양파추출물이 알코올성 지방간에 미치는 영향을 알아보고자 흰쥐를 meal-feeding 방법으로 모든 쥐가 매일 같은 양의 식이를 공급받는 실험조건 하에서 에탄올 없이 정상식이만 섭취한 대조군, 에탄올과 정상식이와 함께 투여한 에탄올군, 양파추출물과 에탄올을 정상식이와 함께 투여한 에탄올양파추출물군으로 5마리씩 3그룹으로 나누어 사육하였다. 양파 추출물을 28일간 흰쥐에게 먹여 체중의 변화, 장기 무게 변화, 혈청 중의 glutamate oxaloacetate transaminase (GOT), glutamate pyruvate transaminase (GPT), alkaline phosphatase (ALP), gamma-glutamyl transpeptidase (GTP), total bilirubin, total protein, total cholesterol, triglyceride를 생화학적 검사를 통해 양파추출물이 에탄올로 유도된 지방간을 예방, 개선하는지 연구하였다. 대조군과 실험군 둘다 연구 시작부터 끝까지 지속적으로 체중 증가를 보였으나 그룹 간에 유의적인 차이를 보이지 않았다. 장기 무게는 각각의 그룹 간장, 신장, 심장, 비장, 고환 등의 무게에서 유의적인 차이점이 없었다. 혈중의 지방 변화를 보면 에탄올군에서는 혈중 중성지방이 유의적으로 증가하였고, 에탄올양파추출물군에서는 혈중 중성지방이 유의적으로 낮게 나타났다. 그러나 대조군과 에탄올양파추출물군 간에는 유의점이 없었다. GOT, GPT, ALP, GTP 의 4주간 실험한 혈중 농도에서 GOT와 GPT가 에탄올군에서 유의적으로 높았고, 에탄올양파추출물군에서는 유의적으로 낮게 나타났다. 이상의 실험 결과들을 종합해 볼 때, 양파추출물을 에탄올 식이와 함께 흰쥐에게 28일간 공급하였을 때, 지방간 관련 대표적인 혈액 지표인, 중성지방, GOT, GPT의 농도가 유의적으로 감소한다는 것을 이 실험을 통해서 확인할수 있었다.
양파추출물이 알코올성 지방간에 미치는 영향을 알아보고자 흰쥐를 meal-feeding 방법으로 모든 쥐가 매일 같은 양의 식이를 공급받는 실험조건 하에서 에탄올 없이 정상식이만 섭취한 대조군, 에탄올과 정상식이와 함께 투여한 에탄올군, 양파추출물과 에탄올을 정상식이와 함께 투여한 에탄올양파추출물군으로 5마리씩 3그룹으로 나누어 사육하였다. 양파 추출물을 28일간 흰쥐에게 먹여 체중의 변화, 장기 무게 변화, 혈청 중의 glutamate oxaloacetate transaminase (GOT), glutamate pyruvate transaminase (GPT), alkaline phosphatase (ALP), gamma-glutamyl transpeptidase (GTP), total bilirubin, total protein, total cholesterol, triglyceride를 생화학적 검사를 통해 양파추출물이 에탄올로 유도된 지방간을 예방, 개선하는지 연구하였다. 대조군과 실험군 둘다 연구 시작부터 끝까지 지속적으로 체중 증가를 보였으나 그룹 간에 유의적인 차이를 보이지 않았다. 장기 무게는 각각의 그룹 간장, 신장, 심장, 비장, 고환 등의 무게에서 유의적인 차이점이 없었다. 혈중의 지방 변화를 보면 에탄올군에서는 혈중 중성지방이 유의적으로 증가하였고, 에탄올양파추출물군에서는 혈중 중성지방이 유의적으로 낮게 나타났다. 그러나 대조군과 에탄올양파추출물군 간에는 유의점이 없었다. GOT, GPT, ALP, GTP 의 4주간 실험한 혈중 농도에서 GOT와 GPT가 에탄올군에서 유의적으로 높았고, 에탄올양파추출물군에서는 유의적으로 낮게 나타났다. 이상의 실험 결과들을 종합해 볼 때, 양파추출물을 에탄올 식이와 함께 흰쥐에게 28일간 공급하였을 때, 지방간 관련 대표적인 혈액 지표인, 중성지방, GOT, GPT의 농도가 유의적으로 감소한다는 것을 이 실험을 통해서 확인할수 있었다.
Studies have shown that onions exhibit a wide variety of health-promoting properties. The health benefits by the onion have been attributed to its ability to scavenge free radicals, to reduce blood lipids, to lower blood pressure, and to inhibit platelet aggregation. This study was performed to inve...
Studies have shown that onions exhibit a wide variety of health-promoting properties. The health benefits by the onion have been attributed to its ability to scavenge free radicals, to reduce blood lipids, to lower blood pressure, and to inhibit platelet aggregation. This study was performed to investigate whether onion extract supplementation would affect the blood markers of ethanol-induced fatty liver in rats. Initially, male Sprague-Dawley rats were housed singly in a room of controlled temperature and lighting and had free access to a nutritionally adequate AIN-93G and deionized water. The rats were trained for meal feeding to prevent a decline in food intake, as inevitably observed following an ethanol feeding. After the training period, rats were weight-matched and assigned to the following three groups: 1) a control group, fed the AIN-93G diet alone (control); 2) an ethanol group, fed the AIN-93G diet with ethanol at 4 g/day/kg body weight (ethanol); and 3) an onion group, fed the AIN-93G diet with ethanol plus supplemental freeze-dried onion powder at 500 mg/day/rat (ethanol + onion). All three group were meal-fed 7.0 g of their respective diets at 0900 h and 7.5 g at 1600 h for 28 days. At 0, 2, and 4 wk, blood was collected via the orbital sinus and organs were collected following overnight food deprivation. Both control and experimental groups continually gained weight throughout the study. No significant differences in the weights of the liver, kidneys, heart, spleen, and testis were observed. However, the serum level of triglycerides was significantly increased by ethanol but significantly decreased by onion extract. The activities of serum glutamate oxaloacetate transaminase (GOT), glutamate pyruvate transaminase (GPT) at 4 wk were significantly increased by ethanol feeding but were significantly decreased by onion supplementation. However, no differences among groups were observed in the serum levels of alkaline phosphatase, gamma-glutamyl transpeptidase, bilirubin, and protein. These results provide that onion extract favorably affect alcoholic fatty liver by decreasing the serum concentration of triglyceride and the activities of GOT and GPT.
Studies have shown that onions exhibit a wide variety of health-promoting properties. The health benefits by the onion have been attributed to its ability to scavenge free radicals, to reduce blood lipids, to lower blood pressure, and to inhibit platelet aggregation. This study was performed to investigate whether onion extract supplementation would affect the blood markers of ethanol-induced fatty liver in rats. Initially, male Sprague-Dawley rats were housed singly in a room of controlled temperature and lighting and had free access to a nutritionally adequate AIN-93G and deionized water. The rats were trained for meal feeding to prevent a decline in food intake, as inevitably observed following an ethanol feeding. After the training period, rats were weight-matched and assigned to the following three groups: 1) a control group, fed the AIN-93G diet alone (control); 2) an ethanol group, fed the AIN-93G diet with ethanol at 4 g/day/kg body weight (ethanol); and 3) an onion group, fed the AIN-93G diet with ethanol plus supplemental freeze-dried onion powder at 500 mg/day/rat (ethanol + onion). All three group were meal-fed 7.0 g of their respective diets at 0900 h and 7.5 g at 1600 h for 28 days. At 0, 2, and 4 wk, blood was collected via the orbital sinus and organs were collected following overnight food deprivation. Both control and experimental groups continually gained weight throughout the study. No significant differences in the weights of the liver, kidneys, heart, spleen, and testis were observed. However, the serum level of triglycerides was significantly increased by ethanol but significantly decreased by onion extract. The activities of serum glutamate oxaloacetate transaminase (GOT), glutamate pyruvate transaminase (GPT) at 4 wk were significantly increased by ethanol feeding but were significantly decreased by onion supplementation. However, no differences among groups were observed in the serum levels of alkaline phosphatase, gamma-glutamyl transpeptidase, bilirubin, and protein. These results provide that onion extract favorably affect alcoholic fatty liver by decreasing the serum concentration of triglyceride and the activities of GOT and GPT.
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문제 정의
본 연구에서는 양파추출물의 보충이 에탄올로 유도된 지방간에 미치는 영향을 완화함으로써 보호 효과가 가능한지 평가하기 위해서, 실험군과 대조군의 식이섭취량을 통제한 상태(매일 같은 양의 식이를 하루에 두 번씩 급여) 에서, 동결 건조한 양파 추출물을 4 주간 흰쥐에게 투여하였다. 체중의 변화, 주요 장기 무게, 혈청 중의 gutamate oxaloacetate transaminase (GOT), glutamate pyruvate transaminase (GPT), alkaline phosphatase (ALP), gammaglutamyl transpeptidase (GTP), total bilirubin, total protein, total 나lolesterol, triglyceride 농도 변화를 분석하여, 양파주출물이 에탄올로 유도된 지방간의 생화학적 지표에 미치는 영향을 연구하고자 하였다.
양파 추출물을 28일간 흰쥐에게 먹여 체중의 변화, 장기 무게 변화, 혈청 중의 glutamate oxaloacetate transaminase (GOT), glutamate pyruvate transaminase (GPT), alkaline phosphatase (ALP), gamma-glutamyl transpeptidase (GTP), total bilirubin, total protein, total cholesterol, triglyceride 를생화학적 검사를 통해 양파추출물이 에탄올로 유도된 지방간을 예방, 개선하는지 연구하였다. 대조군과 실험군 둘 다 연구 시작부터 끝까지 지속적으로 체중 증가를 보였으나 그룹 간에 유의적인 차이를 보이지 않았다.
체중의 변화, 주요 장기 무게, 혈청 중의 gutamate oxaloacetate transaminase (GOT), glutamate pyruvate transaminase (GPT), alkaline phosphatase (ALP), gammaglutamyl transpeptidase (GTP), total bilirubin, total protein, total 나lolesterol, triglyceride 농도 변화를 분석하여, 양파주출물이 에탄올로 유도된 지방간의 생화학적 지표에 미치는 영향을 연구하고자 하였다.
가설 설정
1)Values are means 土 SD, n = 5.
1)Values are means 土 SD, n = 5.
2) Values in a row not sharing a superscript differ (P < 0.05).
제안 방법
4주 동안 같은 동물에서 혈액 변화 성상을 개별적으로 추적하기 위해서, 혈액 채취 후 동물을 희생시키지 않고 '안구혈액채취법 (retro-orbital sinus bleeding), 을 이용하여 2주마다 동물 마취 후, 같은 동물에서 일정양의 공복 혈액을 채취하였다. 채취된 혈액은 혈액응고 반응을 시킨 후에 원심분리기(2, 000 x g for 10 min at 3℃) 를 이용, 혈청 시료를 분리하였다 4주 째, 채혈 직후, 각 동물의 주요 장기를 적출, 무게를 측정하였다.
0 g/kg 체중으로 계산을 하여 아침, 저녁으로 각각 나누어식이에 섞어 공급을 하였다 하루에 두 번 일정량의 정해진식이를 공급하여, 식이섭취 차이로 인해서 발생될 수 있는 변수 (compounding effect) 를 제거하는데 최적의 식이 공급방식으로 알려진 ‘meal feeding, 방법으로 4주 동안 공급하였다. 그래서 에탄올 섭취로 인한 식이섭취 감소에 따른 영향을 제거하기 위해서 동물성장에 영향을 주지 않는 공급량인 14.5 g/day 으로 4주 동안 공급을 하였다. 그리고 하루에 두 번씩, 아침 8:00 am 에 7 g, 오후 3:30 pm 에 7.
5 g/day 으로 4주 동안 공급을 하였다. 그리고 하루에 두 번씩, 아침 8:00 am 에 7 g, 오후 3:30 pm 에 7.5 g 씩, 총 14.5 g 을 4주 동안 정해진 시간에 식이공급을 하였다이 mealing feeding 에 의한 식이공급 방법으로, 일반적으로 알코올 강제 투여 동물실험에서 발견되는 식이섭취 감소 경향이 에탄올의 투여에도 불구하고 4주 실험기간 내내 대부분 1시간 안에 식이 섭취가 완료되는 것을 확인하였다 매주 체중증가량 및 체중 변화량을 측정하기 위해서 4주간에 걸쳐 각 동물의 체중을 측정, 기록하였다.
시까지 사육을 하였다. 실험식이 공급 전날 체중에 따른 난괴법으로 5마리씩 3군으로 나누어, 표준식이만 공급받는 동물군을 대조군 (control) 으로 정하였으며, 에탄올과 표준 식이를 공급받는 동물군을 에탄올군 (ethanol, E), 그리고 에탄올과 동결건조 양파추출물(500 mg) 을 표준식이와 함께 혼합, 공급된 동물군을 에탄올양파추출물군 (ethanol+onion, E+onion) 으로 설정하였다(17).
양파추출물이 알코올성 지방간에 미치는 영향을 알아보고자 흰쥐를 meal-feeding 방법으로 모든 쥐가 매일 같은 양의 식이를 공급받는 실험조건 하에서 에탄올 없이 정상식이만 섭취한 대조군, 에탄올과 정상식이와 함께 투여한 에탄올 군, 양파추출물과 에탄올을 정상식이와 함께 투여한에탄올양파추출물군으로 5마리씩 3그룹으로 나누어 사육하였다. 양파 추출물을 28일간 흰쥐에게 먹여 체중의 변화, 장기 무게 변화, 혈청 중의 glutamate oxaloacetate transaminase (GOT), glutamate pyruvate transaminase (GPT), alkaline phosphatase (ALP), gamma-glutamyl transpeptidase (GTP), total bilirubin, total protein, total cholesterol, triglyceride 를생화학적 검사를 통해 양파추출물이 에탄올로 유도된 지방간을 예방, 개선하는지 연구하였다.
채취된 혈액은 혈액응고 반응을 시킨 후에 원심분리기(2, 000 x g for 10 min at 3℃) 를 이용, 혈청 시료를 분리하였다 4주 째, 채혈 직후, 각 동물의 주요 장기를 적출, 무게를 측정하였다.
첨가된 ethanol(30% ethanol, Sigma Chemical, U.S.A.) 함량은 지방간 유도 시에 일반적으로 많이 적용되는 함량인 4.0 g/kg 체중으로 계산을 하여 아침, 저녁으로 각각 나누어식이에 섞어 공급을 하였다 하루에 두 번 일정량의 정해진식이를 공급하여, 식이섭취 차이로 인해서 발생될 수 있는 변수 (compounding effect) 를 제거하는데 최적의 식이 공급방식으로 알려진 ‘meal feeding, 방법으로 4주 동안 공급하였다. 그래서 에탄올 섭취로 인한 식이섭취 감소에 따른 영향을 제거하기 위해서 동물성장에 영향을 주지 않는 공급량인 14.
혈청 콜레스테롤 농도는 효소적 방법을 적용한 kit(아산제약)을 이용하여 측정하였다. 혈청 HDL-콜레스테롤 함량은 먼저 HDL fraction을 분획, 침전시킨 후, 효소 비색법(아산제약)을 이용, 상기한 방법으로 측정하였다.
혈청의 GOT 와 GPT 의 농도 측정은 아산제약이 상업적으로 제공하는 kit 를 이용하여 측정하였다. 총 빌리루빈의 양은 Michaelsson 변법을 이용해서 측정하였다(아산제약).
대상 데이터
총 빌리루빈의 양은 Michaelsson 변법을 이용해서 측정하였다(아산제약). GTP 와 ALP 농도는 상업적 kit(아산제약)을 이용해서 측정하였다. 총단백질농도는 BCA 방법을 이용한 kit(Pierce Co.
동물실험에 사용된 동결건조 양파추출물은 시중에서 구입한 양파를 과즙쥬스기 (Philips 전자, Korea) 를 이용, 완전히 마쇄하여, cheese cloth로 침전물을 일차적으로 제거하였다. 2차적으로 원심분리기(2000 x g for 10 min) 를 이용하여 침전물을 제거 후 나머지를 채취하였다(17).
실험에 사용된 동물은 4주령 (체중 약 75 g) male Sprague- Dawley 쥐(중앙실험동물)이며, 4주 동안 창원대학교 식품영양학과 동물사육실(실내온도 22 ±2℃, 상대습도 55 + 5%, 12 h light-dark cycle) 에서 자동급수장치가 겸비된 개인별 cage로 자유롭게 공급된 증류수와 표준식이로 실험 식이 공급 시까지 사육을 하였다. 실험식이 공급 전날 체중에 따른 난괴법으로 5마리씩 3군으로 나누어, 표준식이만 공급받는 동물군을 대조군 (control) 으로 정하였으며, 에탄올과 표준 식이를 공급받는 동물군을 에탄올군 (ethanol, E), 그리고 에탄올과 동결건조 양파추출물(500 mg) 을 표준식이와 함께 혼합, 공급된 동물군을 에탄올양파추출물군 (ethanol+onion, E+onion) 으로 설정하였다(17).
데이터처리
실험의 결과들은 평균치와 표준편차 (means + SD) 로 나타내었고, SPSS package program software를 이용하여 ANOVA 로 검증한 후 p < 0.05 수준에서 Scheffe's multiple range test 로 비교분석을 실시하였다.
이론/모형
동물실험에 사용된 식이는 미국영양학회 (American Institute of Nutrition, AIN, USA) 가 추천하는 AIN-93G 분말식이를구입하여 사용하였다 (18). 이 식이의 mineral 함량은 egg white 대체로 조정이 되었으며, 지방으로 soybean oil을 사용하여 표준식이로 하였다.
제공하는 kit 를 이용하여 측정하였다. 총 빌리루빈의 양은 Michaelsson 변법을 이용해서 측정하였다(아산제약). GTP 와 ALP 농도는 상업적 kit(아산제약)을 이용해서 측정하였다.
GTP 와 ALP 농도는 상업적 kit(아산제약)을 이용해서 측정하였다. 총단백질농도는 BCA 방법을 이용한 kit(Pierce Co., U.S.A.) 을 이용해서 측정하였다.
이용하여 측정하였다. 혈청 HDL-콜레스테롤 함량은 먼저 HDL fraction을 분획, 침전시킨 후, 효소 비색법(아산제약)을 이용, 상기한 방법으로 측정하였다. Non HDL-콜레스테롤의 계산은 총 콜레스테롤에서 HDL-콜레스테롤을 뺀 값으로 계산되었다.
Non HDL-콜레스테롤의 계산은 총 콜레스테롤에서 HDL-콜레스테롤을 뺀 값으로 계산되었다. 혈청 중성지방 (triglyceride) 농도는 효소 비색법을 이용하여 측정하였다(아산제약).
성능/효과
4주 동안 동결 건조한 양파추출물을 표준 식이와 함께 급여한 결과로 인한 체중 변화는 Fig. 1에 나타난 바와 같다대조군과 두 실험군 모두 식이 종료 시점까지 지속적인 체중 증가율을 보였으며, 체중증가율이 대조군이 329.8 + 16.0 g으로 23%, 에탄올군이 337.9 + 18.5 g으로 25%, 에탄올 양파추출물 군이 332.2 + 13.7 g으로 24%의 증가율을 보였다. 대조군과 양 실험군 사이에 유의적인 차이점이 없었다.
것으로 보고하였다. 4주간에 걸친 본 연구에서는 대조군보다는 높은 농도이나 에탄올과 양파를 함께 투여한 동물군에서는 양파에 의해서 유의적으로 낮게 나타나 위의 연구 결과들과 어느 정도 일치함을 발견할 수 있다. 총콜레스테롤의 경우, An과 Kim(20) 의 연구에서 양파실험군이 대조군보다 낮게 나타났다는 보고도 있다.
3와 같이 나타났다. 4주째에 나타난 혈중 중성 지방농도는 대조군, 에탄올군, 그리고 에탄올 양파추출물 군에서 각각 73.7 ±9.4 mg/dL, Ⅲ.6 ±19.3 mg/dL, 89.87 土 15.4 mg/dL 으로 나타났다. 이러한 결과는 중성지방의 농도가 대조군에 비해서 에탄올군에서 유의적으로 증가되었으나에탄올 양파추출물군 에서와 같이 증가된 농도가 양파추출물 투여에 의해서 유의적으로 감소되었음을 볼 수 있었다.
그러나 대조군과 에탄올양파추출물군 간에는 유의점이 없었다. GOT, GPT, ALP, GTP 의 4주간 실험한 혈중 농도에서 GOT 와 GPT 가 에탄올군에서 유의적으로 높았고, 에탄올 양파추출물군 에서는 유의적으로 낮게 나타났다. 이상의 실험 결과들을 종합해 볼 때, 양파추출물을 에탄올 식이와 함께 흰쥐에게 28일간 공급하였을 때, 지방간 관련 대표적인 혈액 지표인, 중성지방, GOT, GPT 의 농도가 유의적으로 감소한다는 것을 이 실험을 통해서 확인할 수 있었다.
그러나 혈중 ALP 농도는 대조군이 23.03 ±7.07 U/dL이며, 에탄올군은 27.33 ±5.56 U/dL이며, 에탄올 양파추출물 군은 24.36 ±4.97 U/dL으로 나타나 대조군과 실험군 사이에 유의적인 차이가 없었다. 이는 GOT 나 GPT 경우와 달리, 양파추출물 공급이 에탄올양파추출군에서 ALP 활성 억제작용이 유의적이지 않았다는 것을 시사하고 있다.
Kang 과 Kang 의 연구 (22)에서도 양파 건분의 첨가식이가 혈중 중성지방을 감소시키고, 콜레스테롤식이로 인한 혈중 콜레스테롤농도의 증가를 억제한다고 보고하였다. 위의 연구 결과들을 통해 양파에 함유되어 있는 주요 생리활성 성분이 혈중 콜레스테롤과 중성지질의 농도를 감소시킴으로써 지방간 생성을 억제하고 완화함을 알 수 있다. 그러나 본 연구에서는 혈중 콜레스테롤 농도가 동물군들 사이에서 유의적인 차이가 없는 것으로 나타났는데, 다른 연구자(22)의 연구에서도 대조군과 실험군 사이에 유의적인 차이가 보이지 않았다고 보고와 견주어 볼 때, 본 연구 결과와 어느 정도 일치함을 알 수 있다.
73 U/dL로 분석되었다. 이 또한 GOT 농도와 유사하게, 대조군에 비해서 에탄올군에서 유의적으로 증가되었으나 양파추출물을 에탄올과 함께 공급하면 GPT 농도가 양파에 의해서 유의적으로 감소되는 것을 발견할 수 있다. 그러나 에탄올양파추출물군과 대조군의 비교에서는 유의 적인 차이가 없었다(Fig.
4 mg/dL 으로 나타났다. 이러한 결과는 중성지방의 농도가 대조군에 비해서 에탄올군에서 유의적으로 증가되었으나에탄올 양파추출물군 에서와 같이 증가된 농도가 양파추출물 투여에 의해서 유의적으로 감소되었음을 볼 수 있었다. 그러나 에탄올양파추출물군의 감소된 중성지방의 농도는 대조군의 그것과 비교해서 차이가 없었다.
34 U/dL로 나타났다. 이러한 결과는 혈중 GOT 농도가 대조군에 비해서 에탄올군에서 유의적으로 증가되었으나 에탄올 양파추출물 군에서와 같이 증가된 농도가 양파추출물 투여에 의해서 유의적으로 감소되는 것을 발견할 수 있다. 그러나 에탄올양파추출물군의 감소된 GOT 농도는 비교군의 그것과 비교해서 차이가 없었다.
GOT, GPT, ALP, GTP 의 4주간 실험한 혈중 농도에서 GOT 와 GPT 가 에탄올군에서 유의적으로 높았고, 에탄올 양파추출물군 에서는 유의적으로 낮게 나타났다. 이상의 실험 결과들을 종합해 볼 때, 양파추출물을 에탄올 식이와 함께 흰쥐에게 28일간 공급하였을 때, 지방간 관련 대표적인 혈액 지표인, 중성지방, GOT, GPT 의 농도가 유의적으로 감소한다는 것을 이 실험을 통해서 확인할 수 있었다.
혈중 GTP 함량은 대조군이 2.10 ±2.12 U/L이며, 에탄올 군이 1.86 ±0.28 U/L이며, 에탄올양파추출물군은 1.50 ±0.17 U/L으로 나타나 역시 대조군과 실험군 사이에 유의적인 차이가 없었다.
장기 무게는 각각의 그룹 간장, 신장, 심장, 비장, 고환 등의 무게에서 유의적인 차이점이 없었다. 혈중의 지방 변화를 보면 에탄올 군에서는 혈중 중성지방이 유의적으로 증가하였고, 에탄올양파추출물군 에서는 혈중 중성지방이 유의적으로 낮게 나타났다. 그러나 대조군과 에탄올양파추출물군 간에는 유의점이 없었다.
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