쪽풀 생잎에서 우려낸 색소 액에 소석회를 첨가한 후 쪽풀 색소의 침전물을 만들어서 냉동 건조시켜 쪽풀 색소를 제조하여, 그 성분을 조사한 결과 다음과 같은 결론을 얻었다. 1. UV분광광도, TLC정성 분석, HPLC 측정 결과 쪽 분말 용액의 2개 bend가 나타났으며, 적색색소대인 540nm 와 청색 색소대인 620nm가 존재함을 알 수 있었다. 2. FT-IR 분석으로부터 $1627cm^{-1}$에서 채, $3200{\sim}3300cm^{-1}$에서 NH의 흡수대가 나타나고, 적색 및 청색 색소의 IR spectrum이 일치하였으며, 3. EI-mass 분석 결과 청색과 적색 색소의 fragment 이온의 m/z가 일치하고, $^1H_MNR$ 분석결과로부터 두 색소는 이성질체임을 알 수 있었고, 4. 쪽 염료 성분 함량을 조사한 결과 인디고 색소 4.06%와 인디루빈 1.06%이었다.
쪽풀 생잎에서 우려낸 색소 액에 소석회를 첨가한 후 쪽풀 색소의 침전물을 만들어서 냉동 건조시켜 쪽풀 색소를 제조하여, 그 성분을 조사한 결과 다음과 같은 결론을 얻었다. 1. UV분광광도, TLC 정성 분석, HPLC 측정 결과 쪽 분말 용액의 2개 bend가 나타났으며, 적색색소대인 540nm 와 청색 색소대인 620nm가 존재함을 알 수 있었다. 2. FT-IR 분석으로부터 $1627cm^{-1}$에서 채, $3200{\sim}3300cm^{-1}$에서 NH의 흡수대가 나타나고, 적색 및 청색 색소의 IR spectrum이 일치하였으며, 3. EI-mass 분석 결과 청색과 적색 색소의 fragment 이온의 m/z가 일치하고, $^1H_MNR$ 분석결과로부터 두 색소는 이성질체임을 알 수 있었고, 4. 쪽 염료 성분 함량을 조사한 결과 인디고 색소 4.06%와 인디루빈 1.06%이었다.
Natural indigo colorants were prepared by extraction of Polygonum tinctorium which was harvested just in the blooming season(in the late of July). The components were analyzed by TLC and HPLC, and its structures were analyzed by FT-IR, EI-mass. The results obtained are summarized as follows; The nat...
Natural indigo colorants were prepared by extraction of Polygonum tinctorium which was harvested just in the blooming season(in the late of July). The components were analyzed by TLC and HPLC, and its structures were analyzed by FT-IR, EI-mass. The results obtained are summarized as follows; The natural indigo powder was dissolved in DMSO and developed in eluent, $CHCI_3/CH_3CN$(8.5:1.5 v/v) by means of TLC for its quality analysis. It was segregated into indirubin as a red colour and indigo as a blue colour. In case of HPLC analysis,. FT-IR spectrum of indirubin showed a peak for NH residue between 3200 and $3300cm^{-1}$. $^1H-NMR$ spectrum for indigo displayed AA'BB' spin system caused by indole structure between 6.5 and 7.7ppm of H4, 5, 6 and 7, and -NH proton for indirubin showed an singlet between 10.88 and 11.0ppm. EI-mass spectrum of indigo and indirubin both disclosed their molecular size as 262 and it implies that these two substances are isomer.
Natural indigo colorants were prepared by extraction of Polygonum tinctorium which was harvested just in the blooming season(in the late of July). The components were analyzed by TLC and HPLC, and its structures were analyzed by FT-IR, EI-mass. The results obtained are summarized as follows; The natural indigo powder was dissolved in DMSO and developed in eluent, $CHCI_3/CH_3CN$(8.5:1.5 v/v) by means of TLC for its quality analysis. It was segregated into indirubin as a red colour and indigo as a blue colour. In case of HPLC analysis,. FT-IR spectrum of indirubin showed a peak for NH residue between 3200 and $3300cm^{-1}$. $^1H-NMR$ spectrum for indigo displayed AA'BB' spin system caused by indole structure between 6.5 and 7.7ppm of H4, 5, 6 and 7, and -NH proton for indirubin showed an singlet between 10.88 and 11.0ppm. EI-mass spectrum of indigo and indirubin both disclosed their molecular size as 262 and it implies that these two substances are isomer.
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제안 방법
(1) DMSO(100%) 용매에 대한 Indigo의 값 구하기 20 mg Standard Indigo를 500 ml DMSO에 완전히 녹인후 5배 희석한 1 ml를 취하여 다음과 같이 흡광도를 구하여 다음 식에 의하여 계수를 구하였다
1) Sample을 DMSO(100%) 용매에 녹여 Indigo 정량하기 Sample 590 mg을 DMSO에 녹여 Indigo를 추출하여 완전한 Indigo 추출을 위해 매일 2회씩, 5일 반복(total 10회) 하여 363 ml의 추출액을 얻었다. 이용액을 10배 희석하여 1 ml를 취하였다.
2) Sample을 DMSO : CH3CN(1 : 9)에 녹여 indirubin을추출 한 후 완전한 indirubin 추출을 위해 매일 1회씩 6일 반복(total 6회)하여 184 ml의 추출액을 얻었고, 이것을 희석하지 않고 그대로 1ml를 취하여 아래식에 따라 값을 구하였다.
spectrometer (Perkin Elmer, Lamda 10) 로 분광곡선을 각각 측정 하였다.
시료를 10 mg 씩을 DMSO와 Acetonitrile(2 : 1 v/v)로 용해한 후 그 액을 알루미늄 플렛에 놓고 전개 액으로 chloroform : Acetonitrile(8.5 : 1.5 v/v)에 전개 하였다.
이 연구는 쪽 자체의 성분 분석을 위하여 TLC, HPLC 를 이용하여 분석하였으며 구조 분석으로서는 FT-IR, 'HNMR 및 El-mass를 이용하였다.
다음과 같이 하였다. 즉 2 g의 쪽풀 색 소를 200 ml 의 acetonitrile 로 1일 1회씩 추출하여 6일 동안 반복 추출한 후, 나머지 용해되지 않는 청색소를 indigo 색소분석용으로 사용하였고, indirubine 5 g의 쪽풀 색 소를 acetonitrile 용액으로 3회 반복 추출하여 얻은 용액을 glass filterGG)로 여과하고, 여과액을 원심분리기(Vision, Super speed vacuum)로 12,000 rpm, 10분간 원심분리한 후 상등액을 evaporator로 증발시킨 후 그 액을 분자량 측정에 사용하였고, 용제를 완전히 증발시킨 후 긁어 모아서 구조분석용으로 사용하였다.
쪽풀 생잎에서 우려낸 색소 액에 소석회를 첨가한 후 쪽 풀 색소의 침전물을 만들어서 냉동 건조시켜 쪽풀 색소를 제조하여, 그 성분을 조사한 결과 다음과 같은 결론을 얻었다.
UV/vis. 측정에 의해 쪽 색소에는 주로 청색색소와 적색 색소가 함유되어 있다는 것을 알았고, 합성 indigo에는 주로 청색색소가 있다는 것을 알았는데, 각각에 함유되어있는 성분을 확인하기 위하여, 우선 박층크로마토그라피 (TLC)와 고속액체크로마토그라피 (HPLC)를 이용하여 정성 분석한 결과는 Fig. 1, 2와 같다.
1. UV 분광광도, TLC 정성 분석, HPLC 측정 결과 쪽 분말 용액의 2개 bend가 나타났으며, 적색색소대인 540 nm 와 청색 색소대인 620 nm가 존재함을 알 수 있었다.
4. 쪽 염료 성분 함량을 조사한 결과 인디고 색소 4.06% 와 인디루빈 1.06%이었다.
이것은 적색색소의 Indole-type N-H 공명이 10.82와 10.98 ppm에서 관측되어지고 이것이 indirubin 일 것이라고 추정한 것과 같이 이 실험에서도 triplet 3 sets와 4 sets의 doublet가 관측되어져 Hart의 NMR 결과와 일치하므로 동일 구조임을 확인하였다. 즉, 적색색소는 indirubin 임이 확인되었다.
98 ppm에서 관측되어지고 이것이 indirubin 일 것이라고 추정한 것과 같이 이 실험에서도 triplet 3 sets와 4 sets의 doublet가 관측되어져 Hart의 NMR 결과와 일치하므로 동일 구조임을 확인하였다. 즉, 적색색소는 indirubin 임이 확인되었다. 표 1은 위의 결과를 정리한 것으로서 indigo 색소와 indirubin 색소의 각각의 proton의 화학적이동(ppm)을 명확한 결과이다.
표 1에서 보는 바와 같이 청색색소의 H4, 5, 6, 7은 6.5~7.7 ppm에서 Indole 구조를 기본으로 하는 AA'BB' system 스핀 분열 현상을 나타내고 있으며, H4, 7은 7.61 및 7.33 ppm에서 각각 2중선을 나타내고 있고, H5, 6은 7, 51 및 6.97 ppm에서 3중선으로 나타난 것을 알 수 있다. 또한 10.
참고문헌 (12)
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