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문제 정의
- 따라서 본 연구는 담수산 rotifer, B. ca/yci0orus의 먹이로 많이 이용하는 담수산 농축 Chlorella에 농도별로 vitamin 外를 첨가 하여 rotifer의 유성생식율과 내구란 생산을 조사하였으며 vitamin B, 2 농도별로 생산된 내구란의 부화율도 조사하였다.
- 본 연구는 vitamin 恥의 첨가에 따른 담수산 rotifer, Brachionus ca/yci/7orus의 유성생식율 및 내구란 생산을 조사하였다. Vitamin 恥의 첨가방법은 rotifer의 먹이생물인 농축 담수산 C/Hore〃a에 첨가하여 공급하였고 실험 용기는 250 mL 삼각플라스크에서 실시 하였다.
제안 방법
- 본 연구는 vitamin 恥의 첨가에 따른 담수산 rotifer, Brachionus ca/yci/7orus의 유성생식율 및 내구란 생산을 조사하였다. Vitamin 恥의 첨가방법은 rotifer의 먹이생물인 농축 담수산 C/Hore〃a에 첨가하여 공급하였고 실험 용기는 250 mL 삼각플라스크에서 실시 하였다.
- 각 vitamin B“ 첨가량에 따라 생산된 내구란의 부화율 실험은 내구란을 4t, 암 조건에서 3개월 동안 보관한 후, 5mL multi culture chamber (배양수 3mL)에 내구란 100개 내외를 수용하였다. 내구란의 부화조건은 28t, 3, 000lux로 하였고 36시간 후 내구란 에서 부화한 rotifer를 조사하였다.
- 각 vitamin B“ 첨가량에 따라 생산된 내구란의 부화율 실험은 내구란을 4t, 암 조건에서 3개월 동안 보관한 후, 5mL multi culture chamber (배양수 3mL)에 내구란 100개 내외를 수용하였다. 내구란의 부화조건은 28t, 3, 000lux로 하였고 36시간 후 내구란 에서 부화한 rotifer를 조사하였다. 실험은 3회 반복하였다.
- (1988)의 방법에 따라 계산하였다. 또한 배양기간 중 rotifer의 성장률 (specific growth rate, r) (r= (l/T)ln(NT/No)(T= 접종 이후 rotifer가 최고밀도에 도달하기까지의 배양일수; Nt=T days의 rotifer 최고 밀도; N°= rotifer 접종밀도)〕을 조사하였다.
- 최초 rotifer의 접종밀도는 250mL 삼각플라스크 (배양수 200mL)에 1 개체/mL로 하였으며, 실험조 건은 27℃, 3, 0001ux로 하였다. 실험기간은 rotifer가 최고밀도까지 도달한 후 감소하는 날을 실험 종료일로 하였다. 실험은 3회 반복 하였다.
- calyciflorus는 군산시 옥구 strain (Hur and Park, 1996)의 내 구 란을 5 mL multi culture chamber (배양수 3mL)에 수용하여 27t, 3, 000 lux로 연속 조명된 상태에서 36시간 동안 부화시켰으며, 부화된 female 중 72마리를 2 mL multi culture chamber (배 양수 ImL)에서 배양을 하여 가장 내구란 생산이 높은 female을 실험에 사용하였다. 실험은 vitamin Bd가 첨가되지 않은 담수산 농축 Chlorella (대상, 주식회사) 1L 에 vitamin B12 (Sigma, 99%)를 0.7, 1.5, 3.0 및 6.0ppm이 되게 첨가하여 vitamin Bn의 무 첨가구인 대조구와 함께 rotifer의 먹 이로 공급하였다. 먹이 공급량은 mL당 rotifer 10개체를 기준으로 하여 담수산 농축 Chlorella를 건조중량으로 8.
대상 데이터
- 본 실험에 사용된 담수산 rotifer, B. calyciflorus는 군산시 옥구 strain (Hur and Park, 1996)의 내 구 란을 5 mL multi culture chamber (배양수 3mL)에 수용하여 27t, 3, 000 lux로 연속 조명된 상태에서 36시간 동안 부화시켰으며, 부화된 female 중 72마리를 2 mL multi culture chamber (배 양수 ImL)에서 배양을 하여 가장 내구란 생산이 높은 female을 실험에 사용하였다. 실험은 vitamin Bd가 첨가되지 않은 담수산 농축 Chlorella (대상, 주식회사) 1L 에 vitamin B12 (Sigma, 99%)를 0.
데이터처리
- Vitamin B, 2 첨가량에 대한 B. calyc辺orus의 최고밀도, 성장률, 유성생식율, 내구란 생산 및 부화율에 대한 실험 결과는 One-way ANOVA-test를 실시하여 Duncan's multiple range test (Duncan, 1955)로 처리 평균간의 유의성(PC0.05)을 SPSS (SPSS Inc., 1997) program으로 검정하였다.
이론/모형
- 배양기간 중 1일 1회 입체현미경 (stereo microscope, Olympus CH-2)하에서 rotifer female을 종류별로 계수하였으며 rotifer의 유성생식율, 수정률 rotifer 1俨개체당 내구란 생산 및 먹이 건조 중량 (g)당 내구란 생산은 Hagiwara et al. (1988)의 방법에 따라 계산하였다. 또한 배양기간 중 rotifer의 성장률 (specific growth rate, r) (r= (l/T)ln(NT/No)(T= 접종 이후 rotifer가 최고밀도에 도달하기까지의 배양일수; Nt=T days의 rotifer 최고 밀도; N°= rotifer 접종밀도)〕을 조사하였다.
성능/효과
- , 1997; 吉村 等, 1994). 그러나 본"연구에 있어서 vitamin B, 2 를 rotifer의 먹이인 담수산 농축 C/i/ore〃a에 첨가하여 공급하였을 경우, 첨가량이 증가할수록 유성생식율 및 수정률이 높게 나타나는 경향을 보였다. 이것은 수용성인 vitamin B”를 rotifer가 직접 섭취하는 것보다는 배양수내 rotifer의 먹이인 bacteria가 수용성 vitamin Bu를 섭취하여 간접적으로 rotifer가 섭취한 것으로 판단된다.
- Rotifer 10, 000개체 당 내구란 생산은 대조구에서 1, 198개로 가장 낮게 나타났으며 vitamin B12 첨가량이 증가할수록 높게 나타나는 경향을 보였다. 가장 높은 생산량은 6ppm구에서 11, 289개로 다른 실험구와 유의적인 차이를 보였다 (P<0.
- Rotifer의 최고밀도는 vitamin B”의 첨가량이 높을수록 낮게 나 타났고 6 ppm구에 서 가장 낮은 138개체/mL를 보였다. 유성생식 율과 수정률은 vitamin B”의 첨가량이 많을수록 높아 6ppm구에 서 각각 63.
- 5 ppm구에서 231 개/mL로 가장 높게 나타났으나 다른 vitamin B”의 첨가구와의 유의적인 차이는 없었고, Rotifer 10,개체 당, Chlorella 건중량 (g) 당 내구란 생산량은 6ppm구에서 각각 11,289개, 121,252개로 가장 높게 나타났다. Vitamin B”의 첨가량에 따라 형성된 내구란의 부화율은 vitamin Bd 를 첨가한 실험구에서 67.7~80.9%의 부화율을 보여 첨가하지 않 은 대조구 48.2%보다 높게 나타났다. 따라서 담수산 rotifer, B.
- 따라서 본 실험을 종합하여 볼 때, vitamin Bn는 담수산 rotifer,B. ca/yci0orus의 유성생식율, 수정률, 내구란 생산량 및 부화율을 높여주는 역할을 하였다는 것을 볼 수 있으며, Hagiwara et al. (1994), Maruyama and Hirayama (1993), Maruyama et al. (1997) 의 연구에서와 같이 Chlorella 세포 내 vitamin B&가 함유된 상태 로 먹이로 공급하는 방법과 본 연구에서와 같이 배양수에 vitamin Bn를 첨가하여 bacteria의 증식 혹은 bacteria 균체 내의 vitamin B12 함량을 높여서 rotifer의 먹이로 이용할 수 있을 것으로 판단된다. 본 실험에 따라 담수산 rotifer Brachionus calyciflorus 내구 란의 효율적인 대량 생산을 위한 가장 효과적인 vitamin B12의 첨 가량은 유성생식율과 수정률이 높으면서 rotifer 개체 및 먹 이공급 량 당 가장 많은 내구란 생산을 보인 6ppm으로 판단된다.
- mL당 내구란 생산은 1.5 ppm구에서 231 개/mL로 가장 높게 나타났으나 다른 vitamin B”의 첨가구와의 유의적인 차이는 없었고, Rotifer 10,개체 당, Chlorella 건중량 (g) 당 내구란 생산량은 6ppm구에서 각각 11,289개, 121,252개로 가장 높게 나타났다. Vitamin B”의 첨가량에 따라 형성된 내구란의 부화율은 vitamin Bd 를 첨가한 실험구에서 67.
- Rotifer 10, 000개체 당 내구란 생산은 대조구에서 1, 198개로 가장 낮게 나타났으며 vitamin B12 첨가량이 증가할수록 높게 나타나는 경향을 보였다. 가장 높은 생산량은 6ppm구에서 11, 289개로 다른 실험구와 유의적인 차이를 보였다 (P<0.05). 또한 Chlorella 건중량 (g)당 내구란 생산에 있어서는 대조구에서 15, 757개로 가장 낮게 조사되었으나 0.
- 05). 그리고 mL당 내구란 생산량에 있어서는 대조구에서 57.5 개/mL로 가장 낮게 나타났으며 1.5 ppm구에서 231.1 개/mL로 가장 높게 나타났 지만 vitamin Bn 첨가구 간에는 유의적인 차이를 볼 수 없었다 (P>0.05).
- 2%보다 높게 나타났다. 따라서 담수산 rotifer, B. ca- /yci〃orus의 내구란 생산과 내구란의 부화율에 vitamin B12가 영 향을 미친 것으로 판단된다.
- (1997) 의 연구에서와 같이 Chlorella 세포 내 vitamin B&가 함유된 상태 로 먹이로 공급하는 방법과 본 연구에서와 같이 배양수에 vitamin Bn를 첨가하여 bacteria의 증식 혹은 bacteria 균체 내의 vitamin B12 함량을 높여서 rotifer의 먹이로 이용할 수 있을 것으로 판단된다. 본 실험에 따라 담수산 rotifer Brachionus calyciflorus 내구 란의 효율적인 대량 생산을 위한 가장 효과적인 vitamin B12의 첨 가량은 유성생식율과 수정률이 높으면서 rotifer 개체 및 먹 이공급 량 당 가장 많은 내구란 생산을 보인 6ppm으로 판단된다.
- 부화율에 있어서는 vitamin B”를 첨가해 주지 않은 대조구에서 48.2%로 가장 낮게 나타났으며, 6ppm구에서 80.9%의 가장 높은 부화율을 보였으나 vitamin B” 첨가구들 간에서의 유의적인 차이는 나타나지 않았다 (P>0.05).
- 0% 로 나타났다. 수정률에 있어서는 대조구에서 37.1%로 가장 낮게 나타났으며 vitamin Bm의 첨가량이 많아질수록 증가하는 경향을 보였으며 대조구와 비교하여 유의적으로 6ppm구에서 가장 높은 89.6%로 나타났다 (P<0.05).
- Rotifer의 최고밀도는 vitamin B”의 첨가량이 높을수록 낮게 나 타났고 6 ppm구에 서 가장 낮은 138개체/mL를 보였다. 유성생식 율과 수정률은 vitamin B”의 첨가량이 많을수록 높아 6ppm구에 서 각각 63.0%와 89.6%로 조사되었다.
- 유성생식율은 0.7ppm구에서 25.8%로 가장 낮게 조사되었으나 대조구의 28.1%와 유의적인 차이는 없었으며 (P>0.05), vitamin Bn의 첨가량이 많아질수록 증가하여 6ppm구에서 가장 높은 63.0% 로 나타났다. 수정률에 있어서는 대조구에서 37.
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