phthalate와 물리 화학적 성질이 매우 비슷한 bis (2- ethylbutyl) phthalate ester를 내부표준물질로 사용하였다. Nonylphenol의 경우 m/z 135에서 5개의 연속된 봉우리가 얻어졌는데 5개 봉우리 면적을 전부 합하여 내부표준물질의 면적과 비교하여 식 (1)에 의해 계산하였다.
이론/모형
- 시료 주입은 1 μL였고 주입 방법은 분할주입법 (split)을 사용하였으며 분할비는 14:1 이었다. 운반 기체는 헬륨(99.
- 검출기의 온도는 각각 200℃, 300℃로 맞추었다. 이온화에너지는 70eV 가하여 생성된 이온들은 특정질량을 가지는 이온만을 선택하여 검출하는 단일이온 검색방법 (single ion monitoring, SIM)을 사용하여 분석하였다. SIM 방법에서 사용된 이온들은 각 화합물의 특정 질량 중 서로 겹치지 않는 것을 선택하였다.
- 이것을 GC/MS vial에 옮겨 질소 기체하에서 완전히 건조시킨다. 여기에 150 jiL diethyl ether 가하여 GC/MS-SIM 방법으로 분석한다. 검출 한계는 스캔방식의 경우 OP0.
- Tsuda22 등은 극성이 강한 Flo- risil 칼럼과 hexane을 이용하여 방해물질을 분리 제 거하였으며, 본 연구에서도 극성 이 강한 aminopropyl 칼럼을 이용하여 흡착시킨 후 방해물질인 지방산, triglyceride, cholesterol, cholesterylester 등은 iso-hexane 으로 제거하였다. 불순물을 분리제거한 후 정확한 정량을 위하여는 각 EDC 물질 중 서로 겹치지 않는 질량을 갖는 조각이온을 선택하여 연속적으로 검색하는 단일이온 검색법 (single ion monitering, SIM)을 사용하였고 다중점 보정을 위한 회수율은 Table 4에 나타냈다. SIM법의 장점은 이온선택성으로 방해물질의 봉우리들을 크게 감소시키는 반면 정량하고자 하는 OP.
성능/효과
- NP, ISTD, BEHP의 봉우리의 감도는 크게 증가시킨다. 본 연구에서도 SIM 방식은 부분스캔방식에 비해 100배 이상 높은 감도를 나타냈고, 매질의 영향을 고려한 실제시료에서는 20배 정도 높은 감도를 나타냈다(2.4 추출 및 정제 참조). 5 ppm의 octylphenol, bis (2-ethylbutyl)phthalate ester, bis (2-ethythexyl) phthalate 와 nonylphen이 표준용액을 SIM 방법으로 각각의 선택된 질량값(m/z) 206, 135, 150, 149에서 얻은 크로마토그램은 Fig.
- 25이었다. Bis (2-ethylbutyl) phthalate ester를 내부표준 물로 하여 각각의 내분비계 장애물질에 대한 감응지수는 각각 0.9975, 2.8141, 0.6240로 OP와 BEHP는 1 보다 작은 값을 나타냈고 NP는 1보다 큰 값을 나타냈으나, 이것은 각각의 물질에 대한 독특한 기기적 감응 반웅 특성으로 해석된다. 농도를 알고 있는 쇠고기 돼지고기 시료로부터 여러농도의 ISTD에의한 상기 EDC 물질의 회수율을 Table4에 나타냈다.
- 12.5 ㎍/g 내부표준물질의 농도에서 OP, NP, BEHP의 회수율은 각각 135, 130, 89%였다.OP, NP의 각각 30% 이상의 부의 오차를 수반했고 BEHP의 경우는 11%의 옴의 오차를 수반 했음을 알 수 있었다.
- 5 ㎍/g 내부표준물질의 농도에서 OP, NP, BEHP의 회수율은 각각 135, 130, 89%였다.OP, NP의 각각 30% 이상의 부의 오차를 수반했고 BEHP의 경우는 11%의 옴의 오차를 수반 했음을 알 수 있었다. 이것은 2.
- 35ng/g로 평균적으로 NP의 10배 이상 검출되었다. 상기와 같이 국내에 유통되고 있는 육류에서 내분비계 장애물질로 주목 받고있는 NP와 BEHP가 일부 잔류 되어 있음을 알 수 있었다. 이것을 Page 등10,11이 연구한 소고기 중의 BEHP함량(0.
- 결론적으로 OP, NP, BEHP의 동시 정량이 내부표준물질로 bis (2-ethylbutyl) phthalate을 이용하여 가능하나 각각의 회수율에는 다소 차이가 나는 결과를 얻었다. 보다더 신뢰성 있는 결과를 얻기 위해서는 NP, OP와 BEHP를 각각 두 구룹으로 분리하여 각기 다른 내부표준물질과 각기 다른 분리 용매와 분리 칼럼을 사용하는 것이 바람직하며, 세가지 물질의 동시 정량을 위해서는 분리과정중 용매의 종류와 혼합비에 따른 회수율 등에 보다 깊은 연구가 필요하다고 사료된다.
- 1. 쇠고기 돼지고기에 포함된 octylphenol, nonylphe- nol, bis (2-ethythexyl) phthalate를 시험관 농축 장치에서 이염화메탄을 이용하여 효과적으로 추출한 후 2g aminopropyl 칼럼에서 이소헥산으로 분리 정제한 후 GC/MS-SIM 방법으로 30분안에 정량하였으며 다중점 회수율 측정결과 OP, NP의 경우는 0.125-12.5 ㎍/g에서 직선성을 보였고 BEHP는 0.0125-12.5 ㎍/g의 넓은 농도범위에서 좋은 직선성을 보였다.
- 2. 이 방법을 국내에 유통되는 육류에 적용시킨 결과 내분비계장애물질로 주목되는 nonylphenole 극히 적은 양의 시료에서 검출되었으며, bis (2-ethythexyl) phthalate는 0.36-2.35 ug/g이 포함되어 있었으며 이값은 외국의 사례에 비해 다소 높은 값으로 판단된다.
- 3. 국내육류에서 octylphenole 전혀 검출되지 않았다.
- 24(xg/g이었다. BEHP의 경우는 모든 시료에서 검출되었는데 최소 0.36ng/g에서 최대 2.35ng/g로 평균적으로 NP의 10배 이상 검출되었다. 상기와 같이 국내에 유통되고 있는 육류에서 내분비계 장애물질로 주목 받고있는 NP와 BEHP가 일부 잔류 되어 있음을 알 수 있었다.
후속연구
- 보다 좋은 분석 방법의 개발을 퉁하여 또 다른 생체 시료인 어패류, 양서류의 근육, 산모의 모유, 혈액 등의 초 미세 정량까지 발전 시키고저 한다.
- 1의 nonylphenol 크로마토그램과 완벽하게 일치함을 알 수 있었다. 따라서 nonylphenol과 같은 내분비계장애물질이 일부 쇠고기 돼지고기에서 검출되었다는 것은 앞으로 지속적인 연구와 관찰이 필요한 시점이라 생각된다. Fig.
- 보다더 신뢰성 있는 결과를 얻기 위해서는 NP, OP와 BEHP를 각각 두 구룹으로 분리하여 각기 다른 내부표준물질과 각기 다른 분리 용매와 분리 칼럼을 사용하는 것이 바람직하며, 세가지 물질의 동시 정량을 위해서는 분리과정중 용매의 종류와 혼합비에 따른 회수율 등에 보다 깊은 연구가 필요하다고 사료된다. 현재 저자는 이에 대한 연구를 수행 중에 있다.
- 4. 국내 유통되는 육류에 대한 환경호르몬물질의 잔류량에 대한 보다 광범위한 조사 연구가 필요하며 그에 따른 표준 분석방법의 연구개발 과 잔류량 허용치에 대한 연구가 외국의 사례와 함께 검토되어야 할 것으로 생각된다.
※ AI-Helper는 부적절한 답변을 할 수 있습니다.