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RAPD-PCR(Random Amplified Polymorphic DNA - Polymerase Chain Reaction) 방법을 이용한 Listeria monocytogenes의 검색
Use of RAPD-PCR(Random Amplified Polymorphic DNA-Polymerase Chain Reaction) Method for a Detection of Pathogenic Listeria monocytogenes 원문보기

한국식품영양학회지 = The Korean journal of food and nutrition, v.17 no.3, 2004년, pp.254 - 259  

박범준 (울산과학대학 호텔조리과) ,  신언환 (울산과학대학 호텔조리과)

초록
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Primer 20가지로 Listeria spp.에 대해 screening을 하여 병원균인 L. monocytogenes를 구별하게 하는 RAPD-PCR의 band pattern을 나타내는 10-mer random primer가 OPG-13이 라는 것을 알았다. OPG-13은 GC%가 70%이므로 계산상으로는 annealing 온도가 34$^{\circ}C$이다. 32～36$^{\circ}C$까지 다섯 가지의 온도로 annealing한 결과 L. monocytogenes만이 갖는 특정한 크기의 band가 역시 34$^{\circ}C$에서 형성됨을 알아냈고, 34$^{\circ}C$를 annealing 온도로 정하였다. Line 1부터 4까지 1. monocytogenes ATCC15313, 19111, 19112, 19113은 2개의 700 bp와 1500 bp band를 형성하였고 그 밖의 Listeria spp.들 Line 6부터 11까지 L. ivanovii ATCC 19119, L. grayi ATCC19120, L. murrayi ATCC25401, L. innocua ATCC33090, L. welshimeri ATCC35897, L. seeligeri ATCC35967은 약 2,000 ～ 2,300 bp크기 한 개의 band를 보여 병원성 균과 비병원성 균이 매우 확실하게 구분되는 band pattern이 나타나는 이러한 결과로 10-mer random primer인 OPG-13을 이용한 RAPD-PCR 방법이 병윈균인 L. monocytogenes를 검색하는데 이용될 수 있음을 확인할 수 있었다.

Abstract ▼ AI-Helper 아이콘AI-Helper

Rapid detection of foodbome pathogens is becoming increasingly important. The requirement for faster, more reliable tests has lead to the development of a wide range of rapid methods. Among these methods, the use of systems based on nucleic acid based detection has been increasing since they offer a...

주제어

#PCR   #RAPD   #Listeria monocytogenes  

참고문헌 (10)

  1. Eugen, D, Michaela, LW, Wemer, G and Trinad, C. Molecular cloning, sequencing, and identification of a metalloprotease gene from Listeria monocytogenes. That is species specific and physically linked to the Listeriolysin Gene. Infect. Immun. 59:65-72. 1991 

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