선택한 단어 수는 입니다.
최소 단어 이상 선택하여야 합니다.
최소 단어 이상 선택하여야 합니다.
선택한 단어 수는 30입니다.
최대 10 단어까지만 선택 가능합니다.
최대 10 단어까지만 선택 가능합니다.
문제 정의
- 이와 같이 음료와 약재에 관한 청피의 활용에 대한 다양한 연구가 이루어져 왔으나, 식품 보존과 관련된 식중독성 미생물에 대한 항균효과의 구체적인 연구가 부족한 실정이다. 따라서 본 연구에서는 청피 추출물이 각종 식중독 유발 세균의 증식에 미치는 영향을 검증해 보고자 하였다.
- 본 연구에서는 식중독 유발세균에 대한 항균활성이 우수한 천연 항균성 물질을 검색하기 위해 예로부터 민간과 한방에서 널리 이용되어 온 청피를 각종 유기용매로 추출하여 식중독 유발세균에 대한 항균활성을 조사해 보았다. 청피를 petroleum ether, chloroform, ethly acetate, methan이를 이용하여 실온에서 각각 용매별로 계통 분획하고, 열수주출물을 얻은 후, 9종의 식중독 유발세균 (Sraphylococcus aureus, Bacillus cereus, Salmonella enteritidis, Shigella flexneri, Escherichia coli, Salmonella typhimurium, Shigella dysenteriae, Pseudomonas aruginosa, Shigella sonnei) 에 대하여 항균효과를 조사하였다 청피 추출물의 농도별 항균 활성 검색에서는 청피의 ethyl acetate 추출물이 가장 큰 항균 효과를 보였으며 Staphylococcus aureus^ Pseudomonas aeruginosa?} 가장 민감하게 반응하는 균주였다.
제안 방법
- 건조시킨 청피 600 g에 대해 청피 중량의 2배 분량인 petroleum ether, chloroform, ethyl acetate, methanol을 사용하여 항균성 물질을 추출하였다. 추 출관에 청피를 넣고 1ℓ의 methanol을 넣은 후 실온에서 6시간 방치한 후, Whatman No.
- 청피 추출물을 다른 항균성 식물 추출물과 혼합했을 시 항균력의 상승 여부를 확인하고자 백화사 설초 추출물과의 혼합을 시도하였다. 본 실험의 예비 실험에서 항균력이 있음이 입증된 청피의 ethyl acetate 추출물과 백화사설초의 methanol 추출물을 각각 1,000 ppm씩 섞고, 청피의 ethyl acetate 추출물 2,000 ppm 및 백화사설초의 methanol 추출물 2,000ppm과 항균력을 비교하였다. 대상 균주는 Shigella flexneri를 사용하고 대조군으로 70% ethanol을 각 시료와 동일한 양인 20 ㎕씩 분주하여 검증하였다.
- , England)에 여과하여 불순물을 제거하였다. 여과된 용액은 감압농축기(EYELA, N-N. Series. Japan)를 사용하여 35℃ 에 서 감압·농축하였으며 농축한 추출물은 petroleum ether, chloroform, ethyl acetate 및 methanol을 각각 사용하여 용매 계통 분획하였다. 청피의 열수 추출물은 유기용매로 추출하고 남은 잔사에 1차 증류수를 넣고, 실온에서 6시간 방치한 뒤 여과하여 100 ℃ 에서 30분간 끓인 후 동일한 방법으로 농축하였다.
- Japan)로 제균시키고, 액체배지에 각 추출물을 1,000 ppm, 3,000 ppm, 및 5,000 ppm 농도별로 첨가하였다. 여기에 O.D.값을 0.4로 맞춘 세균 배양액을 최종농도가 1°이 되게 무균적으로 접종하여 37 ℃ 에서 72시간 배양하고, 12시간마다 세균 배양액의 증식정도를 620 nm, spectrophotometer에서 측정하였다8).
- 4로 흡광도를 조절하고 pour-plate method에 따라 Tryptic Soy Agar(TSA)배지가 분주 된 배양접시에 균일하게 섞은 후 실온에서 굳혔다. 이 배지 위에 멸균된 paper disc를 시료 수에 맞게 올리고 밀착시킨 후 청피의 petroleum ether, chloroform, ethyl acetate, metlianol, 열수추출물을 각각 250 ppm, 500 ppm, 1,000 ppm, 2,000 ppm으로 희석하여 20㎕씩 천천히 흡수시켰다. Control 은 청피 추출물이 들어있지 않은 70% ethanol을 실험군과 동일한 방법으로 점적하였다.
- Control 은 청피 추출물이 들어있지 않은 70% ethanol을 실험군과 동일한 방법으로 점적하였다. 준비된 모든 plate는 37℃ 에서 24시간 배양한 후 disc 주변에 생성된 Clear zone(mm)의 크기를 측정하여 각 분획물의 항균 활성 정도를 측정하였다.
- 청피 추출물을 다른 항균성 식물 추출물과 혼합했을 시 항균력의 상승 여부를 확인하고자 백화사 설초 추출물과의 혼합을 시도하였다. 본 실험의 예비 실험에서 항균력이 있음이 입증된 청피의 ethyl acetate 추출물과 백화사설초의 methanol 추출물을 각각 1,000 ppm씩 섞고, 청피의 ethyl acetate 추출물 2,000 ppm 및 백화사설초의 methanol 추출물 2,000ppm과 항균력을 비교하였다.
- 청피의 ethyl acetate 추출물을 membrane filter(0.2㎛, pore size. Toyoroshi kaisha. Ltd. Japan)로 제균시키고, 액체배지에 각 추출물을 1,000 ppm, 3,000 ppm, 및 5,000 ppm 농도별로 첨가하였다. 여기에 O.
- 청피의 ethyl acetate 추출물을 농도별로(0 ppm, 1,000 ppm, 3,000 ppm 및 5,000 ppm) TSB네]지에 첨가하고, Gram 양성균인 Bacillus cereus와 Gram 음성균인 Shigella sonnei 에 각각 접종시켜 72시간 배양하면서 일정 시간 간격으로 균주의 성장 정도를 측정해 본 바, Fig. 3 및 Fig. 4와 같은 증식곡선을 얻을 수 있었다. Bacillus cereus2} 경우, 청피의 ethyl acetate 추출물을 넣지 않은 control버지에서 배양했을 시 12시간 후부터 급격한 증가를 보여 빠른 성장이 일어남을 관찰할 수 있었다.
대상 데이터
- 본 실험의 예비 실험에서 항균력이 있음이 입증된 청피의 ethyl acetate 추출물과 백화사설초의 methanol 추출물을 각각 1,000 ppm씩 섞고, 청피의 ethyl acetate 추출물 2,000 ppm 및 백화사설초의 methanol 추출물 2,000ppm과 항균력을 비교하였다. 대상 균주는 Shigella flexneri를 사용하고 대조군으로 70% ethanol을 각 시료와 동일한 양인 20 ㎕씩 분주하여 검증하였다.
- 본 실험에서 사용한 항균성 시험 대상 식물인 청피는 한국산으로, 대구시 중구 남성로 약전 골목에 서 2003년 11월, 건조 상태의 것을 구입하였다. 불순물을 제거하기 위해 가볍게 2번 수세하여 건조시킨 후, 추출용 시료로 사용하였다.
- 본 실험에서 사용한 항균성 시험 대상 식물인 청피는 한국산으로, 대구시 중구 남성로 약전 골목에 서 2003년 11월, 건조 상태의 것을 구입하였다. 불순물을 제거하기 위해 가볍게 2번 수세하여 건조시킨 후, 추출용 시료로 사용하였다.
- 청피 추출물의 항균실험에 사용한 균주는 Grar(+)세균 2종과 Gram(-)세균 7종으로 총 9종을 한국과학기술연구원 생명공학연구소에서 분양 받아 사용하였다(Table 1). 균의 생육배지로는 모든 균주에 대하여 Tryptic Soy Broth(Difco, TSB)를 사용하여 37℃, incubator에서 18~24시간 배양하였다.
이론/모형
- 항균성 물질을 검색하기 위해 본 실험에서는 paper disc방법을 사용하였다. Tryptic Soy Broth(TSB) 배지에 배양한 세균을 spectrophotometer(Nomron instruments.
성능/효과
- Paper disc 방법으로 청피의 각종 유기용매 분획물 및 열수추출물을 각종 식품부패균 및 식중독균에 적용시켜 항균 활성을 실험해본 바다음과 같은 결과를 얻을 수 있었다. Gram 양성균에 대한 청피의 petroleum ether, chloroform, ethyl acetate, methanol 추출물 및 열수추출물의 항균활성은 Table 3과 같이 나타나 disc에 점적한 청피의 각종 추출물의 농도가 증가할수록 항균 활성이 크게 나타났다. 즉 농도가 증가할수록 항균 활성을 나타내는 inliibition zone의 크기가 증가하여 ethyl acetate 추출물의 경우 Staphylococcus aureus 에 대해 2,000 ppm 농도에서 18 mm로 가장 큰 활성도를 나타내었다(Fig.
- 청피의 ethyl acetate 추출물과 백화사설초의 methanol 추출물을 혼합하여 항균력을 측정해 본 결과 두 추출물을 섞어 첨가했을 경우가 단독으로 사용했을 시보다 상승효과를 나타내었다. 또한 청피의 ethyl acetate 추출물이 식중독 유발세균의 성장에 미치는 효과를 검정하기 위해 Bacillus cereus 및 Shigella sonnei 배양액에 청피의 ethyl acetate 추출물을 각각 5,000 ppm 농도로 첨가했을 시, Bacillus cereus의 생육이 24시간 이상까지 억제됨을 관찰할 수 있었고, Shigella sonnei의 생육도 12시간까지 지연시킬 수 있 었다
- 청피의 ethyl acetate 추출물과 백화사설초의 methanol 추출물를 섞었을 경우 나타나는 항균효과 는 Table 5와 같이 나타났다. 본 실험에서 가장 민감한 항균효과를 보였던 Shigella flexneri 에 대한 두 식물 추출물의 항균력은 청피 추출물과 백화사설초 추출물을 혼합했을 경우 더 크게 나타나, 청피의 ethyl acetate 추출물만을 단독으로 2,000 ppm 준 경우(17 mm)보다 청피의 ethyl acetate 추출물 1,000 ppm에 백화사설초의 methanol 추출물 1,000 ppm을 섞어준 경우가 더 큰 항균력을 보였다(23 mm). Shigella flexneri 균에 대해서도 두 추출물을 각각 1,000 ppm 씩 섞어 투여한 경우가 청피의 ethyl acetate 추출물 2,000 ppm을 단독으로 준 경우보다 높은 항균력을 보였다(Fig.
- faecalis 및 Bacillus sp. 에 대하여 발육억제 효과를 보이며 Gram 음성균인 E. coli 와 진균인 Candida albicans 에 대해서는 억제효과가 없다고 보고한 바 있으나, 본 실험에 사용한 청피의 경우 Gram 양성과 음성 균주 간에 특징적인 차이를 보이지 않았다.
- Gram 양성균에 대한 청피의 petroleum ether, chloroform, ethyl acetate, methanol 추출물 및 열수추출물의 항균활성은 Table 3과 같이 나타나 disc에 점적한 청피의 각종 추출물의 농도가 증가할수록 항균 활성이 크게 나타났다. 즉 농도가 증가할수록 항균 활성을 나타내는 inliibition zone의 크기가 증가하여 ethyl acetate 추출물의 경우 Staphylococcus aureus 에 대해 2,000 ppm 농도에서 18 mm로 가장 큰 활성도를 나타내었다(Fig. 1). 청피 추출물의 종류 및 농도에 따라 각 균주들에 대한 다른 활성을 나타내 균의 종류에 따라 각기 다른 항균활성을 나타내, 청피의 petroleum ether 추출물은 Staphylococcus aureus에 대해 주된 항균 활성을 나타내었고, 청피의 chloroform 추출물은 Pseudomonas aeruginosa 에서 가장 큰 활성을 나타내었다.
- 1). 청피 추출물의 종류 및 농도에 따라 각 균주들에 대한 다른 활성을 나타내 균의 종류에 따라 각기 다른 항균활성을 나타내, 청피의 petroleum ether 추출물은 Staphylococcus aureus에 대해 주된 항균 활성을 나타내었고, 청피의 chloroform 추출물은 Pseudomonas aeruginosa 에서 가장 큰 활성을 나타내었다. 청피의 ethyl acetate 추출물은 본 실험에 사용한 모든 균주에 대해 항균활성을 나타내었고 500 ppm 농도에서도 항균효과가 나타났다.
- 본 연구에서는 식중독 유발세균에 대한 항균활성이 우수한 천연 항균성 물질을 검색하기 위해 예로부터 민간과 한방에서 널리 이용되어 온 청피를 각종 유기용매로 추출하여 식중독 유발세균에 대한 항균활성을 조사해 보았다. 청피를 petroleum ether, chloroform, ethly acetate, methan이를 이용하여 실온에서 각각 용매별로 계통 분획하고, 열수주출물을 얻은 후, 9종의 식중독 유발세균 (Sraphylococcus aureus, Bacillus cereus, Salmonella enteritidis, Shigella flexneri, Escherichia coli, Salmonella typhimurium, Shigella dysenteriae, Pseudomonas aruginosa, Shigella sonnei) 에 대하여 항균효과를 조사하였다 청피 추출물의 농도별 항균 활성 검색에서는 청피의 ethyl acetate 추출물이 가장 큰 항균 효과를 보였으며 Staphylococcus aureus^ Pseudomonas aeruginosa?} 가장 민감하게 반응하는 균주였다. 청피의 ethyl acetate 추출물과 백화사설초의 methanol 추출물을 혼합하여 항균력을 측정해 본 결과 두 추출물을 섞어 첨가했을 경우가 단독으로 사용했을 시보다 상승효과를 나타내었다.
- 청피 추출물의 종류 및 농도에 따라 각 균주들에 대한 다른 활성을 나타내 균의 종류에 따라 각기 다른 항균활성을 나타내, 청피의 petroleum ether 추출물은 Staphylococcus aureus에 대해 주된 항균 활성을 나타내었고, 청피의 chloroform 추출물은 Pseudomonas aeruginosa 에서 가장 큰 활성을 나타내었다. 청피의 ethyl acetate 추출물은 본 실험에 사용한 모든 균주에 대해 항균활성을 나타내었고 500 ppm 농도에서도 항균효과가 나타났다. 갓의 에탄올 추출물 중 ethyl acetate 분획물은 Staphylococcus aureus 에 대해서 가장 높은 항균활성이 있음이 보고된 바 있는데9), 본 실험에서도 청피의 ethyl acetate 추출물이 Staphylococcus aureus 에 대해 가장 강한 항균효과를 나타내었다.
- 4와 같은 결과를 얻을 수 있었다. 청피의 ethyl acetate 추출물을 첨가하지 않은 control의 경우 배양 후 12시간부터 급속한 균의 증식을 볼 수 있었고, 5,000 ppm 농도를 첨가하였을 경우 균의 증식이 완만하게 이루어져 청피의 ethyl acetate 추출물이 Bacillus cereus와 Shigella sonnei 균의 성장을 효율적으로 억제시킬 수 있는 것으로 판단되었다
- Bacillus cereus2} 경우, 청피의 ethyl acetate 추출물을 넣지 않은 control버지에서 배양했을 시 12시간 후부터 급격한 증가를 보여 빠른 성장이 일어남을 관찰할 수 있었다. 청피의 ethyl acetate추출물 1,000 ppm을 첨가한 배지에서는 균의 성장이 36시간까지 억제됨을 관찰할 수 있었고, 5,000 ppm의 농도에서는 48시간 이상까지 균의 증식이 지연되는 것을 확인할 수 있었다 (Fig. 3).
- 청피의 추출물을 petroleum ether, chloroform, ethyl acetate 및 methanol로 각각 분리한 결과, 각 분획물의 추출 수율은 Table 2와 같이 나타났다. 청피의 petroleum ether, chloroform, ethyl acetate, methanol 분획물 및 열수추출물은 각각 0.2%, 0.3%, 0.7%, 11.4% 및 21.6%로 나타나, petroleum ether의 수율이 가장 낮았고 열수추출물의 수율이 가장 높았다.
- aureus에 항균성이 있다고 보고한 바 있다. 한편 본 실험에 사용한 청피 추출물의 농도가 250 ppm이하인 경우에는 항균 효과를 검증할 수 없었고, 청피의 petroleum ether 추출물과 chloroform 추출물의 경우도 모든 균주에 대해 그다지 큰 항균활성을 나타내지 않아 500 ppm이상에서만 항균력을 관찰할 수 있었다. 식물의 ethyl acetate 추출층에는 사포닌 성분, 유기산류, 탄닌, 당, 배당체 및 기타 알칼로이드류가 주로 용출되는 것으로 알려져 있는데, 본 실험에서 가장 높은 항균력을 보인 청피의 ethyl acetate 추출물에도 이와 유사한 성분들이 함유되어 있을 것으로 사료된다.
※ AI-Helper는 부적절한 답변을 할 수 있습니다.