선택한 단어 수는 입니다.
최소 단어 이상 선택하여야 합니다.
최소 단어 이상 선택하여야 합니다.
선택한 단어 수는 30입니다.
최대 10 단어까지만 선택 가능합니다.
최대 10 단어까지만 선택 가능합니다.
문제 정의
- (Etienne and Bertrand 2003). 이에 종간교잡식물에서 재분화된 식물도 고려인삼과 미국인삼이 각기 나타내는 고유한 DNA 밴드가 모두 나타나는 지를 알아 봄으로써, F1 재분화식물이 ribosomal DNA의 ITS영역에서 유전적인 안정성을 유지하는 지를 확인하고자 본 실험을 실시하였다.Figure 1.
제안 방법
- PCR조건으로는 95 ℃ 에서 30초간 denaturation을 하였으며 55℃에서 30초간 an- nealing하고 72℃에서 1분간 extension하여, 총 36회의 반응을 실시하였다. PCR 반응액은 1% agarose gel에서 전기영동을 실시한 후 ethidium bromide 용액으로 염색하여 관찰하였다.
- ITS영역의 증폭에 사용된 oligonucleotide 는 Bioneer사 (Chungwon, Korea) 제품을 사용하였다. PCR 증폭에 사용한 primer는 5' 방향에서 ITS 5Fprimer (5' -GGAAGTAAAAGTCGTAACAA-GG-3')와 3' 방향의 ITS 4R primer (5'-TCCTCCGCTTAT-TGATATGC-3')를각기 사용하여 수행하였다 (Figure 1). PCR조건으로는 95 ℃ 에서 30초간 denaturation을 하였으며 55℃에서 30초간 an- nealing하고 72℃에서 1분간 extension하여, 총 36회의 반응을 실시하였다.
- PCR 증폭에 사용한 primer는 5' 방향에서 ITS 5Fprimer (5' -GGAAGTAAAAGTCGTAACAA-GG-3')와 3' 방향의 ITS 4R primer (5'-TCCTCCGCTTAT-TGATATGC-3')를각기 사용하여 수행하였다 (Figure 1). PCR조건으로는 95 ℃ 에서 30초간 denaturation을 하였으며 55℃에서 30초간 an- nealing하고 72℃에서 1분간 extension하여, 총 36회의 반응을 실시하였다. PCR 반응액은 1% agarose gel에서 전기영동을 실시한 후 ethidium bromide 용액으로 염색하여 관찰하였다.
- 고려 인삼과 미국인삼을 구별할 수 있는 SNP primer를 이용하여 고려인삼, 미국인삼, 종간교잡종, 캘러스 및 재분화식물 체를 비교분석하였다. 천풍, 연풍, 선원 등의 고려인삼의 품종 내에서는 ITS 영역에서 PCR-패턴에서 차이점이나타나지 않았다 (Figure 4; lane 1, 2, 3).
- 고려인삼 (panax 과 미국인삼 (Panax quinquefolius) 의 종간교잡종 (F1) 의 화서조직 및 고려인삼 종자의 자엽조직을 무균적으로 절취하여 2, 4-D (2, 4-dichlorophenoxy acetic acid) 1.0 mg/L와 BAP (benzylaminopurine) 0.1 mg/L을 첨가한 MS (Murashige and Skoog 1962) 배지에접종하여 배발생세포를 유기하였으며 1개월 간격으로 동일한 배지에서 계대배양하였다. 배발생세포를 동일한 배지에서 4개월가량 방치하면 갈변된 캘러스위에 연노란색의 자엽형배가 관찰되는데 (Ahm et al.
- 고려인삼인 천풍, 연풍 및 선원, 미국인삼, 고려인삼과 미국 인삼 간의 종간교잡종으로부터 각기 채취한 잎 및 재분화 식물체의 잎과 켈러스를 시료로 사용하여 액체질소를첨가하며 마쇄하였다. 식물 DNA 추출용 kit (Nucleospin Plant, Macherey-Nagel)를 사용하여 마쇄된 시료로부터 DNA를 추출하였다.
- 식물체의 잎과 켈러스를 시료로 사용하여 액체질소를첨가하며 마쇄하였다. 식물 DNA 추출용 kit (Nucleospin Plant, Macherey-Nagel)를 사용하여 마쇄된 시료로부터 DNA를 추출하였다. ITS영역의 증폭에 사용된 oligonucleotide 는 Bioneer사 (Chungwon, Korea) 제품을 사용하였다.
- 1992). 체형과 약효가 뛰어나면서 광과 적변에 강한 인삼품종을 얻고자 고려인삼과 미국인삼 간의 종간교배를 실시하였다. 고려인삼에 비하여 미국인삼은 개화기가 20일 가량 늦어, 출아기에 미국인삼의뇌두에 지베렐린을 처리하여 개화시기를 앞당겼다.
대상 데이터
- 식물 DNA 추출용 kit (Nucleospin Plant, Macherey-Nagel)를 사용하여 마쇄된 시료로부터 DNA를 추출하였다. ITS영역의 증폭에 사용된 oligonucleotide 는 Bioneer사 (Chungwon, Korea) 제품을 사용하였다. PCR 증폭에 사용한 primer는 5' 방향에서 ITS 5Fprimer (5' -GGAAGTAAAAGTCGTAACAA-GG-3')와 3' 방향의 ITS 4R primer (5'-TCCTCCGCTTAT-TGATATGC-3')를각기 사용하여 수행하였다 (Figure 1).
성능/효과
- 교잡 1세대의 화서조직에서 재분화된 F1 유식물체는 고려인삼 유식물체에 비하여 지상부와 지하부 생육이 모두 양호하였으며, 줄기 색도 고려인삼 재분화 식물체의 줄기에 비하여 자색을 강하게 띄었으며 잎의 색도 진한 녹색을 나타내었다. 천풍, 연풍, 선원 등의 고려인삼의 품종 내에서는
- 한편 종간교잡 1세대의 화서조직에서 유기된 캘러스에서도 고려인삼과 미국인삼에 각기 나타나는 고유한 PCR 밴드 (A, B)를 모두 갖는 것으로 나타났으며, 고려인삼의자엽조직에서 유기된 캘러스에서는 고려인삼에서 만 나타나는 PCR밴드와 동일한 것으로 (Figure 4; lane 6, 8) 보아,식물체가 가지고 있는 유전적 인 특성이 식물조직에서 유기된 캘러스에서도 그대로 유지되고 있는 것으로 판단되었다. 또한 교잡종의 화서조직 유래 캘러스에서 재분화된 식물체가 교잡종의 잎이나 캘러스와 동일한 PCR 패턴을 보임에 따라 시험관내에서 복잡한 재분화 과정을 거친 식물체일지라도 모본 식물체가 지닌 유전적인 특성을 유지하고 있음을 확인할 수 있었다 (Figure 4; lane 7). 또한 고려인삼에 F1 식물을 여교잡하여 얻은 식물에서는 PCR 밴드 A와 B 가 모두 나타나, 1회의 여교잡으로는 미국인삼의 ITS 영역의 DNA를 제거할 수 없음을 알 수 있었다 (Figure 4; lane 9).
- 2003; Chung 2004). 또한 종간교잡종에서 재분화된 식물의지하부 생육을 보면 뿌리의 길이 (근장)와 직경 (근경)이 각기 3.7 cm, 4.2 mm로 고려인삼 재분화식물의 근장과 근직경에 비하여 1.2배 이상 높게 나타났다(Table 1). 이와 같이 종간교잡종으로 부터 재분화된 식물체의 지상부와 지하부 생육이 모본인 고려인삼 재분화 식물체에 비하여 월등히 좋은 것으로 보아, 재분화과정을 거쳐 생산된 식물체는종간교잡식물체가 지닌 잡종강세의 특성을 그대로 지니고있다고 생각되었다.
- 2배 이상 높게 나타났다(Table 1). 이와 같이 종간교잡종으로 부터 재분화된 식물체의 지상부와 지하부 생육이 모본인 고려인삼 재분화 식물체에 비하여 월등히 좋은 것으로 보아, 재분화과정을 거쳐 생산된 식물체는종간교잡식물체가 지닌 잡종강세의 특성을 그대로 지니고있다고 생각되었다.
- 한편 미국인삼은 고려인삼에서보이는 특정한 PCR 밴드 (A)를 보이지 않는 반면에 미국인삼에서만 보이는 PCR-밴드 (B)를 나타내는데 (Figure 4; lane 4) 종간교잡종은 고려인삼과 미국인삼에 각기 나타나는 고유한 PCR 밴드 (A, B)를 모두 나타냈다 (Figure 4; lane 5). 한편 종간교잡 1세대의 화서조직에서 유기된 캘러스에서도 고려인삼과 미국인삼에 각기 나타나는 고유한 PCR 밴드 (A, B)를 모두 갖는 것으로 나타났으며, 고려인삼의자엽조직에서 유기된 캘러스에서는 고려인삼에서 만 나타나는 PCR밴드와 동일한 것으로 (Figure 4; lane 6, 8) 보아,식물체가 가지고 있는 유전적 인 특성이 식물조직에서 유기된 캘러스에서도 그대로 유지되고 있는 것으로 판단되었다. 또한 교잡종의 화서조직 유래 캘러스에서 재분화된 식물체가 교잡종의 잎이나 캘러스와 동일한 PCR 패턴을 보임에 따라 시험관내에서 복잡한 재분화 과정을 거친 식물체일지라도 모본 식물체가 지닌 유전적인 특성을 유지하고 있음을 확인할 수 있었다 (Figure 4; lane 7).
후속연구
- 그러나 본 연구는 ribosomal DNA의 ITS영 역만을 비교검토하였을 뿐 인삼 게놈 전체를 비교한 것은 아니므로 인삼 종간잡종의 재분화식물체가 유전적으로 안정하다고 단언하기에는 이르다고 생각한다. 추후, AFLP와 SSAR 방법등을 도입하여 인삼 종간잡종에서 재분화된 식물체의 유전적인 안정성을 확인할 필요가 있다고 생각된다.
※ AI-Helper는 부적절한 답변을 할 수 있습니다.