녹즙분말과 콜레스테롤 첨가식이로 8주간 사육한 흰쥐의 혈중 지질, 호모시스테인 및 엽산수준에 미치는 효과를 관찰한 결과는 다음과 같다. 흰쥐의 혈중 총 콜레스테롤 농도는 녹즙이나 콜레스테롤 보충에 의해 유의한 영향을 받지 않았으나 중성지질 농도는 녹즙군에서 낮았다(p<0.001). HDL-콜레스테롤과 LDL-콜레스테롤의 경우, 식이 콜레스테롤의 영향을 받아, HDL-콜레스테롤은 콜레스테롤군보다 무콜레스테롤군에서 높았으며 (p<0.001), LDL-콜레스테롤은 콜레스테롤군에서 높았다(p<0.05). HDL-콜레스테롤 수준은 녹즙군에서 높았으며 (p<0.05), LDL-콜레스테롤 농도는 콜레스테롤과 케일의 상호효과가 나타나 무콜레스테롤군에서 만 녹즙에 의한 감소효과를 보였다 HDL/LDL비율은 콜레스테롤 보충군에서 낮았으며 (p<0.05), 녹즙보충군에서 높았으나 통계적으로 유의한 결과를 나타내지 못하였다. 혈청 엽산, 비타민 $B_{12}$ 및 혈장 호모시스테인 농도는 녹즙분말이나 콜레스테롤 보충에 의해 영향을 받지 않았다. 혈중 엽산과 비타민 $B_{12}$ 농도사이에는 유의한 양의 상관성 (r=0.5632, p<0.001)이 관찰되었으나, 혈중 호모시스테인 농도는 혈중 엽산, 비타민 $B_{12}$ 및 콜레스테롤 농도 사이에는 모두 유의한 상관성이 관찰되지 않았다. 본 연구결과를 종합하여 보면, 엽산이 충분히 공급되는 경우, 녹즙보충시 나타나게 되는 심혈관계질환 예방효과는, HDL 농도의 증가 및 중성지방 농도의 감소에 의한 것이며, 녹즙내 엽산보충에 의한 호모시스테인 농도 변화와는 관련이 적은 것으로 사료된다.
녹즙분말과 콜레스테롤 첨가식이로 8주간 사육한 흰쥐의 혈중 지질, 호모시스테인 및 엽산수준에 미치는 효과를 관찰한 결과는 다음과 같다. 흰쥐의 혈중 총 콜레스테롤 농도는 녹즙이나 콜레스테롤 보충에 의해 유의한 영향을 받지 않았으나 중성지질 농도는 녹즙군에서 낮았다(p<0.001). HDL-콜레스테롤과 LDL-콜레스테롤의 경우, 식이 콜레스테롤의 영향을 받아, HDL-콜레스테롤은 콜레스테롤군보다 무콜레스테롤군에서 높았으며 (p<0.001), LDL-콜레스테롤은 콜레스테롤군에서 높았다(p<0.05). HDL-콜레스테롤 수준은 녹즙군에서 높았으며 (p<0.05), LDL-콜레스테롤 농도는 콜레스테롤과 케일의 상호효과가 나타나 무콜레스테롤군에서 만 녹즙에 의한 감소효과를 보였다 HDL/LDL비율은 콜레스테롤 보충군에서 낮았으며 (p<0.05), 녹즙보충군에서 높았으나 통계적으로 유의한 결과를 나타내지 못하였다. 혈청 엽산, 비타민 $B_{12}$ 및 혈장 호모시스테인 농도는 녹즙분말이나 콜레스테롤 보충에 의해 영향을 받지 않았다. 혈중 엽산과 비타민 $B_{12}$ 농도사이에는 유의한 양의 상관성 (r=0.5632, p<0.001)이 관찰되었으나, 혈중 호모시스테인 농도는 혈중 엽산, 비타민 $B_{12}$ 및 콜레스테롤 농도 사이에는 모두 유의한 상관성이 관찰되지 않았다. 본 연구결과를 종합하여 보면, 엽산이 충분히 공급되는 경우, 녹즙보충시 나타나게 되는 심혈관계질환 예방효과는, HDL 농도의 증가 및 중성지방 농도의 감소에 의한 것이며, 녹즙내 엽산보충에 의한 호모시스테인 농도 변화와는 관련이 적은 것으로 사료된다.
The purpose of this study was to investigate the effects of green vegetable (kale) juice powder supple-mentation on lipid profiles, plasma homocysteine, folate and vitamin $B_{12}$ in rats fed cholesterol (Chol. ) or Chol. free diet. 7-week old male Sprague Dawley rats (n=40) were divided...
The purpose of this study was to investigate the effects of green vegetable (kale) juice powder supple-mentation on lipid profiles, plasma homocysteine, folate and vitamin $B_{12}$ in rats fed cholesterol (Chol. ) or Chol. free diet. 7-week old male Sprague Dawley rats (n=40) were divided into 4 groups, and experimental diets containing control diet group (CO), control diet plus 0.5 wt$ \% $ Chol. (CC), control diet added with 5 wt$ \% $ kale (KO), control diet added with 5 wt$ \% $ kale plus 0.5 wt$ \% $ Chol. (KC) were fed for 8 wks. Plasma homocysteine level was examined by amino acid analyzer and serum folate and vitamin $B_{12}$ level were measured by com-petitive radioimmunoassay methods. In various serum lipid profiles, TG level was lower in kale juice powder groups (KO, KC) compared to the corresponding groups (CO, CC) (p<0.001). In Chol. supplemented groups (CC, KC), HDL-Chol. level was lower (p<0.001) and LDL-Chol. level was higher (p<0.05) than Chol. free diet. HDL-Chol. level was higer (p<0.05) in kale juice powder groups. HDL/LDL ratio was lower in Chol. supplemented groups (CC, KC) and tended to be higher in kale juice powder groups (KO, KC) Serum folate and vitamin $B_{12}$ levels were not affected by dietary Chol. and kale juice powder supplementation. Plasma homocysteine level was not affected by dietary Chol. and kale juice powder supplementation, too. Serum folate level was positively correlated with serum vitamin $B_{12}$ level (r=0.5632, p<0.001), but plasma homocysteine level was not significantly correlated with any serum folate, vitamin $B_{12}$ and Chol. levels, respectively. In summary, kale juice powder supplementation have improved serum lipid profiles by increasing the HDL level and decreasing the TG level and have not altered homocysteine level under the sufficient supply of folate and vitamin B complex relating with the homocysteine metabolism.
The purpose of this study was to investigate the effects of green vegetable (kale) juice powder supple-mentation on lipid profiles, plasma homocysteine, folate and vitamin $B_{12}$ in rats fed cholesterol (Chol. ) or Chol. free diet. 7-week old male Sprague Dawley rats (n=40) were divided into 4 groups, and experimental diets containing control diet group (CO), control diet plus 0.5 wt$ \% $ Chol. (CC), control diet added with 5 wt$ \% $ kale (KO), control diet added with 5 wt$ \% $ kale plus 0.5 wt$ \% $ Chol. (KC) were fed for 8 wks. Plasma homocysteine level was examined by amino acid analyzer and serum folate and vitamin $B_{12}$ level were measured by com-petitive radioimmunoassay methods. In various serum lipid profiles, TG level was lower in kale juice powder groups (KO, KC) compared to the corresponding groups (CO, CC) (p<0.001). In Chol. supplemented groups (CC, KC), HDL-Chol. level was lower (p<0.001) and LDL-Chol. level was higher (p<0.05) than Chol. free diet. HDL-Chol. level was higer (p<0.05) in kale juice powder groups. HDL/LDL ratio was lower in Chol. supplemented groups (CC, KC) and tended to be higher in kale juice powder groups (KO, KC) Serum folate and vitamin $B_{12}$ levels were not affected by dietary Chol. and kale juice powder supplementation. Plasma homocysteine level was not affected by dietary Chol. and kale juice powder supplementation, too. Serum folate level was positively correlated with serum vitamin $B_{12}$ level (r=0.5632, p<0.001), but plasma homocysteine level was not significantly correlated with any serum folate, vitamin $B_{12}$ and Chol. levels, respectively. In summary, kale juice powder supplementation have improved serum lipid profiles by increasing the HDL level and decreasing the TG level and have not altered homocysteine level under the sufficient supply of folate and vitamin B complex relating with the homocysteine metabolism.
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제안 방법
따라서, 본 연구에서는 흰쥐에게 콜레스테롤과 케일 녹즙 분말을 공급한 후 혈중 지질패턴과 엽산 및 호모시스테인 농도를 측정하여, 케일녹즙 보충이 심혈관계질환에 미치는 효과를 관찰하였다.
먹도록 하였다. 사육기간 동안의 평균 식이 섭취량과 체중 증가량을 계산하여 각 실험군들의 식이 효율(food efficiency ratio, FER)을 계산하였다. 사육실의 온도는 22℃, 습도 18%, 조명주기는 12시간으로 조절하였다.
, Louis, Mo, USA)과 20% sulfosalicylic acid를 첨 가한 후, 4℃에서 3, 300 rpm으로 15분간 원심 분리 하였다. 상층액 100 UL을 아미노산 분석 기 (Bio 20 autoloader amino acidanalyzer, Phamacia Biotech, Cambridge, England) 에 주입하여 호모시스테인을 분석하였다(21). 이때 완충액과 닌히드린 용액의 유속은 각각 20uL/hr와 25uL/hr이었으며, 호모시 스테 인의 표준물질로는 D, L-homocysteine(Sigma Chemical Co.
생후 7주령의 Sprague Dawley 수컷 흰쥐를 기본사료로 예비 사육하여 환경 에 적 응시 킨 후, 체중에 따라 난괴 법 (randomized complete block design) 에 의해 10마리씩 4군으로 분류하여 각기 대조식이 (control diet, CO), 고콜레스테롤 식이 (CO + cholesterol (CO, 케 일 (kale: Brassica oleracea acephala- KO) 및 고콜레스테롤-케 일(KO + cholesterol: KC) 의실험식이로 8주간 사육하였다.
식이 섭취량은 매일 일정한 시각에 측정하였고, 체중은 1주일에 1회 같은 시각에 측정하였으며, 식이와 물은 자유롭게 먹도록 하였다. 사육기간 동안의 평균 식이 섭취량과 체중 증가량을 계산하여 각 실험군들의 식이 효율(food efficiency ratio, FER)을 계산하였다.
실험동물은 8주간의 실험기간이 종료된 후, 12시간 절식시키고 diethyl ether로 마취시켜 복부 대동맥에서 혈액을 채취하였다. 채취한 혈액의 일부는 .
녹즙은 선별한 원재료를 세척, 침지, 분쇄, 착즙과정을 거쳐 제조되었는 더】, 이 녹즙은 착즙기 자체에서 100 mesh로 일차 여과하고 다시 60 mesh로 여과시 켰다[(주) 풀무원]. 제조과정에서 상당량의 불용성 식이섬유소가 제거된 케 일 녹즙을 동결 건조시켜 분말형태로 만들었으며, 녹즙에서 얻은 건조 분말의 수율은 약 5%였다. 제조된 녹즙분말은 식이 무게의 5%(당질 대치)(12, 18)를 첨가하였으며, 콜레스테롤군의 경우 식이 무게의 0.
제조과정에서 상당량의 불용성 식이섬유소가 제거된 케 일 녹즙을 동결 건조시켜 분말형태로 만들었으며, 녹즙에서 얻은 건조 분말의 수율은 약 5%였다. 제조된 녹즙분말은 식이 무게의 5%(당질 대치)(12, 18)를 첨가하였으며, 콜레스테롤군의 경우 식이 무게의 0.5% 수준(19)으로 첨가하여 실험식이를 제조하였다. 케 일 녹즙의 영 양성 분 자료는 Table 2에 제 시 하였다.
대상 데이터
상층액 100 UL을 아미노산 분석 기 (Bio 20 autoloader amino acidanalyzer, Phamacia Biotech, Cambridge, England) 에 주입하여 호모시스테인을 분석하였다(21). 이때 완충액과 닌히드린 용액의 유속은 각각 20uL/hr와 25uL/hr이었으며, 호모시 스테 인의 표준물질로는 D, L-homocysteine(Sigma Chemical Co., St. Louis, MO, USA)을 사용하였다.
데이터처리
"These values were parts of our previous study (14) and analyzed by 2-way ANOVA test.
1'These values were parts of our previous study (14) and analyzed by 2-way ANOVA test.
모든 수치의 통계분석은 SAS(STAT Version 6, SAS Institute Inc., Cary, NC, USA)를 이용하여 실시하였으며, 모든 분석결과는 mean 士 SEM으로 표시하였다. 식이 콜레스테롤과 케일녹즙 분말 보충이 혈중 지질, 호모시스테인 및 엽산 농도에 미치는 효과는 two-way ANOVA에 의해 유의수준 a <0.
001 수준에서 검증하였다. 분석요인들 간의 상관관계 분석은 Pearson correlation test로 수행하였다.
, Cary, NC, USA)를 이용하여 실시하였으며, 모든 분석결과는 mean 士 SEM으로 표시하였다. 식이 콜레스테롤과 케일녹즙 분말 보충이 혈중 지질, 호모시스테인 및 엽산 농도에 미치는 효과는 two-way ANOVA에 의해 유의수준 a <0.05, a <0.01 및 « <0.001 수준에서 검증하였다. 분석요인들 간의 상관관계 분석은 Pearson correlation test로 수행하였다.
이론/모형
혈청의 총 콜레스테롤(total cholesterol), 중성지방(triglyceride: TG) 및 HDL-cholester이은 enzymatic colorimetry method를 이용한 kit로((주)영연화학, 일본) 분석하였고, LDL + VLDL-cholesterole Friedwald의 계산식(20)에 의해 산출하였다.
성능/효과
8주간의 실험기간동안 체중 증가량과 식이 효율(FER) 은 케일 녹즙분말(5 wt%, 이하 녹즙분말)과 콜레스테롤 첨가에 의해 유의한 영향을 받지 않는 것으로 나타났다. 또한에너 저 섭 취 량(kcal/d)으로 환산한 경우에도 실험 군간에 유의한 차이를 보이지 않았다.
3% 감소)에서 더 크게 감소하였으나, 총 콜레스테롤 농도는 녹즙분말이나 콜레스테롤 보충에 의해 유의한 영향을 받지 않았다. HDL-콜레스테롤과 LDL-콜레스테롤 수준의 경우, 식이 콜레스테롤의 영향이 나타나, HDL-콜레스테롤은 콜레스테롤첨가군(CC, KC)에 비해 무 콜레스테롤 군(CO, KC”에서 유의하게 높았으며(pCO.OOl), 반대로 LDL-콜레스테롤은 콜레스테롤첨가군(CC, KC)에서 유의하게 높았다(p<0.05). 녹즙분말의 보충효과는 HDL-콜레스테롤 수준에서만 유의한 영향이 나타났는데(p<0.
4% 증가)에서 더 많이 증가하였다. LDL-콜레스테롤 농도는 콜레스테 롤과 녹즙분말의 상호효과가 나타나 무콜레 스테 롤 군에서 만 녹즙분말 보충에 의해 감소되는 효과를 보였다. HDL/ LDL 비율은 콜레스테롤첨가군에서 유의하게 낮았으며(p< 0.
정제화하여 만든 알약형태를 4개월간 공급한 결과, 총콜레스테롤과 LDL-콜레스테롤 수준이 유의 하게 감소하여 혈중 지질패턴이 개선되었음이 보고되었다(25). 녹즙 분말보충으로 HDL-콜레스테롤 수준 증가와 TG수준이 감소한 본 연구결과와는 다르지만, 두 실험결과를 종합하여 보면, 채소즙에 의한 항산화 영 양소의 공급이 혈중 지질패턴도 개선시킬 수 있음을 알 수 있었다.
05). 녹즙분말의 보충효과는 HDL-콜레스테롤 수준에서만 유의한 영향이 나타났는데(p<0.05), 콜레스테롤첨가군(15.4% 증가)보다는 무콜레스테롤군(27.4% 증가)에서 더 많이 증가하였다. LDL-콜레스테롤 농도는 콜레스테 롤과 녹즙분말의 상호효과가 나타나 무콜레 스테 롤 군에서 만 녹즙분말 보충에 의해 감소되는 효과를 보였다.
Sasaki 등(27) 은 고콜레스테롤혈증을 유발시킨 흰쥐에게 엽산을 보충하면, 혈중 콜레스테롤과 HDL-콜레스테롤 수준은 변화되지 않아 혈중 지질패턴이 개선되지는 못하나, 혈관 기능의 손상 정도는 완화되었다고 보고하였다. 따라서 본 연구에서는 혈관 기능 관련 지표들은 측정하지 않아 확실한 결론을 내리기에 부족한 면이 있으나, 녹즙분말 보충시 나타나는 심 혈관계 질환의 예방 및 치료 등의 건강상의 이점은, 혈중 TG 농도의 감소와 HDL 농도의 증가로 인한 지질패턴의 개선에 의한 것이며, 녹즙내의 엽산으로 인한 호모시스테인 대사 변화와는 관련이 적은 것으로 사료된다.
이 외 에도 케 일 녹즙에는 여러 항산화 관련비 타민과 무기 질 및 플라보노이 드 성 분도 풍부하여 (15), 항산화 체계를 향상시킴(13)으로써, 그리고 칼륨 등의 기타 영양성분들(37)에 의해 심혈관계질환을 예방함도 보고된 바 있다. 따라서 케일녹즙이 심혈관계질환에 미치는 예방효과는 매우 다양한 기전이 복합적으로 작용하는 것으로 생각되며, 심혈관계질환을 예방하기 위해서는 채소와 과일의 섭취를 적극적으로 증가시킬 필요가 있음을 알 수 있었다.
또한 본 연구결과, 케일 섭취로 혈중 총 콜레스테롤 농도는 변화되지 못하였으나, HDL-콜레스테롤 농도를 증가시켜주고, 특히 혈중 TG 농도가 매우 유의 하게 감소된 점 (p< 0.001)이 특이 하다. 우리 나라는 서 양에 비해 혈중 TG 수치 가 높은 고지혈증 환자가 많으므로, 본 연구결과는 고콜레스테롤혈증 뿐 아니라 고TG혈증 환자에게도 녹즙의 섭취가 혈중 지질패턴을 크게 개선해줄 수 있음을 밝힌 의미 있는 연구 결과라 생각된다.
001), 녹즙 보충에 의해서는 특히 무 콜레스테롤 군(KO군에서 증가하였으나 큰 표준오차 값으로 인해 통계적으로 유의한 결과를 나타내지 못하였다. 식이 콜레스테롤을 보충 (CC군)하면, HDL-콜레스테롤 수준은 감소하였으나, 이때 녹즙을 보충하여 주면 (KC군) TG 수준은 감소하고 HDL-콜레스테롤 수준은 증가하여, 녹즙보충이 양호한 혈중 지질 패턴을 유지하는데 도움을 주는 것을 알 수 있었다.
이상의 결과를 종합하면 케일녹즙 분말은 호모시스테인 대사에는 유의한 영향을 미치지는 못하였으나, 혈중 지질 패턴을 개선하였다. 이 외 에도 케 일 녹즙에는 여러 항산화 관련비 타민과 무기 질 및 플라보노이 드 성 분도 풍부하여 (15), 항산화 체계를 향상시킴(13)으로써, 그리고 칼륨 등의 기타 영양성분들(37)에 의해 심혈관계질환을 예방함도 보고된 바 있다.
그러나 혈중 엽산, 비타민 B6 및 비타민 B12 수준이 정상인 여대생을 대상으로 한 연구(34)에서는 이들 비타민 농도와 혈중 호모시스테인 농도 사이에 유의한 상관성 이 관찰되 지 않음을 보고하여본 연구결과와 유사하였다. 즉 본 연구의 식이조성은 엽산을 비롯한 호모시 스테 인 대사 관련 비 타민 B(B12와 BQ가 충분한 수준으로 공급되었기에, 녹즙을 통한 엽산의 보충이 혈중 호모 시 스테 인 농도에 유의한 영향을 주지 않은 것으로 생각된다. 고호모시스테인 혈증 이외에도 고콜레스테롤혈증 역시 심혈관계질환의 주요 위험요인인데(2), 본 연구에서는 혈중 콜레스테롤 수준과 혈중 호모시 스테 인 농도 사이에 유의한 상관성 이 발견되지 않았다(not shown data).
미 치 는 영 향은 Table 4에 제 시 하였다. 혈중 중성 지방(TG) 농도는 녹즙분말 보충에 의해 유의하게 감소하였는데(p<0.001), 특히 무콜레스테롤군(27.2% 감소)보다 콜레스테롤첨가군 44.3% 감소)에서 더 크게 감소하였으나, 총 콜레스테롤 농도는 녹즙분말이나 콜레스테롤 보충에 의해 유의한 영향을 받지 않았다. HDL-콜레스테롤과 LDL-콜레스테롤 수준의 경우, 식이 콜레스테롤의 영향이 나타나, HDL-콜레스테롤은 콜레스테롤첨가군(CC, KC)에 비해 무 콜레스테롤 군(CO, KC”에서 유의하게 높았으며(pCO.
Nicolle 등(23)의 연구에서는.흰쥐에게 동결 건조시킨 상추를 보충 공급한(20% diet wt.) 결과, 혈중 총 콜레스테롤 수준이 대조군보다 유의하게 감소하여 본 연구결과와 약간의 차이를 보였다. 이와 같은 결과는 부분적으로는 실험 식이 조성의 차이로 인한 것으로 설명된다.
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