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문제 정의
- 따라서 본 연구에서는 식품의 보존 기간을 연장하고 안전성을 확보하기 위하여 부패 및 식중독을 야기할 수 있는 각종 세균에 대한 항균성을 조사하였기에보고하는 바이다.
제안 방법
- 48시간 동안 배양하였다. 배양액을 취하여분광 광도계 (Shimadzu UV mini 1240, Japan)로 580 nm에서의 흡광도를 측정하여 각 균주의 증식 여부를 확인함으로써 최소 저해 농도(MIC)를 측정하였다.
- 처리된 균주는 적당 배수로 희석하고 Tryptic Soy Agar 배지에 도말 평판법으로 도말한 다음 37℃에서 12〜48시간 동안 배양하였다. 자몽 종자 추출물 처 리구의 콜로니 수를 자몽 종자 추출물을 처리하지 않은 미처리 구의 콜로니 수와 비교하여 콜로니 형성 저해 활성을 측정하였다.
- 자몽 종자 추출물을 각 농도별로 첨가한 Tiyptic Soy Broth 100㎖ 에 50 ㎕의 균주 현탁액을 접종하고 37°C에서 배양하였다 이 때 일정 간격으로 시료를 채취하여 분광 광도계로 540nm에서의 흡광도를 측정하여 미생물 생육 곡선을 작성하였다.
- 자몽 종자 추출물의 항균성을 조사하기 위하여 그람 양성균인 Bacillus cereus, Bacillus subtilis, Listeria monocytogenes^ 그람 음성 균인 Escherichia coli, Sa lmonella enteritidis, Serratia marcescens 를 대상으로 하여 최소 저해 농도 생육 저해 활성, 콜로니 형성 저해활성을 실험하였다. 그람 양성균에 대한 자몽 종자 추출물의 최소 저해 농도는 12.
- 자몽 종자 추출물의 항균성을 조사하기 위하여 그람 양성균인 Bacillus cereus, Bacillus subtilis, Listeria monocytogenes^ 그람 음성 균인 Escherichia colt, Salmo nella enteritidis, Serratia marcescens^: 대상으로 하여 최소 저해 농도 생육 저해 활성, 콜로니 형성 저해 활성을 실험하였다.
대상 데이터
- 배지는 Difi?o사의 제품을 사용하였다.
- 그람 양성균으로는 Bacillus cereus, Bacillus subtilis, Listeria monocytogenes를, 그람 음성 균으로는 Escheri chia coli, Salmonella enteritidis, Serratia marcescens를사용하였으며 Tryptic Soy Agar 배지에 계대배양하면서 실험에 사용하였다.
성능/효과
- 자몽 종자 추출물의 최소 저해 농도를 측정한 결과, 다른 항균성 물질 "''2)과 마찬가지 로 그람 음성균보다그람 양성균에 대하여 높은 항균성을 보였다. 이렇게그람 염색성에 따라서 항균성이 달라지는 것은 항균성 성분의 세포내로의 투과성 또는 세포벽 합성에 대한 저해 때문으로 판단되나 보다 자세한 실험이 필요할 것으로 생각된다.
- 5 ppm 정도로 상대적으로 낮았으며, 그람 음성균의 최소 저해 농도는 50 ppm 이상으로 상대적으로 높았다. 균주의 증식에 대한 생육 저해 활성을 조사한 결과 Bacillus cereus는 1 ppm 이하, Bacillus subtilis는 6.25 ppm, Listeria monocytogenes 는 1 ppm 이하, Escherichia coli는 6.25 ppm, Salmonella enteardis는 25 ppm, Serratia marcescens는 25 ppm부터생육이 저해되었다. 그람 양성균의 콜로니 형성 저해활성은 Bacillus cereus는 93.
- 실험하였다. 그람 양성균에 대한 자몽 종자 추출물의 최소 저해 농도는 12.5 ppm 정도로 상대적으로 낮았으며, 그람 음성균의 최소 저해 농도는 50 ppm 이상으로 상대적으로 높았다. 균주의 증식에 대한 생육 저해 활성을 조사한 결과 Bacillus cereus는 1 ppm 이하, Bacillus subtilis는 6.
- 그람 양성균의 콜로니 형성 저해 활성은 Bacillus cereus는 93.9%, Bacillus subtilis는 94.0%, Listeria monocyto-genes는 99.9%였으며, 그람 음성균의 콜로니 형성 저해 활성은 Escherichia coli는 4.4%, Salmonella enter- itidis는 82.7%, Serratia marcexcens는 86.4%였다. 콜로니 형성 저해 활성은 최소 저해 농도와 마찬가지로 그람 양성균에 대해서는 높은 저해 활성을 보였으며, 그람 음성균에 대해서는 상대적으로 낮은 저해 활성을 보였다.
- 25 ppm, Salmonella enteardis는 25 ppm, Serratia marcescens는 25 ppm부터생육이 저해되었다. 그람 양성균의 콜로니 형성 저해활성은 Bacillus cereus는 93.9%, Bacillus subtilis는 94.0 %, Listeria monocytogenes는 99.9%, 그람 음성균의 콜로니 형성 저해 활성 은 Escherichia coli는 4.4%, Salmo nella enteritidis는 82.7%, Serratia marcesens는 86.4%로, 그람 양성균에 대해서는 높은 저해 활성을 보였으며, 그람 음성균에 대해서는 비교적 낮은 저해 활성을보였다.
- 각 미생물에 대한 자몽 종자 추출물의 최소 저해 농도는 Table 1과 같았다. 그람 양성균인 Bacillus cereus,Bacillus subtilis, Listeria monocytogenes^] 최 소 저해 농도는 모두 12.5 ppm£로 매우 낮은 농도에서도 생육이 저해되었으며, 그람 음성균인 Escherichia coli, Sal monella enteritidis, Serratia wrcescms의 최소 저해 농도는 각각 50 ppm, 50 ppm, 100 ppm으로 상대적으로높은 농도에서 생육이 저해되었다. 이는 다른 항균성물질11, 12)과 마찬가지로 그람 음성균보다 그람 양성균에 대하여 높은 항균성의 결과와 유사한 경향을 나타냈으며 최 등'3)의 결과와는 상반된 결과를 나타냈다.
- 6에 나타내었다. 그람 양성균인 Bacillus cereus는 1 ppm 이하의 농도에서부터 균의 생육이 저해받기 시작하여 12.5 ppm 이상에서는 생육이 완전히 억제되었고, Bacillus subtilis는 6.25 ppm에서 균의 생육이 저해받기 시작하여 12.5 ppm 이상에서는 생육이 완전히 억제되었으며,Listeria monocytogenes는 1 ppm 이하의 농도에서부터균의 생육이 저해받기 시작하여 12.5 ppm 이상에서는 생육이 완전히 억제되었다. 그람 음성균인 Escherichia c<*.
- 그람 음성균인 Escherichia c<*.는 6.25 ppm에서 균의 생육이 저해받기 시작하여 50 ppm 이상에서는 생육이 완전히 억제되었고, Sal monella enteritidis는 25 ppm에서 균의 생육이 저해받기 시작하여 50 ppm 이상에서는 생육이 완전히 억제되었으며, Serratia marcescens는 25 ppm에서 균의 생육이 저해받기 시작하여 100 ppm 이상에서는 생육이완전히 억제되었다.
- 더욱이 콜로니 형성 저해 활성이 높게 나타남으로써 식품 및 식품 접촉 표면을 살균하는 살균제로 사용하여도 우수한 효과를 나타낼 것으로 판단된다. 따라서 기존의 식품 선도보지제를 대체하는 우수한 제품을 만들어낼 수 있을 것으로 기대된다.
- 자몽 종자 추출물은 100 ppm 이하의 낮은 농도에서도 각종 미생물의 생육을 완전히 억제하므로 기존에사용하고 있는 보존료에 비하여 훨씬 높은 항균성을보였다. 또한 자몽 종자 추출물은 LD50가 2, 900 mg/kg 체중으로 거의 무독한 물질로 알려져 있기 때문에2D 안전성이 매우 높은 천연의 보존료로 이용이 가능할 전망이다.
- 4%였다. 콜로니 형성 저해 활성은 최소 저해 농도와 마찬가지로 그람 양성균에 대해서는 높은 저해 활성을 보였으며, 그람 음성균에 대해서는 상대적으로 낮은 저해 활성을 보였다.
후속연구
- 따라서 기존의 식품 선도보지제를 대체하는 우수한 제품을 만들어낼 수 있을 것으로 기대된다.
- 이렇게그람 염색성에 따라서 항균성이 달라지는 것은 항균성 성분의 세포내로의 투과성 또는 세포벽 합성에 대한 저해 때문으로 판단되나 보다 자세한 실험이 필요할 것으로 생각된다.
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