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문제 정의
- 이는 인종적인 차이가 기인한 것으로 여겨진다. 이에 저자들은 한국의 건강한 성인에서 BDNF Val66Met 유전자 다형성이 성격 기질과 어떠한 관련성을 가지는지 알아보고자 하였다.
제안 방법
- 대상들의 정맥혈 10cc를 채취하였고 DNA 정제를 위해 병원 내 실험실에서 처리하였다. DNA Purification kit (GENTRA)를 이용하여 말초혈액에서 Human genomic DNA를 분리하였다. 분리된 genomic DNA를 가지고 BDNF 유전자의 G196A(Val66Met) 다형성 분석을 위한 중합효소연쇄반응을 시행하기 위하여 다음과 같이 oligonucletide primer(시발체)를 제작하였다.
- PCR tube에 DNA 50ng, 10×Taq buffer(500Mm KCl, 100Mm, Tris-HCl, pH 8.3 and 15mM MgCl2) 3μl, 2.5mM dNTP 2.4μl, 각각의 시발체(10pmol/μl) 1μl, Taq polymerase(5U/μl) 0.5μl를 넣고 나머지는 멸균증류수를 넣어 총 부피 30μl를 만들고 이를 Thernercyker(Takara, Japan)를 사용하여 중합효소연쇄반응을 시행하였다. 94℃에서 5분을 수행한 후, 94℃에서 30초, 60℃에서 30초, 72℃에서 30초간 33 주기를 수행한 후, 마지막으로 반응 후 신장을 위하여 72℃에서 5분 수행 후 다음 분석에 사용할 때까지 4℃에 보관하였다.
- 19) TCI는 모두 240 문항으로 되어있으며,“예-아니오”의 선택형 질문에 답변하도록 되어 있다. TCI는 새로운 것을 추구하는 경향 (novelty seeking, 이하 NS), 위험 회피성 경향(harm avoidance, 이하 HA), RD와 지속성 경향(persistence, 이하 PS) 등의 4가지 기질 차원(temperament dimension)과 자기중심성(Self-directedness, 이하 SD), 협조성(Cooperativeness, 이하 CO) 및 자기 초월성(Selftranscendence, 이하 ST) 등의 3가지 인격 차원(character dimension)으로 이루어졌다.
- 대상들의 정맥혈 10cc를 채취하였고 DNA 정제를 위해 병원 내 실험실에서 처리하였다. DNA Purification kit (GENTRA)를 이용하여 말초혈액에서 Human genomic DNA를 분리하였다.
- DNA Purification kit (GENTRA)를 이용하여 말초혈액에서 Human genomic DNA를 분리하였다. 분리된 genomic DNA를 가지고 BDNF 유전자의 G196A(Val66Met) 다형성 분석을 위한 중합효소연쇄반응을 시행하기 위하여 다음과 같이 oligonucletide primer(시발체)를 제작하였다.
- 중합효소연쇄반응을 통해 증폭된 생성물의 다형성을 분석하기 위해 제한효소인 Eco721(MBI Fermentas)를 사용하였다. 생성물에 Eco721를 3U 처리하여 37℃에서 12시간 동안 반응시킨 후 제한효소 처리 생성물을 3% agarose gel을 이용하여 분리하였고 분리된 생성물을 0.5 ng/ml의 EtBr(Ethidium bromide)로 염색하여 자외선 투과기를 이용하여 관찰하였다. 196번째의 염기가 A(66Met) 인 경우는 생성물이 제한효소에 의해 잘리지 않으므로 크기가 113bp가 되며, G(66Val)인 경우는 제한효소에 의해 78과 35bp로 잘린다.
대상 데이터
- 연구 대상은 총 170명(남 140명, 여 66명)이었으며 평균 연령은 남녀 각각 22.53±1.98, 22.08±1.53세였다. 유전자 빈도 분포에서 BDNF Val64Met 다형성은 HardyWeinberg 평형에 따랐다(표 1).
- 연구대상자는 건강한 젊은 성인으로서, 고려대학교 의과대학의 2003년과, 2004년 본과 1학년 학생 중 자원자 170명이었다. 피험자의 제외 기준은1) 내외과적 장애 또는 신경과적 질환을 가지고 있는 경우, 2) 인격장애, 알코올 중독 및 약물 남용의 정신과적 과거력이 있는 경우3) DSM-Ⅳ 기준에 의해 다른 I 축 장애가 동반된 경우 등이다.
- 중합효소연쇄반응을 통해 증폭된 생성물의 다형성을 분석하기 위해 제한효소인 Eco721(MBI Fermentas)를 사용하였다. 생성물에 Eco721를 3U 처리하여 37℃에서 12시간 동안 반응시킨 후 제한효소 처리 생성물을 3% agarose gel을 이용하여 분리하였고 분리된 생성물을 0.
데이터처리
- 036)(표 2). 사후검증을 시행한 결과 Val/Val 군과 Met/Met 군 사이에 유의한 차이를 볼 수 있었다(one-way ANOVA with Bonferroni, p=0.031). 즉, BDNF의 Val/Val 및 Met/Met 유전자형을 가진 대상군의 평균 PS 척도 점수는 각각 5.
- 유전자 다형성과 TCI 척도 점수와의 관계는 ANOVA test를 통하여 비교하였다. 통계 프로그램은 SPSS/PC+ version 10.
이론/모형
- 성격 검사 도구는 Cloninger 등18)이 개발한 TCI로, 국내에서도 표준화 작업이 시행되었다.19) TCI는 모두 240 문항으로 되어있으며,“예-아니오”의 선택형 질문에 답변하도록 되어 있다.
- 53세였다. 유전자 빈도 분포에서 BDNF Val64Met 다형성은 HardyWeinberg 평형에 따랐다(표 1). BDNF 다형성의 유전자 분포는 중국인을 대상으로 한 연구17)와 유사한 분포를 나타내었으나, 서양인을 대상으로 한 연구 결과16)와는 상이한 분포를 나타내었다.
성능/효과
- 또한 BDNF가 배측 봉선(dorsal raphe)에서 세로토닌 신경의 발화 유형(firing pattern)을 변화시키는 등 뇌의 세로토닌계 조절 역할을 시사하는 연구 결과도 보고되었다.14) 따라서 BDNF가 세로토닌 시스템에 대한 조절 역할을 가진다는 증거와 세로토닌 활성도가 성격 기질과 연관이 있다는 것을 볼 때, BDNF가 특히 불안 경향과 같은 성격 기질의 표현에 중요한 역할을 할 수 있다는 것이 시사된다.
- 결론적으로, 한국인을 대상으로 한 본 연구에서 여성에서 BDNF 유전자 다형성과 특정 성격 요인 사이에 관련성을 발견할 수 있었다. 또한 서양인들과의 유전적 차이는 성격에 대한 생물학적 접근이 그만큼 복잡하다는 것을 시사한다.
- BDNF 다형성의 유전자 분포는 중국인을 대상으로 한 연구17)와 유사한 분포를 나타내었으나, 서양인을 대상으로 한 연구 결과16)와는 상이한 분포를 나타내었다. 또한 성별에 따른 대립형질 및 유전자형의 빈도 분포는 통계적으로 차이가 없는 것으로 나타났다.
- 본 연구에서는 건강한 성인 170명을 대상으로 BDNF Val64Met 유전자 다형성과 TCI 성격 특성과의 상관관계를 분석한 결과, 여성에서 PS 기질 특성이 BDNF 다형성과 유의한 상관 관계를 나타내었다. PS 기질 특성은 보상과 관련 없이 행동을 지속하는 경향을 나타내는 것으로 RD에서부터 분리되어 나온 특성이다.
후속연구
- 와 같은 아시아인을 대상으로 하였으나 결과는 상이하였다. 그러나 본 연구의 제한점으로, 유의한 차이를 보인 여성의 경우 Met/Met 유전자형을 가진 대상자 수는 11명으로 통계적 유의성을 적용하기에 제한점이 있으므로 예비적 성격의 연구 결과로 판단해야 할 것이다.
- 4%로서, BDNF 다형성 발현에 인종간의 차이가 있는 것이다. 그러므로 역시 유전자형에 대한 인종적 차이를 조사하기 위해서는 더 큰 규모의 표본 모집이 필요할 것으로 생각된다.
- 또한 서양인들과의 유전적 차이는 성격에 대한 생물학적 접근이 그만큼 복잡하다는 것을 시사한다. 그러므로 향후 보다 많은 표본을 포함하는 대규모 연구가 필요할 것으로 판단된다.
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