본 연구는 만형자(Vitex rotundifolia)의 세포독성을 확인하기 위한 목적으로 methanol, ethanol, acetone으로 추출한 뒤, 인간 유래의 대장암 세포주인 HT-29에 처리하여 MTT reduction assay를 이용하여 실험을 하였다. 그 결과, 모든 만형자 추출물에서 농도 의존적으로 성장 저해 효과가 나타났으며, 그 중에서도 acetone 추출물을 50 ${\mu}g/ml$ 농도로 처리 시 18%로 가장 높은 항암 효과를 보였다. 또한 각 용매별 추출물을 50 ${\mu}g/ml$를 처리하여 HT-29 세포주의 성장을 관찰한 결과, acetone 추출물은 대조구에 비하여 암세포의 수축 등 형태변화가 두드러지게 나타났으며, Hoechst 33342 staining을 통하여 apoptotic body가 형성된 것을 확인 하였다. 그리고 가장 활성이 좋은 acetone 추출물을 용매 분획하여 얻은 분획물 중, n-hexane 분획물에서 농도 의존적으로 세포독성을 나타냄을 알 수 있었다. 또한 만형자의 n-hexane 분획물은 다른 대장암 세포주 SW620에 대해서도 50 ${\mu}g/ml$ 농도에서 대조군에 비하여 7배 정도의 높은 세포독성을 나타내고 있음을 MTT reduction assay와 LDHrelease assay를 통하여 확인 할 수 있었다.
본 연구는 만형자(Vitex rotundifolia)의 세포독성을 확인하기 위한 목적으로 methanol, ethanol, acetone으로 추출한 뒤, 인간 유래의 대장암 세포주인 HT-29에 처리하여 MTT reduction assay를 이용하여 실험을 하였다. 그 결과, 모든 만형자 추출물에서 농도 의존적으로 성장 저해 효과가 나타났으며, 그 중에서도 acetone 추출물을 50 ${\mu}g/ml$ 농도로 처리 시 18%로 가장 높은 항암 효과를 보였다. 또한 각 용매별 추출물을 50 ${\mu}g/ml$를 처리하여 HT-29 세포주의 성장을 관찰한 결과, acetone 추출물은 대조구에 비하여 암세포의 수축 등 형태변화가 두드러지게 나타났으며, Hoechst 33342 staining을 통하여 apoptotic body가 형성된 것을 확인 하였다. 그리고 가장 활성이 좋은 acetone 추출물을 용매 분획하여 얻은 분획물 중, n-hexane 분획물에서 농도 의존적으로 세포독성을 나타냄을 알 수 있었다. 또한 만형자의 n-hexane 분획물은 다른 대장암 세포주 SW620에 대해서도 50 ${\mu}g/ml$ 농도에서 대조군에 비하여 7배 정도의 높은 세포독성을 나타내고 있음을 MTT reduction assay와 LDH release assay를 통하여 확인 할 수 있었다.
This study was performed to investigate the cytotoxic activity from Vitex rotundifolia. V. rotundifolia was extracted with methanol, ethanol, and acetone, and then the cytotoxic effect of these extracts was measured by the MTT reduction assay and morphological assay on the HT-29 human colon carcinom...
This study was performed to investigate the cytotoxic activity from Vitex rotundifolia. V. rotundifolia was extracted with methanol, ethanol, and acetone, and then the cytotoxic effect of these extracts was measured by the MTT reduction assay and morphological assay on the HT-29 human colon carcinoma cells. Among the three extracts, the acetone extract showed the highest cytotoxic activity on the HT-29 cells in a dose-dependent manner with an $IC_{50}$ value of 10 ${\mu}g/ml$. The acetone extract was further fractionated sequentially with n-hexane, diethyl ether, ethyl acetate, and water layer according to the degree of polarity. The n-hexane layer among the fractioned layers showed inhibitory activity on the growth of HT-29 cells. In addition, n-hexane layer also showed the cytotoxic activity against SW620 human colon carcinoma cells. These result indicated that extracts of V. rotundifolia may contain bioactive materials and could be potential candidates as chemotherapeutic agents against human colon carcinoma cells.
This study was performed to investigate the cytotoxic activity from Vitex rotundifolia. V. rotundifolia was extracted with methanol, ethanol, and acetone, and then the cytotoxic effect of these extracts was measured by the MTT reduction assay and morphological assay on the HT-29 human colon carcinoma cells. Among the three extracts, the acetone extract showed the highest cytotoxic activity on the HT-29 cells in a dose-dependent manner with an $IC_{50}$ value of 10 ${\mu}g/ml$. The acetone extract was further fractionated sequentially with n-hexane, diethyl ether, ethyl acetate, and water layer according to the degree of polarity. The n-hexane layer among the fractioned layers showed inhibitory activity on the growth of HT-29 cells. In addition, n-hexane layer also showed the cytotoxic activity against SW620 human colon carcinoma cells. These result indicated that extracts of V. rotundifolia may contain bioactive materials and could be potential candidates as chemotherapeutic agents against human colon carcinoma cells.
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문제 정의
따라서 본 연구에서는 천연자원으로부터 항암활성을 가지는 물질을 탐색하기 위한 목적으로 만형자를 이용하여 여러 용매별 추출물을 암세포에 처리하여 세포독성을 확인함으로써 만형 자가 가지는 항암활성 효과를 밝히고자 하였다.
제안 방법
, Tokyo, Japan)를 이용하여 40P에서 감압 농축하여 각 용매 추출물을 얻었다. Acetone 추출물에서 다음 단계의 분획물을 얻기 위하여 용매의 극성을 달리하여 순차적으로 용매분획을 얻었다. 즉, hexane과 물을 같은 비율로 분획 주줄하여 hexane증을 분리하였고, 동일한 방법으로 diethyl ether, ethyl acetate 및 water 층으로 분획하여 얻어진 각각의 용매 분획물을 감압 농축 시켜 분획물을 얻었다.
rotundifolia (A: methanol extract, B: ethanol extract, C: acetone extract). After MTT assay, the MTT reductioii rate (means ±S.D. of triplicate deterniination) were calculated by setting each of control survivals in the absence of V. rotundifolia extracts. ***significant vs.
HT-29 세포주에 대한 높은 세포독성을 보인 zz-hexane 분획물이 다른 종류의 암세포에서도 이와 같은 암세포 성장억제 능을 나타내는지 확인하기 위하여 HT-29 세포주와는 다른 인간 유래의 대장암 세포주 SW620 세포주를 이용하여 다음과 같은 실험을 하였다. Fig.
LDH 측정에 의한 세포독성 확인. 만형자 분획 추출물의 세포독성을 측정하기 위한 방법으로 LDH release assay를 실시하였다.
5% Triton X-100용액을 50 ji/ 첨가하여 10분 동안 shaking시켜 세포벽을 깨트린 다음, 같은 방법으로 LDH reagent 50 ul를 첨가하여 반응 시키고, 반응이 끝나면 반응 정지액을 넣은 뒤, 540nm에서 흡광도를 측정하였다. LDH에 대한 세포독성의 백분율은 배양액과 살아있는 세포에서 유리된 총 LDH에 대한 배양액으로부터 유리된 LDH의값으로 계산하여 무처리 대조구와 비교한 값을 나타내었다.
MTT 분석을 통한 세포 생존율 측정. 만형자 추출물 및 분획물의 세포독성을 측정하기 위하여 MTT reduction assay를 실시하였다.
만형자 분획 추출물의 세포독성을 측정하기 위한 방법으로 LDH release assay를 실시하였다. SW620 세포주를 Ixlb cells/mZ로 맞춘 후, 100 B씩 96-well plate에 분주하여 CO2 incubator에서 24시간 동안 배양한 뒤, 10, 25, 50jig/m/의 농도로 제조한 만형자 분획 추출물을 세포주에 처리하였다. 다시 24시간 동안 배양한 후, 배양액을 새로운 96-well plate에 50 ji/ 분주하고, 이 배양액에 LDH reagent를 50jU씩 첨가하여 상온에서 정치시킨 후, 20분간 반응하였다.
대장암 유래의 세포주인 HT-29에 대한 만형자 추출물의 세포독성 확인 결과는 다음과 같다. 각 용매별 만형자 추출물을 10, 25, 50 jig/m/의 농도로 HT-29 세포주에 처리하고 MTT reduction assay 방법을 통하여 추출물을 처리하지 않은 대조군과 비교하여 암세포 성장 억제효과를 확인하였다(Fig. 1). Methanol과 ethanol 추출물을 10jig/m/으] 농도로 처리 했을 때 각각 64.
즉, hexane과 물을 같은 비율로 분획 주줄하여 hexane증을 분리하였고, 동일한 방법으로 diethyl ether, ethyl acetate 및 water 층으로 분획하여 얻어진 각각의 용매 분획물을 감압 농축 시켜 분획물을 얻었다. 각 추출물 및 분획물은 5mg/m/로 DMSO (dimethyl sulfoxide)^] 녹여 적당한 농도로 희석하였고, 1% DMSO가 되도록 처리하였다.
2A). 또한 apoptosis의 형태학적 득 징 중의 하나인 핵의 변화를 관찰하기 위해서 핵 내 DNA에 특이적으로 결합하는 형광 염색제인 Hoechst 33342를 사용하여 핵을 염색하고 형광 현미경으로 관찰하였다(Fig. 2B). 그 걸과 대조군은 타원형의 온선한 핵 모양을 나타낸 반면 methanol, ethanol, acetone 추출물 50ug/m/을 처리한 경우에 apoptotic body가 핵 주변에 나타나 HT-29 세포주의 사멸에 영향을 미치는 깃을 알 수 있었다.
추출물 및 분획물 제조. 만형자 10 g에 methanol, ethanol, acetone 용매를 각각 100 m/씩 가하여 상온에서 3일 동안 정치 시켜 추출 한 후, 여과지(5C. 110 mm, Advantec, Tokyo Roshi Kaisha, Ltd., Tokyo, Japan)로 여과하였다. 여과된 추출 여액은 회전 감압농축기(EYELA N-1000, Tokyo Rikakikai Co.
암세포의 형태학적 변화 관찰. 만형자 각 용매 추출물에 대한 H「29 세포주의 형태학적인 변화를 관찰하기 위해 6 well plate에 2 X lb cells/weH로 2 m/씩 첨가하여 24시간 동안 배양하고, 50jig/m/의 농도로 추출물을 24시간 처리한 후, phasecontrast microscope(Nikon, Japan)를 이용하여 변화된 HT-29 세포주의 형태학적 특징을 촬영하였다.
만형자 분획물의 암세포 성장 억제 효과. 만형자 용내별 추출물 중 가장 강력한 항암 활성을 가지는 acetone 주줄물을 이용하여 극성도에 따라 n-hexane, diethyl ether, ethyl acetate 및 water 순서로 용내 분획하여 그 분획물을 얻었다(Fig. 3). 각 용배별 분획물의 암세포 성장 억제효과에 대한 걸과는 Fig.
만형자 추출물 및 분획물의 세포독성을 측정하기 위하여 MTT reduction assay를 실시하였다. 세포주를 1 X 105 cells/mZ로 맞추고 96 well plate에 각각 100 ul씩 첨가하여 24시간 동안 37℃, 5% CO, incubator 에서 배양한 후, 각 용매별 추출물 및 분획물을 각각 10, 25, 50jig/m/의 농도로 제조하여 암 세포주에 처리하였다. 24시간 동안 배양한 후, 각 well에 PBS 완충액에 녹인 MTT(5 mg/mZ) 용액을 10X씩 첨가하여 다시 1시간 동안 배양 시킨다.
본 연구팀에서는 국내 . 외에서 자생하고 있는 435가지의 약용 식물을 대상으로 인간 대장암 세포주의 성장을 효과적으로 저해하는 천연 추출물의 탐색을 시도하였다. 그 결과 만형자 (Vitex mtimdifolia) 추출물로부터 대장암 세포주에 대한 세포독성을 확인할 수 있었다.
Acetone 추출물에서 다음 단계의 분획물을 얻기 위하여 용매의 극성을 달리하여 순차적으로 용매분획을 얻었다. 즉, hexane과 물을 같은 비율로 분획 주줄하여 hexane증을 분리하였고, 동일한 방법으로 diethyl ether, ethyl acetate 및 water 층으로 분획하여 얻어진 각각의 용매 분획물을 감압 농축 시켜 분획물을 얻었다. 각 추출물 및 분획물은 5mg/m/로 DMSO (dimethyl sulfoxide)^] 녹여 적당한 농도로 희석하였고, 1% DMSO가 되도록 처리하였다.
대상 데이터
(St Louis, MO, USA)로부터 구입하였으며, LDH(Lactate dehydrogenase) release assay kit는 Wako Pure Chemical Industries, Ltd.(Osaka, Japan)로부터 구입하였다. 그 외의 연구에 사용된 여러가지 용매 및 시약은 모두 일급 이상의 등급을 사용하였다.
암세포 배양. 만형자의 세포독성을 실험하기 위해 한국세포주은행(KCLB, Seoul)으로부터 인간 대장암 유래의 세포주 29와 SW620을 분양받아 본 실험에 사용하였다. 세포배양을 위해 RPMI1640 medium에 10% fetal bovine serum(FBS) 및 lOOunit/m/의 penicillin, 100ug/m/의 streptomycin을 첨 가하여 사용하였고, 95%의 습도가 유지되는 37℃, 5% CO, incubator (MOC-18AIC, SANYO, Osaka, Japan)에서 배양하였다.
시약 및 실험재료. 본 실험에 사용한 만형자은 2006년 2월경 남 마산시 (주)금강제약으로부터 제공받아 추출.분획하여 실험에 사용하였다.
그 결과 만형자 (Vitex mtimdifolia) 추출물로부터 대장암 세포주에 대한 세포독성을 확인할 수 있었다. 본 연구에 사용된 만형자는 순비기나무의 건조한 과실로서 우리나라 중부 이남의 바닷가에서 자생하고 있으며, 형태는 지름 4~6mm로 원구형 또는 편 구형이 고성분으로는 vitexicaipin, camphene, aliphatic hydrocarbon 등이 함유되어 있다26-27). 약리 작용으로는 항균 작용, 혈압강하 작용, 진통 작용, 혈액응고 억제작용, 멜라닌색소형성 억제작용 등이 알려져 있지만, 만형자의 항암활성에 관련된 생리활성물질의 연구는 아직 초보적인 단계에 불과하다.
본 연구팀에서는 국내 . 외에서 자생하고 있는 435가지의 약용 식물을 대상으로 인간 대장암 세포주의 성장을 효과적으로 저해하는 천연 추출물의 탐색을 시도하였다.
데이터처리
모든 자료의 처리는 SPSS-PC+ 통계 package를 사용하여 처리하였다. 각 항목에 따라 백분율과 평균치 土 표준편차(SD)를 구하고 각 추출물의 세포독성 정도를 비교하기 위해 one-way 분산분석 (ANOYA)을 시행하여 F값을 구하고 Scheffer test를 이용하여 대조군과 각 구간의 유의성 차이를 검증하였다. 통계적 유의성은 5% 수준에서 평가하였다.
각 항목에 따라 백분율과 평균치 土 표준편차(SD)를 구하고 각 추출물의 세포독성 정도를 비교하기 위해 one-way 분산분석 (ANOYA)을 시행하여 F값을 구하고 Scheffer test를 이용하여 대조군과 각 구간의 유의성 차이를 검증하였다. 통계적 유의성은 5% 수준에서 평가하였다.
이론/모형
LDH 측정에 의한 세포독성 확인. 만형자 분획 추출물의 세포독성을 측정하기 위한 방법으로 LDH release assay를 실시하였다. SW620 세포주를 Ixlb cells/mZ로 맞춘 후, 100 B씩 96-well plate에 분주하여 CO2 incubator에서 24시간 동안 배양한 뒤, 10, 25, 50jig/m/의 농도로 제조한 만형자 분획 추출물을 세포주에 처리하였다.
MTT 분석을 통한 세포 생존율 측정. 만형자 추출물 및 분획물의 세포독성을 측정하기 위하여 MTT reduction assay를 실시하였다. 세포주를 1 X 105 cells/mZ로 맞추고 96 well plate에 각각 100 ul씩 첨가하여 24시간 동안 37℃, 5% CO, incubator 에서 배양한 후, 각 용매별 추출물 및 분획물을 각각 10, 25, 50jig/m/의 농도로 제조하여 암 세포주에 처리하였다.
성능/효과
HT-29 세포주에 대한 높은 세포독성을 보인 zz-hexane 분획물이 다른 종류의 암세포에서도 이와 같은 암세포 성장억제 능을 나타내는지 확인하기 위하여 HT-29 세포주와는 다른 인간 유래의 대장암 세포주 SW620 세포주를 이용하여 다음과 같은 실험을 하였다. Fig. 5A와 같이 MTT reduction assay를 통하여 zz-hexane 분획물을 10, 25, 50 농도로 처리한 후세포 독성 확인한 결과, 50 μg/E에서 7.1 %로 강력한 세포독성 을 가지는 것을 알 수 있었다. 또한 LDH release assay를 통하여 세포독성을 확인한 결과 50 ug/ml에서 높은 세포독성을 보임을 알 수 있었다(Fig.
24시간 동안 배양한 후, 각 well에 PBS 완충액에 녹인 MTT(5 mg/mZ) 용액을 10X씩 첨가하여 다시 1시간 동안 배양 시킨다. Formazan 형성을 확인한 후, 배지를 완전히 제거하고, well 바닥에 형성된 formazairg- 녹이기 위해 lOOp/의 DMSO를 첨가한 후, ELISA reader (Model 680, BioRad, USA)를 이용하여 540nm에서 흡광도를 즉정하여 만형자 주줄물을 처리하지 않고 배양시킨 대조군 세포를 100%로 하였을 때의 상대적인 세포 성장 억제율로 나타내었다.
1). Methanol과 ethanol 추출물을 10jig/m/으] 농도로 처리 했을 때 각각 64.7%, 70.8%로 약한 활성을 보였지만, 50jig/mZ로 처리했을 때에는 각각 31.9%, 27.7%로 급격히 활성이 증가하는 것을 볼 수 있었다. 그러나 acetone 추출물의 경우 10 jig/m/ 농도에서 52.
2B). 그 걸과 대조군은 타원형의 온선한 핵 모양을 나타낸 반면 methanol, ethanol, acetone 추출물 50ug/m/을 처리한 경우에 apoptotic body가 핵 주변에 나타나 HT-29 세포주의 사멸에 영향을 미치는 깃을 알 수 있었다.
외에서 자생하고 있는 435가지의 약용 식물을 대상으로 인간 대장암 세포주의 성장을 효과적으로 저해하는 천연 추출물의 탐색을 시도하였다. 그 결과 만형자 (Vitex mtimdifolia) 추출물로부터 대장암 세포주에 대한 세포독성을 확인할 수 있었다. 본 연구에 사용된 만형자는 순비기나무의 건조한 과실로서 우리나라 중부 이남의 바닷가에서 자생하고 있으며, 형태는 지름 4~6mm로 원구형 또는 편 구형이 고성분으로는 vitexicaipin, camphene, aliphatic hydrocarbon 등이 함유되어 있다26-27).
2% 생존율을 보였으며 50 jig/m/ 농도에서는 18%로 가장 강한 암세포 성장 억제 효과를 보였다. 다음으로 H「29 세포주에 대한 형태학적 변화를 알아보기 위하여 위상차 현미경을 이용하여 관찰한 걸과, 대조구는 암세포가 조밀하고, 정상적으로 성장하는데 반해 각각의 추출물을 50 jig/m/ 농도로 처리한 세포는 선체적인 세포의 수가 적을 뿐만 아니라 그 형태가 응축되어 있고, 불규칙적인 형태를 가지면서 세포사멸이 나타난 깃을 알 수 있었다. 그중 acetone 추출물을 처리한 세포에서는 더 많은 세포사멸이 일어나는 깃으로 보아 MTT reduction assay 걸과와 동일한 깃으로 확인할 수 있었다(Fig.
1 %로 강력한 세포독성 을 가지는 것을 알 수 있었다. 또한 LDH release assay를 통하여 세포독성을 확인한 결과 50 ug/ml에서 높은 세포독성을 보임을 알 수 있었다(Fig. 5B).
Ethyl acetate에서는 다른 분획물과 비교하였을 때 미약한 활성이 보였고, water 층에서는 거의 활성이 보이지 않았다. 이상의 결과로부터 만형자 추출물의 비극성 성질을 가진 물질들이 대장암 세포주에 대한 세포독성 효과를 나타내고 있다는 깃을 시사하고 있었다.
HT-29 세포주에 각 분획물을 10, 25, 50jig/m/의 농도로 처리하였을 때, 여러 용내 분획물 중 n-hexane 분획물에서의 효과가 가장 늪:았다. 즉, n-hexane 분획물 50ug/r아을 처리했을때 27.3%의 암세포 생존율을 보였고, diethyl ether 분획물에서도 50 jig/m/ 농도 처리 시 32.9%로 활성이 증가하였으나 n- hexane 분획물과 비교하였을 때 상대적으로 효과가 닞음을 알 수 있었다. Ethyl acetate에서는 다른 분획물과 비교하였을 때 미약한 활성이 보였고, water 층에서는 거의 활성이 보이지 않았다.
참고문헌 (28)
Rho, S. N. and Han, J. H. (2000) Cytotoxicity of garlic and onion methanol extract on human lung cancer cell lines. J. Korean Soc. Food Sci. Nutr. 29, 870-874
Doll, R. and Peto, R. (1981) The causes of cancer. J. Natl. Cancer Inst. 66, 1191-1308
Cha, J. Y., Jeon, B. S., Moon, J. C., Yoo, J. H. and Cho, Y. S. (2004) Cytotoxic effect of Inonotus obliquus composition in HCT-15 human colon cancer cells and AGS gastric cancer cells. J. Korean Soc. Food Sci. Nutr. 33, 633-640
Shim, S. M., Kim, M. and Bae, S. J. (2001) Cytotoxicity and quinone reductase induced effects of Daucus carota L. leaf extracts on human cancer cells. J. Korean Soc. Food Sci. Nutr. 30, 86-91
Ham, S. S., Cui, C. B., Choi, H. T. and Lee, D. S. (2004) Antimutagenic and cytotoxic effects of Allium victorialis extracts. Korean J. Food Preserv. 11, 221-226
Chung, Y. J., Bae, M. W., Chung, M. I., Lee, J. S. and Chung, K. S. (2002) Cytotoxic effect of the distilled pine-needle extracts on several cancer cell lines in vitro. J. Korean Soc. Food Sci. Nutr. 31, 691-695
Cha, M. R., Yoon, M. Y., Kim, J. Y., Hwang, J. H. and Park, H. R. (2006) The cytotoxic effect of the gleditsiae semen extracts on human colon carcinoma cells. J. Korean Soc. Appl. Biol. Chem. 49, 248-253
Kim, K. H., Park, H. Y., Nam, J. H., Park, J. E., Kim, J. Y., Park, M. I., Chung, K. O., Park, K. Y. and Koo, J. Y. (2005) The inhibitory effect of curcumin on the growth of human colon cancer cells (HT-29, WiDr) in vitro. Korea J. Gastroenterol. 45, 277-284
Han, D. S., Oh, S. K. and Oh, E. S. (2003) Selective cytotoxicities of phenolic acids in cancer cells. J. Toxicol. Pub. Health. 19, 45-50
Kim, H. J., Lee, I. S. and Lee, K. R. (1999) Antimutagenic and anticancer effects of Ramaria botrytis (Fr.) Rick extracts. J. Kor. Soc. Food Sci. Nutr. 28, 1321-1325
Ham, S. S., Kim, E. J., Jung, S. W., Choi, K. P., Zhao, J. L. and Hwang, B. H. (1996) The antimutagenic and anticancer effect of Taxus cuspidata extracts. J. Kor. Soc. Food Sci. Nutr. 25, 1062-1068
Goodman, G. E., Yen, P. Y., Cox, C. T. and Crowlny, J. (1987) Effect of verapamilon in vitro cytotoxicin and vinblastine in human tumor cell. Cancer Res. 47, 2295-2304
Kim, W. S., Lee, R. A., Hwang, D. Y., Hong, Y. J. and Hong, S. I. (2004) Histoculture drug response assay in colorectal cancer specimen. J. Korean Surgical Society 66, 109-115
Tucker, J. M., Davis, C., Kitchens, M. E., Bunni, M. A., Priest, D. G., Spencer, H. T. and Berger, F. G. (2002) Response to 5- fluorouracil chemotheraphy is modified by dietary folic acid deficiency in $Apc^{Min/+}$ mice. Cancer Lett. 187, 153-162
Ramming, K. P. and Haskell, C. M. (1985) In Haskell CM (ed) Cancer treatment, (2nd ed.): Colorectal malignancies, Philadephia
Choi, H. R., Lee, K. H. and Kim, C. H. (2003) Radiosensitizing and antitumor effect of the seed of Benincasae hispida. Korean J. Food Sci. Technol. 35, 479-482
Kim, H. S., Hong, S. B., Sung, H. J., Moon, G. A. and Yoon, Y. (2003) Effect of deer blood on reduction of the side effects of chemotherapeutic drugs. Kor. J. Pharmacogn. 34, 145-149
Grigsby, P. W. (2002) Update on radiation therapy for endometrial cancer. Oncology 16, 777-786
Park, R. K., Oh, K. R., Lee, K. G., Mun, Y. J., Kim, J. H. and Woo, W. H. (2001) The water extract of Boswellia carterii induces apoptosis in human leukemia HL-60 cells. Yakhak Hoeji 45, 161-168
Oh, H. S., Cui, C. B., Choi, H. T., Kim, S. H., Jeon, M. S. and Ham, S. S. (2004) Antimutagenic and cytotoxic effects of Acer ginnala Max. bark extracts. Korean J. Food Preser. 11, 550- 556
Kim, Y. M., Do, J. R., Kim, D. S. and Park, J. H. (2006) Cytotoxicities of hydrolyzed crude laminaran from Eisenia bicyclis on the SNU-1, HeLa and SW cells. Korean J. Food Sci. Technol. 38, 793-798
Jung, S. E. and Bae, J. H. (2002) The effect of Prunus mume extracts on the growth of Hepg 2 and HeLa cell lines. Korean J. Food Nutr. 35, 439-445
Park, S. Y., Shin, M. O., Lee, S. H. and Bae, S. J. (2005) The growth inhibitory effects of Atrina Pecitinata fractions on cancer cell lines. Korean Nutr. Soc. 38, 307-312
Im, H. G., Yu, M. H., Chung, D. W. and Lee, I. S. (2006) Inhibitory effects of fungal metabolites isolated from foodstuffs on the growth of human cancer cell lines. Korean J. Food Sci. Technol. 38, 262-267
Park, Y. J., Kim, M. H. and Bae, S. J. (2002) Enhancement of anticarcinogenic effect by combination of lucii fructus with vitamin C. J. Korean Soc. Food Sci. Nutr. 31, 143-148
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