선택한 단어 수는 입니다.
최소 단어 이상 선택하여야 합니다.
최소 단어 이상 선택하여야 합니다.
선택한 단어 수는 30입니다.
최대 10 단어까지만 선택 가능합니다.
최대 10 단어까지만 선택 가능합니다.
문제 정의
- 예전부터 우리 나라의 전통식품인 청국장 및 된장에 서도 높은 단백질 분해 효소를 분리하는 균이 존재하 는 것으로 보고되고 있어13,15)혈전 용해능이 있는 효소를 분비하는 균의 존재 가능성이 높아 분리, 동정하였으며19)본 연구에서는 청국장으로부터 분리된 혈전 용해 능이 우수한 Bacilhis subtilis MG410 균주를 이 용, 배지 조건을 달리하여 혈전 용해 효소생산을 위한 최적의 조건을 검토하였다.
- 청국장으로부터 분리한 균을 이용하여 fibrin을 분해 효소활성이 우수한 균주 Bacillus subtilis MG410을 분리한 균주를 이용하여 fibrinolytic enzyme의 생성을 위한 최적 배지 조건을 확립하고자 하였다.
제안 방법
- 효소활성과 균체의 성장에 따른 pH의 영향을 조사 하기 위하여 nutrient broth 기본배지 에 최적 조건의 탄 소원, 질소원, 무기질원 Na2HPO4 . 12H20를 각각 0.02%가 되도록 첨가한 다음 초기 pH는 5~8로 하여 48시간 배양 후 효소활성과 균체 성장을 측정하였다.
- Bacillus subtilis MG410의 혈전 분해효소의 생산을 위한 최적 탄소원과 그 농도를 조사하기 위해 nutrient broth를 기본배지로 하고 탄소원 8종 중 단당류와 이당류는 0.5%의 농도로 첨가하고, dextrin 및 soluble starch는 각각 5%의 농도로 첨가하여 효소활성과 균체의 성장을 측정하였다. 이때 균체의 성장률은 660 nm에서 흡광도를 측정하여 나타내었다.
- 2%, pH 5가 최적배지 조건으로 나타났다. 그러나 대량생산시 cellobiose가 매우 고가인 점을 감안하여 cellobiose 대신 fucose 1.5%를 첨가 하여 Bacillus subtilis MG410 균주를 배양시 배양시간에 따른 균에 성장과 혈전 용해.효소의 생성 및 pH 등의 변화를 Fig.
- 무기질의 최적 조건을 확립하기 위해 nutrient broth를 기본배지로 하여 가장 우수하게 나타난 탄소원과 질소원을 최적농도로 첨가하고 무기질원 8종을 0.02%의 농도로 첨가하여 효소활성과 균체 성장을 측정하였다. 실험결과 가장 우수한 무기질원으로 선정된 무기질원을 0.
- 배양 시간에 따른 효소활성과 균의 생육 정도를 조사하기 위하여 최적조건하에서 jar fermentor(MK250 KF-7L, Korea)을 이용하여 효소활성은 4시간 간격으로 측정하였으며 균의 생육정도와 pH는 2시간 간격으로 60시간동안 확인하였다.
- 이때 균체의 성장률은 660 nm에서 흡광도를 측정하여 나타내었다. 시 험결과 우수한 탄소 원으로 선정된 한 종의 탄수화물을 택하여 그 농도를 0.3%, 0.5%, 0.7%, 1%, 3%, 5% 그리고 7%로 각각 달리하여 배양한 후 효소 활성과 균체 성장을 측정하였다.
- Soybean meal은 그 종류를 달리하여 생대두분, 탈 지대두분을 사용하였다. 시험결과 우수한 질소원으로 선정된 질소원을 대상으로 그 농도가 0.5%, 1%, 2% 그리고 3%가 되도록 첨가하여 배양 후 효소 활성과 균체 성장을 측정하였다.
- 02%의 농도로 첨가하여 효소활성과 균체 성장을 측정하였다. 실험결과 가장 우수한 무기질원으로 선정된 무기질원을 0.005%, 0.01%, 0.015%, 0.02%, 0.025%,0.03% 그리고 0.035%가 되도록 첨가하여 배양 후 효 소활성과 균체 성장을 측정하였다.
- 우리나라도 일본의 natto와 마찬가지로 옛부터 된 장, 고추장, 간장, 청국장 등의 장류를 제조하였고, 장류의 고유한 맛은 콩 단백질의 가수분해물인 아미노산에서 기인하는 구수한 맛들의 조화에서 이루어졌다. 청국장은 삶은 콩에 볏집을 이용하여 재래식으로 발 효시키 거 나'') Bacillus subtilis를 이용하여 단시간 발효 숙성시켜 제조되며17) 실모양의 끈끈한 점질물이 생성 되고 특유한 향기와 맛을 내게 된다.
- 질소원의 최적 조건을 확립하기 위해 nutrient broth를 기본배지로 하여 가장 우수하게 나타난 탄소원을 최적 농도로 첨가하고 서로 다른 질소원 8종을 0.5%의 농도로 첨가하여 효소활성과 균체의 성장을 측정하였다. Soybean meal은 그 종류를 달리하여 생대두분, 탈 지대두분을 사용하였다.
- 청국장으로부터 분리된 Bacillus subtilis MG410 균 주의 fibrinoly enzyme의 생산을 위한 탄소원의 효과를 조사하기 위하여 nutrient broth를 기본배지로 하여 gul- cose, fructose 등의 단당류와 cellobiose, lactose, man nitol, maltose 등의 이 당류를 각각 0.5%씩 첨가하였고, dextrin, soluble starch는 각각 5%가 되도록 첨가한 후 효소활성 및 균체 성장을 측정하여 Table 1과 같은 결과를 얻었다.
- 효소생산을 위한 다양한 질소원에 대한 영향을 조사하기 위하여 NB 기본배지에 탄소원으로써 cellobio se 를 0.5% 첨가하고 각각 다른 질소원을 0.5%씩 첨가 하여 효소활성 및 균체 성장을 측정한 결과 Table 4와 같이 나타났다.
- 효소의 활성 측정은 fibrin 에 혈잔 분해효소가 작용 할 때 펩타이드 결합의 분해로 증가하는 가용성 저분 자 분해산물량을 275 nm의 영역에서 흡수되는 흡관도 를 구하는 방법을 활용하여 Fig. 1과 Fig. 2와 같이 측정하였다. 즉, 시험관에 0.
대상 데이터
- 5%의 농도로 첨가하여 효소활성과 균체의 성장을 측정하였다. Soybean meal은 그 종류를 달리하여 생대두분, 탈 지대두분을 사용하였다. 시험결과 우수한 질소원으로 선정된 질소원을 대상으로 그 농도가 0.
- 혈전 용해효소를 분비하는 균주는 (주)메디오젠에서 청국장으로부터 분리한 Bacillus subtilis MG410을 제공 받아 nutrient agar(Difco, USA) 사면배지에 4주마다 계대 배양하여 4℃에서 냉장 보관하며 사용하였다. 기본배지로 사용된 nutrient broth는 DIFCO사 제품을 사용하였으며, 그 외 배지제조에 사용된 재료는 식품 첨가물용 재료를 사용하였다.
- 혈전 용해효소를 분비하는 균주는 (주)메디오젠에서 청국장으로부터 분리한 Bacillus subtilis MG410을 제공 받아 nutrient agar(Difco, USA) 사면배지에 4주마다 계대 배양하여 4℃에서 냉장 보관하며 사용하였다. 기본배지로 사용된 nutrient broth는 DIFCO사 제품을 사용하였으며, 그 외 배지제조에 사용된 재료는 식품 첨가물용 재료를 사용하였다.
성능/효과
- Na2HPO4 . 12H20를 첨가시 효소생산이 가장 높게 나타났고, CaCl2, K2HPO4, KH2PO4 첨가시에는 효소생 산에 높은 효과를 보였으나 CuSO4 . 5H2O, CoCI2 .
- 무기질원으로는 Na2HPO4 . 12HQ을 첨가시 효소생 산이 가장 높게 나타났으며, CaCl2, K2HPO4, KHjPOi 첨가시에는 효소 생산에 높은 효과를 보였으나 CuSO4 . 5H2O, CoC12 .
- Dextrin 첨가는 균의 성장과 효소활성 이 대조구에 비해 낮게 나타났으며, soluble starch를 첨가했을 때 균의 성장과 효소활성은 대조구에 비해 높게 나타났다. 이 등')은 dextrin과 soluble starch를 각각 5%씩 첨가 시에 균의 성장과 효소활성이 대조구에 비해 월등히 높았다고 하였는데 본 실험 결과와는 상이하게 나타났다.
- 5%, soybean meal 2%, NazHPCh . I2H2O 0.02%, 소포제 0.2%, pH 5가 최적배지 조건으로 나타났다. 그러나 대량생산시 cellobiose가 매우 고가인 점을 감안하여 cellobiose 대신 fucose 1.
- Mannit이의 첨가는 균의 성장에는 영향을 주지 않았지만 효소활성을 증가시켰고, lactose의 경우 균의 성장은 높았지만 효소활성이 낮게 나타났으며, maltose는 균의 성장은 대조구와 비슷했지만, 효소활성은 심하게 억제하였다. 또한 cellobiose를 첨가한 경우 균의 성장과 효소 활성이 가장 높은 것으로 나타났다.
- pH에서는 pH 5가 control보다는 균의 성장은 5배, 효소 활성은 10배 이상 높은 효과를 보였다.
- 균의 성장과 함께 혈전용해 효소의 생성이 증가하였으며, 배양 48시간에 최대 활성을 보인 후 그 후부터 감소하는 경향을 보였다.
- 균의 성장과 효소활성에 대한 cellobiose의 영향을 측정한 결과 1%를 제외하고는 균의 성장은 높게 나타났으며, 0.3%, 0.5%, 0.7%는 효소할성이 높게 나타났다(Table 2). 반면 1%, 3%, 5%의 농도에서는 효소활성 이 낮게 나타났다.
- 질소원으로 soybean meal, soybean peptone-^- 각각 첨가시 기본배지에서 보다 균의 성장과 효소활성이 높게 나타났고, bacto peptone은 균의 성장은 낮았지만 효소 활성은 높게 나타났다. 그 중 soybean meal을 첨 가시에 가장 높은 균의 성장과 효소활성이 나타났다. 질소원 soybean meal 2%를 첨 가시 control 보다 균의 성장은 6배, 효소 활성은 0.
- 반면 1%, 3%, 5%의 농도에서는 효소활성 이 낮게 나타났다. 그 중에서 0.5%가 가장 높은 효소활 성을 보여 주었고, 균의 성장도 높았다.
- 따라서 최적 배지 조성은 탄소원 cellobiose 0, 5%, 질 소원 soybean meal 2%, 무기질원 Na2HPO4 - 12H2O 0.02%, pH 5로 조성되었다.
- Mannit이의 첨가는 균의 성장에는 영향을 주지 않았지만 효소활성을 증가시켰고, lactose의 경우 균의 성장은 높았지만 효소활성이 낮게 나타났으며, maltose는 균의 성장은 대조구와 비슷했지만, 효소활성은 심하게 억제하였다. 또한 cellobiose를 첨가한 경우 균의 성장과 효소 활성이 가장 높은 것으로 나타났다.
- 그 중 soybean meal을 첨 가시에 가장 높은 균의 성장과 효소활성이 나타났다. 질소원 soybean meal 2%를 첨 가시 control 보다 균의 성장은 6배, 효소 활성은 0.5배 높은 효과를 보였다.
- 질소원으로 soybean meal, bacto peptone을 각각 첨가하였을 때 기본배지에서 보다 균의 성장과 효소활성 이 높게 나타났으며, bacto peptone의 경우 균의 성장은 낮았지만 효소활성은 높게 나타났다. 그 중 soybean meal을 첨가했을 때 균의 성장과 효소활성이 가장 높게 나타났다.
- 질소원으로 soybean meal, soybean peptone-^- 각각 첨가시 기본배지에서 보다 균의 성장과 효소활성이 높게 나타났고, bacto peptone은 균의 성장은 낮았지만 효소 활성은 높게 나타났다. 그 중 soybean meal을 첨 가시에 가장 높은 균의 성장과 효소활성이 나타났다.
- 최적 배지 조성은 탄소원 cellobiose 0.5% 첨가시 contr이보다 균의 성장은 0.5배, 효소 활성은 9배 정도 높은 효과를 보였고, 단당류인 glucose를 첨가시에는 균의 성장은 다소 높았으나 효소활성은 높지 않은 수치를 나타냈다.
- 는 탄소원 으로 dextrin과 soluble starch를 각각 2% 첨 가시에 효소 활성 이 증가되 었으나 soluble starch보다는 dextrin이 효소 생성에 효과적이었다고 보고하여 상이한 결과를 보였다. 한편 gulcose, fructose, lactose등을 첨가하였을 때 효소활성이 억제되었다는 결과는 본 실험에서 분리한 균주와 유사한 것으로 보였다.
※ AI-Helper는 부적절한 답변을 할 수 있습니다.