[논문]불환금정기산(不換金正氣散)이 마우스 Th1/Th2 분화(分化) 및 알레르기 염증 반응 조절에 미치는 효과

임강민; 강희; 박성민; 심범상; 김성훈; 최승훈; 안규석

불환금정기산(不換金正氣散)이 마우스 Th1/Th2 분화(分化) 및 알레르기 염증 반응 조절에 미치는 효과
Effect of Bulhwangeumjeonggi-san on Cytokine Levels of Mouse Th1/Th2 Cells and Anti-allergic Activity in Ovalbumin-sensitized Allergic Inflammation Model 원문보기

동의생리병리학회지 = Journal of physiology & pathology in Korean Medicine, v.20 no.6, 2006년, pp.1467 - 1476

Abstract ▼ AI-Helper

This study was to evaluate the effect of Bulhwangeumjeonggi-san (BS) on mouse Th1 and Th2 cells' differentiation and ovalbumin (OVA)-induced allergic inflammation. The proliferation of mouse CD4 T cells and the secretion of Th1/Th2 cytokines under the influence of BS extract were measured as well as the amount ${\beta}$-hexosaminidase in RBL-wH3 cells and the levels of TNF-${\alpha}$ and IL-6 secretion in Raw264.7 cells. BALB/c mice were orally administered with BS extract and simultaneously inoculated with OVA to induce allergic reaction and measure the level of total lgE, OVA-specific lgE and the production of IFN- g, IL-4, IL-5 by the spleen cells. When mouse CD4- T cell were stimulated with anti-CD3 and anti-CD28 for 48 hours in various concentrations of BS extract, it increased proliferation of CD4 cells by 14% in 50 ${\mu}g/m{\ell}$ concentration but it showed an inhibition in higher concentrations. CD4 T cells under Th1/Th2 polarizing conditions for 3 days with BS resulted in mild decrease of IFN- g in Th1 cells and mild increase of IL-4 in Th2 cell at 50 ${\mu}g/m{\ell}$ but the level of IL-4 decreased by 18% at 100 ${\mu}g/m{\ell}$. BS extract had a dose-dependent inhibitory effect on antigen-induced release of ${\beta}$-hexosaminidase in RBL-2H3 cells. Treatment of BS extract on LPS stimulated Raw 264.7 cells showed dose-dependent decrease in TNF-${\alpha}$ production. Oral administration of BS extract on OVA-induced allergic mice showed an inhibitory effect on the levels of total serum lgE and OVA-specific lgE by 50% and 55%, respectively. Culture of spleen cells with OVA resulted in significant increase of IFN- g by 25% and significant decrease of IL-4 and IL-5 by 53%, and 38%, respectively. The results show that BS does not strongly induce mouse T cells to transform into Th1 or Th2 but it has an anti-allergic effect in vitro, and that it also corrects the unbalance between the reactions of Th cells in allergic diseases.

주제어

AI 본문요약
AI-Helper

* AI 자동 식별 결과로 적합하지 않은 문장이 있을 수 있으니, 이용에 유의하시기 바랍니다.

문제 정의

본 연구에서는 BALB/c 마우스를 이용하여 알레르기성 면역반응을 연구하는데 매우 유용한 OVA 모델36-찌을 통해 不換金正氣散 물 추출물이 면역반응을 어떻게 조절하는지 살펴보았다. 마우스에게 不換金正氣散 물 추출물을 4주간 직접 경구 투여 하면 서동 시에 OVA로 알레르기를 유발하여 혈청내의 total IgE와 OVA-specific IgE를 측정하였고 아울러 이들 마우스의 비장 세포를 분리하여 OVA를 넣고 배양한 후에 이들 세포가 분비하는 Thl 및 Th2 cytokine의 양을 측정해 본 결과 不換金正氣散은 매우 우수한 항알레르기 효과가 있음이 실험을 통해 증명되었다.
본 연구에서는 不換金正氣散의 T 세포에 대한 면역조절과 항알레르기 효과를 알아보기 위해 마우스의 비장에서 CD4 T cell을 분리하여 인위적으로 Thl cell과 Th2 cell로 분화시켜 이를 조절하는 능력을 측정하였고, RBL-2H₃ cell과 Raw 264.7 cell을 이용하여 항염증 효과를 확인하였으며, 아울러 마우스에게 不換金正氣散 물 추출물을 경구 투여하여 ovalbumin (OVA)으로 알레르기 염증을 유발하였을 때 혈청의 IgE와 cytokine 변화를 측정하여 유의한 결과를 얻었기에 보고하는 바이다.
본 연구에서는 不換金正氣散의 消化機能의 향상 이외에도 T helper cell에 대한 선택적 免疫調節 작용과 아울러 항알레르기작용이 있는지 알아보기 위해 마우스 및 RBL-2H₃와 Raw 264.7 cell line을 이용하여 실험하였다.

제안 방법

40 ㎛ nylon cell strainer로 여과하였다. 1000 rpmz 10분간 원심분리 한 후 RBC lysis buffer로 적혈구를 파괴하였다 2회 원심분리 한 후 비장 세포를 trypan blue exclusion assay를 통해 생존율을 확인한 후 세포 수를 측정하였다.
정상군과 대조군은 동량의 PBS를 투여하였다. A1(OH)3와 PBS를 동량으로 섞은 용액에 0.1%의 OVA를 넣은 후 실험 시작 0일, 7일, 14일째 복강내에 투여하여 감작하였으며 정상군은 PBS를 복강내에 투여하였다. 항원 유발을 위해 마지막 복강투여 1주일 후 7일간 대조군과 실험군 마우스의 비강에 OVA 용액을 20 以씩 점적하였다.
The effect of BS on serum IgE levels in mice. All mice were intraperitoneally immunized with OVA on days 0, 7, 14, and subsequently inoc니ated intranasally with OVA from days 21 to 28. The mice orally administered with BS extractd.
Anti-CD3e(10 座/戒)가 coating된 12-well plate에 lxlO₆ cells/1戎의 농도로 CD4 T cell을 seeding하고 anti-CD28 및 rIL-2(5 ng/戒)를 첨가하였다. Thl polarizing condition을 만들기 위해서는 rIL-12(5 ng/n粉와 anti-IL-4(10 您/赐을 넣었으며 Th2 polarizing condition을 위해서는 rIL-4(5 ng/调 와 anti-IL-12(10 瘗/祉)을 추가한 후 3일간 배양하였다.
OVA로 감작된 마우스를 치사시킨 후 얻은 비장세포를 72시간 OVA로 자극하여 그 상층액을 ELISA로 측정하였다' 정상군 마우스로부터 얻은 비장세포의 IL-4는 3.98 ±3.34 pg/ml이었으며 대조군의 경우 163.44 ± 56.89 pg/ml이었으며 不換金正氣散 물 추출물 처리군은 77.87 ±14.22 pg/ml 로써 유의성있게 감소하였다(Table & Fig. 9). IL-5의 경우 3.
OVA로 감작된 마우스를 치사시킨 후 얻은 비장세포를 72시간 OVA로 자극하여 그 상층액을 ELISA로 측정하였다. 정상군 마우스로부터 얻은 비장세포의 IFN- g는 1553.
RBL-2H₃ 세포를 IgE 와 항원으로 유도하여 0 -hexosaminidase를 유리시키는 반응에 대해 不換金正氣散 물 추출물이 억제하는 효과를 알아보았다. 不換金正氣散 물 추출물은 50, 題/ml에서 21%, 100 俸/ml에서는 26%, 200 娼/ml에서는 37%, 400 陽/ml에서는 42%의 억제율을 보여주었다(Fig.
RBL-2터3 cell (5xl05 c이ls/威)을 24-well plate에 seeding 한 후 mouse monoclonal DNP-specific IgE (1 也g/n粉를 첨가하여 3 시간 감작하였다. 배지를 걷어내고 Tyrode buffer (135 mM NaClz 5 mM KC₁, 1 mM MgCh, 2 mM CaCh/ 5.
All mice were intraperitoneally immunized with OVA on days 0, 7, 14, and subsequently inoculated intranasally with OVA from days 21 to 28. The mice were orally administered with BS(1g/kg) or PBS (normal and control group) three times per week days 0 to 27. Spleen cells were obtained from day 28 and cultured in the presence of OVA.
7 macrophage cell-g- 10% FBS, 1% antibiotic-antimycotic이 함유■돈! DMEM으로 배양한 후 24-well plate에 2灯。5을 seeding하얏为다. overnight incubation한 후 medium을 갈아준 후에 不換金正氣散 물 추출물을 농도별로 가하고 동시에 lipopolysaccharide(l 俸 /戒)를 처리하였다. 18시간이 지난 후에 상층액을 harvest하여 -20 ℃ 에 보관하였다.
여기에 anti-CD28(2 您/双)를 넣고 co-stimulation하였다. 不換金正氣散 물 추출물은 0, 10, 50, 100, 200및 400 “g/ml의 농도로 48시간 37 ℃, 5% CO₂ incubator에 배양한 후 CellTiter 96R aqueous one solution reagent를 첨가하였다. Raw264.
不換金正氣散 물 추출물을 phosphate buffered saline (PBS) 에 1.0 g/kg의 용량으로 마우스에게 4주간 일주일에 세 번씩 경구투여 하였다. 정상군과 대조군은 동량의 PBS를 투여하였다.
마우스이며 오리엔트(주)에서 구입하였다. 고형사료와 물은 제한 없이 공급하면서 낮 12시간/ 밤 12시간의 생활리듬을 주었으며 항온 항습 상태에서 1주간 적응시킨 후 사용하였다.
7 cell의 세포독성 검사를 위해서 먼저 10% FBS, 1% antibiotic-antimycotic이 함유된 DMEM으로 배양한 후 2xl04 cells/100 以의 농도로 96-well plate에 seeding하여 24시간을 배양한 후 배양액을 갈아주었다. 교체한 모든 배양액에는 50, 100, 200및 400 姻/ml의 농도로 不換金正氣散 물 추출물을 처리하여 20시간을 배양한 후에 동일한 reagent를 첨가하였다. Formazan product는 microplate reader(Tecanz Austria)를 이용하여 optical density 490-650 nm에서 reading하였다.
5회 washing후 각각의 biotinylated detection antibody를 넣고 한 시간 상온에 두었다. 다시 7회 washing한 후 horse reddish peroxidase-conjugated streaptavidin 을 100 成씩 분주한후 1시간 상온에 두었다 Biotinylated OVA는 Biotin NH形와 OVA를 혼합한 후 투석하여 제조한 후 사용하였다. 7회 washing후 33~5, 5'-Tetramethybenzidine substrate reagent 100 处를 가한 후 30분이 지나서 IM H₂SO₄ 50 以를 첨가하였다.
2) 비장세포 부유액의 준비

비장을 마우스로부터 적출하여 10% FBS, 1% antibiotic-antimycoticO ] 함유된 RPMI-1640으로 세척하였다. Micro slide glass로 비장을 잘게 으깬 뒤 0.
양등均은 蕾香正氣散이 消化障碍를 동반한 食慾不振과 여름이나 비가 오는 濕한 날씨에 악화되는 濕性 아토피 皮膚炎에 유의한 효과가 있다고 보고하였다. 임상적으로 소화기 증상을 개선시켜 正氣의 작용을 돕는 방제들이 알레르기 질환에도 유용하게 활용되고 있고 한의학적으로 알레르기 질환의 병태가 濕에 의해 벌어지는 경우가 많아서 본 연구에서는 除濕, 理氣作用의 不換金正氣散을 선택하여 연구하였다.
0 g/kg의 용량으로 마우스에게 4주간 일주일에 세 번씩 경구투여 하였다. 정상군과 대조군은 동량의 PBS를 투여하였다. A1(OH)3와 PBS를 동량으로 섞은 용액에 0.
1%의 OVA를 넣은 후 실험 시작 0일, 7일, 14일째 복강내에 투여하여 감작하였으며 정상군은 PBS를 복강내에 투여하였다. 항원 유발을 위해 마지막 복강투여 1주일 후 7일간 대조군과 실험군 마우스의 비강에 OVA 용액을 20 以씩 점적하였다. 28일째에 마우스를 마취시킨 후 심장채혈하여 혈액을 채혈한 후 응고시켰다.

대상 데이터

anti-CD3e antibody, anti-CD28z anti-mouse IL-4, anti-mouse IL-12, rIL-4z rIL-12와 IL-4, Ⅱ.-5, IFN- g 및 total IgE의 ELISA 측정에 사용된 OPT EIA set는 BD Pharmingen(U.SA)에서 구입하였으며 Biotin NHS는 Vector Laboratories에서 구입하였다.
Fetal bovine serum (FBS)과 OVA-grade V, recombinant IL-2 (rIL-2), anti-dinitrophenol (DNP)-IgE, DNP-human serum albumin (HSA), bovine serum albumin (BSA)은 Sigma(U.S.A.) 에서 구입하였으며 antibiotic-antimycotic과 RPMI 1640z DMEM 은 Invitrogen Life Technology(U.SA) 에서 구입하였다. Magnetic cell sorting CD4 (L3T4) microbeads는 Miltenyi Biotec (U.
SA) 에서 구입하였다. Magnetic cell sorting CD4 (L3T4) microbeads는 Miltenyi Biotec (U.S.A.) 에서 구입하였다. anti-CD3e antibody, anti-CD28z anti-mouse IL-4, anti-mouse IL-12, rIL-4z rIL-12와 IL-4, Ⅱ.
不換金正氣散 (Bulhwangeumjeonggi-san:BS) 의 구성 약물과 용량은 東醫寶鑑에 준하였으며(Table 1), 이들 약물은 경희대학교 한의과대학 부속 한방병원 약제과에서 구입하였다.
이 용액을 filter papei■로 여과한 다음 rotary vacuum evaporator(Eyela/ Japan) 로 감압 농축한 뒤 1000ml round flask에 옮겨 freezing dryer(Eyelaz Japan)로 24시간 동안 동결 건조하여 건조된 분말을 不換金正氣.散 물 추출물 시료로 사용하였다(yield: 546%).
본 실험에 '사용된 실험용 마우스는 생후 8주된 BALB/c 수컷 마우스이며 오리엔트(주)에서 구입하였다. 고형사료와 물은 제한 없이 공급하면서 낮 12시간/ 밤 12시간의 생활리듬을 주었으며 항온 항습 상태에서 1주간 적응시킨 후 사용하였다.
사용된 암세포는 Rat basophilic leukemia-2H₃ (RBL-2H₃) cell line과 Raw264.7 macrophage cell line이며 한국 세포주 은행에서 분양 받았다.
염증반응과 관련한 不換金正氣散의 영향을 알아보기 위해 Raw 264.7 macrophage cell 을 사용하였다. Raw 264.

데이터처리

실험결과는 평균값으로 표시하였으며 SPSS 12.0을 이용하여 Studenfs t-test와 ANOVA로 처리하였다.

이론/모형

Total IgE와 OVA-specific IgE는 不換金正氣散 물 추출물을 1.0 g/kg의 용량으로 4주간 1을 가지고 ELISA 방법을 이용하여 측정하였다. 不換金正주일에 세 번씩 경구투여 후 마우스를 심장 채혈하여 얻은 혈청氣散 물 추출물을 경구 투여한 마우스의 total IgE는 대조군에 비해 유의하게 감소하였다.
마우스 CD4 T cell을 Thl cell과 Th2 cell로 polarization 한 후 3일간 배양하여 얻은 상층액의 IFN- g와 IL-4를 ELISA 방법을 이용하여 측정하였다. Thl 세포의 경우 不換金正氣散 물 추출물을 처리했을 때 IFN- g의 양은 평균치가 약간 감소하였으나 통계적으로 유의하지는 않았다(Table 3).
200 庭/ml이하부터는 세포증식을 억제하는 경향이 나타났으며 400 陽/ml에서는 12%의 억제율을 보여주어 비교적 고농도에서도 세포증식을 강하게 억제하는 부작용은 나타나지 않았다. 마우스 CD4 T cell을 Thl cell과 Th2 cell로 polarization 한 후 不換金正氣散 물 추출물과 더불어 3일간 배양하여 그 상층액의 IFN- g와 IL-4를 ELISA 방법을 이용하여 측정하였다. Thl 세포의 경우 不換金正氣散 물 추출물을 처리했을 때 IFN- g의 양은 약간 감소하였으나 통계적으로 유의하지는 않았다.

성능/효과

不換金正氣散 물 추출물을 농도별로 넣고 마우스 CD4 T cell을 anti-CD3 및 anti-CD28로 48시간 자극한 결과 50 "g/ml에서 약재를 넣지 않은 세포보다 14%의 증가율을 보여주었다(Fig. 1). 200 /zg/ml 이하부터는 세포증식을 억제하는 경향이 약간 나타났는데 400 碍/血에서도 12%의 억제율만을 보여주어 비교적 고농도에서도 세포증식을 억제하는 부작용은 나타나지 않았으나 통계적으로 유의성은 없었다.
또한 IgE의 생산은 Ⅱ.-4 와 IL-5를 만들어내는 Th2 cell에 의해 증가하거나 IFN- g에 의해 IL-4가 길항적으로 억제되어 IgE 양이 감소하는데%㈣, 不換金正氣散 물 추출물을 투여한 마우스의 비장세포에서 분비되는 IFN- g, IL-4, IL-5를 보면 IFN- g의 경우 대조군보다 25% 증가하였고 IL-4는 53% 감소하였으며 IL-5는 38% 감소하였으며 모두 통계적으로 유의성이 있었다.
200 庭/ml이하부터는 세포증식을 억제하는 경향이 나타났으며 400 陽/ml에서는 12%의 억제율을 보여주어 비교적 고농도에서도 세포증식을 강하게 억제하는 부작용은 나타나지 않았다. 마우스 CD4 T cell을 Thl cell과 Th2 cell로 polarization 한 후 不換金正氣散 물 추출물과 더불어 3일간 배양하여 그 상층액의 IFN- g와 IL-4를 ELISA 방법을 이용하여 측정하였다.
6). OVA-specific IgE는 O.D. 값이 정상군은 0.059 ± 0.008로 거의 검출되지 않았으나 대조군은 0.650 + 0.187였고 不換金正氣散 물 추출물 투여군은 0.294 + 0.054로 55% 감소하였다(Table 6, Fig. 7).
7 세포를 LPS로 자극한 후 不換金正氣散 물 추출물을 처리했을 때 TNF-a의 합성이 농도 의존적으로 감소하였다. OVA로 마우스의 알레르기성 반응을 유도하면서 不換金正氣散 물 추출물을 경구투여 한 결과 혈청의 total IgE를 50%로 감소시켰고, OVA-specific IgE를 55% 감소시켰으며, 비장세포를 분리하여 OVA로 배양한 결과 IFN- g는 25% 증가하였으며 IL-4는 53%, IL-5는 38% 감소하였다.
따라서 이 효소의 활성은 mast cell이나 basophil의 탈과립에 대한 marker로서 이용된다. Rat basophil leukemia cell (RBL-2H₃)을 IgE로 감작하여 不換金正氣散 물 추출물을 처리 후 B-hexosaminidase의 유리되는 양을 측정한 결과 50 俸/ml에서 21%, 100 丿妮/ml에서는 26%, 200 陽/ml에서는 37%, 400 瘗/ml에서는 42%의 억제율을 보여주었다. 이로써 不換金正氣散 물 추출물이 항원으로 유도되는 탈과립을 억제하는 항알레르기 효과가 있음을 확인할 수 있었다.
Raw 264.7 macrophage cell에 LPS와 不換金正氣散 물 추출물을 동시에 처리한 후 78시간 배양한 후에 pro-inflammatory cytokine인 TNF-a의 합성량을 ELISA로 측정한 결과, LPS만을 처리한 군은 7418.52 ± 301.96 pg/ml이었으나 不換金正氣散 물 추출물을 처리한 군은 농도 의존적으로 감소하였는데 100 /zg/ml 에서는 5539.51 ± 362.36 pg/inl으로 대조군에 비해 26% 감소하였으며 200 您/ml에서는 4301.07 ± 543.54 pg/ml으로 43% 감소하였고 400 〃g/ml에서는 2422.06 ±120.78 pg/ml으로 68% 감소하였으며 모두 유의성이 있었다(Table 4, Fig. 5).
억제하는 효과를 알아보았다. 不換金正氣散 물 추출물은 50, 題/ml에서 21%, 100 俸/ml에서는 26%, 200 娼/ml에서는 37%, 400 陽/ml에서는 42%의 억제율을 보여주었다(Fig. 4).
IgE는 1형 알레르기 반응에서 매우 중용한 역할을 하기 때문에 IgE 생산의 조절은 임상적으로 매우 중요하다. 不換金正氣散 물 추출물을 경구투여 한 마우스의 total IgE는 대조군에 비해 50% 감소하였으며 OVA-specific IgE도 대조군에 비해 55% 감소하였는데 모두 통계적으로 유의성이 있었다. 또한 IgE의 생산은 Ⅱ.
그러나 Th2 세포에서는 IL-4 값이 50 俸/ml에서는 약간 증가하였으나 100 飓/ml에서 18% 정도 감소하였다. 不換金正氣散 물 추출물이 in vitro에서는 Th ce11을 어느 한 쪽으로 강하게 유도하지 않음을 본 실험에서 확인할 수 있었다.
0 g/kg의 용량으로 4주간 1을 가지고 ELISA 방법을 이용하여 측정하였다. 不換金正주일에 세 번씩 경구투여 후 마우스를 심장 채혈하여 얻은 혈청氣散 물 추출물을 경구 투여한 마우스의 total IgE는 대조군에 비해 유의하게 감소하였다. Total IgE의 경우 혈청을 400배로 희석하여 측정했을 때 정상군은 804.
또한 不換金正氣散 물 추출물을 OVA 감작과 동시에 마우스에 게 경구투여했을 때 항원으로 유도된 IgE 반응을 감소시키고 Thl 반응을 유도하면서 Th2 반응을 감소시킴을 확인하였다. 따라서 不換金正氣散은 불균형한 Th 세포들의 반응을 교정하면서 항알레르기 작용을 가진 것으로 추정할 수 있다.
T cell을 Thl이나 Th?로 강하게 유도하지는 않음을 확인하였고 아울러 탈과립을 억제하는 작용이 있음을 알 수 있었다. 또한 不換金正氣散 물 추출물을 OVA 감작과 동시에 마우스에 게 경구투여했을 때 항원으로 유도된 IgE 반응을 감소시키고 Thl 반응을 유도하면서 Th2 반응을 감소시킴을 확인하였다.
마우스 CD4 T cell을 anti-CD3 및 anti-CD28 로 48시간 동안 농도별로 자극한 결과 不換金正氣散 물 추출물은 50 題/ml에서 14%의 증가율을 보여주었으며 그 이하의 농도에서는 약하게 억제하는 경향이 나타났다. 마우스 CD4 T cell을 Thl cell과 Th2 cell로 polarization한 후 3일간 함께 배양한 결과 不換金正氣散 물 추출물은 Thl 세포의 경우 IFN- g의 양을 약간 감소시켰고, Th2 세포의 IL-4 값을 50 姻/ml에서는 약간 증가시켰으나 100 您/ml에서 18% 정도 감소시켰다. RBL-2H₃ 세포를 IgE와 항원으로 감작했을 때 不換金正氣散 물 추출물은 0-hexosaminidase의 유리를 농도의존적으로 억제시켰다.
7 세포의 TNF-a와 IL-6 분비량을 측정하였다' 또한 BALB/c 마우스에게 不換金正氣散 물 추출물을 경구투여하면서 동시에 OVA로 감작시킨 후 알레르기 반응을 유도하여 total IgE와 OVA-specific IgE 및 비징세포의 IFN- g, IL-4, IL-5 생산량을 측정하여 다음과 같은 결론을 얻었다. 마우스 CD4 T cell을 anti-CD3 및 anti-CD28 로 48시간 동안 농도별로 자극한 결과 不換金正氣散 물 추출물은 50 題/ml에서 14%의 증가율을 보여주었으며 그 이하의 농도에서는 약하게 억제하는 경향이 나타났다. 마우스 CD4 T cell을 Thl cell과 Th2 cell로 polarization한 후 3일간 함께 배양한 결과 不換金正氣散 물 추출물은 Thl 세포의 경우 IFN- g의 양을 약간 감소시켰고, Th2 세포의 IL-4 값을 50 姻/ml에서는 약간 증가시켰으나 100 您/ml에서 18% 정도 감소시켰다.
마우스에게 不換金正氣散 물 추출물을 4주간 직접 경구 투여 하면 서동 시에 OVA로 알레르기를 유발하여 혈청내의 total IgE와 OVA-specific IgE를 측정하였고 아울러 이들 마우스의 비장 세포를 분리하여 OVA를 넣고 배양한 후에 이들 세포가 분비하는 Thl 및 Th2 cytokine의 양을 측정해 본 결과 不換金正氣散은 매우 우수한 항알레르기 효과가 있음이 실험을 통해 증명되었다. IgE는 1형 알레르기 반응에서 매우 중용한 역할을 하기 때문에 IgE 생산의 조절은 임상적으로 매우 중요하다.
우선 不換金正氣散 물 추출물이 anti-CD3/CD28로 자극한 CD4 T cell을 증가시켰는지 확인하기 위해 不換金正氣散 물 추출물을 농도별로 투여한 후 MTS assay를 한 결과 세포 증식률은 50 陽/ml에서 약재를 넣지 않은 세포보다 14%의 증가율을 보여주었다. 200 庭/ml이하부터는 세포증식을 억제하는 경향이 나타났으며 400 陽/ml에서는 12%의 억제율을 보여주어 비교적 고농도에서도 세포증식을 강하게 억제하는 부작용은 나타나지 않았다.
Rat basophil leukemia cell (RBL-2H₃)을 IgE로 감작하여 不換金正氣散 물 추출물을 처리 후 B-hexosaminidase의 유리되는 양을 측정한 결과 50 俸/ml에서 21%, 100 丿妮/ml에서는 26%, 200 陽/ml에서는 37%, 400 瘗/ml에서는 42%의 억제율을 보여주었다. 이로써 不換金正氣散 물 추출물이 항원으로 유도되는 탈과립을 억제하는 항알레르기 효과가 있음을 확인할 수 있었다.

참고문헌 (48)

Goldsby, R.A., Kindt, T.J., Osborne, B.A. Kuby Immunology(4 th edition). New York:W H Freeman & CO,. 2003
Abbas, A.K., Lichtman, A.H. and Pober, J.S. Cellular and Molecular Immunology(2ed). Saunders, p 5, 1994
Worldwide variation in prevalence of symptoms of asthma, allergic rhinoconjunctivitis, and atopic dermatitis: ISAAC. The International Study of Asthma and Allergies in Childhood (ISAAC) Steering committee. Lancet. 351(9111):1225-1232, 1998

상세보기
Tough, D.F., Sun, S., Zhang, X., Spent, J. Stimulation of naive and memory T cells by cytokines. Immunol Rev. 170:39-47, 1999

상세보기
Mosmann, T.R., Cherwinski, H., Bond, M.W., Giedlin, M.A., Coffman, R.L. Two types of murine helper T cell clone. I. Definition according to profiles of lymphokine activities and secreted proteins. 1986. J Immunol. 175(1):5-14, 2005

상세보기
張介賓. 類經, 서울, 대성문화사. pp28,34(上),418(下1), 1986
旺機. 黃帝內經素問今譯, 서울, 성보사. p 8,125,146,412, 1985
최승훈. 내경병리학, 서울, 통나무. pp 223, 229, 1993
은재순, 이동희, 전용근, 권영안, 권진. 加味淸鼻飮이 免疫反應에 미치는 影響, 동의생리병리학회지. 18(5):1391-1396, 2003
김정진, 양성완, 손낙원, 안규석. 加味生料四物湯의 抗炎症效果와 止痒膏의 아토피皮膚炎 손상 및 止痒效果에 미치는 影響, 동의생리병리학회지. 17(3):428-435, 2003

원문보기 상세보기
이건호, 박상용, 류종훈. 황련해독탕의 항알레르기 效果, 서울 경희대학교대학원 석사학위논문. 2004
이상인. 방제학. 서울, 영림사. p 277, 278, 1990
임성우, 류봉하, 박동원, 장인규, 류기원. 不換金正氣散의 효능에 관한 實驗的硏究, 대한한방내과학회지. 11(1):15-27, 1990

원문보기 상세보기
허인무, 장인규, 전진권, 이형구, 민병순, 구본홍. 평위산, 향사평위산 및 不換金正氣散의 효능에 관한 實驗的 고찰, 경희대학교논문집. 13:427-461, 1990
양성완, 손낙원, 정혁상, 김윤범, 이학인, 안규석 . 수종 韓藥 처방이 아토피皮膚炎 환자의 SCORAD 및 Cytokine 변화에 미치는 影響, 서울, 경희대학교대학원 박사학위논문. 2004
김연대. 최신면역, 서울, 집문당. 33, 1982
Cantrell, D. T cell antigen receptor signal transduction pathways, Annu Rev Immunol. 14:259-274, 1996

상세보기
Akbar, A.N., Salmon, M. Cellular environments and apoptosis; tissue microenvironments control activated T cell death. Immunol Today. 18:72-76, 1997

상세보기
Singh, V.K., Mehrotra, S., Agarwal, S.S. The paradigm of Th1 and Th2 cytokines: its relevance to autoimmunity and allergy. Immunol Res. 20:147-161, 1990
Jacobson, N.G., Szabo, S.J., Weber-Nordt, R.M., Zhong, Z., Schreiber, R.D., Darnell, J.E. et al. Interleukin 12 signaling in T helper type 1(Th1) cells involves tyrosine phosphorylation of signal tranducer and activator of transcription(Stat)3 and Stat4.JExp Med.181(5):1755-1762, 1995
Abehsira-Amar, O., Gibert, M., Joliy, M., Theze, J., Jankovic, D.L. IL-4 plays a dominant role in the differential development of Th0 into Th1 and Th2 cells. J Immunol. 148(12):3820-3829, 1992

상세보기
Rao, A., Avni, O. Molecular aspects of T cell differentiation. Br Med Bull. 56(4):969-984, 2000

상세보기
Matsuda, H., Tewtrakul, S., Morikawa, T., Nakamura, A., Yoshikawa, M. Anti-allergic principles from Thai zedoary: structural requirements of curcuminoids for inhibition of degranulation and effect on the release of TNF- $\alpha$ and IL-4 in RBL-2H3 cells. Bioorganic & Medicinal Chemistry. 12:5891-5898, 2004

상세보기
김대식 외. 면역생물학, 서울, 라이프사이언스. 468-472, 2000
Galli, S.J., Costa, J.J. Mast-cell-leukocyte cytokine cascades in allergic inflammation. Allergy. 50(11):851-862, 1995

상세보기
Williamsm, C.M., Galli, S.J. The diverse potential effector and immunoregulatory roles of mast cells in allergic disease. J Allergy Clin Immunol. 105(5):847-859, 2000

상세보기
Busse, W.W., Lemanske, R.F. N Engl J Med. 344:350-362, 2001

상세보기
Beellanti, J.A. Cytokine and allergic disease; clinical aspect. Allergy Asthma Proc. 19(6):337-341, 1988

상세보기
Carlos, A.G., Carlos, M.L., Conceisao, S.M., Alcinda, M. Cytokines and asthma. J Invest Allergy Clin Immunol. 7(5):270-273, 1997
Hogan, S.P., Koskinen, A., Matthaei, K.I., Young, I.G., Foster, P.S. IL-5 producing CD4 T cells play a pivotal role in aeroallergen-induced eosinophilia, bronchial hyperreactivity and lung damage in mice. Am J Respir Crit Care Med. 157(1):210-218, 1998

상세보기
문준전, 안규석, 최승훈.동의병리학. 서울, 고문사. pp 78-90, 1990
신재용. 방약합편해설, 서울, 성보사. 109, 1998
전국한의과대학 공동교재편찬위원회 편저. 본초학, 서울, 영림사. p 335, 337, 339, 393, 487, 2004
Tanaka, Y., Takagaki, Y., Nishimune, T. Effects of metal elements on beta-hexosaminidase release from rat basophilic leukemia cells(RBL-2H3). Chem. Pharm. Bull. 39(8):2072-2076, 1991

상세보기
Hong, C.C., Shimomura-Shimizu, M., Muroi, M., Tanamato, K. Effect of endocrine disrupting chemicals on lipopolysaccharide-induced tumor necrosis factor- $\alpha$ and nitric oxide production by mouse macrophage. Biol Pharm Bull. 27(7):1136-1139, 2004

상세보기
Renz, H., Smith, H.R., Henson, J.E., Ray, B.S., Irvin, C.G., Gelfand, E.W. et al. Aerosolized antigen exposure without adjuvant causes increased IgE production and increased airway responsiveness in the mouse. J Allergy Cin Immunol. 89:1127-1138, 1992

상세보기
Herz, U., Braun, A., Ruckert, T., Renz, H. Various immunological phenotypes are associated with increased airway responsiveness. Clin Exp Allergy. 28:628-634, 1998
Jarmann, E.R., Kuba, A., Montermann, E., Barlett, R.R., Reske-Kunz, A.B. Inhibition of murine IgE and immediate cutaneous hypersensitivity responses to ovalbumin by the immunomodulatory agent leflunomide. Clin Exp Immunol. 115:221-228, 1999

상세보기
Paludan, S.R. Interleukin-4 and interferone-gamma; the quintessence of a mutual antagonistic relationship. Scand J Immunol. 48:459-468, 1998

상세보기
Boothby, M., Mora, A.L., Aronica, M.A., Youn, J., Sheller, J.R., Goenka, S. et al. IL-4 signaling, gene transcription regulation and the control of effector T cells. Immunol Res. 23:179-191, 2001

상세보기
Von Garnier, C., Astori, M., Kettner, A., Dufour, N., Heusser, C., Corradin, G., Spertini, F. et al. Allergen-derived long peptide immunotherapy downregulates specific IgE response and protects from anaphylaxis. Eur J Immunol. 30:1638-1645, 2000

상세보기
Arnicki, A.G., Tsuji, T., Thomas, W.R. Inhibition of mucosal and systemic Th2-type immune responses by intranasal peptides containing a dominant T cell epitope of the allergen Der p 1. Int Immunol. 13:1223-1231, 2001

상세보기
Pedotti, R., Mitchell, D., Wedemeyer, J., Karpuj, M., Chabas, D., Hattab, E.M. et al. An unexpected version of horror autotoxins: anaphylactic shock to a self-peptide. Nat Immunol. 2:216-222, 2001

상세보기
Borish, L.C., Nelson, H.S., Corren, J., Bensch, G., Busse, W.W., Whitmore, J.B. et al Efficacy of soluble IL-4 rceptor for the treatment of adults with asthma. J Allergy Clin Immunol. 107:963-970, 2001

상세보기
Mattes, J., Yang, M., Siqueria, A., Clark, K., MacKenzie, J., McKenzie, A.N. et al. IL-13 induces airways hyperreactivity independently of the IL-4R alpha chain in the allergic lung. J immunol. 167:1683-1692, 2001

상세보기
Milgrom, H., Berger, W., Nayak, A., Gupta, N., Pollard, S., McAlary, M. et al. Treatment of childhood asthma with anti-immunoglobulin E antibody. Pediatrics. 108:E36, 2001

상세보기
Casale, T.B., Condemi, J., LaForce, C., Nayak, A., Rowe, M., Watrous, M. et al. Effect of omalizumab on symptoms of seasonal allergic rhinitis: a randomized controlled trial. J Am Med Assoc. 286:2956-2967, 2001

상세보기
Inagaki, N., Nagai, H. Drugs for the treatment of allergic disease. Jpn J Pharmacol. 86:275-280, 2001

상세보기

저자의 다른 논문 :

표제어: PCR

동의어: Packet Collision Rate

용어 설명 출처 목록 (6)

용어 설명: PCR은 세균 특이성이 있는 primer를 이용하여 적은 수의 세균이 있을지라도 쉽게 검출할 수 있는 유용한 방법이며, 이를 이용하여 구강 내 치면세균막이나 타액에서 직접 세균을 검출할 수 있게 되었다[8].

내보내기 구분	파일저장 인쇄 메일전송
구성항목	기본정보 상세정보 관리번호, 논문명, 저널/프로시딩명, 저자 , 발행년, 권, 호, 시작페이지, 끝페이지, 발행기관 관리번호, 논문명, 대등논문명, 저자 , 저널/프로시딩명, 발행기관, 발행년, 발행언어, 권, 호, 시작페이지, 끝페이지, ISBN, ISSN, 주제분야, 키워드, 초록(한글), 초록(영문), 저자(소속기관)
저장형식	Text(ASCII format) Excel format RefWorks Direct Export RIS format (for Reference Manager, ProCite, EndNote), Scholar's Aids, Mendeley
메일정보	받는사람 (필수) @ 보내는사람 (선택) @ 제목 내용 KISTI 검색결과 이메일 서비스
안내	총 건의 자료가 검색되었습니다. 다운받으실 자료의 인덱스를 입력하세요. (1-10,000) 검색결과의 순서대로 최대 10,000건 까지 다운로드가 가능합니다. 데이타가 많을 경우 속도가 느려질 수 있습니다.(최대 2~3분 소요) 다운로드 파일은 UTF-8 형태로 저장됩니다. 파일의 내용이 제대로 보이지 않을실 때는 웹브라우저 상단의 보기 -> 인코딩 -> 자동선택 여부를 확인하십시오. ~ Text(ASCII format) Excel format

연합인증