목적 : 본 연구는 소아신장질환에서 소변 내 산화질소(NO)의 배설이 변화 되는가 또한 소변 내 NO가 소아 신장질환의 조직학적 원인 및 섬유화 여부를 추정하는데 사용될 수 있는가를 알아보았다. 방법 : 고대구로병원 소아신장 클리닉에 다니는 방광 요관 역류(VUR) 환아 16명, 미세 변화신 증후군(MCNS) 환아 32명을 대상으로 하였다. 대조군은 신장 질환이 없는 환아 12명으로 하였다. 소변은 채취 즉시 원심 분리한 후, 상청액을 분리하여 Griess 반응으로 아질산염$(NO_2)$과 질산염$(NO_3)$농도를 측정하였고 Jaffe 방법으로 크레아티닌(Cr)을 측정하여 소변 내$(NO_2+NO_3)/Cr$ 농도비를 구하여 질환별로 집단 간의 차이를 비교하였다. 또한, MCNS 군에서는 재발 및 단백뇨의 정도와, VUR 군에서는 신반흔의 유무 및 역류의 정도와 소변 내$(NO_2+NO_3)/Cr$ 비율의 차이를 각각 비교하였다. 결과 : VUR군과 MCNS 환아 군 모두 대조군에 비해 소변 내$(NO_2+NO_3)/Cr$ 값이 통계적으로 의미 있게 높았다. MCNS군의 경우 진단 후 첫 1년간 4회 이상 재발했던 빈번 재발 군 이 4회 미만의 군보다, 단백뇨 1+ 이상이었던 군이 단백뇨 trace 이하인 군보다 소변 내$(NO_2+NO_3)/Cr$ 값이 통계적으로 의미 있게 높았다. VUR군에서는 신장 반흔이 있는 경우가 없는 경우보다 소변 내 $(NO_2+NO_3)/Cr$ 값이 통계적으로 의미 있게 높았으나, 역류의 정도와는 관련이 없었다. 결론 : VUR과 MCNS의 발생, 특히 단백뇨의 발생기전에 NO가 관여할 가능성이 있으며, 요로 감염 후 신장 내 반흔의 형성에도 NO가 관여할 것으로 사료된다.
목적 : 본 연구는 소아신장질환에서 소변 내 산화질소(NO)의 배설이 변화 되는가 또한 소변 내 NO가 소아 신장질환의 조직학적 원인 및 섬유화 여부를 추정하는데 사용될 수 있는가를 알아보았다. 방법 : 고대구로병원 소아신장 클리닉에 다니는 방광 요관 역류(VUR) 환아 16명, 미세 변화신 증후군(MCNS) 환아 32명을 대상으로 하였다. 대조군은 신장 질환이 없는 환아 12명으로 하였다. 소변은 채취 즉시 원심 분리한 후, 상청액을 분리하여 Griess 반응으로 아질산염$(NO_2)$과 질산염$(NO_3)$농도를 측정하였고 Jaffe 방법으로 크레아티닌(Cr)을 측정하여 소변 내$(NO_2+NO_3)/Cr$ 농도비를 구하여 질환별로 집단 간의 차이를 비교하였다. 또한, MCNS 군에서는 재발 및 단백뇨의 정도와, VUR 군에서는 신반흔의 유무 및 역류의 정도와 소변 내$(NO_2+NO_3)/Cr$ 비율의 차이를 각각 비교하였다. 결과 : VUR군과 MCNS 환아 군 모두 대조군에 비해 소변 내$(NO_2+NO_3)/Cr$ 값이 통계적으로 의미 있게 높았다. MCNS군의 경우 진단 후 첫 1년간 4회 이상 재발했던 빈번 재발 군 이 4회 미만의 군보다, 단백뇨 1+ 이상이었던 군이 단백뇨 trace 이하인 군보다 소변 내$(NO_2+NO_3)/Cr$ 값이 통계적으로 의미 있게 높았다. VUR군에서는 신장 반흔이 있는 경우가 없는 경우보다 소변 내 $(NO_2+NO_3)/Cr$ 값이 통계적으로 의미 있게 높았으나, 역류의 정도와는 관련이 없었다. 결론 : VUR과 MCNS의 발생, 특히 단백뇨의 발생기전에 NO가 관여할 가능성이 있으며, 요로 감염 후 신장 내 반흔의 형성에도 NO가 관여할 것으로 사료된다.
Purpose : Nitric oxide(NO) is a very potent vasodilator synthesized from L-arginine by endothelial cells. We investigated whether urinary NO excretion was altered in various renal diseases in children and whether urinary NO excretion could be used in predicting pathologic causes and fibrosis in rena...
Purpose : Nitric oxide(NO) is a very potent vasodilator synthesized from L-arginine by endothelial cells. We investigated whether urinary NO excretion was altered in various renal diseases in children and whether urinary NO excretion could be used in predicting pathologic causes and fibrosis in renal diseases in children. Methods : We recruited 48 patients(32 minimal change nephrotic syndrome[MCNS] and 16 vesicoureteral reflux[VUR] patients from the pediatric renal clinic in Korea University Guro Hospital. We measured the concentration of nitrite$(NO_2)$ and nitrate$(NO_3)$ by Griess reaction and that of creatinine(Cr) by Jaffe method in randomized spot urines. We then analyzed the urinary$(NO_2+NO_3)/Cr$ ratios and compared the values between each patient group. Urinary $(NO_2+NO_3)/Cr$ ratios were also evaluated according to the recurrence and the degree of proteinuria at sampling in the MCNS group and compared according to the presence of renal scarring and the grade of reflux in the VUR group. Results : The ratios of urinary$(NO_2+NO_3)/Cr$ were significantly increased in the VUR and MCNS groups, as compared to the control group. In the MCNS group, a higher level of urine $(NO_2+NO_3)/Cr$ was observed In frequent relapse patients(relapse over four times within one year after first diagnosis) and the patients with severe proteinuria at sampling, respectively. The VUR group with renal scars also showed a higher level of urinary$(NO_2+NO_3)/Cr$ compared to that without scars. Conclusions : In summary, VUR may play a role in the pathogenesis of VUR and MCNS. NO also seems to affect proteinuria and renal scar formation. (J Korean Soc Pediatr Nephrol 2007;11:24-31)
Purpose : Nitric oxide(NO) is a very potent vasodilator synthesized from L-arginine by endothelial cells. We investigated whether urinary NO excretion was altered in various renal diseases in children and whether urinary NO excretion could be used in predicting pathologic causes and fibrosis in renal diseases in children. Methods : We recruited 48 patients(32 minimal change nephrotic syndrome[MCNS] and 16 vesicoureteral reflux[VUR] patients from the pediatric renal clinic in Korea University Guro Hospital. We measured the concentration of nitrite$(NO_2)$ and nitrate$(NO_3)$ by Griess reaction and that of creatinine(Cr) by Jaffe method in randomized spot urines. We then analyzed the urinary$(NO_2+NO_3)/Cr$ ratios and compared the values between each patient group. Urinary $(NO_2+NO_3)/Cr$ ratios were also evaluated according to the recurrence and the degree of proteinuria at sampling in the MCNS group and compared according to the presence of renal scarring and the grade of reflux in the VUR group. Results : The ratios of urinary$(NO_2+NO_3)/Cr$ were significantly increased in the VUR and MCNS groups, as compared to the control group. In the MCNS group, a higher level of urine $(NO_2+NO_3)/Cr$ was observed In frequent relapse patients(relapse over four times within one year after first diagnosis) and the patients with severe proteinuria at sampling, respectively. The VUR group with renal scars also showed a higher level of urinary$(NO_2+NO_3)/Cr$ compared to that without scars. Conclusions : In summary, VUR may play a role in the pathogenesis of VUR and MCNS. NO also seems to affect proteinuria and renal scar formation. (J Korean Soc Pediatr Nephrol 2007;11:24-31)
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문제 정의
본 연구에서는 미세변화형 신증후군과 방광 요관 역류 환아에서 소변 내 NO의 배설에 유의한 변화가 있는가를 살펴보았고, 특히 신증후군에 있어서는 단백뇨의 정도와 재발횟수 등에 따른 소변 내 NO의 배설의 변화를 알아보았으며 방광 요관 역류에서는 역류의 정도와 신반흔 유무에 따른 소변 내 NO변화를 분석하였다. 즉, 소변 내 NO가 소아 신장질환의 조직학적 원인 및 섬유화 여부를 추정하는데 사용될 수 있는가를 알아보기 위해 이번 연구를 시행하게 되었다.
내 NO변화를 분석하였다. 즉, 소변 내 NO가 소아 신장질환의 조직학적 원인 및 섬유화 여부를 추정하는데 사용될 수 있는가를 알아보기 위해 이번 연구를 시행하게 되었다.
제안 방법
, Brea, CA, USA) 자동분석기를 이용하여 측정하였다. 각 환자 군과 대조군의 소변 내(NQj+NOG/Cr비율을 비교하였으며 MCNS 환아군에서는 재발횟수 및 단백뇨의 정도에 따른 상관관계를, VUR군에서는 신장 반흔 유무와 방광 요관 역류의 정도에 따른 소변 내 (NO2+NO3)/Cr의 차이를 비교분석하였다. 신장반흔은 요로감염 후 첫 1주 및 3개월 후에 DMSA 신스캔을 시행하여 마지막 검사에서 양성인 경우에 신 반흔으로 간주하였으며 국소성 병변 없이 매끄러운 윤곽을 동반한 신위축.
5% phosphoric acid를 1:1:3의 비율로 섞은 것)을 혼합 하였을 때 소변 내(NO2+NO3)의 농도가 높을수록 발색이 진하게 되어 광학적 밀도가 증가하는 원리를 이용한 것이다. 발색시약에 반응시킨 시료는 어두운 곳에서 10분간 배양 후 542 nm에서 흡광도(optical density)를 측정, NO2+NO3 농도를 구하였다. 소변 내 크레아티닌 농도 측정은 Jaffe Rate법 (Creatinine Reagent Kit, Beckman Instruments, Inc.
본 연구에서는 소아신장클리닉에 내원한 신장병 환아들 중 48명 (VUR 16명, MCNS 32명)을대상으로 소변을 채취하여(NO2+NO3) 농도를 구하여 (NOz+NOG/Cr 비로 보정한 값으로 각 질환별로 집단 간의 차이를 비교하였다. 이 중 VUR군, MCNS군에서 대조군보다 소변 내 (NO2+NO3)/ Cr 값이 통계적으로 의미 있게 높았다.
각 환자 군과 대조군의 소변 내(NQj+NOG/Cr비율을 비교하였으며 MCNS 환아군에서는 재발횟수 및 단백뇨의 정도에 따른 상관관계를, VUR군에서는 신장 반흔 유무와 방광 요관 역류의 정도에 따른 소변 내 (NO2+NO3)/Cr의 차이를 비교분석하였다. 신장반흔은 요로감염 후 첫 1주 및 3개월 후에 DMSA 신스캔을 시행하여 마지막 검사에서 양성인 경우에 신 반흔으로 간주하였으며 국소성 병변 없이 매끄러운 윤곽을 동반한 신위축. 소견을 보이는 경우는 제외하였으며 VURe 배뇨성 방광 요도 조영술을 통해 국제역류분류에 따라 진단하였다 [13].
대상 데이터
고대구로병원 소아신장클리닉에 1년 이상 치료를 받고 있는 환아들 중 48명 (방광요관 역류[vesicoureteral reflux, VUR] 16명, 미세변화형 신증후군[minimal change nephrotic syndrome, MCNS]32명)을 대상으로 하였다. 대조군은 신장 질환이 없는 외래 환아 12명으로 하였다.
대상으로 하였다. 대조군은 신장 질환이 없는 외래 환아 12명으로 하였다.
데이터처리
소견을 보이는 경우는 제외하였으며 VURe 배뇨성 방광 요도 조영술을 통해 국제역류분류에 따라 진단하였다 [13]. 통계 처리는 Jandel corporation사의 통계프로그램인 sigmastat version 2.0을 사용하여 시행하였고, 그래프는 SPSS사의 sigmaplot version 4.0을 사용하였다. 모든 통계분석에 있어서 P<0.
이론/모형
발색시약에 반응시킨 시료는 어두운 곳에서 10분간 배양 후 542 nm에서 흡광도(optical density)를 측정, NO2+NO3 농도를 구하였다. 소변 내 크레아티닌 농도 측정은 Jaffe Rate법 (Creatinine Reagent Kit, Beckman Instruments, Inc., Brea, CA, USA)으로 ASTRA- 8 Beckman Instruments Inc., Brea, CA, USA) 자동분석기를 이용하여 측정하였다. 각 환자 군과 대조군의 소변 내(NQj+NOG/Cr비율을 비교하였으며 MCNS 환아군에서는 재발횟수 및 단백뇨의 정도에 따른 상관관계를, VUR군에서는 신장 반흔 유무와 방광 요관 역류의 정도에 따른 소변 내 (NO2+NO3)/Cr의 차이를 비교분석하였다.
성능/효과
MCNS군에서 채취 당시 단백뇨 1+ 이상이었던 군이 단백뇨 trace 이하인 군보다(NO2+NO3) /Cr 값이 통계적으로 의미 있게 높았다(P<0.05, Fig 3).
결론적으로 MCNS, 특히 단백뇨의 발생기전에 NO가 관여할 가능성이 있으며 신장 내 반흔의 형성에도 NO가 관여할 수 있음을 확인하였다.
있음을 뜻한다. 또한 MCNS 중에서도 재발 횟수가 많은 경우와 심한 단백뇨를 동반한 경우에 NO의 분비가 더 많았다는 것은 신장 질환의 심한 정도와 소변 내 (NO2+NO3)의 농도가 서로 비례하는 관계를 보인다고 추론할 수 있으며, 특히 MCNS에서 NO의 정량적 측정이 질병의 현재 상태나 차후의 경과를 판단할 수 있는 지표로서의 유용성이 있음을 강하게 시사한다. Heeringa 등 [2기은 신장염 환자에서 신손상의 정도와 비례해서 iNOS의 발현정도가 비례한다고 하였다.
이 중 VUR군, MCNS군에서 대조군보다 소변 내 (NO2+NO3)/ Cr 값이 통계적으로 의미 있게 높았다. 또한 MCNS군에서 진단 후 첫 1년간 4회 이상 재발했던 빈번 재발군이 4회 미만으로 재발했던 군보다 (NO2+NO3)/Cr 값이 통계적으로 의미 있게 높았으며, MCNS군에서 채취 당시 단백뇨 1+ 이상이었던 군이 단백뇨 trace 이하인 군보다 소변 내 (NO2+NO3)/Cr 값이 통계적으로 의미 있게 높았다. VUR군에서 신장 반흔이 있는 경우가 반흔이 없는 경우보다 소변 내 (NO2+NO3)/Cr 값이 통계적으로 의미 있게 높았으나, VUR의 정도(grade) 와는 관련이 없었다.
본 연구에서 소아의 MCNS에서 소변 내(NO2 +NO3)의 농도가 높았는데 이것은 iNOS의 과다발현에 의한 NO의 증가가 신장질환과 밀접하게 연관되어 있음을 뜻한다. 또한 MCNS 중에서도 재발 횟수가 많은 경우와 심한 단백뇨를 동반한 경우에 NO의 분비가 더 많았다는 것은 신장 질환의 심한 정도와 소변 내 (NO2+NO3)의 농도가 서로 비례하는 관계를 보인다고 추론할 수 있으며, 특히 MCNS에서 NO의 정량적 측정이 질병의 현재 상태나 차후의 경과를 판단할 수 있는 지표로서의 유용성이 있음을 강하게 시사한다.
집단 간의 차이를 비교하였다. 이 중 VUR군, MCNS군에서 대조군보다 소변 내 (NO2+NO3)/ Cr 값이 통계적으로 의미 있게 높았다. 또한 MCNS군에서 진단 후 첫 1년간 4회 이상 재발했던 빈번 재발군이 4회 미만으로 재발했던 군보다 (NO2+NO3)/Cr 값이 통계적으로 의미 있게 높았으며, MCNS군에서 채취 당시 단백뇨 1+ 이상이었던 군이 단백뇨 trace 이하인 군보다 소변 내 (NO2+NO3)/Cr 값이 통계적으로 의미 있게 높았다.
진단 후 첫 1년간 4회 이상 재발했던 빈번 재발 군(0.054 ± 0.024)에서 4회 미만으로 재발했던 군 (0.013± 0.003)보다 소변 내(NO2+NO3)/Cr값이 통계적으로 의미 있게 높았다CP<0.05, Fig 2).
후속연구
NO가 여러 사이토카인을 매개하여 역류성 신병증 환아에서 신손상과 신 섬유화를 유도한다는 보고가 있었으나[34, 35], 본 연구와 관련하여 역류의 정도에 따른 NO의 증가에 관한 연구는 아직 이루어진 바가 없다. 특히 신장 반흔이 있는 경우가 반흔이 없는 경우보다 NO의 생산이 높게 측정되었다는 점은 특기할만한 결과인데, 이는 만성적인 질병상태에서 조직 손상이 반복되어 조직의 섬유화를 일으키는 과정에 NO가 관여함을 기존의 연구들보다 훨씬 직접적으로 시사하고 있으며, 또한 이제까지의 연구들이 실험적으로 유발된 전향적 동물실험이 대부분이었던 것에 반해 직접 신장 질환 소아들을 대상으로 후향적인 연구를 통해 NO의 병리적 역할을 입증한 것에 이번 연구의 큰 의의가 있다고 할 것이다.
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