예로부터 약용으로 이용되어온 헛개나무 잎을 이용하여 항돌연변이원성 및 암세포 성장 저해효과를 조사하였다. 헛개나무 잎의 돌연변이 억제 효과를 Ames test로 검색한 결과, 헛개나무 잎의 메탄올 추출물과 분획물 그 자체의 돌연변이원성은 없었으며, 헛개나무 잎의 메탄올 추출물은 직접 변이원인 N-methyl-N#-nitro-N-nitroso-guanidine(MNNG)와 간접변이원인 benzo(a)pyrene(B(a)P)의 돌연변이 유발성을 크게 저해하였다. 또한 메탄올 추출물에서 분리한 분획물들도 유의성 있는 돌연변이 억제효과를 나타내었으며 특히 헥산, 클로르포름, 부탄올 분획물의 경우는 물 분획물보다 MNNG와 B(a)P에 대해서 더 큰 항돌연변이 효과를 나타내었다. 그리고 헛개나무 잎의 메탄올 추출물과 그 분획물들의 사람의 암세포주인 HT29와 HepG2에 대한 성장 저해 효과를 MTT assay로 검토한 결과 헛개나무 잎의 메탄올 추출물과 헥산, 클로로포름 분획물들이 높은 암세포 성장 저해 효과를 나타내었으며 농도 의존적인 경향을 보였다. 그러나 사람의 정상 간세포인 Chang cell에서는 세포독성이 나타나지 않았다. 이상의 실험 결과로 헛개나무 잎은 발암물질로부터 생체를 보호하는 물질을 함유하고 있을 것으로 사료된다.
예로부터 약용으로 이용되어온 헛개나무 잎을 이용하여 항돌연변이원성 및 암세포 성장 저해효과를 조사하였다. 헛개나무 잎의 돌연변이 억제 효과를 Ames test로 검색한 결과, 헛개나무 잎의 메탄올 추출물과 분획물 그 자체의 돌연변이원성은 없었으며, 헛개나무 잎의 메탄올 추출물은 직접 변이원인 N-methyl-N#-nitro-N-nitroso-guanidine(MNNG)와 간접변이원인 benzo(a)pyrene(B(a)P)의 돌연변이 유발성을 크게 저해하였다. 또한 메탄올 추출물에서 분리한 분획물들도 유의성 있는 돌연변이 억제효과를 나타내었으며 특히 헥산, 클로르포름, 부탄올 분획물의 경우는 물 분획물보다 MNNG와 B(a)P에 대해서 더 큰 항돌연변이 효과를 나타내었다. 그리고 헛개나무 잎의 메탄올 추출물과 그 분획물들의 사람의 암세포주인 HT29와 HepG2에 대한 성장 저해 효과를 MTT assay로 검토한 결과 헛개나무 잎의 메탄올 추출물과 헥산, 클로로포름 분획물들이 높은 암세포 성장 저해 효과를 나타내었으며 농도 의존적인 경향을 보였다. 그러나 사람의 정상 간세포인 Chang cell에서는 세포독성이 나타나지 않았다. 이상의 실험 결과로 헛개나무 잎은 발암물질로부터 생체를 보호하는 물질을 함유하고 있을 것으로 사료된다.
The effect of Hovenia dulcis Thumb leaves on the mutagenicity in salmonella assay and inhibitory effects on the growth of cancer cells were studied. On antimutagenicity as evaluated by Ames test, the extract and fractions of Hovenia dulcis Thumb leaves had no effect on the mutagenicity by themselves...
The effect of Hovenia dulcis Thumb leaves on the mutagenicity in salmonella assay and inhibitory effects on the growth of cancer cells were studied. On antimutagenicity as evaluated by Ames test, the extract and fractions of Hovenia dulcis Thumb leaves had no effect on the mutagenicity by themselves. However, methanol extract and fractions from Hovenia dulcis Thumb showed strong inhibitory effect on the mutagenesis induced by N-methyl-N#-nitro-N-nitroso-guanidine (MNNG) and benzo(a)pyrene (B(a)P). Among the solvent fractions of methanol extract, the hexane, chloroform and butanol fraction exhibited stronger inhibitory activity against MNNG and B(a)P induced mutagenesis than water fraction. For anticancer effects, Hovenia dulcis Thumb loaves extract and fractions against cancer cell lines including HepG2 and HT29 were investigated. The methanol extract, the hexane fraction and the chloroform fraction of Hovenia dulcis Thumb leaves inhibited growth of cancer cells but they had no effect on the cytotoxicity of normal human liver cells under the same conditions.
The effect of Hovenia dulcis Thumb leaves on the mutagenicity in salmonella assay and inhibitory effects on the growth of cancer cells were studied. On antimutagenicity as evaluated by Ames test, the extract and fractions of Hovenia dulcis Thumb leaves had no effect on the mutagenicity by themselves. However, methanol extract and fractions from Hovenia dulcis Thumb showed strong inhibitory effect on the mutagenesis induced by N-methyl-N#-nitro-N-nitroso-guanidine (MNNG) and benzo(a)pyrene (B(a)P). Among the solvent fractions of methanol extract, the hexane, chloroform and butanol fraction exhibited stronger inhibitory activity against MNNG and B(a)P induced mutagenesis than water fraction. For anticancer effects, Hovenia dulcis Thumb loaves extract and fractions against cancer cell lines including HepG2 and HT29 were investigated. The methanol extract, the hexane fraction and the chloroform fraction of Hovenia dulcis Thumb leaves inhibited growth of cancer cells but they had no effect on the cytotoxicity of normal human liver cells under the same conditions.
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문제 정의
1에서와 같이 시료와 농도에 관계없이 14% 이하의 낮은 세포독성을 나타냈으며 특히, 시료농도 100 ug/mL 첨가 시 Chang 세포에 대해서는 헛개나무 잎 추출물 및 분획물의 처리에 따른 세포 증식 저해효과가 나타나지 않았다. 따라서 헛개나무 잎 메탄올 추출물 및 분획물들이 사람의 간암세포 HepG2와 결장암 세포 HT29 성장에 미치는 영향을 검토하였다. 그 결과 Table 5에서와 같이 헛개나무 잎의 메탄올 추출물은 두 암세포에 대한 저 해효과가 높았으며 이 같은 효과는 첨가되는 추출물의 농도에 비례하면서 증가하였다.
이와 같이 헛개나무의 근피, 수피, 열매에 대해서는 생리활성물질의 분리가 이루어지며 그 효능에 대한 연구가 활발히 진행되고 있으나 잎에 대한 생리활성 효과는 거의 없는 상태이다. 이에 본 연구에서는 헛개나무잎 추출물의 항돌연변이원성 및 항암효과를 검토하기 위하여, 헛개나무 잎으로부터 메탄올 추출물과 그 분획물을 조제하여 Ames test로서 항돌연변이원성을 확인한 후 사람의 암세포에 대한 성장 저해 효과를 관찰하였다.
제안 방법
이것을 top agar 2 mL와 혼합한 후 최소평판배지 (minimal 읺ucose agarplates)에 골고루 도말하였다. 37℃에서 48시간 배양한 후 배지 위의 복귀변이주(revertant)의 콜로니 수를 계수하였다. 체내 대사 활성 체계인 microsomal fraction 즉 S9 mixture 제조는 Maron과 Ames(16)의 방법으로 제조하였다.
특히 헛개나무 잎 추출물 및 분획물들이 직 . 간접 발암물질에 대하여 암의 개시단계에서 일어날 수 있는 돌연변이 유발 억제 효과를 가졌으므로, 암 연구 검색방법으로 이용되고 있는 MTT 정 량분석 법을 이용하여 암세포에 대한 이들의 직접적인 효과를 살펴보았다.
따라서 헛개나무 잎 추출물의 돌연변이 억제작용을 검토하기 위하여 직 . 간접 발암물질을 첨가하여 이들 발암물질에 대한 억제효과를 살펴보았다.
5 g)로 얻었다. 그 잔여물을 분획여두에서 다시 클로르포름, 부탄올로 각각 3번씩 추출하여 클로르포름(6.0 g), 부탄올 분획 물(5.5 g)로 하고 남은 잔여물은 물 분획 물(5.2 g)로 하였으며 모든 추출물은 농축한 후 동결 건조하여 -30℃에 보관하면서 실험에 사용하였다.
돌연변이 유발 억제효과를 나타내는 헛개나무 잎 추출물들의 특성을 자세히 조사하고자 용매의 극성을 이용한 용매분획을 실시하여 헥산, 클로르포름, 부탄올, 물 분획물로 세분화하여 항돌연변이 효과를 관찰하였다. 그 결과 이들 분획물들은 MNNG의 돌연변이를 억제시켰으며 특히, 시료농도 10% 첨가 시 헥산, 클로르포름, 부탄올 분획물은 각각.
실시하였다. 먼저 배양된 세포에서 배지를 제거한 다음 PBS를 첨가하여 가볍게 섞은 후 PBS를 다시 제거하고 0.25% trypsin-EDTA를 첨가하여 37℃에서 5분간 배양하여 세포가 culture dish의 바닥으로부터 완전히 분리되었는지 현미경으로 관찰한 후, culture 배지를 첨가하여 잘 혼합한 다음 세포수를 lxlO6 cells/m丄로 조정하여 실험에 사용하였다. 한편 헛개나무 잎의 메탄올 추출물과 분획물들은 각각 적 당한 농도로 DMS。에 용해 시킨 후 membrane filter 로 여과한 후 사용하였다.
먼저 헛개나무 잎 메탄올 추출물 및 분획물들의 항암 효과가 암세포에 대해 선택적으로 작용해 나타낸 효과인지 혹은 모든 세포를 죽여 항암 효과를 나타낸 효과인지를 확인하기 위하여, 정상 간세포인 Chang cell에 대하여 농도별 세포독성을 살펴보았다. 그 결과 Fig.
그리고 사람의 정상 간세포인 Chang cell을 사용하였다. 세포 배양시 에는 HT29와 Chang 세포는 RPMI-1640 배지에 10% FBS (10% -heat-inactivated fetal bovine serum) 와 1% antibiotics (penicillin G/streptomyCin) 을 가하여 배양하였으며 HepG2 세포는 DMEM 배지에 10% FBS, 1% antibiotics을 첨가하여 배양하였다. 이들 세포주는 37℃의 5% CO에 적응시켜 배양하였으며 2~3일마다 계대 배양하면서 실험에 사용하였다.
예로부터 약용으로 이용되어온 헛개나무 잎을 이용하여 항돌연변이 원성 및 암세포 성장 저해효과를 조사하였다. 헛개나무 잎의 돌연변이 억제 효과를 Ames test로 검색한 결과, 헛개나무 잎의 메탄올 추출물과 분획물 그 자체의 돌연변이 원성은 없었으며, 헛개나무 잎의 메탄올 추출물은 직접 변이 원인 N-methyl-N' -nitro-N-nitrosc广guanidine(MNNG) 와 간접변이원인 benzo(a)pyrene(B(a)P)의 돌연변이 유발성을 크게 저해하였다.
체내 대사 활성 체계인 microsomal fraction 즉 S9 mixture 제조는 Maron과 Ames(16)의 방법으로 제조하였다. 한 시료에 대하여 3개의 최소평판배지를 사용하였으며, 변이원에 대한 억제효과는 변이원 물질의 활성에 대한 시료의 억제율(inhibition %)로 나타내었다. 한편 시료와.
활성 높은 친전자성 물질로 분해된 후 alkyl ion을 형성하여 DNA 염기의 nucleophilic site를 알킬화하고 DNA 절단, 염색체 이상의 변이를 일으키는 것으로 알려져있다(18). 헛개나무 잎을 먼저 메탄올로 추출하여 S. Typhimurium TA100 균주에서 MNNG에 대한 항돌연변이 효과를 검토하였다. 그 결과, Table 1에서와 같이 메탄올 추출물 2.
대상 데이터
그리고 사람의 정상 간세포인 Chang cell을 사용하였다. 세포 배양시 에는 HT29와 Chang 세포는 RPMI-1640 배지에 10% FBS (10% -heat-inactivated fetal bovine serum) 와 1% antibiotics (penicillin G/streptomyCin) 을 가하여 배양하였으며 HepG2 세포는 DMEM 배지에 10% FBS, 1% antibiotics을 첨가하여 배양하였다.
Ames 교수로부터 제공 받아 사용하였다. 돌연변이 유발원 인 N-methyl-N'-nitro-N-nitroso-guanidine(MNNG), benzo(a)pyrene(B(a)P) 은 Sigma(St. Louis, USA)사로부터 구입하였으며 , 기타시 약들은 특급 또는 일급을 사용하였다.
본 실험에 사용한 헛개나무 잎은 경북 의성군 봉양면 백석농업합명 회사에서 건조된 것을 구입하여 이물질을 제거한 후 사용하였고, Salmonella Typhimurium TA98과 TA100 은 미국 캘리포니아 대학의 B. N. Ames 교수로부터 제공 받아 사용하였다. 돌연변이 유발원 인 N-methyl-N'-nitro-N-nitroso-guanidine(MNNG), benzo(a)pyrene(B(a)P) 은 Sigma(St.
세포주 및 세포배양: 본 실험에 사용한 세포주는 암세포로 사람의 간암세포 HepG2(hepatoma cell, human)와 결장암세포 HT29(colon carcinoma cell, human) cell을 사용하였다. 그리고 사람의 정상 간세포인 Chang cell을 사용하였다.
데이터처리
대조군과 각 시료에 대한 실험 결과는 SAS program을 이용하여 Duncan's multiple range test로 분석하였다.
이론/모형
Cytotoxicity 측정: 동물세포에 대한 시료의 cytotoxicity를 측정하기 위하여 Green 등(1刀의 방법에 따라 MTT assay를 실시하였다. 먼저 배양된 세포에서 배지를 제거한 다음 PBS를 첨가하여 가볍게 섞은 후 PBS를 다시 제거하고 0.
Maron과 Ames(16)의 방법에 의해 실험하였다. 즉, 미리 멸균시 킨 capped tube에 시료 50 UL, 돌연변이 원 50 iiL, S9 mix 500 11L(직접변이원의 경우, 0.
37℃에서 48시간 배양한 후 배지 위의 복귀변이주(revertant)의 콜로니 수를 계수하였다. 체내 대사 활성 체계인 microsomal fraction 즉 S9 mixture 제조는 Maron과 Ames(16)의 방법으로 제조하였다. 한 시료에 대하여 3개의 최소평판배지를 사용하였으며, 변이원에 대한 억제효과는 변이원 물질의 활성에 대한 시료의 억제율(inhibition %)로 나타내었다.
성능/효과
또한 헛개나무 잎 분획물들의 암세포 성장 억제효과를 실험한 결과, 헥산, 클로르포름 분획물은 높은 암세포 성장 저해효과를 나타내었으며 시료농도에 비례하여 저해율이 증가하였다. HepG2에 대해 시료 농도 100 ug/mL 첨가 시 74%, 84%의 각각 높은 저 해 효과를 보였으며 또한 HT29에 대해서도 78%, 91%의 높은 저해 효과를 나타내었다(Table 6, 7). 그러나 부탄올과 물 분획물은 HepG2와 HT29에 대해 암세포 증식 억제 효과가 관찰되지 않았다.
또한 B(a)P에 대해서는 TA98과 TA100 균주 모두에서 비슷한 억 제 활성을 나타내 었으며 분획 물의 첨 가농도가 증가할수록 억제효과도 증가하였다. TA98 균주에서는 헥산, 클로르포름, 부탄올 분획물을 10% 농도로 첨가 시 각각 90%, 96%, 76%의 강한 저해효과를 나타내었으며 TA100 균주에서도각각 79%, 87%, 71%의 강한 억 제효과를 나타내었다. 그리고 물 분획 물은 TA98과 TA100에서 시료를 10% 농도로 첨가 시 각각 46%, 34%의 보다 낮은 저해효과를 나타내어 MNNG에서와 마찬가지로 B(a)P을 돌연변이 유발물질로 사용하였을 경우에도 비슷한 경향을 나타내었다(Table 4).
이상에서 알수 있듯이 헛개나무 잎 메탄올 추출물 및 분획물들은 직 .간접 변이원에 대하여 비슷한 억제효과를 나타내었으며 그중에서도 메탄올 추출물로부터 분획한 헥산, 클로르포름, 부탄올이 높은 억제 활성을 보였으나 물 분획물에서도 효과가 나타났으므로 헛개나무 잎의 활성물질은 한 성분이 아니라여러 활성 물질이 존재하여 작용한 것으로 사료된다. 이러한 결과는 이들 추출물에 함유된 성분들이 세포 내에서 변이원에 의한 DNA의 손상을 억제함으로써 생체 암 발생과정 중발암 초기단계의 억 제 인자로 작용할 가능성을 나타내 주고 있다.
살펴보았다. 그 결과 Fig. 1에서와 같이 시료와 농도에 관계없이 14% 이하의 낮은 세포독성을 나타냈으며 특히, 시료농도 100 ug/mL 첨가 시 Chang 세포에 대해서는 헛개나무 잎 추출물 및 분획물의 처리에 따른 세포 증식 저해효과가 나타나지 않았다. 따라서 헛개나무 잎 메탄올 추출물 및 분획물들이 사람의 간암세포 HepG2와 결장암 세포 HT29 성장에 미치는 영향을 검토하였다.
따라서 헛개나무 잎 메탄올 추출물 및 분획물들이 사람의 간암세포 HepG2와 결장암 세포 HT29 성장에 미치는 영향을 검토하였다. 그 결과 Table 5에서와 같이 헛개나무 잎의 메탄올 추출물은 두 암세포에 대한 저 해효과가 높았으며 이 같은 효과는 첨가되는 추출물의 농도에 비례하면서 증가하였다. 간암세포 HepG2의 경우 시료농도 1 pg/mL, 10 pg/mL, 50 iig/mL 및 100 ug/mL 농도에 대해 각각 37%, 57%, 61% 및 76%의 성장 저해효과를 나타내었으며 또한 결장암 세포 HT29에 대해서도 시료농도 1 Iig/mL, 10 pg/mL, 50 iig/mL 및 100 ug/mL 농도에 대해 각각 37%, 56%, 67% 및 80%의 저해 효과를 나타내었다.
항돌연변이 효과를 관찰하였다. 그 결과 이들 분획물들은 MNNG의 돌연변이를 억제시켰으며 특히, 시료농도 10% 첨가 시 헥산, 클로르포름, 부탄올 분획물은 각각.77%, 81%, 71%의 높은 돌연변이 억제효과를 나타내었으나 물 분획물은 29%의 낮은 저해효과를 나타내었다(Table 3). 또한 B(a)P에 대해서는 TA98과 TA100 균주 모두에서 비슷한 억 제 활성을 나타내 었으며 분획 물의 첨 가농도가 증가할수록 억제효과도 증가하였다.
Typhimurium TA100 균주에서 MNNG에 대한 항돌연변이 효과를 검토하였다. 그 결과, Table 1에서와 같이 메탄올 추출물 2.5%, 5% 및 10%의 시료 농도에서 각각 75%, 82% 및 83%의 높은 저해효과를 나타내었으며 농도를 증가시켜도 농도 의존적인 항돌연변이원성은 크게 나타나지 않았다. 이러한 결과는 참취 뿌리 에탄올 추출물이 MNNG에 대해 시료농도 증가에 따른 변화가 거의 없다는 보고와, 유사한 경향을 나타내었다(19).
또한 메탄올 추출물에서 분리한 분획물들도 유의성 있는 돌연변이 억제효과를 나타내었으며 특히 헥산, 클로르포름, 부탄올 분획물의 경우는 물 분획물보다 MNNG와 B(a)P에 대해서 더 큰 항돌연변이 효과를 나타내었다. 그리고 헛개나무 잎의 메탄올 추출물과 그 분획물들의 사람의 암세포주인 HT29와 HepG2에 대한 성장 저해 효과를 MTT assay로 검토한 결과 헛개나무 잎의 메탄올 추출물과 헥산, 클로로포름 분획물들이 높은 암세포 성장 저해효과를 나타내었으며 농도 의존적 인 경향을 보였다. 그러나 사람의 정상 간세포인 Chang cell에서는 세포독성이 나타나지 않았다.
있다(20). 따라서 헛개나무 잎의 B(a)P에 대한 항돌연변이 원성을 S. Typhimurium TA98과 TA100에 대하여 검토한 결과, 두 균주 모두에서 비슷한 억제활성을 나타내었으며 툭히, 10%의 시료 농도에서 TA98의 경우는 92%, TA100의 경우는 90%의 높은 저 해효과를 나타내 었다(Table 2). 이와 같이 헛개나무 잎 메탄올 추출물은 직접 및 간접 변이원에 대해 높은 항돌연변이 효과가 있음을 확인할 수 있었다.
77%, 81%, 71%의 높은 돌연변이 억제효과를 나타내었으나 물 분획물은 29%의 낮은 저해효과를 나타내었다(Table 3). 또한 B(a)P에 대해서는 TA98과 TA100 균주 모두에서 비슷한 억 제 활성을 나타내 었으며 분획 물의 첨 가농도가 증가할수록 억제효과도 증가하였다. TA98 균주에서는 헥산, 클로르포름, 부탄올 분획물을 10% 농도로 첨가 시 각각 90%, 96%, 76%의 강한 저해효과를 나타내었으며 TA100 균주에서도각각 79%, 87%, 71%의 강한 억 제효과를 나타내었다.
헛개나무 잎의 돌연변이 억제 효과를 Ames test로 검색한 결과, 헛개나무 잎의 메탄올 추출물과 분획물 그 자체의 돌연변이 원성은 없었으며, 헛개나무 잎의 메탄올 추출물은 직접 변이 원인 N-methyl-N' -nitro-N-nitrosc广guanidine(MNNG) 와 간접변이원인 benzo(a)pyrene(B(a)P)의 돌연변이 유발성을 크게 저해하였다. 또한 메탄올 추출물에서 분리한 분획물들도 유의성 있는 돌연변이 억제효과를 나타내었으며 특히 헥산, 클로르포름, 부탄올 분획물의 경우는 물 분획물보다 MNNG와 B(a)P에 대해서 더 큰 항돌연변이 효과를 나타내었다. 그리고 헛개나무 잎의 메탄올 추출물과 그 분획물들의 사람의 암세포주인 HT29와 HepG2에 대한 성장 저해 효과를 MTT assay로 검토한 결과 헛개나무 잎의 메탄올 추출물과 헥산, 클로로포름 분획물들이 높은 암세포 성장 저해효과를 나타내었으며 농도 의존적 인 경향을 보였다.
간암세포 HepG2의 경우 시료농도 1 pg/mL, 10 pg/mL, 50 iig/mL 및 100 ug/mL 농도에 대해 각각 37%, 57%, 61% 및 76%의 성장 저해효과를 나타내었으며 또한 결장암 세포 HT29에 대해서도 시료농도 1 Iig/mL, 10 pg/mL, 50 iig/mL 및 100 ug/mL 농도에 대해 각각 37%, 56%, 67% 및 80%의 저해 효과를 나타내었다. 또한 헛개나무 잎 분획물들의 암세포 성장 억제효과를 실험한 결과, 헥산, 클로르포름 분획물은 높은 암세포 성장 저해효과를 나타내었으며 시료농도에 비례하여 저해율이 증가하였다. HepG2에 대해 시료 농도 100 ug/mL 첨가 시 74%, 84%의 각각 높은 저 해 효과를 보였으며 또한 HT29에 대해서도 78%, 91%의 높은 저해 효과를 나타내었다(Table 6, 7).
간접 변이원에 대하여 비슷한 억제효과를 나타내었으며 그중에서도 메탄올 추출물로부터 분획한 헥산, 클로르포름, 부탄올이 높은 억제 활성을 보였으나 물 분획물에서도 효과가 나타났으므로 헛개나무 잎의 활성물질은 한 성분이 아니라여러 활성 물질이 존재하여 작용한 것으로 사료된다. 이러한 결과는 이들 추출물에 함유된 성분들이 세포 내에서 변이원에 의한 DNA의 손상을 억제함으로써 생체 암 발생과정 중발암 초기단계의 억 제 인자로 작용할 가능성을 나타내 주고 있다.
그러나 사람의 정상 간세포인 Chang cell에서는 세포독성이 나타나지 않았다. 이상의 실험 결과로 헛개나무 잎은 발암물질로부터 생체를 보호하는 물질을 함유하고 있을 것으로 사료된다.
Typhimurium TA98과 TA100에 대하여 검토한 결과, 두 균주 모두에서 비슷한 억제활성을 나타내었으며 툭히, 10%의 시료 농도에서 TA98의 경우는 92%, TA100의 경우는 90%의 높은 저 해효과를 나타내 었다(Table 2). 이와 같이 헛개나무 잎 메탄올 추출물은 직접 및 간접 변이원에 대해 높은 항돌연변이 효과가 있음을 확인할 수 있었다.
헛개나무 잎 추출물과 그 분획물 자체가 돌연변이원 유발성을 나타내는지 또는 균주들에■대해 독성을 나타내는지를 확인하기 위하여 Ames test로 검토해 본 결과 자료로는 나타내지 않았지만, 시료농도의 증가에 따른 his+ revertant colony 수의 증감이 없는 것으로 보아 본 실험에 사용한 추출물의 농도에서 시료 자체에 의한 돌연변이원성은 없는 것으로 나타났다. 따라서 헛개나무 잎 추출물의 돌연변이 억제작용을 검토하기 위하여 직 .
헛개나무 잎의 돌연변이 억제 효과를 Ames test로 검색한 결과, 헛개나무 잎의 메탄올 추출물과 분획물 그 자체의 돌연변이 원성은 없었으며, 헛개나무 잎의 메탄올 추출물은 직접 변이 원인 N-methyl-N' -nitro-N-nitrosc广guanidine(MNNG) 와 간접변이원인 benzo(a)pyrene(B(a)P)의 돌연변이 유발성을 크게 저해하였다. 또한 메탄올 추출물에서 분리한 분획물들도 유의성 있는 돌연변이 억제효과를 나타내었으며 특히 헥산, 클로르포름, 부탄올 분획물의 경우는 물 분획물보다 MNNG와 B(a)P에 대해서 더 큰 항돌연변이 효과를 나타내었다.
후속연구
이는 감잎의 암세포 증식억제효과가 헥산, 클로르포름 및 에틸아세테이트에 잘 용해되는 지용성 성분들에 의한 작용이라는 보고(22)도 있으며 또한 마늘의 항돌연변이 및 항암 연구에서 지용성 획분들이 효과를 나타내며 methyl linoleate를 그 주요 성분으로 보고한 바 있다(23). 이상의 결과에서 헛개나무 잎의 메탄올 추출물 및 헥산, 클로르포름 분획물은 사람의 암세포주인 HepG2 와 HT29세포의 증식을 억제하거나 세포 독성효과를 나타내어 세 王수가 감소된 것으로 사료되며 또한 헛개나무 잎의 항암 활성 성분은 주로 지용성이라고 생각되며 추후 이들 획분에서 활성물질의 분리 및 동정 등 지속적인 연구가 필요하리라 사료된다.
참고문헌 (23)
American Cancer Society. 1997. Cancer facts and figures
Singleton P, Sainsbury D. 1987. Dictionary of molecular biology and microbiology. 2nd ed. John Wiley & Sons, New York
Doll R, Pert R. 1997. The cause of cancer. J Natl Cancer Inst 66: 1191-1195
Kada T, Inoue T, Morita K, Namiki M. 1986. Dietary desmutagens. In Genetic toxicology of the diet. Knudsen I, ed. Alan R. Liss Inc., New York. p 245
Micozzi MS, Tangrea JA. 1989. General introduction; relation for the nutritional prevention of cancer. In Nutrition and cancer prevention. Moon TE, Micozzi MS, eds. Marcel Dekker, Inc., New York. p 3
Ong TM, Whong WZ, Stewart S, Brockman HE. 1986. Chlorophyllin; a potent antimutagen against environmental and dietary complex mixture. Mutat Res 173: 111-115
Murakami A, Jiwajinda S, Ohigashi H. 1992. Screening for in vitro antitumor promoting activities of edible plants from Thailand. Cancer Letters 95: 139-146
John TP, Sharad SS, Mohammad SS, Robert TT, Yogesh C. 1998. Mechanisms of anticarcinogenic properties on curcumin; the effect of curcumin on glutathione linked detoxification enzymes in rat liver. Int J Biochem Cell Biol 30: 445-456
Jang M, Cai L, Udeani GO, Slowing KV, Thomas CF, Beecher CW, Fong HH, Farnsworth NR, Kinghorn AD, Mehta RG, Moon RC, Pezzuto JM. 1997. Cancer chemopreventive activity of resveratrol, a natural product derived from grapes. Science 275: 218-220
Goodman GE, Yen YP, Cox TC, Crowlny J. 1987. Effect of verapamil on in vitro cytotoxin and vinblastine in human tumor cell. Cancer Res 47: 2295-2304
Kim HJ, Lee IS, Lee KR. 1999. Antimutagenic & anticancer effects of Ramaria botrytis rick extrcts. J Kor Soc Food Sci Nutr 28: 1321-1325
An SW, Kim YG, Kim MG, Lee BI, Lee SH, Kwon HI, Hwang B, Lee HY. 1999. Comparison of hepatic detoxification activity and reducing serum alcohol concentration of Hovenia dulsis Thumb and Alnus japonica Steud. K J Medical Corp Sci 7: 263-268
Kim MG, Chung YT, Lee JH, Park YS, Shin MK, Kim DH, Lee HY. 2000. Hepatic detoxification activity and reduction of serum alcohol concentration of Hovenia dulsis Thumb from Korea and China. K J Medical Corp Sci 8: 225-233
Maron DM, Ames BN. 1983. Revised methods for the Salmonella mutagenicity test. Mutat Res 113: 173-215
Green LM, Reade JL, Ware CF. 1984. Rapid colometric assay for cell viability; Application to the quantitation of cytotoxic and growth inhibitory lymphokines. J Immunological Methods 70: 257-263
Hwangbo HJ, Ham SS. 1999. Antimutagenic and cytotoxic effects of Aster scaber root ethanol extract. Kor J Food Sci Technol 31: 1065-1070
Gelboin HV. 1980. Benzo(a)pyrene metabolism, activation carcinogensis; role and regulation of mixed function oxidases and related enzymes. Physiol Rev 60: 1107-1166
Ji JH, Kim MN, Chung CK, Ham SS. 2000. Antimutagenic and cytotoxic effects of Aster scaber root ethanol extract. Kor J Food Sci Technol 29: 322-328
Moon SH. 2002. Inhibitory effct of persimmon leaves on the mutagenicity in spore rec assay and on the growth of human cancer cells. Kor J Food & Nutr 15: 23-28
Park KY, Kim SH, Suh MJ, Chung HY. 1991. Effects of garlic on the mutagenicity in Salmonella assay system and on the growth of HT-29 human colon carcinoma cells. Kor J Food Sci Technol 23: 370-374
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