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문제 정의
- 따라서, (주)다비스톤에서 개발하여 식물(잔디)에서 성장촉진, 생식능력 강화, 질병발생 감소 및 비료사용량 감소 등의 효과 를 나타내고 있는 송강약돌을 이용하여 국내 주요 양어종인 넙치에 있어서 사료 첨가제로서의 이용 가능성을 알아보고자 한다.
제안 방법
- 5% NaCl이 첨 가된 trypticase soy agar (TSA)에 27°C에서 48시간 배양하여 준비하였다. 40L 사각 수조에 각 실험구당 각각 10마리씩 3반 복으로 배치되어 있었으며, 어류 1마리당 박테리아 부유물을 0.1 ml씩 복강 주사한 후 일별 폐사를 기록하였다. 폐사어의 폐 사원인을 확인하기 위해 매일 폐사된 어체로 부터 신장을 채취 하여 TSA에 배양하여 E.
- ASTM G-21 분석방법에 따라 3가지 균주에 대해 항곰팡이 실험을 한국원적 회선 응용평가연구원에 의뢰하여 실시하였다. 본 실험에 사용된 곰팡이 균주는 Aspergillus niger, Penicillium pinophilum, Chaetomium globosum^} 포자를 채취하여 혼합균 주로 사용하였다, 배양접시에 한천을 만들어 송강약돌 시료를 얹고 위에 혼합균주 현탄액을 시료 및 배지에 골고루 분무하여 온도 25~28°C, 상대습도 85%인 배양기에 넣어 곰팡이의 성장 을 조사하였다.
- 전환효율, 사료효율, 간중량지수, 비만도 및 생존율을 조사하였 다. 간중량지수를 구하기 위해 각 수조별로 3마리씩 간의 무게 를 측정하였다.
- 7kJ/g)으로 조절하였다. 그리고 각 실 험사료별 송강약돌의 첨가에 따라 셀룰로오스함량을 감소시켜 맞추어 주었다. 송강약돌은 (주)다비스톤에서 제공받아 미세한 분말로 제조하였다.
- 또한 전어 체의 일반성분 조성에서도 유의차가 없었다. 두번째 E. tarda 복강주사에 의한 누적생존율 조사 실험은 박테리아 부유물을 0.1 ml씩 복강 주사한 후 누적생존율을 기록하였다. 13일 후에 SGSqj은 72.
- ASTM G-21 분석방법에 따라 3가지 균주에 대해 항곰팡이 실험을 한국원적 회선 응용평가연구원에 의뢰하여 실시하였다. 본 실험에 사용된 곰팡이 균주는 Aspergillus niger, Penicillium pinophilum, Chaetomium globosum^} 포자를 채취하여 혼합균 주로 사용하였다, 배양접시에 한천을 만들어 송강약돌 시료를 얹고 위에 혼합균주 현탄액을 시료 및 배지에 골고루 분무하여 온도 25~28°C, 상대습도 85%인 배양기에 넣어 곰팡이의 성장 을 조사하였다.
- 실험사료의 단백질원으로 북양어분, 젤라틴, 탈피 대두박을 사용하였으며 , 탄수화물원으로는 소맥분과 덱스트린 을, 지질원으로는 고도불포화지방산이 다량 함유된 오징어간유 를 사용하였다. 송강약돌(Song-Gang® stone, SGS, (주)다비스톤, 대한민국)의 사료내 이용가능성을 확인하기 위하여 실험사 료내에 각각 0% (SGSo), 0.5% (SGSo.5), 1.0% (SGS, .o) 및 2.0% (SGSg)의 4가지 수준으로 송강약돌분말을 첨가하였으며, 송강약 돌의 조성표는 Table 2에 나타내었다. 실험사료의 조단백질 함 량은 50.
- 04 g (mean土SD) 실험어를 40L 사각 수조에 각 실험구 당 각각 25 마리씩 3반복으로 무작위 배치하여 실시하였다. 실험사료는 송 강약들을 사료내 0, 0.5, 1.0, 2.0% 수준으로 첨가하여 제작되 었으며, 일일 사료공급량은 어체중의 4~5%를 1일 2회 공급하 였다. 8주간의 실험결과, 성장률, 사료효율 등 성장효과에 대해 서는 유의적인 차이가 나타나지 않았다.
- 0% (SGSg)의 4가지 수준으로 송강약돌분말을 첨가하였으며, 송강약 돌의 조성표는 Table 2에 나타내었다. 실험사료의 조단백질 함 량은 50.0%, 가용에너지는 16.7 kJ/g (단백질, 16.7 kJ/g; 지질, 37.7 kJ/g; 탄수화물, 16.7kJ/g)으로 조절하였다. 그리고 각 실 험사료별 송강약돌의 첨가에 따라 셀룰로오스함량을 감소시켜 맞추어 주었다.
- 실험종료 후, 증체율 조사와 함께 혈액성분 분석을 위하여 실 험어를 채혈하기 전까지 약 24시간 동안 절식시켰다. 실험어를 각 수조당 3마리씩 무작위로 추출하여 실험어의 미부정맥에서 혈액을 채혈한 후, micro-hematocrit 방■법 (Brown, 1980)에 의해 헤마토크리트(haematocrit, PCV)를 측정하고, cyan-methemoglobin 방법 (Sigma Chemical, St.
- 어체 측정은 2주 간격으로 실시하였으며, 성장률을 측정하기 위하여 24시간 절식시킨 후 MS-222 (100ppm)로 마취시켜 전 체무게를 측정하였다. 실험종료 후, 성장률, 일간성장률, 단백질
- 실험어는 경상남도 거제 부경수산에서 운반된 넙치를 부경 대학교 부설 수산과학연구소로 운반하여 2톤 원형수조에서 실 험 환경에 적응할 수 있도록 2주간 예비사육 하였다. 예비사육 후, 실험어는 평균무게 5.0±0.04g (mean土 SD)인 넙치를 40 L 사각 수조에 각 실험구 당 각각 25마리씩 3반복으로 무작위 배 치하였다. 각 실험수조는 유수식으로 유수량은 l~2L/min으로 조절하여 주었다.
- 충분한 산소 공급을 위해 에어스톤을 설치하 였으며, 실험기간 동안 평균 수온은 19土2。(2로 전 실험기간 동 안 자연수온에 의존하였다. 일일 사료공급량은 전 실험기간 동 안 1일 2회 어체중의 4% 또는 5%로 매일(10:00, 16:00) 공급 하였으며 총 사육실험기간은 8주간 실시하였다.
- 전환효율, 사료효율, 간중량지수, 비만도 및 생존율을 조사하였 다. 간중량지수를 구하기 위해 각 수조별로 3마리씩 간의 무게 를 측정하였다.
- globosum6^ 대한 항곰파이 효과 실험이 실시되 었다. 첫 번째 성장실험에서는 8주동안 평균무게 4.7±0.04 g (mean土SD) 실험어를 40L 사각 수조에 각 실험구 당 각각 25 마리씩 3반복으로 무작위 배치하여 실시하였다. 실험사료는 송 강약들을 사료내 0, 0.
- 1 ml씩 복강 주사한 후 일별 폐사를 기록하였다. 폐사어의 폐 사원인을 확인하기 위해 매일 폐사된 어체로 부터 신장을 채취 하여 TSA에 배양하여 E. Wda의 존재를 확인하였다. 본 실험 은 Kim et al.
- 525)으로 헤모글로빈(hemoglobin; Hb)을 측정하였다. 혈청 성분의 분석을 위하여 채혈한 혈액을 항응고제가 처리되지 않 은 원심분리관에 넣고 실온에 30분간 방치한 후 3, 000 rpm에 서 10분간 원심분리하여 냉장보관하면서 16시간 이내에 분석 하였다. 혈청성분은 임상용 kit (아산제약주식회사, 한국)를 사 용하여 총단백질 (total protein)은 biuret 법으로, 트라이글라이 세라이드 (triglyeride)와 글루코스 (glucose)는 효소법으로 그리 고 GOT (glutamic oxaloacetic transaminase)오} GPT (glutamic pyruvic transaminase)는 Reitman-Frankel 법으로 분석하였다.
대상 데이터
- 그리고 각 실 험사료별 송강약돌의 첨가에 따라 셀룰로오스함량을 감소시켜 맞추어 주었다. 송강약돌은 (주)다비스톤에서 제공받아 미세한 분말로 제조하였다. 모든 실험사료는 원료를 혼합한 후 펠렛제 조기로 압출 .
- 실험에 사용된 실험사료의 조성표와 일반성분은 Table 1에 나타내었다. 실험사료의 단백질원으로 북양어분, 젤라틴, 탈피 대두박을 사용하였으며 , 탄수화물원으로는 소맥분과 덱스트린 을, 지질원으로는 고도불포화지방산이 다량 함유된 오징어간유 를 사용하였다. 송강약돌(Song-Gang® stone, SGS, (주)다비스톤, 대한민국)의 사료내 이용가능성을 확인하기 위하여 실험사 료내에 각각 0% (SGSo), 0.
- 실험어는 경상남도 거제 부경수산에서 운반된 넙치를 부경 대학교 부설 수산과학연구소로 운반하여 2톤 원형수조에서 실 험 환경에 적응할 수 있도록 2주간 예비사육 하였다. 예비사육 후, 실험어는 평균무게 5.
데이터처리
- Paul MN. USA)로 분산분석 (ANOVA est)을 실시하여 최소유의차검정 (LSD: Least Significant Difference)으로 평균간의 유의성 (P<0.05)을 검정하였다.
이론/모형
- 일반성분은 실험사료와 각 수조별로 6마리씩 무작위로 추출 하여 분쇄한 전어체를 분석하였으며, AOAC (1995)방법에 따 라 수분은 상압가열건조법 (125。(二 3시간), 조단백질은 kjeldah 질소정량법(Nx6.25), 조회분은 직접회화법으로 분석하였다. 조지 방은 샘플을 12시간 동결건조한 후 Soxtec system 1046 (Tacator AB, Sweden)을 사용하여 soxhlet 추출법으로 분석하였다.
- Wda의 존재를 확인하였다. 본 실험 은 Kim et al. (2002c)의 방법에 따라 진행되었다.
- 실험종료 후, 증체율 조사와 함께 혈액성분 분석을 위하여 실 험어를 채혈하기 전까지 약 24시간 동안 절식시켰다. 실험어를 각 수조당 3마리씩 무작위로 추출하여 실험어의 미부정맥에서 혈액을 채혈한 후, micro-hematocrit 방■법 (Brown, 1980)에 의해 헤마토크리트(haematocrit, PCV)를 측정하고, cyan-methemoglobin 방법 (Sigma Chemical, St. Louis MO; total hemoglobin procedure No. 525)으로 헤모글로빈(hemoglobin; Hb)을 측정하였다. 혈청 성분의 분석을 위하여 채혈한 혈액을 항응고제가 처리되지 않 은 원심분리관에 넣고 실온에 30분간 방치한 후 3, 000 rpm에 서 10분간 원심분리하여 냉장보관하면서 16시간 이내에 분석 하였다.
- 25), 조회분은 직접회화법으로 분석하였다. 조지 방은 샘플을 12시간 동결건조한 후 Soxtec system 1046 (Tacator AB, Sweden)을 사용하여 soxhlet 추출법으로 분석하였다.
- 혈청 성분의 분석을 위하여 채혈한 혈액을 항응고제가 처리되지 않 은 원심분리관에 넣고 실온에 30분간 방치한 후 3, 000 rpm에 서 10분간 원심분리하여 냉장보관하면서 16시간 이내에 분석 하였다. 혈청성분은 임상용 kit (아산제약주식회사, 한국)를 사 용하여 총단백질 (total protein)은 biuret 법으로, 트라이글라이 세라이드 (triglyeride)와 글루코스 (glucose)는 효소법으로 그리 고 GOT (glutamic oxaloacetic transaminase)오} GPT (glutamic pyruvic transaminase)는 Reitman-Frankel 법으로 분석하였다.
성능/효과
- 1 ml씩 복강 주사한 후 누적생존율을 기록하였다. 13일 후에 SGSqj은 72.7%의 생존율을 나타났으며, SGSlo은 22.2%, SGS20 은 16.7%, SGS)은 0%의 누적생존율이 나타났다. 세 번째 실 험은 A.
- 0% 수준으로 첨가하여 제작되 었으며, 일일 사료공급량은 어체중의 4~5%를 1일 2회 공급하 였다. 8주간의 실험결과, 성장률, 사료효율 등 성장효과에 대해 서는 유의적인 차이가 나타나지 않았다. 헤모글로빈(4.
- 복강 주사후 4일째 부터 폐사체가 나타나기 시작하였으며 , 6~9일 사이의 누적생존 율은 송강약돌 첨가구인 SGC0, SGC, .o, SGCzo이 대조구인 SGC0 에 비해서 유의적으로 높게 나타났다(尸<0.05). 10~12일 사이에 서는 SGCos, SGGo이 SGC0보다 유의적으로 높게 나타났다 (尸<0.
- 곰팡이 접종후, 4주 후에 사료내 송강 약돌 첨가시 곰팡이의 성장을 인지 할수 없었다. 따라서, 상기 결과에 의하여 치어기 넙치에 있어서 사료내 송강약돌 0.5% 첨 가하였을때 성장 및 사료효율의 저하없이 질병저항성 및 항균 제로서 좋은 효과를 나타낼 수 있을 것으로 생각된다.
- 하지만, 현재 양어장에서는 생사료와 양어용 배합 사료에 대한 품질관리기준이 마련되어 있지 않아 관리소홀과 품질관리에 대한 지식부재 등으로 인해 사료내 곰팡이 균의 생 성과 과산화지질의 독성 등의 문제점을 인지하지 못하고 있으며, 이러한 것들이 성장저흐k 질병발생 및 폐사 등의 문제점들을 일으킬 수 있다. 본 실험 에서 A. niger, P. pinophilum, C. globosum 에 대하여 송강약돌은 항균효과가 있는지 ASTM G-21 분석 방법에 따라 알아보았는데, 4주 동안 균의 성장을 인지 할 수 없었다. 이러한 결과로 볼때, 이 균들에 대하여 사료내에 송강 약돌 첨가시 향균효과가 있는 것으로 나타났다.
- , 1990). 본 실험에 서 헤마토크리트는 20.7~24.7%로 나타났는데 이 결과는 Sim Jt al. (1995)의 보고와 매우 유사하게 나타났고, Alexis et al. 1985)의 무지개송어에 있어서 32~42%의 측정값보다는 낮은 값을 보였으며 성장기 잉어(Song, 1995)와 틸라피아(Bai et al., 1994)에 있어서의 44%보다는 낮은 값을 나타났다. 혈청성분 게 있어서 Kim et al.
- farda에 대한 내병 성이 있는 것으로 보고 되었다. 본 실험에서는 처음 성장실험 8주동안 사료내 송강약돌 수준에 상관없이 생존율은 모든 실 험구에서 유의적인 차이가 나타나지 않았다. 하지만, 8주실험 후 남은 어류의 복강에 E.
- 8주간의 성장률, 사료효율, 일간성장률, 단백질 전환효율, 간 중량지수, 비만도 및 생존율은 Table 3에 나타내었다. 성장률, 일간성장률, 사료효율, 단백질 전환효율, 간중량지수, 비만도, 생존율에 대해 모든 실험구에서 유의적인 차이가 나타나지 않았다.
- 실험 4주 후에 송강약돌 무첨가구에서는 A niger, P. pinophilum, C. globosum 균의 성장이 나타났지만, 송강약돌 첨가구에서는 A. niger, P. pinophilum, C. globosum 균의 성장을 인지 할수 없었다.
- 6%의 높은 생존 율을 보였지만, 다른 실험구는 30% 이하의 낮은 생존율을 보 였다. 이러한 결과로 볼때, 8주동안의 성장실험동안 체내에 사 료내 송강약돌을 0.5% 첨가시 송강약돌의 축적효과가 나타난 것으로 생각된다. 축산사료와 달리 양어사료는 동물성 단백질 원을 많이 이용하기 때문에 항산화제, 항균제 등 품질관리가 필수적이다.
- globosum 에 대하여 송강약돌은 항균효과가 있는지 ASTM G-21 분석 방법에 따라 알아보았는데, 4주 동안 균의 성장을 인지 할 수 없었다. 이러한 결과로 볼때, 이 균들에 대하여 사료내에 송강 약돌 첨가시 향균효과가 있는 것으로 나타났다. 실제 곰팡이 균의 경우 약산성의 생육조건을 좋아하는 것으로 보고되고 있 으며, 송강약돌의 경우 약알칼리성으로 약돌에서부터 미량의 해리된 향균금속이온 등이 항곰팡이의 역할을 한 것으로 추정 된다.
- 실험사료를 섭취한 치어기 넙치의 체조성에 대한 결과는 Table 5에 나타내었다. 전어체의 일반성분의 조성은 수분은 73.6^73.8%, 조단백질 함량은 17.2〜17.3%, 조지방 함량은 5.1-5.%, 조회분 함량은 3.5〜3.6%로 나타났으며 모든 실험구에서 유의적인 차 이가 나타나지 않았다.
- 본 실험에서는 처음 성장실험 8주동안 사료내 송강약돌 수준에 상관없이 생존율은 모든 실 험구에서 유의적인 차이가 나타나지 않았다. 하지만, 8주실험 후 남은 어류의 복강에 E. tarda를 주사하여 13일후에 생존률 을 조사하였을때, 송강약돌 0.5% 첨가시 72.6%의 높은 생존 율을 보였지만, 다른 실험구는 30% 이하의 낮은 생존율을 보 였다. 이러한 결과로 볼때, 8주동안의 성장실험동안 체내에 사 료내 송강약돌을 0.
후속연구
- gZobowm곰팡이 에 대 한 항균효과로 사료의 품질관리를 위한 사료첨가제로서 양어사 료에 이용 가능할 것으로 사려된다. 나아가 비특이적 면역반응, 항균효과 및 어병과의 상관관계에 대한 연구들이 지속적으로 이루어져야 될 것으로 생각되며, 아울러 송강약돌의 어떠한 성 분이 그 역할을 하는지 생화학적인 메카니즘을 파악하는 연구 가 이루어져야 될 것으로 생각된다. 앞으로, 사료내 성장촉진 및 면역증강효과가 있는 첨가제를 개발한다면 어류의 육질개선 과 내병성 증대와 수질정화에 큰 효과가 있을 것으로 생각되며 양^생산량 증대에도 도움이 될 것으로 기대된다.
- 따라서 , 본 실험의 결과를 통하여 송강약돌은 급속한 양식업 의 팽창과 더불어 고밀도 사육과 같은 문제로 인해 생산성 저 하 및 어병이 빈번하게 발생하고 있는 국내 양식산업에 성장과 사료효율에 악영향을 끼치지 않고 넙치에 있어 사료첨가제로서 E. tarda에 대한 내성으로 생존율 향상에 도움이 될 것으로 판 단된다. 또한, A.
- tarda에 대한 내성으로 생존율 향상에 도움이 될 것으로 판 단된다. 또한, A. niger, P. pinophilum, C. gZobowm곰팡이 에 대 한 항균효과로 사료의 품질관리를 위한 사료첨가제로서 양어사 료에 이용 가능할 것으로 사려된다. 나아가 비특이적 면역반응, 항균효과 및 어병과의 상관관계에 대한 연구들이 지속적으로 이루어져야 될 것으로 생각되며, 아울러 송강약돌의 어떠한 성 분이 그 역할을 하는지 생화학적인 메카니즘을 파악하는 연구 가 이루어져야 될 것으로 생각된다.
- 나아가 비특이적 면역반응, 항균효과 및 어병과의 상관관계에 대한 연구들이 지속적으로 이루어져야 될 것으로 생각되며, 아울러 송강약돌의 어떠한 성 분이 그 역할을 하는지 생화학적인 메카니즘을 파악하는 연구 가 이루어져야 될 것으로 생각된다. 앞으로, 사료내 성장촉진 및 면역증강효과가 있는 첨가제를 개발한다면 어류의 육질개선 과 내병성 증대와 수질정화에 큰 효과가 있을 것으로 생각되며 양^생산량 증대에도 도움이 될 것으로 기대된다.
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