[논문]알지네이트 인상체에 대한 상업성 소독제의 효과

김선미

문제 정의

본 연구는 알지네이트 인상체를 적절히 소독하기 위한 상업성 소독제의 효과를 알아보고자 Staphylococcus aureus 배양액에 2분 동안 담가서 충분히 균액을 침투시킨 알지네이트 45개의 시편을 네 군의 소독제와 대조군인 멸균수에 시간을 달리하여 침적시켜본 후 생균수를 측 정하였다.
국내에서도 교차감염 방지의 한 방법으로 인상체를 소독하도록 교육하고 적절한 소독제를 추천하는 것이 필요하다. 이를 위해 본 연구는 시중에서 구하기 쉬운 3종의 상업성 소독제를 건강한 사람의 피부에서 혼히 관찰되고 구강 내 세균의 하나인 Methicillin 항생제에 내성이 있는 Staphylococcus sireus가 묻어 있는 알지네이트 인상체에 적용하는 실험을 통해 알지네이트 인상체에 대한 소독제의 효과를 알아보고자 하였다.

제안 방법

각 시간별로 침적이 끝난 후 알지네이트 시편을 BHI broth 1 ml에 옮겨 약 30초 동안 vortex mixei를 사용하여 강하게 진동을 주어 균이 충분히 인상체로부터 분리되게 하였다. 그 후 broth 액을 PBS buffer에 회석하여 BHI 한천배지에 접종하여 37도의 배양기에서 배양 후 생균수를 측정하였다. 대조군으로는 알지네이트 시편을 Staphylococcus aureus 배양액에 2분 동안 담근 후 소독제 대신에 멸균수 10 ml에 1분, 5분, 10분간씩 침적시킨 후 이것을 BHI broth 1ml 에 옮겨 약 30초 동안 균이 충분히 인상체 시편으로부터 분리되게 하여 균이 떨어진 broth액을 PBS buffer에 약 10⁵ 희석하여 BHI agar에 접종하여 배양 후 생균수를 측정하였다.
그 후 broth 액을 PBS buffer에 회석하여 BHI 한천배지에 접종하여 37도의 배양기에서 배양 후 생균수를 측정하였다. 대조군으로는 알지네이트 시편을 Staphylococcus aureus 배양액에 2분 동안 담근 후 소독제 대신에 멸균수 10 ml에 1분, 5분, 10분간씩 침적시킨 후 이것을 BHI broth 1ml 에 옮겨 약 30초 동안 균이 충분히 인상체 시편으로부터 분리되게 하여 균이 떨어진 broth액을 PBS buffer에 약 10⁵ 희석하여 BHI agar에 접종하여 배양 후 생균수를 측정하였다. 모든 실험은 3회 반복 실험하였다.
본 연구에서 통계적 비교를 하지 않은 것은 통계적 유의성이 임상적으로 유효한 생균수의 감소를 증명할 수 없었기 때문이며, 다른 논문²³⁾에 제시된 일반적인 4-logl0의 감소를 적절한 소독제의 기준으로 간주했다.
알지네이트(Alginoplast, Hera us kulzer, 독일)를 제조회사의 추천 사항대로 멸균수와 혼합하여 인상체를 채득하는 것과 같은 방법으로 원기둥 모양의 틀(직경 10 mm X높이 8 mm)에 넣어 알지네이트 시편을 45개 제작하고, 70% 알코올에 침적 후 건조시켰다. 알지네이트 시편을 바로 10⁷개/ml의 Staphylococcus aureus 배양액에 2분 동안 담가 충분히 균액이 알지네이트 시편에 침투하도록 한 후 옮겨서 각 소독제 10 ml에 각각 1분, 5분, 10분간씩 침적시켰다. 소독제는 네 종류를 사용했는데 유한락스(유한양행, 한국)를 10배 회석한 0.
2 ml 접종하여 37℃ 항온 배양기에서 16시간 정치배양하였다. 알지네이트(Alginoplast, Hera us kulzer, 독일)를 제조회사의 추천 사항대로 멸균수와 혼합하여 인상체를 채득하는 것과 같은 방법으로 원기둥 모양의 틀(직경 10 mm X높이 8 mm)에 넣어 알지네이트 시편을 45개 제작하고, 70% 알코올에 침적 후 건조시켰다. 알지네이트 시편을 바로 10⁷개/ml의 Staphylococcus aureus 배양액에 2분 동안 담가 충분히 균액이 알지네이트 시편에 침투하도록 한 후 옮겨서 각 소독제 10 ml에 각각 1분, 5분, 10분간씩 침적시켰다.

대상 데이터

구강 내 상주균이면서 다양한 화농성 병변을 유발하는 Meticillin에 내성이 있는 Staphylococcus aureus(MRSA, ATCC 6538)를 200 ml BHI broth에 0.2 ml 접종하여 37℃ 항온 배양기에서 16시간 정치배양하였다. 알지네이트(Alginoplast, Hera us kulzer, 독일)를 제조회사의 추천 사항대로 멸균수와 혼합하여 인상체를 채득하는 것과 같은 방법으로 원기둥 모양의 틀(직경 10 mm X높이 8 mm)에 넣어 알지네이트 시편을 45개 제작하고, 70% 알코올에 침적 후 건조시켰다.
알지네이트 시편을 바로 10⁷개/ml의 Staphylococcus aureus 배양액에 2분 동안 담가 충분히 균액이 알지네이트 시편에 침투하도록 한 후 옮겨서 각 소독제 10 ml에 각각 1분, 5분, 10분간씩 침적시켰다. 소독제는 네 종류를 사용했는데 유한락스(유한양행, 한국)를 10배 회석한 0.5% 차아염소산 나트륨(sodium hypochlorite)과 유한락스를 100배 희석한 0.05% 차아염소산 나트륨, 와이덱스(동인당 제약. 한국)로 판매되는 2% 글루탈알데하이드(glutaraldehyde), 하이크로에스(수산이엔씨. 한국)로 판매되는 차아염소산(Hypochlorus acid) 30ppm 동이 사용되었다. 각 시간별로 침적이 끝난 후 알지네이트 시편을 BHI broth 1 ml에 옮겨 약 30초 동안 vortex mixei를 사용하여 강하게 진동을 주어 균이 충분히 인상체로부터 분리되게 하였다.

성능/효과

0.5% 차아염소산 나트륨(유한락스)에 1분, 5 분, 10분 침적한 경우와 0.05% 차아염소산 나트륨에 5분, 10분 침적한 경우와 2% 글루탈알데하이드(와이덱스)에 1분, 5분, 10분 침적한 경우에 99.99%(10⁴개/ml) 이상의 생균수의 감소를 보여 알지네이트 인상체를 소독하는 데 효과적이었다. 반면에 30ppm 차아염소산(하이크로에스)에 침적한 경우와 멸균수에 침적한 경우는 시간의 경과에 상관없이 알지네이트 인상체를 소독하는 데 효과적이지 못했다.
Staphylococcus aureus 균액이 묻은 알지네이트 시편을 네 군의 소독제와 대조군인 멸균수 10ml에 각각 1분, 5분, 10분간씩 침적시켜 보았을 때 10⁵개/ml에서 99.99%(10⁴개/ml) 이상의 생균수의 감소를 보이는 경우는 0.5% 차아염소산 나트륨에 1분, 5분, 10분 침적한 경우와 0.05% 차아염소산 나트륨에 5분, 10분 침적한 경우, 2% 글루탈알데하이드에 1분, 5분, 10분 침적한 경우였으며. 0.
5%를 사용할 때 B형간염 바이러스를 비활성화시킨다고 추천하였으며²⁴⁾, 알지네이트 인상체의 효과적인 세균성, 바이러스성, 진균성 소독제로 보고되고 있다^23,25,26). 본 실험에서도 0.5%의 차아염소산 나트륨에 알지네이트 시편을 1분 이상만 침적시켰어도 Staphylococcus aureus가 검출되지 않아 높은 소독효과를 보였으며, 100배 희석한 0.05%의 차아염소산 나트륨에는 인상체를 소독제에 5분 이상은 침적시켜야 10⁴개/ml 이상의 생균수가 감소되는 것을 알 수 있었다. 하지만 원액인 5%의 차아염소산 나트륨일지라도 모든 세균에 효과적이지 않고, 차아염소산 나트륨의 효과가 다른 여러 가지 요인 즉 미생물로의 접근성, 유기물의 존재 여부, pH.
. 본 연구에서는 차아염소산 성분의 하이크로에스에 Staphylococcus aureus로 오염된 알지네이트 시편을 넣었올 때 10²개/ml 정도의 감소 효과를 보여 소독제로서 효과적이지 못함을 알 수 있었다. 이는 멸균수에 침적한 경우와 유사하였다.
2% 글루탈알데하이드는 10분간 인상체를 침적시켰을 때 알지네이트나 다른 인상체의 체적 안정성을 크게 변화시키지 않고¹²⁾, B형간염 바이러스를 비활성화시킬 수 있다고 보고되었다²⁹⁾. 본 연구에서도 2% 글루탈알데하이드는 오염된 알지네이트 시편을 1분 이상만 침적시켰을 때 Staphylococcus aureus가 검출되지 않아 완전한 소독 효과가 나타났다.
이 실험을 통하여서 많은 병원성 미생물이 포함될 수 있는 인상체에 석고를 붓기 전이나 기공소에 보내기 전에 적절한 소독제를 사용하여 소독이 이루어져야 함을 인식할 수 있었고, Staphylococcus imreus가 묻어 있는 알지네이트 인상체를 소독할 때 0.5%의 차아염소산 나트륨 과 2% 글루탈알데하이드에 1분 이상 침적했을 때와, 0.05%의 차아염소산 나트륨에 5분 이상 침적했을 때가 1여개/ml 이상의 생균수의 감소를 보여 효과적이었으며, 30 ppm 차아염소산인 하이크로에스와 물에 침적시킨 것은 알지네이트 인상체의 소독제로 효과적이지 못함을 알 수 있었다.
이는 차아염소산과 알지네이트의 성분과의 상호작용에 의해 소독 효과를 떨어뜨렸옴을 생각해 볼 수 있게 했다. 이를 통해 어떤 인상체료들의 표면 구조는 소독제의 효과를 억제할 수 있음을 알 수 있었으며. 인상체와 소독제의 상호작용을 고려한 소독이 이루어져야 함을 생각할 수 있었다.
11 X10⁵개/ml로 생균수가 감소하였다. 차아염소산에 침적한 경우와 멸균 수에 침적한 경우는 서로 유사하였으며 1분, 5분, 10분 침적한 경우 모두 거의 일정하게 10⁶개/ml가 측정되었다(표 1).

후속연구

본 연구는 구강 내 세균이면서 다양한 화농성 병변을 유발할 수 있으며, 면역학적으로 약한 환자는 더욱 주의가 필요한 Staphylococcus wreus를 이용한 실험이었지만 그 외에 많은 병원성 미생물들이 오염될 수 있으므로 다른 미생물들을 포함한 실험이 더 고안되고, 앞으로 알지네이트 이외의 다른 고무인상체들을 위한 적정한 소독제에 대한 연구와 또한 소독했을 때 인상체들의 체적 안정성에 대한 연구들이 지속되어야 하겠다.

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