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문제 정의
- 몇몇 종류의 essential oile oxytocin과 유사한 물질을 갖고 있기 때문에 사용에 신중해야 한다는 보고도 있다Qucy, 2002). 본 실험은 항생제 BMD premix(Baci- tracin methylene disalicylate), 유기산 복합제인 Lacid((주) 은진인터내셔날) 그리고 essential oil 제품인 Imniunbcm ((주) 은진인터내셔날)이 육계에 미치는 영향을 비교 평가하기 위하여 생산성, 영양소 이용율, 혈액 성상, ND titer, IgG, 그리고 장내 미생물 균종 등을 조사하였다.
제안 방법
- 각 처리는 사양 시험 첨가구와 동일하되 대조구만 ND 백신 무접종의 negative 대조구를 두었다. 35일령에 모두 도계 하여 즉시 심장에서 혈액 5 mL씩 EDTA가 처리된 vacu- tainer에 채혈한 후 24시간 안에 혈액 분석기(HEMACYTE; OSI, Oxford Science, Inc) 를 이용하여 leukocytes 와 erythrocy- tes를 분석하였고, 1,500 rpm으로 30분간 원심 분리한 후 혈청 을 따로 분리 하여 ND Titei과 IgG 분석 전까지 냉 동 보관하였다. ND titer는 닭 ND 항체 검사용 진단 키트(CHEIL・ BIO Co, Ltd.
- , Korea)를 사용하여 ELISA reader(SEAC SIRIO S, Italy)로 측정하였다. IgG 분석은 Chicken IgG ELISA Quantitation Kit(BETHYL Laboratories, Inc. USA)를 이용하여 측정하였다.
- 35일령에 모두 도계 하여 즉시 심장에서 혈액 5 mL씩 EDTA가 처리된 vacu- tainer에 채혈한 후 24시간 안에 혈액 분석기(HEMACYTE; OSI, Oxford Science, Inc) 를 이용하여 leukocytes 와 erythrocy- tes를 분석하였고, 1,500 rpm으로 30분간 원심 분리한 후 혈청 을 따로 분리 하여 ND Titei과 IgG 분석 전까지 냉 동 보관하였다. ND titer는 닭 ND 항체 검사용 진단 키트(CHEIL・ BIO Co, Ltd., Korea)를 사용하여 ELISA reader(SEAC SIRIO S, Italy)로 측정하였다. IgG 분석은 Chicken IgG ELISA Quantitation Kit(BETHYL Laboratories, Inc.
- NRC 사양 표준(1998)에 준하여 CP 22%, ME 3, 100 kcal/kg 인 육계 전기 사료와 CP 19%, ME 3, 150 kcal/kg인 육계 후기사료를 제조하여 대조구로 사용하였다(Table 1). 첨가구에 첨가한 제제의 배합비와 조성분 함량은 Table 2와 같다.
- 5 mL씩 다리 근육에 접종하였다. 각 처리는 사양 시험 첨가구와 동일하되 대조구만 ND 백신 무접종의 negative 대조구를 두었다. 35일령에 모두 도계 하여 즉시 심장에서 혈액 5 mL씩 EDTA가 처리된 vacu- tainer에 채혈한 후 24시간 안에 혈액 분석기(HEMACYTE; OSI, Oxford Science, Inc) 를 이용하여 leukocytes 와 erythrocy- tes를 분석하였고, 1,500 rpm으로 30분간 원심 분리한 후 혈청 을 따로 분리 하여 ND Titei과 IgG 분석 전까지 냉 동 보관하였다.
- 선택 배지 및 배양 조건은 Table 3에 나타난 바와 같다. 배양 후 미생물의 수를 각 평판의 colony-for- ming unit(CFU)로 계산 후 logm으로 환산하였다.
- 사양 시험 종료 처리당 10수씩 경추탈골에 의해 도계한 후 ileocecal junction의 상부 10 cm씩 일정하게 절개하여 그 안에 있는 모든 내용물을 멸균된 용기에 담아 분석 전까지 -50℃에 보관하였다 채취한 장내용물 약 1g을 멸균된 15 mL test tube에 담고 멸균된 증류수 9 이를 첨가하여 희석 (10T)시 킨 후 1( ~ KT®까지 단계 적 으로 희 석 하였다. 세 종류의 선택 배지 평판에 희석된 샘플을 1 m씩 접종시키고 혐기적(GaPack System, BBL Microbiology System, Becton Dickinson & Co, Cockeysville, MD 2130, USA) 또는 호기적으로 배양하였다.
- 사양 시험과 동시에 대사 케이지에 수용한 병아리에 ND 백신(NOBILIS® NEWCAVAC, Intervet, Hland)을 시험 개시 후 2주와 4주에 각각 04 mL, 0.5 mL씩 다리 근육에 접종하였다. 각 처리는 사양 시험 첨가구와 동일하되 대조구만 ND 백신 무접종의 negative 대조구를 두었다.
- 4 m)에 완전임의 배치하였다. 사양 시험은 35일간 실시하였으며 시험기간 동안 물과 사료를 자유 채식시켰고 24시간 점등하였다.
- 1% 첨가구 등 4첨가구를 두었다. 사양 시험을 위하여 갓 부화한 육계 (Ross®종) 1,000수(암 . 수 각각 500수)를 공시하여 4처리 5반복, 반복 당 암 . 수 동수로 50수씩을 floor pen(가로: 2.
- 킨 후 1( ~ KT®까지 단계 적 으로 희 석 하였다. 세 종류의 선택 배지 평판에 희석된 샘플을 1 m씩 접종시키고 혐기적(GaPack System, BBL Microbiology System, Becton Dickinson & Co, Cockeysville, MD 2130, USA) 또는 호기적으로 배양하였다. 선택 배지 및 배양 조건은 Table 3에 나타난 바와 같다.
- 시험 구는 대 조구, BMD® premix(Bacitracin methylene disalicylate 2.5%) 0.1% 첨가구, Lactacid® 0.5% 첨가구, 그리고 Immunocin® 0.1% 첨가구 등 4첨가구를 두었다. 사양 시험을 위하여 갓 부화한 육계 (Ross®종) 1,000수(암 .
- 시험 원료와 분뇨 내 일반 성분 함량은 AOAQ1990) 방법에 의해 측정하였다. 시험 원료와 아미노산 함량은 샘플을 36시간 동안 110℃에서 6N HCl 로 가수분해한 후 원료와 분뇨의 아미노산을 column(HITACHI ion exchange column) 으로 분리한 다음 ninhydrin 시 약과 반응시켜 amino acid analy- zer(L-8800 High speed amino acid analyzer, HITACHI)로 분석하였다. 각 영양소 이용율은 {(섭취 건물중량 X % 영양소 함량 - 분뇨 건물 중량 X 분뇨 영양소 함량) /(섭취 건물 중량 X % 영양소 함량)} X 100으로 계산하였다.
- 영 양소 이용율을 측정하기 위하여 대사 실험을 실시하였다. 육계 병아리 40수를 20개의 대사 케이지(가로: 35.
- 육계 병아리 40수를 20개의 대사 케이지(가로: 35.5 cm, 세로: 45 cm, 높이: 55 cm)에 4처리 5반복으로 반복당 2수 (암 . 수 각 1수씩)씩 배치하여 사양 시험 4주령에 배치하여 3일간 적응 기간이 경과한 후 3일간 전분 채취법으로 실시하였다. 시험 원료와 분뇨 내 일반 성분 함량은 AOAQ1990) 방법에 의해 측정하였다.
- 체중과 사료 섭취량은 전기(0~2주), 후기(3~5주)로 나누어 처리구별로 측정하였으며 사료 요구율(사료 섭취량 / 증체량)을 산출하였다. 생산지수는 (출하시 평균체중 X 생존율 / 출하일령 X 사료 요구율) X 100으로 해서 산출하였다.
대상 데이터
- Essential oile 식물성 천연원료로서 무독성, 체내 무잔류성, 병원균의 내성 이 나타나지 않아 최근 문제가 되고 있는 항생제를 대체할 물질로 많은 연구가 진행되고 있다. 따라서 본 실험에서 사용한 Immunocin은 Kilmora lavan 에서 추출한 berberine chloride, Echinacea 에서 추출한 chichoric acid, grapefruit seed에서 추출한 bioflavonoid로 구성된 혼합제이다. Essential oile 사료 섭취, 소화효소 분비, 면역 기능 향상 작용이 있으며(Adams, 1999; Wenk, 2003) 육계의 소장에서 괴사성 장염의 원인균인 Cl.
데이터처리
- 자료를 SAS(1995) GLM(General Linear Model) Procedure를 이용하여 분석하였으며, F-test 결과 유의성이 있을 경우 첨가구 평균간의 차이를(F<0.05) Duncan's multiple range test로 검정하였다.
이론/모형
- 수 각 1수씩)씩 배치하여 사양 시험 4주령에 배치하여 3일간 적응 기간이 경과한 후 3일간 전분 채취법으로 실시하였다. 시험 원료와 분뇨 내 일반 성분 함량은 AOAQ1990) 방법에 의해 측정하였다. 시험 원료와 아미노산 함량은 샘플을 36시간 동안 110℃에서 6N HCl 로 가수분해한 후 원료와 분뇨의 아미노산을 column(HITACHI ion exchange column) 으로 분리한 다음 ninhydrin 시 약과 반응시켜 amino acid analy- zer(L-8800 High speed amino acid analyzer, HITACHI)로 분석하였다.
성능/효과
- 05). 0~2주 기간의 사료 섭취 량은 항생제구가 가장 높았으나, 0~5주 전 기간에서는 대조구가 가장 높았다(F<0.05). 0~2주 기간의 사료 요구율은 유의차가 없었으나>0.
- 0~2주기간의 증체량은 항생제구가 유의하게 높았고(F<0.05), 0~5 주 전 기간에도 항생제구가 가장 높았으나, Lactacid®구는 다른 첨가구들에 비해 유.의하게 낮았다(F<0.
- Lactobacilli 수는 첨가구 간에 유의 차가 없었지 만 Lactacid® 구가 높은 경향을 보였다. Margarita 등(2004) 육계에서 유기산을 급여한 결과 대조구에 비해 유기산 첨가구의 Lactobacilli 수가 높았다고 발표하였다.
- ND titere ND vaccine을 접 종하지 않는 negative control 과 ND 접종한 모든 첨가구별 간에 유의차가 있었으나(F<0.05) ND 접종한 모든 첨가구 간에는 유의차가 없었다.
- Glick 등(1982)은 육계에서 불활성 단백질 전구체인 pepsinogen이 acidification0] 되면 peptide bond가 분열되어 활성형 pepsin으로 전환되어 단백질 소화율이 증가된다고 하였고, Hernandez 등(2004)은 육계 실험에서 essential oil고} Labiatae extract를 급여한 결과 starter &d에서는 단백질 소화율이 개선되지 않았으나 fmi-sher fbed의 fecal digestibility는 개선되었다고 발표하였으며, Lee 등(2003)은 essential oil인 CRINA POUTRY를 육계에 급여하면 단백질 소화율이 개선된다는 발표와 일치하였다. NFE 이용율은 생산성 개선 효과는 없었으나 Lactacid®구가 가장 높았다<0.05).
- Margarita 등(2004) 육계에서 유기산을 급여한 결과 대조구에 비해 유기산 첨가구의 Lactobacilli 수가 높았다고 발표하였다. 괴사성 장염 을 일으키는 Cl. perfringens 수는 negative contr이구가 가장 높았으며(<0.05) 첨가구 간에는 Immunocin®구와 Lactacid®구가 낮은 경향을 보였다. Garrido 등(2004)은 육계에 유기산을급여한 실험에서 대조구에 비해 유기산을 급여 한 첨가구의 CL perfringens 수가 가장 적었다고 하였고 Mitsch 등(2004)은 육계실험 결과 2종의 blended essential oil을 급여하여 Cl.
- 만성 염증 시 증가하는 것으로 알려진 호중구(NE), 자가면역질환이나 급성 감염증 회복기에 증가하는 림프구(LY)의 수 그리고 stress indicator(NE/LY)는 첨가구 간에 유의차가 없었지만 negative control구가 가장 낮았고 첨가구들 중에서는 Immunocin®구가 가장 낮고 Lactacid®구가 가장 높은 경향을 보였다. 또한 화농성 질환이나 조직괴사시 증가하는 단핵구 (MO)나 기생충 감염이나 면역성 과민 반응시 증가되는 호산구(EO) 그리고 EO와 공조하며 유사한 반응을 보이는 호염구(이의 경우도 첨가구들 중 Immunocin®구가 낮은 경향을 보였고, Lactacid®구가 높은 경향이었다. Erythrocytes와 관련된 수치들은 첨가구 간에 유의한 차이가 없었다.
- 초기 염증시 증가하는 것으로 알려진 백혈구), 급 . 만성 염증 시 증가하는 것으로 알려진 호중구(NE), 자가면역질환이나 급성 감염증 회복기에 증가하는 림프구(LY)의 수 그리고 stress indicator(NE/LY)는 첨가구 간에 유의차가 없었지만 negative control구가 가장 낮았고 첨가구들 중에서는 Immunocin®구가 가장 낮고 Lactacid®구가 가장 높은 경향을 보였다. 또한 화농성 질환이나 조직괴사시 증가하는 단핵구 (MO)나 기생충 감염이나 면역성 과민 반응시 증가되는 호산구(EO) 그리고 EO와 공조하며 유사한 반응을 보이는 호염구(이의 경우도 첨가구들 중 Immunocin®구가 낮은 경향을 보였고, Lactacid®구가 높은 경향이었다.
- Brown과 Southem(1985)은 1%의 citric acid와 ascorbic acid를 육계에 급여했을 때 생산성에 미치는 영향이 없었다고 발표하였다. 본 실험에서도 Lactacid®구가 대조 구에 비해 사료 요구율이나 생산지수에 있어 유의한 차이가 없었다. Hernandez 등(2004)은 육계에서 항생제인 avilamycin 과 essential oil 첨가실험에서 첨가구들이 대조구에 비해 생산성 에는 유의차가 없었다고 보고하였으나, 석종찬 등(2003) 은 essential oil과 항생제를 첨가했을 때 증체 량과 사료 섭취량이 대조구에 비해 증가하였으며 사료 요구율은 essential oil, 항생제, 대조구 순으로 낮았다고 보고하였다.
- 05). 육계에서 생산성을 종합적으로 평가하는 생산지수의 경우 Immunocin®구와 항생제 구가 각각 305.5와 304.5로 대조구 284.1과 Lactacid®구 279.2보다 유의하게 높았다(F<0.05).
- 같다. 혈중 IgG 농도는 ND vaccine을 접종하지 않는 ne gative control 이 ND 접종한 모든 첨가구보다 유의적으로 높았으며 (P<0.05) 첨가구 간에는 Immunocin®구가 다른 첨가구보다 높았다(<0.05). 홍성진 등(2001)은 생약제인 Miracle® 20을 육계에게 급여한 결과 본 실험과 유사한 결과를 발표하였다.
후속연구
- Immunocin ®구는 적혈구 용적(HCT 또는 PCV)과 평균 적혈구 용적 (MCV)에서 타 처리구들에 비해.높은 경향이 있었고 평균 적혈구 혈색소량(MCH)과 평균 적혈구 색소 농도(MCHC)는 낮은 경향이 있는데 이에 대한 임상학적 의의는 추후 심도 있게 검토되어야 할 과제다.
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