[논문]동계 마우스 종양의 방사선 감수성 예측인자로서의 생물학적 표지자

장세경; 김성희; 신현수; 성진실

동계 마우스 종양의 방사선 감수성 예측인자로서의 생물학적 표지자
Biological Markers as Predictors of Radiosensitivity in Syngeneic Murine Tumors 원문보기

대한방사선종양학회지 = The Journal of the Korean soceity for therapeutic radiology and oncology, v.24 no.2, 2006년, pp.128 - 137

장세경 (포천중문의과대학교 분당차병원 방사선종양학과) , 김성희 (연세대학교 의과대학 방사선종양학교실) , 신현수 (포천중문의과대학교 분당차병원 방사선종양학과) , 성진실 (연세대학교 의과대학 방사선종양학교실)

초록
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목적: 방사선 감수성이 다양한 동계(syngeneic) 마우스 종양들을 대상으로 50% 종양억제선량과 종양성장지연 등 방사선 감수성을 대변하는 지표와 방사선에 의해 유도되는 아포토시스 간에 상관관계가 있는지 여부를 알아보고자 하였다. 또한 아포토시스와 관련된 여러 유전물질의 기본(constitutive) 발현수준을 측정한 후 이들 상호 간의 상관관계를 분석하여 방사선 감수성을 예측할 수 있는 생물학적 표지자를 알아보고자 하였다. 대상 및 방법: 동계 마우스 종양으로는 난소암 OCa-1, 유방암 MCa-K, 편평상피세포암 SCC-VII, 섬유육종 FSa-II, 간암 HCa-1을 사용하였고 이들은 PCR-SSCP 검사상 p53이 모두 자연형인 종양들이었고 주령 $8{\sim}10$ 주인 C3H/HeJ 웅성 마우스를 사용하였다. 50% 종양억제선량과 종양성장지연 및 방사선에 의해 유도되는 아포토시스를 측정하여 이들과 방사선에 의해 유도되는 아포토시스간의 상관관계를 분석하여 방사선에 의해 유도되는 아포토시스로 방사선 감수성을 예측할 수 있는지 여부를 알아보고, 또한 아포토시스와 관련된 유전물질 $053,\;p21^{WAF1/CIP1},\;BAX,\;Bcl-2,\;Bcl-x_L,\;Bcl-X_s,\;p34$ 등의 기본 발현양상 및 발현수준을 Western blot과 농도계측기로 측정한 후 이들 상호 간의 상관관계를 분석하였다. 결과: 방사선에 의해 유도된 아포토시스의 정도와 종양성장지연과의 사이에는 통계적으로 유의한 상관관계가 존재하였다(R=0.922, p=0.026). 50% 종양억제선량과의 사이에는 통계적 유의성은 변연수준이었으나(p=0.070) 상관관계의 경향을 보였다(R=-0.848). $p21^{WAF1/CIP1}$과 p34의 기본 발현수준과 50% 종양억제선량(R=0.893, p=0.041와 R=0.904, p=0.035) 및 종양성장지연(R=-0.922, p=0.026와 R=-0.890, p=0.043) 사이에는 통계적으로 유의한 상관관계가 존재하였다. 즉, $p21^{WAF1/CIP1}$과 p34의 기본 발현수준이 낮은 경우에 방사선 감수성이 높고, 기본 발현수준이 높은 경우에는 방사선 감수성이 낮은 상관관계가 존재함을 알 수 있었다. 결론: 방사선에 의해 유도된 아포토시스의 정도로 종양의 방사선 감수성을 예측하여 볼 수 있을 것으로 생각하며, 종양의 방사선 감수성을 예측할 수 있는 생물학적 표지자로 $p21^{WAF1/CIP1}$와 p34의 기본 발현수준이 이용될 수 있을 것으로 생각한다.

Abstract ▼ AI-Helper

Purpose: We investigated whether a relationship exists between tumor control dose 50 ($TCD_{50}$) or tumor growth delay (TGD) and radiation induced apoptosis (RIA) in syngeneic murine tumors. Also we investigated the biological markers that can predict radiosensitivity in murine tumor system through analysis of relationship between $TCD_{50}$, TGD, RIA and constitutive expression levels of the genetic products regulating RIA. Materials and Methods: Syngeneic murine tumors such as ovarian adenocarcinoma, mammary carcinoma, squamous cell carcinoma, fibrosarcoma, hepatocarcinoma were used In this study. C3H/HeJ mice were bred and maintained in our specific pathogen free mouse colony and were $8{\sim}12$ weeks old when used for the experiments. The tumors, growing in the right hind legs of mice, were analyzed for $TCD_{50}$, TGD, and RIA at 8 mm in diameter. The tumors were also analyzed for the constitutive expression levels of $p53,\;p21^{WAF1/CIP1},\;BAX,\;Bcl-2,\;Bcl-X_L,\;Bcl-X_S$, and p34. Correlation analysis was peformed whether the level of RIA were correlated with $TCD_{50}$ or TGD, and the constitutive expression levels of genetic products regulating RIA were correlated with $TCD_{50}$, TGD, RIA. Results: The level of RIA showed a significant positive correlation (R=0.922, p=0.026) with TGD, and showed a trend to correlation (R=-0.848), marginally significant correlation with $TCD_{50}$ (p=0.070). It indicates that tumors that respond to radiation with high percentage of apoptosis were more radiosensitive. The constitutive expression levels of $p21^{WAF1/CIP1}$ and 34 showed a significant correlation either with $TCD_{50}$ (R=0.893, p=0.041 and R=0.904, p=0.035) or with TGD (R=-0.922, p=0.026 and R=-0.890 p=0.043). The tumors with high constitutive expression levels of $p21^{WAF1/CIP1}$ or p34 were less radiosensitive than those with low expression. Conclusion: Radiosensitivity may be predicted with the level of RIA in murine tumors. The constitutive expression levels of $p21^{WAF1/CIP1}$ or p34 can be used as biological markers which predict the radiosensitivity.

주제어

AI 본문요약
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문제 정의

연구는 미흡한 실정이다. 따라서 방사선 감수성이 다양한 동계 (syngeneic) 마우스 종양들을 대상으로 50% 종양 억제 선량과 종양성장지연 등 방사선 감수성을 대변하는 지표와 방사선에 의해 유도되는 아포토시스 간에 상관관계가 있는지 여부를 알아보고자 하였다. 또한 아포토시스와 관련된 여러 유전물질의 기본 발현수준을 측정한 후 이들 상호 간의 상관관계를 분석하여 방사선 감수성을 예측할 수 있는 생물학적 표지자를 알아보고자 하였다.
따라서 방사선 감수성이 다양한 동계 (syngeneic) 마우스 종양들을 대상으로 50% 종양 억제 선량과 종양성장지연 등 방사선 감수성을 대변하는 지표와 방사선에 의해 유도되는 아포토시스 간에 상관관계가 있는지 여부를 알아보고자 하였다. 또한 아포토시스와 관련된 여러 유전물질의 기본 발현수준을 측정한 후 이들 상호 간의 상관관계를 분석하여 방사선 감수성을 예측할 수 있는 생물학적 표지자를 알아보고자 하였다.

가설 설정

논의되고 있다.37)본 연구에서는 p53의 기본 발현수준과 방사선 감수성 간에는 상관관계가 없었다.

제안 방법

재부유화된 세포액 10μl 에 trypan blue 염색약 990μl를 섞고 이 중 10μl만 취하여 100배 현미경하에서 hemocytometer로 활성 세포 수를 계수하였다. 계수된 세포 수를 기준으로 5XG개의 세포를 마우스 대퇴부에 주사하였다. 종양의 성장은 주 2~3 회 caliper로 측정하여 관찰하였으며 서로 직각인 세 직경의 평균치가 8 mm에 도달하였을 때 실험을 시작하였고 실험의 개요는 Fig.
, Santa Cruz, CA, USA), Bcl-2 (Ab 7, Oncogene Science, Manhassett, NY, USA), B_c1-_xl (Ab 1, Oncogene Science, Manhassett, NY, USA), Bcl-xs (Ab 1, Oncogene Science, Manhassett, NY, USA), p34 (Oncogene Research Products, Cambridge, MA, USA) 등으로 생산회사가 추천하는 농도를 사용하였다. 다시 PBS 로 세척하고 horseradish peroxidase가 접합되어 있는 항 IgG 항체로, p53 은 항양(antisheep) 항체(Oncogene Science, Manhassett, NY, USA), #은 항마우스(antimouse) 항체 (Dako Corporation, Carpintaria, CA, USA), BAX는 항마우스 항체 (Santa Cruz Biotechnology Inc., Santa Cruz, CA, USA), Bcl-2는 항마우스 항체 (Oncogene Science, Manhassett, NY, USA), Bel- _xl 은 항마우스 항체(Oncogene Science, Manhassett, NY, USA), Bcl-Xs는 항마우스 항체 (Oncogene Science, Manhassett, NY, USA), p34는 항마우스 항체 (Oncogene Research Products, Cambridge, MA, USA)로 1시간 처리한 후 ECL Western Blotting Detection System (Amersham, Arlington Heights, IL,USA)을 사용하여 X-선 필름상에 나타나는 band의 농담으로 유전물질의 발현수준을 조사하였다. 발현수준의 평가는 농도계측기 (CSC chemiluminiscence detection module, Raytest, Straubenhardt, Germany)를 이용하여 분석하였다.
p53, p21WAF, /CiP1, BAX, Bcl-2, Bcl-xL, Bcl-xs, p34 등의 기본 발현수준을 분석하였다. 채취한 조직 약 1 mn?를 잘게 부수어 인산 완충액(PBS, pH 7.4)으로 3회 세척한 후 0.5% NP40, 1 μl/ml dithiothereitol (Sigma Chemical Co., St Louis, MOS USA), 10 μl 1/ml PMSF (Sigma Chemical Co., St Louis, MO, USA), 20 mM Tris-hydrochloride (pH 7.6), 150 mM sodium chloride, 5 niM EDTA 등을 포함하는 냉각 완충액에서 1시간 처리하였다. 이를 4℃에서 20분간 원심분리하여 단백질이 용해되어 있는 상층액을 얻었다.
마우스 대퇴부에 종양세포들을 이식하여 종양을 성장시켰으며 종양세포의 이식과정은 다음과 같이 하였다. -70℃ 에 냉동 보관해 온 종양세포를 1차적으로 4~5마리의 마우스 측부 피하에 심어 종양을 성장시켰다.
마우스는 무균상태 (specific pathogen free)로 공급 및 사육하였고 온도 22℃, 습도 55%가 일정하게 유지되는 사육환경에서 상자당 5마리씩 사육하였다. 동계 마우스 종양으로는 난소암인 OCa-I, 유방암인 MCa-K, 편평상피세포암인 SCC-VⅡ, 섬유육종인 FSa-Ⅱ, 간암인 HCa-I을 사용하였고 이들은 PCR-SSCP 검사상 p53이 모두 자연형인 종양들이었다.
마우스를 마취하지 않은 상태로 특수하거 제작된 고정대를 사용하여 종양 부위에만 방사선을 조사하였다.
, Santa Cruz, CA, USA), Bcl-2는 항마우스 항체 (Oncogene Science, Manhassett, NY, USA), Bel- _xl 은 항마우스 항체(Oncogene Science, Manhassett, NY, USA), Bcl-Xs는 항마우스 항체 (Oncogene Science, Manhassett, NY, USA), p34는 항마우스 항체 (Oncogene Research Products, Cambridge, MA, USA)로 1시간 처리한 후 ECL Western Blotting Detection System (Amersham, Arlington Heights, IL,USA)을 사용하여 X-선 필름상에 나타나는 band의 농담으로 유전물질의 발현수준을 조사하였다. 발현수준의 평가는 농도계측기 (CSC chemiluminiscence detection module, Raytest, Straubenhardt, Germany)를 이용하여 분석하였다.
방사선 조사는 선형가속기 (CLINAC 2100C/D, Varian, Palo Alto, CA, USA)를 사용하여 25 Gy를 단일 조사하였다.
아포토시 스의평가는 400배 광학현미경하에서 시행하였으며 1,000개의 세포 핵당 apoptotic body 수를 구하였다. 방사선에 의해 유도되는 아포토시스는 방사선조사 후 1~3시간 내에 최대 수준을 보였으며 최대 측정값을 비교 분석하였다.
방사선에 의해 유도되는 아포토시스와 50% 종양 억제 선량 및 종양성장지연 간의 상관관계를 알아보았다. 50% 종양 억제 선량과의 관계에서는 방사선에 의해 유도되는 아포토시스의 양이 많을수록 50% 종양억제선량이 작아지는즉, 방사선에 민감한 경향을 보였고(R=-0.
방사선치료 후 일정시간 간격으로 마우스를 경추 탈구사시켜 방사선에 의해 유도되는 아포토시스를 측정하였다. 채취한 조직을 고정액에 고정시켜서 파라핀에 포매하고 4μm 절편을 만들어 hematoxylin eosin 염색을 시행하고 이미 보고 된 아포토시스의 형태학적 특징에 따라%)마우스의 조직표본에서 아포토시 스의 수준을 평 가하였다.
-70℃ 에 냉동 보관해 온 종양세포를 1차적으로 4~5마리의 마우스 측부 피하에 심어 종양을 성장시켰다. 성장된 종양을 채취하여 괴사가 없는 부분만을 선택한 후 기계적으로 부수어 0.025% Trypsin 처리한 후 체로 여과시키고 Sweeney필터로 통과시켜 단일 부유화된 종양세포만 얻었다. 종양 세포액을 4K에서 1,500 rpm으로 원심분리한 후 침전물만 얻어 이를 다시 재부유화하였다.
채취한 조직을 고정액에 고정시켜서 파라핀에 포매하고 4μm 절편을 만들어 hematoxylin eosin 염색을 시행하고 이미 보고 된 아포토시스의 형태학적 특징에 따라%)마우스의 조직표본에서 아포토시 스의 수준을 평 가하였다. 아포토시 스의평가는 400배 광학현미경하에서 시행하였으며 1,000개의 세포 핵당 apoptotic body 수를 구하였다. 방사선에 의해 유도되는 아포토시스는 방사선조사 후 1~3시간 내에 최대 수준을 보였으며 최대 측정값을 비교 분석하였다.
유전물질의 기본 발현양상은 마우스 종양에 따라 다양하게 나타났다. 유전물질의 기본 발현수준은 농도계측기를 이용하여 평가하였고 발현 수준이 가장 낮은 경우를 1이라고 평가하였을 때의 상대 값(relative densitometric value, RDV)으로 평가하였다. 기본 발현수준의 상대 값은 BAX의 경우에서 동계 마우스 종양에 따라 10배의 차이가 나타나서 가장 맣은 차이를 나타냈고 #와 Bcl-2에서도 약 6배의 차이를 나타냈으며 p53의 경우에는 약 4배의 차이를 보였다.
얻은 단백질 용액은 polyacrylamide gel (Bio-Rad, Hercules, CA, USA)에서 100 volt로 1시간 동안 전기영동시킨 후 nitrocellulose membrane (Bio-Rad, Hercules, CA, USA)으로 이동시켰다. 이를 5% 탈지유와 0.1% tween-20 (Sigma Chemical Co., St Louis, MO, USA)를 포함하는 PBS (blocking 액)에 2시간 동안 처리하고 분석하고자 하는 각 유전자에 대한 1차 항체로 2시간 동안 처리하였다. 사용한 1차 항체로는 p53 (Ab 7,Oncogene Science, Manhassett, NY, USA), #(:피 (Ab 5, Oncogene Science, Manhassett, NY, USA), BAX (p- 19, Santa Cruz Biotechnology Inc.
종양의 평균 직경이 8 mm로 자라면 조직을 채취하고 Western blotting을 이용하여 아포토시스와 관련된 유전물질인 p53, p21WAF, /CiP1, BAX, Bcl-2, Bcl-xL, Bcl-xs, p34 등의 기본 발현수준을 분석하였다. 채취한 조직 약 1 mn?를 잘게 부수어 인산 완충액(PBS, pH 7.
종양의 평균 직경이 8 mm로 자라면 종양에 대해 방사선치료를 시행하고 2~3일 간격으로 종양의 크기를 지속적으로 측정하고 서로.직각인 세 개의 직경을 측정하여 그 평균으로 크기를 산출하였다. 측정치는 절대성장지연(absolute growth delay)으로 평가하였다.
채취한 조직을 고정액에 고정시켜서 파라핀에 포매하고 4μm 절편을 만들어 hematoxylin eosin 염색을 시행하고 이미 보고 된 아포토시스의 형태학적 특징에 따라%)마우스의 조직표본에서 아포토시 스의 수준을 평 가하였다. 아포토시 스의평가는 400배 광학현미경하에서 시행하였으며 1,000개의 세포 핵당 apoptotic body 수를 구하였다.
직각인 세 개의 직경을 측정하여 그 평균으로 크기를 산출하였다. 측정치는 절대성장지연(absolute growth delay)으로 평가하였다. 절대성장지연은 실험군과 대조군간에 종양이 12 mm 직경에 이르기까지의 기간의 차이이다.

대상 데이터

, St Louis, MO, USA)를 포함하는 PBS (blocking 액)에 2시간 동안 처리하고 분석하고자 하는 각 유전자에 대한 1차 항체로 2시간 동안 처리하였다. 사용한 1차 항체로는 p53 (Ab 7,Oncogene Science, Manhassett, NY, USA), #(:피 (Ab 5, Oncogene Science, Manhassett, NY, USA), BAX (p- 19, Santa Cruz Biotechnology Inc., Santa Cruz, CA, USA), Bcl-2 (Ab 7, Oncogene Science, Manhassett, NY, USA), B_c1-_xl (Ab 1, Oncogene Science, Manhassett, NY, USA), Bcl-xs (Ab 1, Oncogene Science, Manhassett, NY, USA), p34 (Oncogene Research Products, Cambridge, MA, USA) 등으로 생산회사가 추천하는 농도를 사용하였다. 다시 PBS 로 세척하고 horseradish peroxidase가 접합되어 있는 항 IgG 항체로, p53 은 항양(antisheep) 항체(Oncogene Science, Manhassett, NY, USA), #은 항마우스(antimouse) 항체 (Dako Corporation, Carpintaria, CA, USA), BAX는 항마우스 항체 (Santa Cruz Biotechnology Inc.
실험동물은 주령 8~10주인 C3H/HeJ 웅성 마우스를 사용하였다. 마우스는 무균상태 (specific pathogen free)로 공급 및 사육하였고 온도 22℃, 습도 55%가 일정하게 유지되는 사육환경에서 상자당 5마리씩 사육하였다.
계수된 세포 수를 기준으로 5XG개의 세포를 마우스 대퇴부에 주사하였다. 종양의 성장은 주 2~3 회 caliper로 측정하여 관찰하였으며 서로 직각인 세 직경의 평균치가 8 mm에 도달하였을 때 실험을 시작하였고 실험의 개요는 Fig. 1과 같다.

데이터처리

50% 종양억제선량, 종양성장지연 및 방사선에 의해 유도된 아포토시스와 p53, p21WAF1/CIP1, BAX, Bcl-2, Bcl-xL, Bcl-xs, p34 등의 기본 발현수준과의 상관관계는 SPSS 8.0 프로그램의 Pearson 상관 분석을 이용하였다.

이론/모형

Western blotting을 이용하여 아포토시스와 관련된 유전물질의 기본 발현양상을 알아보았다. 유전물질의 기본 발현양상은 마우스 종양에 따라 다양하게 나타났다.

성능/효과

50% 종양 억제 선량에서와 마찬가지로 p21WAFVam과 μ34의 기본 발현수준이 낮을수록 종양성장지연이 오래되는 즉, 방사선 감수성이 높아지는 관계가 있음을 알 수 있었다. 방사선에 의해 유도되는 아포토시스와의 관계에서는 통계적인 유의성을 보이는 유전물질은 없었으나 p21WAF, /C"은 기본 발현수준이 낮을수록 방사선에 의해 유도되는 아포토시스의 양이 많아지는 경향을 보였고(R=-0.856) 통계적으로도 변연의 유의성 (p=0.064)을 보였다(Fig. 6).
및 종양성장지연 간의 상관관계를 알아보았다. 50% 종양 억제 선량과의 관계에서는 방사선에 의해 유도되는 아포토시스의 양이 많을수록 50% 종양억제선량이 작아지는즉, 방사선에 민감한 경향을 보였고(R=-0.848) 통계적으로도 변연의 유의성(marginal significant, p=0.070)을 보였다. 종양성장지연과의 관계에서는 방사선에 의해 유도되는 아포토시스의 양이 많을수록 종양성장지연이 오래되는 즉, 방사선에 민감한 경향을 나타내었고(R=0.
5) 이외에 p53, BAX, Bcl-2, Bcl-2/BAX, B_c1-_xl, Bel*와는 통계적 유의성이나 상관관계의 경향을 찾을 수 없었다. 50% 종양 억제 선량에서와 마찬가지로 p21WAFVam과 μ34의 기본 발현수준이 낮을수록 종양성장지연이 오래되는 즉, 방사선 감수성이 높아지는 관계가 있음을 알 수 있었다. 방사선에 의해 유도되는 아포토시스와의 관계에서는 통계적인 유의성을 보이는 유전물질은 없었으나 p21WAF, /C"은 기본 발현수준이 낮을수록 방사선에 의해 유도되는 아포토시스의 양이 많아지는 경향을 보였고(R=-0.
이외에 p53, BAX, Bcl-2, Bcl-2/BAX, Bcl-xL, Bcl-xs、와는 통계적 유의성이나 상관관계의 경향을 찾을 수 없었다. P21 WAF1/CIP1 의 기본 발현수준이 낮을수록 50% 종양억제선량이 작아지는, 즉 방사선 감수성이 높아지는 관계가 있음을 알 수 있었다. p34도 #의 경우와 마찬가로 기본 발현 수준이 낮을수록 방사선 감수성이 높아지는 관계가 있음을 알 수 있었다.
유전물질의 기본 발현수준은 농도계측기를 이용하여 평가하였고 발현 수준이 가장 낮은 경우를 1이라고 평가하였을 때의 상대 값(relative densitometric value, RDV)으로 평가하였다. 기본 발현수준의 상대 값은 BAX의 경우에서 동계 마우스 종양에 따라 10배의 차이가 나타나서 가장 맣은 차이를 나타냈고 #와 Bcl-2에서도 약 6배의 차이를 나타냈으며 p53의 경우에는 약 4배의 차이를 보였다. Bcl-X!과 Bcl- xs 및 p34에서는 2배 이내의 차이를 보임으로써 동계 마우스 종양에 따른 차이가 가장 적었다(Fig.
026). 또한, 50% 종양 억제 선량과의 관계에서는 방사선에 의해 유도되는 아포토시스의 정도가 많을수록 50% 종양억제선량은 작아지는 경향이 나타났으나(R=-0.848) 통계적으로는 변연의 유의성(p=0.070)을 보였다. 50% 종양억제선량과의 관계에서 통계적인 유의성이 뚜렷하게 나타나지 못한 이유는 마우스 종양의 종류가 5 종으로 표본의 수가 적은 상황에서 OCa-I을 제외한 나머지 4종류의 종양에서 방사선에 의해 유도된 아포토시스의 측정값이 비슷하였기 때문으로 생각된다.
마우스 종양에 따른 50% 종양억제선량은 MD Anderson암센터의 Milas 등31,32)의 결과를 인용하였고 OCa-I, MCa- K, FSa-Ⅱ, SCC-VⅡ, HCa-I에서 각각 52.6 (49.3-56.0) Gy, 64.7 (63.9-65.6) Gy, 74.8 (68.6-81.6) Gy, 80 Gy, 81 Gy이상으로 OCa-I에서 방사선 감수성이 가장 높았고 HCa-I 에서 가장 낮았다(Table 1). 종양성장지연은 동계 마우스 종양에 따라 OCa-I, MCa-K, FSa-Ⅱ, SCC-VⅡ, HCa-I에서 각각 26.
6 일로 50% 종양억제선량의 결과에서와 같이 OCa-I의 경우가 방사선에 가장 민감하였고 HCa-I의 경우가 방사선에 가장 저항성이 높았다(Table 2). 방사선에 의해 유도된 아포토시스는 OCa-I에서만 1&2±3.3%로 다른 종양에 비해 많이 관찰되었고 MCa-K, FSa-Ⅱ, SCC-VⅡ, HCa-I에서는 각각 0.5±0.2%, 1 + 0.2%, 0.3±0.1%, 0.3±0.1%로 큰 차이가 없었다(Table 3).
본 연구에서 P21WAFQPI과 p34는 기본 발현수준이 낮을수록 방사선 감수성이 높은 상관관계를 보였는데, p21WAF1/CIP1은 G1 기 정체에 관여하는 유전물질로 실험실 내 연구에서 기본 발현수준이 높을수록 항암화학요법에 저항성이 크다고 보고되고 있다.2"9)방사선치료에 대해서 도 사람의 대장 종양 세포를 이용한 실험실 내 연구에서 p21WAFi, CIP1 유전자가 결손된 종양 세포주의 경우 유전자가 온전한 세포주에 비해 방사선에 의한 아포토시스의 유도가 많았고, 생체 내 실험에서는 p21WAF1/CIP1 유전자가 결손된 종양 세포주의 경우 유전자가 온전한 세포주에 비해 방사선 감수성이 높았다고 보고되었다.
보고되고 있다. 본 연구에서는 방사선에 의해 유도되 는 아포토시스의 정도가 많을수록 종양성 장지연이 길어지는 상관관계가 존재하였고(R=0.922) 이는 통계적으로도 의미가 있었다(p=0.026). 또한, 50% 종양 억제 선량과의 관계에서는 방사선에 의해 유도되는 아포토시스의 정도가 많을수록 50% 종양억제선량은 작아지는 경향이 나타났으나(R=-0.
아포토시스와 관련된 여러 유전물질의 기본 발현수준과50% 종양억제선량 간의 상관관계에서는 p21WAFgiPi과 p34 의 기본 발현수준만이 통계적 유의성을 보였다(Fig. 4). 이외에 p53, BAX, Bcl-2, Bcl-2/BAX, Bcl-xL, Bcl-xs、와는 통계적 유의성이나 상관관계의 경향을 찾을 수 없었다.
3). 이로써 방사선에 의해 유도되는 아포토시스의 양이 많을수록 방사선 감수성이 높음을 알 수 있었다.
070)을 보였다. 종양성장지연과의 관계에서는 방사선에 의해 유도되는 아포토시스의 양이 많을수록 종양성장지연이 오래되는 즉, 방사선에 민감한 경향을 나타내었고(R=0.922) 또한 통계적인 유의성(p=0.026)을 보였다(Fig. 3). 이로써 방사선에 의해 유도되는 아포토시스의 양이 많을수록 방사선 감수성이 높음을 알 수 있었다.
6) Gy, 80 Gy, 81 Gy이상으로 OCa-I에서 방사선 감수성이 가장 높았고 HCa-I 에서 가장 낮았다(Table 1). 종양성장지연은 동계 마우스 종양에 따라 OCa-I, MCa-K, FSa-Ⅱ, SCC-VⅡ, HCa-I에서 각각 26.9±4.3일, 15.5±1.6일, 10±3.3일, 8±3.0일, 7.4±2.6 일로 50% 종양억제선량의 결과에서와 같이 OCa-I의 경우가 방사선에 가장 민감하였고 HCa-I의 경우가 방사선에 가장 저항성이 높았다(Table 2). 방사선에 의해 유도된 아포토시스는 OCa-I에서만 1&2±3.

후속연구

결론적으로 방사선에 의해 유도된 아포토시스의 정도로 종양의 방사선 감수성을 예측하여 볼 수 있을 것으로 생각하며, 종양의 방사선 감수성을 예측할 수 있는 생물학적 표지자로 P21WAFI/CIP1 와 p34의 기본 발현수준이 이용될 수 있을 것으로 생각한다. 하지만 본 연구는 방사선 감수성이 서로 다른 동계 마우스 종양 5종류만을 사용한 결과이므로, 본 연구의 결과가 효과예측시험에 이용되기 위해서는 방사선 감수성이 다양한 더 많은 종류의 종양 세포주를 대상으로 하는 연구 및 실제 임상 연구를 통한 검증이 선행되어야 할 것으로 생각한다.
만약 종양의 방사선 감수성을 미리 예측할 수 있다면 조사하는 방사선량을 조절할 수 있고 방사선에 민감하지 않은 종양이라면 방사선치료 이외의 수술 및 항암화학요법 등의 다른 치료법을 선택하거나 방사선치료 방법을 변형시키는 등의 시도를 할 수도 있을 것이다. 따라서 종양의 방사선에 대한 감수성을 치료 이전에 알아보려는 노력이 다양하게 시도되어 왔다.
것으로 생각한다. 하지만 본 연구는 방사선 감수성이 서로 다른 동계 마우스 종양 5종류만을 사용한 결과이므로, 본 연구의 결과가 효과예측시험에 이용되기 위해서는 방사선 감수성이 다양한 더 많은 종류의 종양 세포주를 대상으로 하는 연구 및 실제 임상 연구를 통한 검증이 선행되어야 할 것으로 생각한다.

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저자의 다른 논문 :

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동의어: Packet Collision Rate

용어 설명 출처 목록 (6)

용어 설명: PCR은 세균 특이성이 있는 primer를 이용하여 적은 수의 세균이 있을지라도 쉽게 검출할 수 있는 유용한 방법이며, 이를 이용하여 구강 내 치면세균막이나 타액에서 직접 세균을 검출할 수 있게 되었다[8].

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