선택한 단어 수는 입니다.
최소 단어 이상 선택하여야 합니다.
최소 단어 이상 선택하여야 합니다.
선택한 단어 수는 30입니다.
최대 10 단어까지만 선택 가능합니다.
최대 10 단어까지만 선택 가능합니다.
문제 정의
- 본 연구에서는 TCDD로 유발되는 간독성에 대하여 어성초의 간 보호 효과를 알아보기 위하여 rat에 TCDD로 간독성을 유발시킴과 동시에 어성초를 투여하여 간 독성 억제 효과를 조사하였다.
제안 방법
- 0.1M phosphate buffer와 0.01M NaN3 0.01M GSH, 1.5mM NADPH, H2O 그리고 GSSG-reductase를 혼합하여 여기에 균질액을 넣어 상온에서 1분간 방치한 후 5nM H2O2를 가하여 340nm에서 흡광도 감소 측정을 하였다.
- 0.2M Phosphate buffer를 1mM Xanthine, 1% Sodiume Deoxychlorate(DOC), 1.5mM KCN, 0.2mM cytochrome C를 넣은 혼합액에 균질액 3㎕를 넣고, xanthine Oxidase (XOD)원액을 넣어 혼합한 후 550nm에서의 흡광도 변화를 측정하였다. 시료의 효소 활성도를 알아보기 위한 표준액으로서는 Sigma사의 superoxide dismutase standard를 사용하였다.
- GOT와 실험방법은 동일하나, GPT의 측정은 GPT 기질 1.0ml를 사용하고 37℃ 수조에서 30분간 반응시킨 후 505nm에서 흡광도를 측정하였다.
- 내로 4주간 격일로 투여하였다. ITA군과 NTT군은 saline을 투여하였다. 혈청에서 GOT, GPT의 활성도를 측정하였고, 간조직중에서 MDA, GSH, GSSG, GPx, SOD, Catalase의 level을 측정하였다.
- NTT군은 0.9% saline을 투여 했으며 HTT군과 TTA군은 TCDD를 1㎍/kg이 되게 복강 내에 투여했다. TCDD 투여한지 일주일 후부터 HTT군은 어성초를 200mg/kg이 되게 4주 동안 격일로 복강 내에 투여하였다.
- 5ml를 취했다. TBA변법[7] 으로 Sodium Dodecyl Sulfate(SDS)를 가하여 95℃ 의 끓는 물에 50분간 가열한 후 급냉시켜 Buthanol 5ml을 가하고 원심분리한 후 상등액을 취하여 535nm에서 흡광도를 측정하였다.
- 9% saline을 투여 했으며 HTT군과 TTA군은 TCDD를 1㎍/kg이 되게 복강 내에 투여했다. TCDD 투여한지 일주일 후부터 HTT군은 어성초를 200mg/kg이 되게 4주 동안 격일로 복강 내에 투여하였다. 나머지 군은 생리식염수를 투여하였다.
- TCDD를 투여한지 일주일 후부터 어성초를 200mg/kg 복강 내로 4주간 격일로 투여하였다. ITA군과 NTT군은 saline을 투여하였다.
- phosphate buffer(0.05M pH 7.0)에 sample (간 균질액을 3000rpm에서 20분간 원심분리한 상등액 100㎕를 buffer로 희석)과 과산화수소 용액를 혼합하여 240nm에서 1분 30초 동안 흡광도 감소를 측정하였다
- Folin 시약을 가한 후 30분간 반응시킨 뒤에 흡광도를 측정하였다. 표준단백시료는 Bovin Serum Albumin(BSA)을 사용하여 같은 방법으로단백질량을 정량하였다.
- ITA군과 NTT군은 saline을 투여하였다. 혈청에서 GOT, GPT의 활성도를 측정하였고, 간조직중에서 MDA, GSH, GSSG, GPx, SOD, Catalase의 level을 측정하였다. GOT 활성도는 HTT군이 TTA군과 비교해서 49.
대상 데이터
- 2mM cytochrome C를 넣은 혼합액에 균질액 3㎕를 넣고, xanthine Oxidase (XOD)원액을 넣어 혼합한 후 550nm에서의 흡광도 변화를 측정하였다. 시료의 효소 활성도를 알아보기 위한 표준액으로서는 Sigma사의 superoxide dismutase standard를 사용하였다.
- 실험동물은 체중 40g(four weeks old rats)인 수컷 21마리를 대한실험동물센터로부터 제공받았고 7일 동안 실험실에서 적응시켰다. 모든 동물은 cage에 각각 분리시키고 사료와 물을 자유롭게 섭취하도록 했다.
- 어성초는 경상남도 덕유산 720m의 고랭지에서 재배한 것으로 0.2kg을 48시간 건조하고 14L water로 4시간동안 끓였다. 그리고 이 수층을 자외선으로 살균시킨 후 동결건조하여 사용하였다.
이론/모형
- 단백질의 정량은 Lowry 법[12]에 의해서 실험하였으며, D.W.와 균질액을 A시약(Na2CO3, CuSo4, Na-K tartrate) 5ml를 혼합한 후 15분간 방치한다. Folin 시약을 가한 후 30분간 반응시킨 뒤에 흡광도를 측정하였다.
- 혈청 중의 Glutamate oxaloacetate transaminase (GOT)와 Glutamate pyruvate transaminase (GPT) 는 Reitman-Frankel법에 따라 조제된 kit시액(영동제약)을 사용하여 측정하였다. GOT 기질을 시험관에 취하여 37℃ 수조에서 가온한 후 혈청을 가하고 60분간 반응시켰다.
성능/효과
- SOD는 TTA군이 NTT군 보다 낮게 나타났고, HTT는 TTA군에 비해 46%의 증가를 보였다. Catalase는 TP, f(1.12mU/mg protein)의 활성은 NTT(3.44mU/mg protein)군 보다 32.56% 감소하였다. HTT군의 간의 Catalase 활성도는 TTA 군과 비교하여 50.
- 30unit/ml)군는 TTA군보다 훨씬 낮게 나타났다. GOT 활성도는 HTT군이 TTA군과 비교해서 49%가 감소되었다.
- 혈청에서 GOT, GPT의 활성도를 측정하였고, 간조직중에서 MDA, GSH, GSSG, GPx, SOD, Catalase의 level을 측정하였다. GOT 활성도는 HTT군이 TTA군과 비교해서 49.00%의 억제 효과를 보였다. 반면 GPT활성도는 TTA(29.
- 1에 나타내었다. GOT의 활성도는 NTT (32.00unit/ml)군에 비해서 TTA(73.55unit/ml)군이 현저히 높게 나타났다. HTT(53.
- 47%의 억제율을 보였다. HTT군의 GSH는 TTA군에 비해 1.91 배 증가하였고, GSSG는 TTA군에 비해 46.72% 감소하였다. SOD는 TTA군이 NTT군 보다 낮게 나타났고, HTT는 TTA군에 비해 46%의 증가를 보였다.
- 44mU/mg protein) 보다 훨씬 낮게 나타났다. HTT군의 간 조직중의 Catalase 활성도는 TTA 군과 비교하여 높게 나타났다. 이는 TCDD에 의해 형성된 free radical의 생성을 억제시킨 결과로 사료된다.
- 56% 감소하였다. HTT군의 간의 Catalase 활성도는 TTA 군과 비교하여 50.00% 증가 하였다. 이러한 결과에서 보듯이 TCDD로 인해 생성된 free radical은 항산화 효소에 의해서 감소되었으며, 그리고 어성초가 항산화 효소 대신에 노화를 저해하는 작용을 하는 것으로 사료 된다.
- 36%의 억제효과를 보였다. MDA는 TTA군이 NTT군 보다 높게 나왔으며, HTT군은 NTT군에 비교하여 30.47%의 억제율을 보였다. HTT군의 GSH는 TTA군에 비해 1.
- 91배 증가하였다. TCDD를 처리한 군에 어성초를 투여한 군 즉, HTT군은 12.04nmol/mg protein 으로 TTA군에 비하여 69.53% 억제율을 보였다.
- TTA군 (15, 00nmol/mg protein) 의 간 조직중 GSH level은 NTT군(58.68 nmol/mg protein)의 GSH level 보다 25.56% 감소하였다. HTT군의 간조직 중의 GSH level은 28.
- TTA군(78.91 nmol/mg protein) 의 GPx 할성도는 NTT군(127.85 nmol/mg protein)보다 61.72% 감소하였다. HTT군의 GPx 활성도는 161.
- 00%의 억제 효과를 보였다. 반면 GPT활성도는 TTA(29.70unit.ml)군에 비해 68.36%의 억제효과를 보였다. MDA는 TTA군이 NTT군 보다 높게 나왔으며, HTT군은 NTT군에 비교하여 30.
- Gerig에 의하면 TCDD 투여시 hepatic mixed function oxidase의 변화[6]가 증가하는 것으로 보고 된바 있다. 본 연구결과에서도 TCDD가 간독성을 유발함을 알 수 있었으며 어성초가 유도된 간독성을 완화시켜주는 것으로 생각된다.
※ AI-Helper는 부적절한 답변을 할 수 있습니다.