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유색미 함유 Alkaloid 분리 및 정량
Analysis and quantification of Alkaloid from Heugjinjubyeo 원문보기

Korean journal of crop science = 韓國作物學會誌, v.49 spec.1, 2004년, pp.90 - 96  

정하숙 (덕성여자대학) ,  신진철 (작물과학원) ,  우원식 (서울대학교)

초록이 없습니다.

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제안 방법

  • 발색시약 및 MS, UV, IR, NMR, 13C NMR, DEPT, 1H-1H COSY, HMQC, HMBC 및 NOE spectrum< 통해 화합물 1 의 분자량은 219("; C11H9NO4)이고 융점이 320° 이상인 미황색 상의 alkaloid 화합물로 확인하였다. 또한 화합물의 hydroxy group 위치를 확인하기 위하여 acetylation시켜 acetate 화합물을 단리한 후, NMR spectrum을 비교하여 화합물1 의 화학구조를 4-carbomethoxy-6-hydroxy-2-quinolone으로 규명하였다(Fig.
  • Alkaloid는 염기성(alkali) 화합물로 용해도나 기타 물리 화학적 성질이 서로 다르기 때문에 식물을 약산성(IM HC1 또는 1% 초산(acetic acid)) 알코올로 추출한 후 암모니아수(NH4OH)로 침전시키는 과정을 반복하여 alkaloid 이외의 화합물을 제거한 후 얻게 된다. 다음으로 여지 크로마토그라피 (PC; Paper chromatography), 또는 박층 크로마토그라피 (TLC; Thin layer chromatography)를 하여 시료를 특정 용매를 사용하여 전개시킨후 alkaloid 확인 시약으로 확인한다.
  • 상의 alkaloid 화합물로 확인하였다. 또한 화합물의 hydroxy group 위치를 확인하기 위하여 acetylation시켜 acetate 화합물을 단리한 후, NMR spectrum을 비교하여 화합물1 의 화학구조를 4-carbomethoxy-6-hydroxy-2-quinolone으로 규명하였다(Fig. 1-3).
  • 시료 alcohol 추출물을 1% HC1 20-30 ml에 용해하고 40-50 ml의 diethyl ether로 분획한 후 수층(aqueous-acid extract, lower layer)을 분리하여 10% NHQH로 alkali성으로 한 다음 CHC13 20-30 ml로 분획하여 CHC13 층을 취하고 증발, 농축한 후 소량의 HC1 에 용해하고, 필요시 여과한 후, Mayer 시약에 의한 백탁 또는 백색 침전의 유무로 alkaloid 존재를 확인한다 (Scheme 1).
  • 이동상 용매로는 CHCZ/MeOH을 혼합하여 99:1 → 88:12까지 순차적으로 용출하여, 각각을 TLC 하여 UV lamp(254, 370 nm) 관찰, 10% H2SO4 및 alkaloid 확인시약으로 발색하여 동일 pattern을 나타내는 분획물을 합쳐 모두 9개의 subfraction으로 이 가운데 생리활성이 우수한 subfraction 을 CHCl3:MeOH(92:8)5. column chromatography# 행하고, 이 가운데 subfraction 16을 다시 Sephadex LH-20으로 re-column chromatography를 행하여 순수 화합물을 얻는다(1).

대상 데이터

  • 유색미 시 sativa cv. Heugjinjubyeo) 과피 부분(aleurone layer) 5 kg을 농촌진흥청 작물과학원에서 공급받아 실험에 사용한다. 식물학적 검정은 작물과학원에서 행한다.
  • 국내산 유색미 (Oryza saliva cv. Heugjinjubyeo) 과피 10 g을 80℃에서 acetone 100 ml로 5회 환류 추출하여 극성이 비교적 낮은 물질을 제거한 후 잔사를 0.5% HCl/EtOH로 실온에서 24시간, 3회 추출한 후 농축한다. 추출물을 diethylether/HQ로 분획하여 수층에 10% NH4OH를 가한 후 CHCb로 분획하여 CHC13 가용성 분획층을 모아 증류수로 세척한 후 여과 농축한다(Scheme 1).
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참고문헌 (4)

  1. Gray, A. I. 1993. In alkaloids and sulphur compounds. Waterman, P.G., Ed.; Academic Press: London, pp 271-308 

  2. Woo, W. S. 2001. Study on natural products chemistry. Seoul Natl. Univ., Seoul. pp 347-366 

  3. Chung, H. S. and W. S. Woo. 2001. A quinolone alkaloid with antioxidant activity from the aleurone layer of anthocyanin-pigmented rice. J. Nat. Prod. 64(12) : 1579-1580 

  4. Chung, H. S. 2002. A quinolone alkaloid, from the aleurone layer of Oryza sativa cv. Mihyangbyeo, inhibits growth of cultured human leukemia cell. Nutraceuticals & Food. 7(2): 119-122 

저자의 다른 논문 :

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