염색공단 주변의 토양과 하수로부터 아조염료 분해 탈색능이 우수한 MB2균을 분리하여 Citrobacter sp.로 동정하였다. Citrobacter sp. MB2의 성장 최적배지 및 배양조건은 sucrose 0.5%, yeast extract 1.0%, $K_2HPO_4$ 0.1%, $NaHCO_3$ 0.1%, pH 7.0, 배양온도 $30^{\circ}C$에서 호기적 진탕배양이었으며, 최적배지에서의 균성장은 분리용 배지나 nutrient broth에서의 균성장보다 각각 7배 및 50배 이상 개체수가 증가하였다. Citrobacter sp MB2는 금속염에 대해 강한 내성을 보였으며, 항생제 ampcillin과 penicillin G에 대해서 강한 내성을 보였다.
염색공단 주변의 토양과 하수로부터 아조염료 분해 탈색능이 우수한 MB2균을 분리하여 Citrobacter sp.로 동정하였다. Citrobacter sp. MB2의 성장 최적배지 및 배양조건은 sucrose 0.5%, yeast extract 1.0%, $K_2HPO_4$ 0.1%, $NaHCO_3$ 0.1%, pH 7.0, 배양온도 $30^{\circ}C$에서 호기적 진탕배양이었으며, 최적배지에서의 균성장은 분리용 배지나 nutrient broth에서의 균성장보다 각각 7배 및 50배 이상 개체수가 증가하였다. Citrobacter sp MB2는 금속염에 대해 강한 내성을 보였으며, 항생제 ampcillin과 penicillin G에 대해서 강한 내성을 보였다.
A Citrobacter sp. MB 2, azo dyes decolorizing bacterium, was isolated from the wastewater and soil and identified as Citrobacter sp.. It was examined that optimum conditions for culture media were 0.5% of sucrose, 1.0% of yeast extract, 0.1% of $K_2HPO_4$, 0.1% of $NaHCO_3$ per...
A Citrobacter sp. MB 2, azo dyes decolorizing bacterium, was isolated from the wastewater and soil and identified as Citrobacter sp.. It was examined that optimum conditions for culture media were 0.5% of sucrose, 1.0% of yeast extract, 0.1% of $K_2HPO_4$, 0.1% of $NaHCO_3$ per distilled water. The best efficient condition of culture was obtained at pH 7.0, $30^{\circ}C$ and aerobic shaking culture. The number of Citrobacter sp. MB2 in optimum medium was increased more than 7 fold compared to basal medium and 50 fold compared to nutrient broth. This strain was exhibited strong resistance against metal salts and antibiotics (ampicillin and penicillin G).
A Citrobacter sp. MB 2, azo dyes decolorizing bacterium, was isolated from the wastewater and soil and identified as Citrobacter sp.. It was examined that optimum conditions for culture media were 0.5% of sucrose, 1.0% of yeast extract, 0.1% of $K_2HPO_4$, 0.1% of $NaHCO_3$ per distilled water. The best efficient condition of culture was obtained at pH 7.0, $30^{\circ}C$ and aerobic shaking culture. The number of Citrobacter sp. MB2 in optimum medium was increased more than 7 fold compared to basal medium and 50 fold compared to nutrient broth. This strain was exhibited strong resistance against metal salts and antibiotics (ampicillin and penicillin G).
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제안 방법
균 분리원으로 사용하였다. 균분리용 시료를 1백금이량 취하여 본 실험에 사용한 염료가 각각 100ppm 농도로 첨가된 분리용 배지(1.0% 임ucose, 0.5% peptone, 0.1% KH2PO4, 0.2% K2HPO4, 0.02% NaCl, 0.002% CaCl2 . H2O, 0.02% MgSO4 . 7H2O, pH 7.0)에 접종하여 30P에서 3일간 증 균 배양하여 탈색을 확인하였다. 탈색이 확인된 배양액 0.
균주인 Citrobacter sp.를 분리하고 특성을 조사하였다.
준하여 측정하였다. 본 실험에 사용된 아조 염료가■ 최고 흡광치를 나타내는 각각의 파장(AO6 425 nm, AO10 475 nm, RR4 522nm, RO16 490nm, RB5 596nm, MB1 487nm, BB1 442 nm, DB71 570nm)에서 spectrophotometer(UV-1601, Shimadzu, Japan)를 사용하여 흡광도를 측정하였다. 탈색율은아래의 식 (1)과 같이 계산되었으며, 대조구로는 멸균된 배지를 사용하였다.
1 ml를 각 염료가- 200 ppm의 농도로 첨가된 분리용 배지 20 m/에 혼합 분주 배양하여 clear zone을 기준으로 순수분리하였으며, 형성된 집락을 평판배지에 획선배양하여 순수분리를 재확인하였다. 순수분리된 균들은 염료가 200 ppm의 농도로 첨가된 분리용 액체배지에 배양하여 탈색여부를 확인한 후 각각의 염료에 대해 탈색이 재확인된 균들에 대해 성장률과 탈색율을 조사하고 아울러 다른 아조계 염료에 대해서도 탈색능이 우수한 균주를 최종적으로 선별하였다.
0)에 접종하여 30P에서 3일간 증 균 배양하여 탈색을 확인하였다. 탈색이 확인된 배양액 0.1 ml를 각 염료가- 200 ppm의 농도로 첨가된 분리용 배지 20 m/에 혼합 분주 배양하여 clear zone을 기준으로 순수분리하였으며, 형성된 집락을 평판배지에 획선배양하여 순수분리를 재확인하였다. 순수분리된 균들은 염료가 200 ppm의 농도로 첨가된 분리용 액체배지에 배양하여 탈색여부를 확인한 후 각각의 염료에 대해 탈색이 재확인된 균들에 대해 성장률과 탈색율을 조사하고 아울러 다른 아조계 염료에 대해서도 탈색능이 우수한 균주를 최종적으로 선별하였다.
대상 데이터
.각종 아조계 염료를 분해하는 약 80여종의 균을 순수분리하였으며, 이들 분리균중 사용한 모든 균주에 대해 탈색 능이 확인된 균주는 Table 2에서와 같이 6종이었으며, 이들 중 사용한 아조염료 모두에 대해 가장 높은 탈색율을 보인 MB2균을 본 실험의 공시균으로 최종선정하였다. 최종 선별된 균주 MB2 아조염료에 대한 탈색효과는 Fig.
대구 염색공단 폐수처리장의 활성오니, 폐수 및 폐수가 유출되는 달서천 주위의 물과 토양 시료로부터 .각종 아조계 염료를 분해하는 약 80여종의 균을 순수분리하였으며, 이들 분리균중 사용한 모든 균주에 대해 탈색 능이 확인된 균주는 Table 2에서와 같이 6종이었으며, 이들 중 사용한 아조염료 모두에 대해 가장 높은 탈색율을 보인 MB2균을 본 실험의 공시균으로 최종선정하였다.
본 실험에 사용된 아조계 염료는 Sigma사(St Louis, USA)로부터 구입하였으며 이들의 특성은 Table 1에서와 같다. 산성 염료인 acid orange 6(AO6)은 brownish yellow 색을 띠는 식용 색소로서 food yellow 8로 사용되고 있으며, acid orange 10(AO10)은 brownish yellow 색을 띠는 식용색소로써 food omage 4로 사용되고 있다 .
아조 염료 분해균의 분리를 위하여 대구 염색공단 폐수처리장의 활성오니, 폐수 및 폐수가 유출되는 달서천 주위의 물과 토양시료를 20여점 채취하여 균 분리원으로 사용하였다. 균분리용 시료를 1백금이량 취하여 본 실험에 사용한 염료가 각각 100ppm 농도로 첨가된 분리용 배지(1.
이론/모형
선별된 아조염료 분해균의 동정은 Bergey's Manual of Systematic Bacteriology")의 방법에 따라 배양학적, 형태학적, 생화학적 및 영양학적 특성들을 기초로 동정하였다.
아조 염료의 탈색율은 Dubin과 Wright의 방법 2)에 준하여 측정하였다. 본 실험에 사용된 아조 염료가■ 최고 흡광치를 나타내는 각각의 파장(AO6 425 nm, AO10 475 nm, RR4 522nm, RO16 490nm, RB5 596nm, MB1 487nm, BB1 442 nm, DB71 570nm)에서 spectrophotometer(UV-1601, Shimadzu, Japan)를 사용하여 흡광도를 측정하였다.
성능/효과
MB2의 최적 성장조건을 조사하기 위하여 탄소원, 질소원, 무기염류, 생육인자를 농도별로 달리 첨가하여 조사한 결과 최적 배지조성은 탄소원으로 sucrose 0.5%, 질소원으로 Yeast extract 1.0%, 무기염류로 KJ1PQ, 0.1%와 NaHCO3 0.1%, pH 7.0인 것으로 확인되었으며, 30℃에서 진탕배양할 경우 성장에 가장 유리한 것으로 조사되었다(data not shown). 최적 성장조건에서 Citrobacter sp.
MB2는 사용배지에 관계없이 배양 6시간 이후에는 급속한 성장을 나타내었다. NB에 배양한 경우는 배양 15 시간째에 최고의 균성장(2.0 X IV cfii/ml)을 보인 후 점차 감소하는 경향을 보인 반면, 분리용 배지와 개선된 최적배지의 경우 15시간 까지 급격한 성장을 보여 각각 1.2 X 108 cfii/ml와 7.6x108 cfu/ml의 개체수에 도달한 후 차츰 성장이 둔화되는것으로 나타났다. 개선된 최적배지에서의 균성장은 분리용 배지나 nutrient broth에서의 균성장보다 각각 7배 및 50배 이상증가된 결과이다.
6x108 cfu/ml의 개체수에 도달한 후 차츰 성장이 둔화되는것으로 나타났다. 개선된 최적배지에서의 균성장은 분리용 배지나 nutrient broth에서의 균성장보다 각각 7배 및 50배 이상증가된 결과이다.
DB기의 경우는 배양 24시간째 까지 급속도로 탈색이 이루어졌으나, 이후로는 탈색속도가 둔화되었다. 실험에 사용된 염료중 RR4® 제외하고는 배양초기인 24시간에서 36시간 사이에 대부분의 탈색이 진행되는 것으로 나타났다.
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