선택한 단어 수는 입니다.
최소 단어 이상 선택하여야 합니다.
최소 단어 이상 선택하여야 합니다.
선택한 단어 수는 30입니다.
최대 10 단어까지만 선택 가능합니다.
최대 10 단어까지만 선택 가능합니다.
문제 정의
- 본 연구에서는 조직공학적인 대안으로 생분해성 고분자 담체인 PGA를 이용하여 태아의 간세포를 이식하여 간 조직 재생의 가능성을 알아보았다. 만약, 간세포 이식에 의하여 간조직 재생이 가능하다면, 이 방법은 더욱 많은 연구를 거친 후, 문제점을 가진 현재의 간치료 방법을 대체할 수 있는 새로운 치료법이 될 수도 있을 것이다.
제안 방법
- PGA 담체에서 배지를 제거한 뒤, 분리한 간세포을 담체에 부착시켰다. 간세포를 부착한 PGA담체를 면역결핍 마우스의 복강에 이식하였다. 간세포의 부착을 확인하기 위하여 이식 전에 주사전자현미경 (SEM, Hitachi, Tokyo, Japan)검사를 실시하였다.
- 간세포을 부착하고 이식하기 위해서 삼차원적인 담체로서 생분해성 고분자인 폴리글리콜산 (polyglycolic acid, PGA, Albabi International Research, USA) 섬유 부직포의 다공성 매트릭스를 사용하였다. 고분자 담체는 5x5 mm%] 크기로 잘라서, ethylene oxide gas로 멸균시킨 뒤, 사용하기 하루 전에 10% 소태아 혈청이 들어있는 DMEM/F12 (Gibco BRL, Grand Island, NY, USA)배지에 담가두었다.
- 간세포를 부착한 PGA담체를 면역결핍 마우스의 복강에 이식하였다. 간세포의 부착을 확인하기 위하여 이식 전에 주사전자현미경 (SEM, Hitachi, Tokyo, Japan)검사를 실시하였다. 대조군으로는 간세포만 면역결핍 마우스의 복강에 이식하였다.
- 간세포의 이식 전 간세포가 부착되지 않은 PGA 담체 (Fig. 1A)와 간세포가 부착된 PGA 담체(Fig. IB)의 주사 전자 현미경 검사를 실시하였다. PGA 담체의 주사전자현미경 검사결과 세포 등이 부착할 수 있는 공간을 가지며 서로 얽혀져 있는 섬유들을 관찰할 수 있었다(Fig.
- 간세포의 부착을 확인하기 위하여 이식 전에 주사전자현미경 (SEM, Hitachi, Tokyo, Japan)검사를 실시하였다. 대조군으로는 간세포만 면역결핍 마우스의 복강에 이식하였다.
- 사용하였다. 사육온도는 20C。에서 24C°, 습도는 50~60%로 유지하였고, 물과 사료는 자유롭게 섭취하도록 하였으며 12시간 암명주기로 사육하였다.
- 국내에서도 간이식술이 성공적으로 시행되고 있지만 공여간의 획득이 쉽지 않고, 감염 및 면역거부의 위험이 있으며, 시술 후 평생 면역억제제를 복용하여야 하므로 신체적, 경제적으로 부담이 큰 치료법이다. 이러한 시점에서 보다 근본적인 해결을 위해서 간세포이식을 시도 하였다. 간세포 이식은 1960년대에 간세포가 분리가 가능해지면서 본격적으로 시작되었다{8).
- 이식 1주 후에 복강에 이식한 이식물들을 관찰하였다. 고분자 담체 없이 간세포만을 이식한 경우 면역결핍 마우스의 복강 내에 조직형성을 확인할 수 없었다.
- 이식 후 1주에 이식편을 회수하여 조직학 검사를 실시하였다. 회 수된 조직 을 10% fomalin (Sigma, St.
- Louis, MO, USA) 용액 에 24시간 고정 하고 파라핀에 포매 하여 블록을 만든 후, 4 U m의 박편을 제조하여 헤마토실린&에오신 (H&E) 염색을 실시하였다. 이식한 간세포를 확인하기 위해서 alpha-fetoprotein 염색을 실시하였다.
대상 데이터
- 임신 후 16일 된 FVB 마우스 태아를 간세포 이식의 공여자로 이용하였고 5주된 면역 결핍 마우스 (SLC, Tokyo, Japan)를 수혜자로 사용하였다. 사육온도는 20C。에서 24C°, 습도는 50~60%로 유지하였고, 물과 사료는 자유롭게 섭취하도록 하였으며 12시간 암명주기로 사육하였다.
성능/효과
- 2A). 간세포가 부착된 PGA 담체의 주사 전자 현미경결과 PGA 담체에 간세포가 정상적으로 부착되어 있음을 확인하였다 (Fig. 2B).
- 본 연구에서는 PGA 담체에 부착된 태아 간세포을 체내에 이식한 후 이식된 간세포가 괴사되지 않고 담세관 구조를 가진 간조직을 형성하였으며, PGA 담체의 형태가 남아서 그 지지체의 역할을 수행함을 확인하였다. 이는 기존의 많은 연구에서 간세포를 이식하였을 때 세포가 초기에 다량이 괴사함으로써 이식된 간세포의 효과를 보기 어려웠던 점에 비해 간세포 이식에 있어서의 가능성을 보여주는 결과라 할 수 있다.
- 이식 1주후 조직을 회수하여 H&E 염색을 실시한 결과 분해되지 않고 남아있는 PGA 섬유와 PGA 섬유 사이에 괴사되지 않고 존재하는 간세포 군을 발견할 수 있었다 (Fig. 4A). 또한 PGA 사이에서 담세관 구조를 확인하였다 (Fig.
- 4B). 이식된 태아 간세포를 확인하기 위해서 alphafetoprotein 항체를 이용하여 면역염색을 실시한 결과 간세포의 세포질에 특이적으로 염색되는 것을 확인할 수 있었다(Fig. 5).
후속연구
- 이는 기존의 많은 연구에서 간세포를 이식하였을 때 세포가 초기에 다량이 괴사함으로써 이식된 간세포의 효과를 보기 어려웠던 점에 비해 간세포 이식에 있어서의 가능성을 보여주는 결과라 할 수 있다. 또한 세포 성장성이 뛰어난 태아의 간으로부터 간세포를 얻어다 수의 간 질환 환자의 치료를 위해 사용할 수 있으므로, 기존의 간 이식의 공여장기 부족의 문제점을 해결 할 수 있을 것이다. 이 방법이 간질환의 치료방법으로 가능성을 가지기 위해서는 간 세포의 이식으로 형성된 간 구조와 세포의 장기간 생존과 간 기 능의 유지 여 부를 조사하여 야 할 것이다.
- 재생의 가능성을 알아보았다. 만약, 간세포 이식에 의하여 간조직 재생이 가능하다면, 이 방법은 더욱 많은 연구를 거친 후, 문제점을 가진 현재의 간치료 방법을 대체할 수 있는 새로운 치료법이 될 수도 있을 것이다.
- 또한 세포 성장성이 뛰어난 태아의 간으로부터 간세포를 얻어다 수의 간 질환 환자의 치료를 위해 사용할 수 있으므로, 기존의 간 이식의 공여장기 부족의 문제점을 해결 할 수 있을 것이다. 이 방법이 간질환의 치료방법으로 가능성을 가지기 위해서는 간 세포의 이식으로 형성된 간 구조와 세포의 장기간 생존과 간 기 능의 유지 여 부를 조사하여 야 할 것이다.
※ AI-Helper는 부적절한 답변을 할 수 있습니다.