미세조류 증식 저해균 Shewanella sp. SR-14와 연안해역에서 우점종으로 분포하는 세균인 Vibrio alginolyticus가 규조, Chaetoceros calcitrans의 증식에 미치는 영향 그리고 V. ajginolyticus가 Shewanella sp. SR-14의 C. calcitrans 증식저해 활성에 미치는 영향을 혼합배양으로 측정하였다. Shewsnella sp. SR-14와 해수에서 분리한 V. alginolyticus는 미세조류 배양용 무기배지에서 단독 또는 혼합 배양하여도 잘 증식하였으며, C. calcitrans와 혼합배양시 Shewanella sp. SR-14는 조류증식을 저해한 반면 V alginolyticus는 이 조류의 증식을 촉진하였다. 조류가 첨가된 배지에 Shewanella sp. SR-14의 최초 접종균수가 V. alginolyticus와 거의 같거나 1 log 정도 적게 접종되었을 때에는 C. calcitrans에 대한 Shewanella sp. SR-14의 증식 저해활성이 유지되었으나 V. alginolricus의 최초균수가 Shewanella sp. SR-14보다 3 log 이상 많았을 때에는 조류증식 저해활성이 나타나지 않았다.
미세조류 증식 저해균 Shewanella sp. SR-14와 연안해역에서 우점종으로 분포하는 세균인 Vibrio alginolyticus가 규조, Chaetoceros calcitrans의 증식에 미치는 영향 그리고 V. ajginolyticus가 Shewanella sp. SR-14의 C. calcitrans 증식저해 활성에 미치는 영향을 혼합배양으로 측정하였다. Shewsnella sp. SR-14와 해수에서 분리한 V. alginolyticus는 미세조류 배양용 무기배지에서 단독 또는 혼합 배양하여도 잘 증식하였으며, C. calcitrans와 혼합배양시 Shewanella sp. SR-14는 조류증식을 저해한 반면 V alginolyticus는 이 조류의 증식을 촉진하였다. 조류가 첨가된 배지에 Shewanella sp. SR-14의 최초 접종균수가 V. alginolyticus와 거의 같거나 1 log 정도 적게 접종되었을 때에는 C. calcitrans에 대한 Shewanella sp. SR-14의 증식 저해활성이 유지되었으나 V. alginolricus의 최초균수가 Shewanella sp. SR-14보다 3 log 이상 많았을 때에는 조류증식 저해활성이 나타나지 않았다.
The algicidal activity of Shewanella (formerly Alteromonas) sp. SR-14 against diatom, Chaetoceros calcitrans was reported in our previous papers. In this study, the effect of Vibrio alginolyticus on the algicidal activity of Shewanelia sp, SR-14 was examined under the optimum algicidal conditions, i...
The algicidal activity of Shewanella (formerly Alteromonas) sp. SR-14 against diatom, Chaetoceros calcitrans was reported in our previous papers. In this study, the effect of Vibrio alginolyticus on the algicidal activity of Shewanelia sp, SR-14 was examined under the optimum algicidal conditions, i.e., temperature ($21\pm1^{\circ}C$), light intensity (4,000 lux), and light: dark cycle (12 hour: 12 hour). Shewanella sp. SR-14 grew well in the presence or the absence of V. alginolyticus in Conwy medium. Algal growth was only inhibited by Shewanella sp. SR-14. V. alginolyticus did not show the algicidal activity, Growth of C. calcitrans increased synergistically with growth of V. alginolyticus. When the initial inoculum of V. alginolyticus was only 1 log cycle higher than that of Shewanella sp. SR-14, the effect of V. alginolyticus on the algicidal activity of Shewanella sp. SR-14 was insignificant during incubation of mixed culture, i.e., two bacterial species and the alga. However, when V. alginolyticus dominated Shewanella sp. SR-14 by 3 log cycles of bacterial counts, it was found that the strain SR-14 could not inhibited growth of C. calcitrans up to 5 days of incubation.
The algicidal activity of Shewanella (formerly Alteromonas) sp. SR-14 against diatom, Chaetoceros calcitrans was reported in our previous papers. In this study, the effect of Vibrio alginolyticus on the algicidal activity of Shewanelia sp, SR-14 was examined under the optimum algicidal conditions, i.e., temperature ($21\pm1^{\circ}C$), light intensity (4,000 lux), and light: dark cycle (12 hour: 12 hour). Shewanella sp. SR-14 grew well in the presence or the absence of V. alginolyticus in Conwy medium. Algal growth was only inhibited by Shewanella sp. SR-14. V. alginolyticus did not show the algicidal activity, Growth of C. calcitrans increased synergistically with growth of V. alginolyticus. When the initial inoculum of V. alginolyticus was only 1 log cycle higher than that of Shewanella sp. SR-14, the effect of V. alginolyticus on the algicidal activity of Shewanella sp. SR-14 was insignificant during incubation of mixed culture, i.e., two bacterial species and the alga. However, when V. alginolyticus dominated Shewanella sp. SR-14 by 3 log cycles of bacterial counts, it was found that the strain SR-14 could not inhibited growth of C. calcitrans up to 5 days of incubation.
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문제 정의
SRT4의 조류 증식저해 활성에 미치는 영향을 시험하기 전에 먼저 이 균이 조류 배양용 무기 배지인 Conwy 배지에서 증식력과 Shewanella sp. SRT4와 혼합 배양하였을 때 상호 영향에 대하여 살펴보았다. V.
제안 방법
alginolyticus가 Shewanella sp. SR-14의 C. calcitrans 증식저해 활성에 미치는 영향을 혼합배양으로 측정하였다.
alginolyticus가 조류증 식 저해균 Shewanella sp. SRT4의 Chaetoceros calcitrans 저해 활성에 미치는 영향을 이들 두 시험균주와 C. calcitrans를 혼합 배양하여 측정하였다.
alginolyticus 생균수는 TCBS agar 평판을 사용하여 35& 24시간 배양하여 측정하였으며, Shewanella sp. SRT4의 생균수는 peptone agar (peptone, 0.5 g; yeast extract, 0.05 g; agar, 12 g; 해수, 900 mL; 증류수, 100 mL) 평판을 사용하여 25℃, 3일간 배양하여 측정하였다. 한편, 시험액에 두 시험균이 동시에 접종된 경우 Shewanella sp.
, 1999a)와 같은 것을 사용하였다. V. alginolyticus는 1997년 8월에 전남 여수시 남산동 연안의 수심 2 m 충에서 채취한 해수를 0.8 μm membrane filter로 여과하고 멸균해수로 적절히 희석하여 thiosulfate citrate bile sucrose (TCBS, Difco) agar에 도말하고, 35℃에서 24시간 배양하여 나타난 황색 colony를 순수 분리한 다음 여러가지 생화학 시험을 거쳐 동정하였다 (Kelly et al., 1991).
alginolyticus 배양액을 첨가하여 혼합배양하였다. 각 혼합 배양액 및 대조구는 온도 21 ± 1℃, 조도 약 4.000lux, 광주기 12시간 Light: 12시간 Dark로 정치 배양하였으며, 조류의 증식은 전보 (Kim et al., 1999a)에서 나타낸 바와 같이 spectrophotometer (Milton Roy, model spectro- nic GENESYS 5)로 750nm에서 흡광도를 측정하여 나타내었다.
대상 데이터
실험에 사용한 조류증식 저해균, Shewanella sp. SRT4와 규조, Chaetoceros calcitrans CCMP 1315는 전보 (Kim et al., 1999a)와 같은 것을 사용하였다. V.
따라서 본 시험에서는 우리나라 연안에서 일반적으로 분포하고 있고, 적조 발생 시 많이 분포하며, 선택배지가 있어 S/iewanella sp. SRT4와 혼합 배양하여도 쉽게 구분할 수 있는 점 등을 고려하여 V. alginolyticus를 시험균주로 선정 사용하였다.
이론/모형
Conwy 배지(Walne, 1979) 혹은 조류배양액에 각각 따로 또는 혼합 접종된 Shewanella sp. SRT4와 V. a/ginolyticus의 생균수는 도말법으로 측정하였다 (Buck and Cleverdon, I960). 즉, 시험액에 두 시험균이 각각 따로 접종된 경우 V.
Shewanella sp. SRT4의 C. calcitrans 증식 저해활성에 미치는 V. alginnolyticus 의 영향은 혼합배양법으로 측정하였다. 즉, Conwy 배지에 대수 증식기의 미세조류를 일정농도 되도록 접종한 다음, 대조구에는 peptone broth만을, 시험구에는 peptone broth에서 20℃, 3일간 배양한 Shewanella sp.
성능/효과
, 1999b)에서 Shewanella sp. SR-14는 무균 조류 배양액에서는 mL당 수 cell만 접종하여도 조류의 증식이 저지되는 것으로 보고하였으나, 본 시험 결과 N. alginolyti- cus가 31og 이상 많게 공존할 시에는 조류증식 저해활성이 나타나지 않았다.
Shewanella sp. SR-14와 V. alginolyticus를 조류가 첨가된 배지에서 혼합 배양하였을 때 두 균은 양호하게 증식하여 최초 균수의 차이에 관계없이 1일 후 생균수가 모두 ItTCFU/mL 이상 증식하였다. 그리고 조류 배양액의 OD750 값은 V.
calcitransA 첨가된 배지에 Shewanella sp. SRT4와 V. algi- nolyticus의 최초균수를 각각 5.6X10' CFU/mL 및 7.4X 104 CFU/ mL로 접종하고 배양하였을 때 시험구 조류의 증식은 대조 구와 같은 경향이었고 정지기에 달하였을 때 최고밀도는 시험구가 약간 높았다. 전보 (Kim et al.
Shewanella sp. SRT4와 V. alginolyticus를 Conwy 배지에서 단독 배양하였을 때 이들 균은 조류 배양조건에서 잘 증식하여 모두 최초균수 약 104 CFU/mL에서 배양 1일 후 약 106 CFU/mL 이상 증식하였다. 그런데 최대 균수에 도달 후 Shewanella sp.
이러한 결과는 石田 (1994)이 조류 배양액에 시료를 접종하여 조류 증식 저해균을 분리할 때 증식을 촉진하는 세균이 공존할 경우 조류 증식 저해능이 상쇄되어 분리가 어렵다고 언급한 바와 같은 경향이었고, 해양 생태계에서도 S7iewanella sp. SRT4와 공존하는 미세조류 증식촉진 세균과 수적인 차이가 적을 때에는 조류의 증식을 저해할 수 있지만 그 차이가 클 때는 조류증식 저해 능을 나타내지 못할 것으로 사료되었다.
시험에 사용된 균은 Gram 음성의 간균으로 sucrose를 분해하였고, NaCl이 함유되지 않은 배지에서는 증식하지 않았으나 10% 함유된 배지에서는 증식하였고, 또 marine agar에서 swarming을 나타내는 등 전형적인 V. alginolyticus의 특성을 나타내었다.
해수를 희석하여 TCBS agar 평판에 도말 배양한 후 황색을 나타내는 균주 4종을 순수 분리하여 동정한 결과 3개의 균주가 V. alginolyticus로 동정되었으며, 시험에 사용한 균주의 생화학적 특성을 Table 1에 나타내었다.
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