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문제 정의
- 본 연구는 항산화활성(11, 12)과 항미 생물 활성(13, 14), 발암과 노화억 제 작용, 호르몬 분비 강화 작용(15, 16)이 있는 것으로 밝혀진 솔잎 추출물을 이용하여 Vibrio^ 의 한 식중독 발생을 방지할 수 있는 방안을 모색하고자 회 섭취시 양념으로 이 용되 고 있는 고추냉 이 의 Vibrio균에 대한 항균력 과 솔잎추출물과의 혼용 효과를 검토하였다.
가설 설정
- 4)Mean within each column with no common superscripts are significantly different (p<0.05).
제안 방법
- Vibrio 분리원으로 대구 재래시장에서 판매되는 꽃게와 가자미를 사용하여 꽃게는 Homogenizer(ACE NISSEI Ltd., Japan)를 이용하여 마쇄 후 1 g을, 가자미는 표피, 내장, 아가미 등을 멸균 면봉으로 swab한 다음 1% NaCl alkaline pep- tone수에 넣어 37°C에서 24시 간 증균하였다. 이 를 thiosulfate citrate bile salt sucrose agar(TCBS, Difco, USA)배지 상에 1 차 분리 하여 green색의 colony-f- 채 취 하여 다시 TCBS배지 상에서 2차 분리한 다음 Api 20E kit(Biomerieux, France)를 사용하여 동정하였다.
- 간장에 시판 고추냉이를 혼합하여 제조한 고추냉이 간장에 솔잎 추출물을 0%, 1%, 3% 첨가하여 회 섭취시 맛, 향, 색, 종합적 기호도를 5점 채점법에 준하여 관능검사를 실시한 결과 Table 3과 같다. 대조구와 솔잎 추출물 1% 첨구간의 맛, 향, 색, 종합적 기호성 등 모든 면에서 유의성의 차이가 없는 반면, 솔잎 추출물 3% 첨가구의 경우 대조구에 비해 맛, 향, 종합적 기호성 등이 유의하게 감소하는 경 향을 나타내었다.
- 卩论”。균에 대한 시판 고추냉이와 솔잎 추출물의 항균효과는 시 판 3개 회 사의 고추냉 이 제 품을 구입 하여 trypic soy broth에 각각 1% 첨가 후 각각의 공시 균주를 접종한 다음 24시간 배양하면서 12시간 간격으로 생균수를 측정하여 검토하였다. 또한 간장과 혼합한 고추냉이장에 솔잎 추출물 1%를 첨 가한 다음 5분, 10분, 30분 간격 으로 전술한 바와 같은 방법으로 생균수를 측정하여 대조구와 비교하였다.
- 7%, 0.9%, 1%를 첨 가한 tryptic soy broth에 각각의 V%”'。균주를 접종한 다음 37°C에서 24시간 동안 배양하면서 12시간 간격으로 시료를 채취한 다음 0.1% peptone용액으로 적 정 희석하여 tryptic soy agar에 접종 37°C에서 24시간 배양 후 나타난 colony수를 측정하여 대조구와 비교하였다.
- 또한 간장과 혼합한 고추냉이장에 솔잎 추출물 1%를 첨 가한 다음 5분, 10분, 30분 간격 으로 전술한 바와 같은 방법으로 생균수를 측정하여 대조구와 비교하였다.
- , Japan)를 이용하여 마쇄 후 1 g을, 가자미는 표피, 내장, 아가미 등을 멸균 면봉으로 swab한 다음 1% NaCl alkaline pep- tone수에 넣어 37°C에서 24시 간 증균하였다. 이 를 thiosulfate citrate bile salt sucrose agar(TCBS, Difco, USA)배지 상에 1 차 분리 하여 green색의 colony-f- 채 취 하여 다시 TCBS배지 상에서 2차 분리한 다음 Api 20E kit(Biomerieux, France)를 사용하여 동정하였다.
- 제조한 고추냉이장에 솔잎 추출물을 0%, 1%, 3% 첨가하여 맛, 향, 색, 종합적 기호도를 5점 채점법을 이용하여 관능검사를 실시한 다음 SPSSU8)로 분석 후 유의성을 검정하였다.
- para- haemolyticus ATCC 17802에 대한 솔잎추출물의 항균활성검 색은 paper disc method(17)를 사용하였다. 즉, 24시 간 배양한 공시 균주를 tryptic soy agar(Difco, USA) plate에 각각 접 종한 후 솔잎 추출액 농도 40 uL/disc인 disc를 배 지 표면에 가볍 게 놓은 후 냉장고에서 하루 동안 방치한 다음 37°C에서 24시 간 배양한 후 clear zone 생성 유무를 확인하였다.
- 회 섭취 시 사용하는 고추냉이장에 솔잎 추출물 첨가효과를 검 토하기 위 하여 3개 회 사에서 제조한 시 판 고추냉이와 솔잎추출물의 혼용효과를 검 토하였 다. 간장, 고추냉이장과, 솔잎추출물 1%를 첨가한 고추냉이장에 각각 공시 균을 1质%业가 되게 접종한 다음 5분, 10분, 30분 간격으로 생균 수의 변화를 측정한 결과는 Table 2와 같다.
대상 데이터
- 솔잎 ethanol 추출물은 팔공산에서 채취한 솔잎에 75%의 ethanol을 10배 가하여 24시 간 추출한 다음 감압증발농축기(Heidolph WB 2000, Ger.)를 이용하여 1/10로 농축하여 이를 ethanol추출원액으로 사용하였다. 솔잎 열수 추출물은 증류수를 솔잎 무게에 대해 10배 가하여 80"C에서 3시간 가열한 후 감압증발농축기를 이용하여 1/10로 농축한 다음 이를 열수 추출원액으로 사용하였다.
이론/모형
- 분리 균주 V. parahaemolyticus, V. vulnificus^ V. para- haemolyticus ATCC 17802에 대한 솔잎추출물의 항균활성검 색은 paper disc method(17)를 사용하였다. 즉, 24시 간 배양한 공시 균주를 tryptic soy agar(Difco, USA) plate에 각각 접 종한 후 솔잎 추출액 농도 40 uL/disc인 disc를 배 지 표면에 가볍 게 놓은 후 냉장고에서 하루 동안 방치한 다음 37°C에서 24시 간 배양한 후 clear zone 생성 유무를 확인하였다.
성능/효과
- 처리시간이 경과함에 따라 대조구와 고추냉이 첨가구에서는 뚜렷한 감소현상이 나타나지 않았으나 솔잎추출물 혼합 처 리구는 뚜렷한 감소현상을 나타내었다. 시 판고추냉이 에 종류에 따른 V. parahaemolyticus HY I의 감소효과는 관찰할 수 없었으나 솔잎추출물 첨가에 따른 생균수 감소의 증진효과는 유사한 경 향을 나타내었으며 , V. parahaemolyticus ATCC 17802와 V. vulnificus FST I의 각 처리구별 생균수 변화는 표에서 보는 바와 같이 k parahaemolyticus HY "과 유사한 경 항을 나타내 었다. Park 등(22)이 Listeria monocytogenes, Salmonella, Shigella, Sta phylococcus 등의 식중독 세균에 대한 솔잎 에탄올 추출물의 항균활성을 검색한 결과 솔잎 에탄올 추출물을 L5〜2% 첨가하였을 경우 배양 10시간 이후부터 대조구에 비하여 약 1.
- 간장, 고추냉이장과, 솔잎추출물 1%를 첨가한 고추냉이장에 각각 공시 균을 1质%业가 되게 접종한 다음 5분, 10분, 30분 간격으로 생균 수의 변화를 측정한 결과는 Table 2와 같다. V. para haemolyticus HY I의 경 우 대조구와 고추냉 이 처 리 구는 처리 5분 후 초기 균수에 비 해 약 1 log CFU/mL 감소하였으나 솔잎추출물 혼합첨 가에 의 한 감소효과는 1 log CFU/mL 더 증진되는 경향을 나타내었다. 처리시간이 경과함에 따라 대조구와 고추냉이 첨가구에서는 뚜렷한 감소현상이 나타나지 않았으나 솔잎추출물 혼합 처 리구는 뚜렷한 감소현상을 나타내었다.
- 시판 고추냉이를 간장에 첨가하여 고추냉이 간장을 제조한 다음 丫论松균의 생존을 실험한 결과 솔잎 추출물 1%를 첨가한 고추냉이 간장에서 Vibrio 생균수의 감소는 뚜렷하였다. 고추냉이 간장을 제조한 다음 관능검사를 실시한 결과 5% 수준에서 대조구와 솔잎 추출물 첨 가구 간의 유의적 인 차이는 나타나지 않았다.
- 꽃게와 가자미 에서 분리 한 균주를 동정 한 결과 V. parahaemolyticus HY I와 V. vulnificus FST I로 동정되었다. V.
- Table 3과 같다. 대조구와 솔잎 추출물 1% 첨구간의 맛, 향, 색, 종합적 기호성 등 모든 면에서 유의성의 차이가 없는 반면, 솔잎 추출물 3% 첨가구의 경우 대조구에 비해 맛, 향, 종합적 기호성 등이 유의하게 감소하는 경 향을 나타내었다. 색의 경우 솔잎 ethanol 추출물 1% 첨가구, 3% 첨가구 모두 대조구와 비교하여 유의 적 인 차이 를 나타내지 않았다.
- 이러한 결과로 솔잎 추출물의 1% 첨가시 대조구와 관능적으로 유의 적 인 차이 를 나타내 지 않아 고추냉이 간장 제조시 솔잎 추출물 1% 첨가가 가능할 것으로 판단되었으며 고추냉이 단독으로 사용할 경우보다 솔잎추출물을 혼용할 경우 하절기 해산물의 오염 미생물에 의한 식중독의 발생을 예방할 수 있을 것으로 판단되 었다. 본 실험 결과 솔잎 추출물을 양념용 고추냉이 제조시 첨가할 경우 기호성 감소 없이 식품오염 미생물에 대한 항균활성 증진효과를 기대할 수 있어 식 품보존제로서 의 사용이 가능할 것으로 판단되 었다. 그러나 고추냉이와 솔잎추출물은 독특한 향이 있어 이와 조화를 이룰 수 있는 식품의 보존제로서 사용을 위해 보다 광범위한 연구가 필요한 것으로 판단되었다.
- vulnificus FST I으로 동정 되 었다. 분리 I’论厂记와 V. parahaemolyticus ATCC 17802에 대한 솔잎 추출물의 항균활성 검색을 실시한 결과 솔잎 추출물 1%를 첨가하였을 경우 뚜렷한 성장 억제현상을 나타내 었다. 시 판 고추냉 이 와 솔잎 ethanol 추출물을 혼합하여 각 에 대한 성장억제효과를 검토한 결과 1% 고추냉이 단독 첨가구보다 1% 솔잎 추출물과 혼합처 리구가 뚜렷한 성장억제 효과를 나타내었다.
- 84 log CFU/mL를 나타내 어 솔잎 추출물 첨 가에 따른 성장 억제효과를 나타내었다. 성장억 제 효과는 솔잎 추출물의 첨가농도가 높아짐에 따라 뚜렷하였으며 1% 첨가구의 경우 2log cycle 이 상 뚜렷 한 성 장 억 제 효과를 나타내 었다. 분리 균주인 V.
- 1에서 보는 바와 같다. 솔잎 열수 추출물의 경우 공시 균주에 대한 clear zone의 생성을 관찰할 수 없었으나, 솔잎 ethanol 추출물의 경 우는 분리 V. vulificus FST I, V. para haemolyticus HY I과 V. parahaemolyticus ATCC 17802에 대 해 각각 뚜렷한 clear zone을 형성 하여 이들 미 생물에 대한 항균효과를 나타내었다. Park 등(22)이 솔잎 에탄올 추출물이 Salmonella thphimurium, Listeria monocytogenes 등의 모든 식중독 세균에 대하여 항균효과를 나타낸 반면, 솔잎 물 추출물의 경우 Escherichia co/i를 제외한 모든 식중독 세균에 대 하여 항균효과를 나타내 었다고 보고하였다.
- parahaemolyticus ATCC 17802에 대한 솔잎 추출물의 항균활성 검색을 실시한 결과 솔잎 추출물 1%를 첨가하였을 경우 뚜렷한 성장 억제현상을 나타내 었다. 시 판 고추냉 이 와 솔잎 ethanol 추출물을 혼합하여 각 에 대한 성장억제효과를 검토한 결과 1% 고추냉이 단독 첨가구보다 1% 솔잎 추출물과 혼합처 리구가 뚜렷한 성장억제 효과를 나타내었다. 시판 고추냉이를 간장에 첨가하여 고추냉이 간장을 제조한 다음 丫论松균의 생존을 실험한 결과 솔잎 추출물 1%를 첨가한 고추냉이 간장에서 Vibrio 생균수의 감소는 뚜렷하였다.
- 시 판 꽃게와 가자미 에 서 片厂记를 분리 하여 Api 20E kit로 동정 한 결과 U. parahaemolyticus HY I과 V. vulnificus FST I으로 동정 되 었다. 분리 I’论厂记와 V.
- 시 판 고추냉 이 와 솔잎 ethanol 추출물을 혼합하여 각 에 대한 성장억제효과를 검토한 결과 1% 고추냉이 단독 첨가구보다 1% 솔잎 추출물과 혼합처 리구가 뚜렷한 성장억제 효과를 나타내었다. 시판 고추냉이를 간장에 첨가하여 고추냉이 간장을 제조한 다음 丫论松균의 생존을 실험한 결과 솔잎 추출물 1%를 첨가한 고추냉이 간장에서 Vibrio 생균수의 감소는 뚜렷하였다. 고추냉이 간장을 제조한 다음 관능검사를 실시한 결과 5% 수준에서 대조구와 솔잎 추출물 첨 가구 간의 유의적 인 차이는 나타나지 않았다.
- 색의 경우 솔잎 ethanol 추출물 1% 첨가구, 3% 첨가구 모두 대조구와 비교하여 유의 적 인 차이 를 나타내지 않았다. 이러한 결과로 솔잎 추출물의 1% 첨가시 대조구와 관능적으로 유의 적 인 차이 를 나타내 지 않아 고추냉이 간장 제조시 솔잎 추출물 1% 첨가가 가능할 것으로 판단되었으며 고추냉이 단독으로 사용할 경우보다 솔잎추출물을 혼용할 경우 하절기 해산물의 오염 미생물에 의한 식중독의 발생을 예방할 수 있을 것으로 판단되 었다. 본 실험 결과 솔잎 추출물을 양념용 고추냉이 제조시 첨가할 경우 기호성 감소 없이 식품오염 미생물에 대한 항균활성 증진효과를 기대할 수 있어 식 품보존제로서 의 사용이 가능할 것으로 판단되 었다.
- uu/n沂cus에 대 해 항미 생물활성을 갖는다고 보고하였다. 이러한 결과로 솔잎에 존재하는 항미 생 물활성 물질들은 물보다 에 탄올 또는 메 탄올에 많이 추출되어진다고 사료된다.
- para haemolyticus HY I의 경 우 대조구와 고추냉 이 처 리 구는 처리 5분 후 초기 균수에 비 해 약 1 log CFU/mL 감소하였으나 솔잎추출물 혼합첨 가에 의 한 감소효과는 1 log CFU/mL 더 증진되는 경향을 나타내었다. 처리시간이 경과함에 따라 대조구와 고추냉이 첨가구에서는 뚜렷한 감소현상이 나타나지 않았으나 솔잎추출물 혼합 처 리구는 뚜렷한 감소현상을 나타내었다. 시 판고추냉이 에 종류에 따른 V.
후속연구
- 본 실험 결과 솔잎 추출물을 양념용 고추냉이 제조시 첨가할 경우 기호성 감소 없이 식품오염 미생물에 대한 항균활성 증진효과를 기대할 수 있어 식 품보존제로서 의 사용이 가능할 것으로 판단되 었다. 그러나 고추냉이와 솔잎추출물은 독특한 향이 있어 이와 조화를 이룰 수 있는 식품의 보존제로서 사용을 위해 보다 광범위한 연구가 필요한 것으로 판단되었다.
- 5 ~6 log cycle 정도 항균효과가 있는 것으로 보고하였다. 이러 한 결 과로 본 실 험 은 Park 등이 이 용한 첨 가농도보다 낮은 농도에서 빠른 시간에 큰 항균효과를 기대할 수 있는 것으로 사료된다.
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