식물체는 기관에 따라 조직 및 세포의 종류와 배열이 분화 초기단계에 이미 정해져 특징적인 형태를 갖게 되나 여러 요인에 의해 변형되기도 한다. 줄기에 덩굴손이 변형되어 부정근인 흡착근을 형성하는 담쟁이덩굴은 벽면 등의 피착면에 착생하는 식물로 이들의 흡착근은 특징적인 구조를 지닌다. 본 연구에서는 착생에 따른 담쟁이덩굴의 흡착근 표피조직의 분화양상을 전자현미경적으로 추적하여 연구하였다. 흡착근은 분화 초기에 경정단 분열조직으로부터 포에 둘러싸여 발달한다. 초기의 어린 흡착근은 곤봉형으로 상 하피 구별이 되지 않으나 활발히 생장하는 흡착근은 구형으로 상 하피가 뚜렷이 분화된다. 최외층의 표피는 장방형의 세포로 구성되며 이들 표피세포는 세포벽에 얇은 각피층을 지닌다. 착생 전 흡착근은 볼록한 평철형이 되고 표피세포내 액포에는 전자밀도가 매우 높은 물질이 다량 축적된다. 착생 직전 및 직후 흡착근의 상 하피조직은 빠르게 변형되어 액포에 축적된 물질이 분비되면서 피착면에 더욱 밀착되고 수분이 소실된 흡착근은 세포사멸의 과정을 거친다. 이 시기 하피조직에서의 변화는 상피조직에 비해 급격히 일어나며, 분비물질은 벽면에 강력히 흡착되어 착생의 기능을 수행하게 된다. 특히 착생을 전후로 급격한 하피조직의 변화가 일어나 흡착근 하피조직의 외곽면이 먼저 피착면에 접촉하고 전자밀도가 높은 물질이 분비되어 오목한 상태를 유지하던 중앙부위도 물질이 분비되면서 흡착근 전체가 부착되게 된다. 즉, 전자밀도가 높은 물질의 분비와 수분소실에 의한 흡착근의 피착면으로의 밀착 등이 담쟁이덩굴 흡착근의 착생에 매우 중요한 역할을 하는 것으로 추정된다. 매년 이와 같은 방법으로 흡착근은 분화 초기단계에서부터 노화에 이르기까지 여러 단계를 거치며 신속한 형태적, 구조적 변화를 수반하면서 강력한 착생기능을 수행하게 된다.토끼 면역항체를 선모충유충 조직항원에 반응시켰을 때 충체의 표피와 기저층 그리고 EIM 및 stichocyte의 ${\alpha}_0\;{\alpha}_1$ 과립에 황금입자가 표지되었다. 따라서 1일 동안 배설되는 분비배설항원은 선모충 유충의 표피와 stichocyte의 ${\alpha}_0\;{\alpha}_1$ 과립에서 유도되는 반면에 3일 동안 배설되는 분비배설항원은 표피와 stichocyte의 ${\alpha}_0$ 과립에서 유도되고, 선모충유충 감염후 1주, 4주에 실험쥐에서 형성되는 감염항체는 선모충의 표피와 기저층 그리고 EIM에서 분비되는 항원에 의하여 생성된다. 이상의 결과로 선모충의 분비배설항원과 감염항원은 선모충 유충의 표피와 EIM및 stichocyte의 ${\alpha}_0\;{\alpha}_1$ 과립에서 유도되며 이들은 45 kDa 단백을 포함하고 있는 것으로 생각된다.성하고 있는 세포들에는 세포질이 어두운 세포와 밝은 세포가 있었으며, 세포질내에는 전자밀도가 높은 분비과립이 관찰되었다. 전체적인 특징은 눈물샘분비세포 중 장액세포의 것과 비슷하였으나, 과립의 크기는 작았다. 분비관을 구성하는 세포들 사이에도 연접복합체가 매우 잘 발달되어 있었다. 샘포에서 사이관으로 이행되는 곳에서도 샘포세포와 사이관세포 사이에서도 연접복합체가 관찰되었다. 분비관세포의 분비과립 가운데는 중심부분에 전자밀도가 더 높은 중심을 가진 다른 모양의 과립이 관찰되기도 하였다. 의해 사망한 환자는 없었다. 결 론: 자궁경부암 환자에 항암화학요법과 동
식물체는 기관에 따라 조직 및 세포의 종류와 배열이 분화 초기단계에 이미 정해져 특징적인 형태를 갖게 되나 여러 요인에 의해 변형되기도 한다. 줄기에 덩굴손이 변형되어 부정근인 흡착근을 형성하는 담쟁이덩굴은 벽면 등의 피착면에 착생하는 식물로 이들의 흡착근은 특징적인 구조를 지닌다. 본 연구에서는 착생에 따른 담쟁이덩굴의 흡착근 표피조직의 분화양상을 전자현미경적으로 추적하여 연구하였다. 흡착근은 분화 초기에 경정단 분열조직으로부터 포에 둘러싸여 발달한다. 초기의 어린 흡착근은 곤봉형으로 상 하피 구별이 되지 않으나 활발히 생장하는 흡착근은 구형으로 상 하피가 뚜렷이 분화된다. 최외층의 표피는 장방형의 세포로 구성되며 이들 표피세포는 세포벽에 얇은 각피층을 지닌다. 착생 전 흡착근은 볼록한 평철형이 되고 표피세포내 액포에는 전자밀도가 매우 높은 물질이 다량 축적된다. 착생 직전 및 직후 흡착근의 상 하피조직은 빠르게 변형되어 액포에 축적된 물질이 분비되면서 피착면에 더욱 밀착되고 수분이 소실된 흡착근은 세포사멸의 과정을 거친다. 이 시기 하피조직에서의 변화는 상피조직에 비해 급격히 일어나며, 분비물질은 벽면에 강력히 흡착되어 착생의 기능을 수행하게 된다. 특히 착생을 전후로 급격한 하피조직의 변화가 일어나 흡착근 하피조직의 외곽면이 먼저 피착면에 접촉하고 전자밀도가 높은 물질이 분비되어 오목한 상태를 유지하던 중앙부위도 물질이 분비되면서 흡착근 전체가 부착되게 된다. 즉, 전자밀도가 높은 물질의 분비와 수분소실에 의한 흡착근의 피착면으로의 밀착 등이 담쟁이덩굴 흡착근의 착생에 매우 중요한 역할을 하는 것으로 추정된다. 매년 이와 같은 방법으로 흡착근은 분화 초기단계에서부터 노화에 이르기까지 여러 단계를 거치며 신속한 형태적, 구조적 변화를 수반하면서 강력한 착생기능을 수행하게 된다.토끼 면역항체를 선모충유충 조직항원에 반응시켰을 때 충체의 표피와 기저층 그리고 EIM 및 stichocyte의 ${\alpha}_0\;{\alpha}_1$ 과립에 황금입자가 표지되었다. 따라서 1일 동안 배설되는 분비배설항원은 선모충 유충의 표피와 stichocyte의 ${\alpha}_0\;{\alpha}_1$ 과립에서 유도되는 반면에 3일 동안 배설되는 분비배설항원은 표피와 stichocyte의 ${\alpha}_0$ 과립에서 유도되고, 선모충유충 감염후 1주, 4주에 실험쥐에서 형성되는 감염항체는 선모충의 표피와 기저층 그리고 EIM에서 분비되는 항원에 의하여 생성된다. 이상의 결과로 선모충의 분비배설항원과 감염항원은 선모충 유충의 표피와 EIM및 stichocyte의 ${\alpha}_0\;{\alpha}_1$ 과립에서 유도되며 이들은 45 kDa 단백을 포함하고 있는 것으로 생각된다.성하고 있는 세포들에는 세포질이 어두운 세포와 밝은 세포가 있었으며, 세포질내에는 전자밀도가 높은 분비과립이 관찰되었다. 전체적인 특징은 눈물샘분비세포 중 장액세포의 것과 비슷하였으나, 과립의 크기는 작았다. 분비관을 구성하는 세포들 사이에도 연접복합체가 매우 잘 발달되어 있었다. 샘포에서 사이관으로 이행되는 곳에서도 샘포세포와 사이관세포 사이에서도 연접복합체가 관찰되었다. 분비관세포의 분비과립 가운데는 중심부분에 전자밀도가 더 높은 중심을 가진 다른 모양의 과립이 관찰되기도 하였다. 의해 사망한 환자는 없었다. 결 론: 자궁경부암 환자에 항암화학요법과 동
The present study examined the epidermal changes of adhesive disks which occur during attachment in Parthenocissus tricuspidata using scanning and transmission electron microscopy. Several adhesive disks, each covered with a bract, develop from the shoot apical meristem during early development. In ...
The present study examined the epidermal changes of adhesive disks which occur during attachment in Parthenocissus tricuspidata using scanning and transmission electron microscopy. Several adhesive disks, each covered with a bract, develop from the shoot apical meristem during early development. In the initial stage, the adhesive disks are club-shaped and their upper and lower epidermis are indistinguishable. However, in the actively growing stage, they become spherical and both epidermis are clearly differentiated into the adventitious roots. Prior to wall attachment, the adhesive disks exhibit adaxial convex and abaxial concave shapes, and electron-dense substances are abundant in the vacuoles of epidermal cells. The peripheral area of the adhesive disk is adhered first to the wall surface, while the central area is drawn inward in a vacuum-like state during attachment. As the attachment progresses and the electron-dense substances continue to discharge, the upper and lower epidermis rapidly undergo deterioration and the disks shrink considerably. At this stage, structural changes of the lower epidermis occur much faster than in the upper one. The discharged substance is accumulated on the wall surface, and this aids the attachment of adhesive disks on the wall for long periods. In this manner, the shape and structure of the adhesive disk epidermis change drastically from initial growth to the mature stage. Further, the role of electron-dense substance and shrinkage of the disk during attachment has been discussed in Parthenocissus tricuspidata.
The present study examined the epidermal changes of adhesive disks which occur during attachment in Parthenocissus tricuspidata using scanning and transmission electron microscopy. Several adhesive disks, each covered with a bract, develop from the shoot apical meristem during early development. In the initial stage, the adhesive disks are club-shaped and their upper and lower epidermis are indistinguishable. However, in the actively growing stage, they become spherical and both epidermis are clearly differentiated into the adventitious roots. Prior to wall attachment, the adhesive disks exhibit adaxial convex and abaxial concave shapes, and electron-dense substances are abundant in the vacuoles of epidermal cells. The peripheral area of the adhesive disk is adhered first to the wall surface, while the central area is drawn inward in a vacuum-like state during attachment. As the attachment progresses and the electron-dense substances continue to discharge, the upper and lower epidermis rapidly undergo deterioration and the disks shrink considerably. At this stage, structural changes of the lower epidermis occur much faster than in the upper one. The discharged substance is accumulated on the wall surface, and this aids the attachment of adhesive disks on the wall for long periods. In this manner, the shape and structure of the adhesive disk epidermis change drastically from initial growth to the mature stage. Further, the role of electron-dense substance and shrinkage of the disk during attachment has been discussed in Parthenocissus tricuspidata.
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문제 정의
줄기 끝의 경정단 분열조직 또는 액아에서 형성되는 줄기 발생 부 정근과는 달리 뿌리에 형성되는 경우 세포분열은 내 초에서 측근이 발달하는 경우와 유사하다고 알려져 있다 (Esau, 1979; Fahn, 1990). 본 연구에서는 피착면 에 강력히 부착하는 줄기 발생 담쟁이덩굴 흡착근 표 피조직의 변화양상을 생장단계별로 연구하였다. 특히, 흡착근의 식물체 착생기작에 초점을 두고 상피 및 하 피조직을 추적하여 이들의 형태해부학적, 미세구조적 인 특징을 자세히 조사하였다.
이러한 변화는 착생기능에 따른 흡착근 내부 및 외부구조의 역동적 분화에 따른 것으로 표피조직의 역할이 강조되는 계기가 되었다. 이에 본 연구에서는 담쟁이덩굴 줄기에서 채취된 흡착근을 실험대상으로 상피와 하피조직의 변화를 추적하여 착생에 따른 형태 및 구조적 변화를 자세히 조 사하고자 하였다. 이를 위해 흡착근 표피조직의 형태 및 구조적 특성을 주사전자현미경으로 연구하였으며, 세포수준에서의 구조적 특징은 투과전자현미경을 이용하여 비교 연구하였다.
제안 방법
Reichert Ultracut-S ultramicrotome으로 정리된 block 으로부터 0.5~1.0|im 후박절편을 만들고 0.1% Toluidine Blue 용액으로 염색하여 Zeiss 광학현미경을 통해 사용할 초박절편의 tissue section을 조사하였다. 이후 diamond knife로 90〜 100nm의 얇은 초박절편을 제작 하여 그리드에 올린 후 2% uranyl acetate와 lead citrate로 45분씩 이중염색하였다.
이를 다시 2% aqueous osmium t예:roxide (OsO4)로 4°C에서 2 〜 12시간 후고정하여 동일 buffei로 다시 15분씩 3 회 세척하였다. 고정된 시료는 30〜100%에 이르는 graded ace-tone series로 각각 15분 간격으로 탈수과정 을 거친 후 isoamyl acetate로 15분 간격으로 3회 치환 하여 4°C에서 냉장 • 보관하였다. 이후 이들 시료를 liquid CO2에 의한 임계 건조 (critical point drying) 과정 을 거쳐 건조시킨 후 ion sputter에서 약 10nm의 금속 피막 처리하였다.
본 실험에서는 2006년 3월부터 10월에 걸쳐 대구광역시 달서구 신당동 계명대학교 캠퍼스 백은관 건물 벽에 자라는 담쟁이덩굴 (parthenocissus tricuspodata)) 을 대상으로 연구하였다. 위 식물체로부터 각 단계의 흡착근을 24〜48시간을 주기로 관찰 및 추적하여 Sony DSC-f717 장치로 변화양상을 1차적으로 조사하 였다. 이후 전자현미경적으로 연구될 흡착근을 선별하여 0.
금속피막을 입힌 시료는 한국기초과 학연구원 대구분소 소재 Hitachi S-4200 SEM으로 15 kV에서 분석되었다. 이들 image data는 Microtek 4500t에 의해 scan 및 digitalizalion되어 image processing을 거쳐 비교 · 연구되었다.
이에 본 연구에서는 담쟁이덩굴 줄기에서 채취된 흡착근을 실험대상으로 상피와 하피조직의 변화를 추적하여 착생에 따른 형태 및 구조적 변화를 자세히 조 사하고자 하였다. 이를 위해 흡착근 표피조직의 형태 및 구조적 특성을 주사전자현미경으로 연구하였으며, 세포수준에서의 구조적 특징은 투과전자현미경을 이용하여 비교 연구하였다.
1% Toluidine Blue 용액으로 염색하여 Zeiss 광학현미경을 통해 사용할 초박절편의 tissue section을 조사하였다. 이후 diamond knife로 90〜 100nm의 얇은 초박절편을 제작 하여 그리드에 올린 후 2% uranyl acetate와 lead citrate로 45분씩 이중염색하였다. 염색된 그리드는 한 국기초과학지원연구원 대구분소의 Hitachi H-7100 TEM을 이용하여 75kV에서 연구되었고 35 mm film 또는 EM negative film으로 촬영되어 현상 및 인화되었다.
고정된 시료는 30〜100%에 이르는 graded ace-tone series로 각각 15분 간격으로 탈수과정 을 거친 후 isoamyl acetate로 15분 간격으로 3회 치환 하여 4°C에서 냉장 • 보관하였다. 이후 이들 시료를 liquid CO2에 의한 임계 건조 (critical point drying) 과정 을 거쳐 건조시킨 후 ion sputter에서 약 10nm의 금속 피막 처리하였다. 금속피막을 입힌 시료는 한국기초과 학연구원 대구분소 소재 Hitachi S-4200 SEM으로 15 kV에서 분석되었다.
염색된 그리드는 한 국기초과학지원연구원 대구분소의 Hitachi H-7100 TEM을 이용하여 75kV에서 연구되었고 35 mm film 또는 EM negative film으로 촬영되어 현상 및 인화되었다. 이후 이들에 대한 종합적인 image processing은 Artix Scan 4500t Microtek, Mitsubishi CP9500DW digital 장치 등을 거쳐 최종적으로 분석되었다.
위 식물체로부터 각 단계의 흡착근을 24〜48시간을 주기로 관찰 및 추적하여 Sony DSC-f717 장치로 변화양상을 1차적으로 조사하 였다. 이후 전자현미경적으로 연구될 흡착근을 선별하여 0.1 〜0.2mm 크기의 분화 초기단계에서부터 2〜 2.5 mm에 이르는 성숙한 단계의 조직을 채취 tissue sampling하였다. 채취한 담쟁이덩굴의 홉착근 표피조 직은 다옴과 같은 처리과정을 거쳐 단계별로 실험되 었다.
주사전자현미경법으로 연구될 흡착근들은 먼저 어린단계, 발달단계, 착생 전 단계, 착생 후 성숙단계, 노화 및 사멸단계에 이르기까지 단계별로 선별하였다. 각각의 단계에서 채취된 흡착근을 3% glutaraldehyde 용액으로 실온에서 3시간 전고정한 후, 0.
투과전자현미경법으로 연구될 시료들은 위의 방법과 동일한 glutaraldehyde에 의한 1차 전고정 및 OsO4 에 의한 2차 후고정, 그리고 acetone에 의한 탈수과정 을 거쳤다. 탈수 처리된 시료는 acetone과 resin이 일정 한 비율로 혼합되어 각각 1시간씩 실온의 rotator 상 에서 처리되었으며, 이후 100% resin 용액으로 1시간 씩 2회 교체하여 치환하였다. 이때 resin은 low-viscosily resin 제조법에 따라 혼합되었고, 순수 resin으로 3회 교체된 후 시료들은 포매되어 65°C에서 48시간 중합경화 시킨 후 resin block으로 제작되었다.
투과전자현미경법으로 연구될 시료들은 위의 방법과 동일한 glutaraldehyde에 의한 1차 전고정 및 OsO4 에 의한 2차 후고정, 그리고 acetone에 의한 탈수과정 을 거쳤다. 탈수 처리된 시료는 acetone과 resin이 일정 한 비율로 혼합되어 각각 1시간씩 실온의 rotator 상 에서 처리되었으며, 이후 100% resin 용액으로 1시간 씩 2회 교체하여 치환하였다.
본 연구에서는 피착면 에 강력히 부착하는 줄기 발생 담쟁이덩굴 흡착근 표 피조직의 변화양상을 생장단계별로 연구하였다. 특히, 흡착근의 식물체 착생기작에 초점을 두고 상피 및 하 피조직을 추적하여 이들의 형태해부학적, 미세구조적 인 특징을 자세히 조사하였다.
대상 데이터
이후 이들 시료를 liquid CO2에 의한 임계 건조 (critical point drying) 과정 을 거쳐 건조시킨 후 ion sputter에서 약 10nm의 금속 피막 처리하였다. 금속피막을 입힌 시료는 한국기초과 학연구원 대구분소 소재 Hitachi S-4200 SEM으로 15 kV에서 분석되었다. 이들 image data는 Microtek 4500t에 의해 scan 및 digitalizalion되어 image processing을 거쳐 비교 · 연구되었다.
본 실험에서는 2006년 3월부터 10월에 걸쳐 대구광역시 달서구 신당동 계명대학교 캠퍼스 백은관 건물 벽에 자라는 담쟁이덩굴 (parthenocissus tricuspodata)) 을 대상으로 연구하였다. 위 식물체로부터 각 단계의 흡착근을 24〜48시간을 주기로 관찰 및 추적하여 Sony DSC-f717 장치로 변화양상을 1차적으로 조사하 였다.
이후 diamond knife로 90〜 100nm의 얇은 초박절편을 제작 하여 그리드에 올린 후 2% uranyl acetate와 lead citrate로 45분씩 이중염색하였다. 염색된 그리드는 한 국기초과학지원연구원 대구분소의 Hitachi H-7100 TEM을 이용하여 75kV에서 연구되었고 35 mm film 또는 EM negative film으로 촬영되어 현상 및 인화되었다. 이후 이들에 대한 종합적인 image processing은 Artix Scan 4500t Microtek, Mitsubishi CP9500DW digital 장치 등을 거쳐 최종적으로 분석되었다.
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