[논문]발효차중의 미량 성분인 gallic acid 산화물 purpurogallin carboxylic acid의 항염증 효과

주진우

[국내논문] 발효차중의 미량 성분인 gallic acid 산화물 purpurogallin carboxylic acid의 항염증 효과
Anti-inflammatory Effects of Purpurogallin Carboxylic Acid, An Oxidation Product of Gallic Acid in Fermented Tea 원문보기

한국식품과학회지 = Korean journal of food science and technology, v.40 no.6 = no.202, 2008년, pp.707 - 711

초록
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본 연구의 목적은 발효차 중에 미량물질로 존재하는 purpurogallin 유도체의 항염증에 대한 효과를 검토하고자 실시하였다. 특히 발효차에 존재하는 미량 성분들에 대한 생리활성 연구보고는 많지 않은데 이러한 이유는 미량성분을 기술적으로 발효차로부터 분리 정제하기가 매우 어렵기 때문으로 판단된다. 특히 녹차잎에 존재하는 페놀 화합물중 하나인 gallic acid는 발효과정 중 benzotropolone 구조를 가지는 purpurogallin 유도체를 새롭게 만드는 것으로 알려져 있는데 본 연구에서는 gallic acid 화합물이 이러한 과정 중에 생성하는 산화물을 효소적 산화 모델시스템인 peroxidase/hydrogen peroxide 모델을 이용하여 산화물을 얻은 후 컬럼크로마토그라피법을 이용하여 순수 분리하였다. 이 과정에서 purpurogallin carboxylic acid(PCA)를 gallic acid의 산화물로 분리할 수 있었고 이의 구조를 $^{1}H$ NMR, $^{13}C$ NMR 및 MS 분석방법을 이용하여 확인할 수 있었다. 이후 단리되어진 PCA의 항염증 효과를 검토하였다. RAW264.7 세포를 이용하여 PCA의 항염증 효과를 검토하였는데 PCA 100, 75, $50{\mu}g/mL$ 처리는 NO의 생성을 LPS만 처리한 세포에 비해 각각 57.6, 41.5, 21.8%를 유의적으로 저해시키는 것으로 나타났다. PCA 100, $75{\mu}g/mL$ 처리군에서 LPS만 처리한 RAW264.7 세포에 비해 IL-6의 생성이 각각 43.1, 23.9% 억제되어지는 것으로 관찰되었다. 또한 유사한 경향으로 PCA 100 및 $75{\mu}g/mL$ 처리군에서 LPS만 처리한 RAW264.7 세포에 비해 $PGE_2$의 생성이 각각 29.0% 및 15.4% 억제 되어지는 것으로 관찰되었다. 최근 생리활성을 가지는 신물질의 탐색 및 신소재 개발의 중요성이 부각되고 있다. 특히 선진국의 신물질의 개발에 의한 물질 특허가 증가하고 있고, 이에 따라 국내에서도 국제 경쟁력을 확보하기 위한 새로운 소재 개발이 시급한 상황이다. 본 연구 결과는 gallic acid의 산화물인 purpurogallin 유도체를 이용한 항염증 소재의 적용 가능성을 검토한 주요한 결과로 사료되어진다. 또한 본 연구를 통하여 발효차에 미량으로 존재하는 화합물들의 생리활성을 확인할 수 있었으며, 발효차에 포함되어 있는 미량 성분들의 항염증 관련 신소재 개발 가능성을 검토할 수 있었다.

Abstract ▼ AI-Helper

The principal objective of the current study was to isolate a purpurogallin derivative as an oxidation product from gallic acid, in an effort to assess the anti-inflammatory effects of this compound. Purpurogallin derivative is known to be the one of the oxidation products of gallic acid. This compound has been identified as a minor chemical component in fermented tea products. It has been previously demonstrated that theaflavins, the oxidation products of catechins found in fermented tea products, exert profound antioxidant and anti-inflammatory effects. However, the biological activities of a minor chemical component in fermented teas have yet to be evaluated. Purpurogallin carboxylic acid (PCA) was identified as a major oxidation product of gallic acid from a peroxidase/hydrogen peroxide oxidation model system. The identity of the PCA was verified by $^{1}H$ NMR, $^{13}C$ NMR and MS techniques. PCA treatment significantly suppressed the generation of pro-inflammatory mediators including nitric oxide and IL-6 in lipopolysaccharide (LPS)-stimulated RAW264.7 murine macrophages. According to the nitrite assay, PCA 100, 75, and $50{\mu}g/mL$ treatment dose-dependently inhibited NO production by 57.6, 41.5, and 21.8%, respectively, in LPS-stimulated RAW264.7 murine macrophage cells. Moreover, IL-6 production was inhibited to a significant degree with PCA treatment of 100 and $75{\mu}g/mL$ at 43.1 and 23.9%, respectively. PCA treatment also significantly suppressed $PGE_2$ production at levels of 100 and $75{\mu}g/mL$. These results showed that PCA exerts inhibitory effects on the production of inflammatory mediators.

Keyword

AI 본문요약
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문제 정의

본 연구에서는 녹차에 함유되어 있는 페놀성 화합물인 gallic acid가 발효차 제조 중에 산화작용에 의해 형성되어지는 purpurogallin 유도체를 이용하여 이의 항염증 효과를 RAW264.7 세포배양 실험을 통하여 검토하고자 하였다. 이를 위해 gallic acid 산화물을 얻기 위한 효소적 산화모델 시스템을 검토하였고, 단리되어진 purpurogallin 유도체가 RAW264.
실질적으로 식품소재에서 미량으로 존재하는 화합물이지만 이들의 생리활성을 검토하고 기능성 소재로서의 적용 가능성을 검토하는 것은 신소재 탐색 및 개발에 매우 중요한 부분으로 사료되어진다. 본 연구에서는 gallic acid 화합물에 의해 산화과정 중에 생성되는 산화물을 효소를 이용한 산화 모델 시스템을 적용하여 이의 산화물인 purpurogallin carboxylic acid의 효소적 합성방법을 검토하고, 본 화합물에 대해 세포배양 실험을 통한 항염증효과를 검토하고자 실시하였다.
특히 IL-6 및 TNF-α는 pro-inflammatory cytokine으로 급성 또는 만성 염증반응에 있어서 주요한 역할을 하는 것으로 알려져 있다. 본 실험에서는 PCA의 처리가 murine macrophage(RAW264.7)의 NO 생성에 어떠한 영향을 미치는지를 검토하고자 실시하였다. RAW264.
본 연구의 목적은 발효차 중에 미량물질로 존재하는 purpurogallin 유도체의 항염증에 대한 효과를 검토하고자 실시하였다. 특히 발효차에 존재하는 미량 성분들에 대한 생리활성 연구보고는 많지 않은데 이러한 이유는 미량성분을 기술적으로 발효차로부터 분리 정제하기가 매우 어렵기 때문으로 판단된다.
특히 선진국의 신물질의 개발에 의한 물질 특허가 증가하고 있고, 이에 따라 국내에서도 국제 경쟁력을 확보하기 위한 새로운 소재 개발이 시급한 상황이다. 본 연구 결과는 gallic acid의 산화물인 purpurogallin 유도체를 이용한 항염증 소재의 적용 가능성을 검토한 주요한 결과로 사료되어진다. 또한 본 연구를 통하여 발효차에 미량으로 존재하는 화합물들의 생리활성을 확인할 수 있었으며, 발효차에 포함되어 있는 미량 성분들의 항염증 관련 신소재 개발 가능성을 검토할 수 있었다.

제안 방법

IL-6 및 PGE2 양은 각 PCA 처리군의 세포배양 상층액을 채취 후 ELISA kit(R&D Systems, Minneapolis, MN, USA)를 이용하여 제조사의 프로토콜에 따라 측정하였다.
이후 각 well은 PBS를 이용하여 세척 후 FBS-free DMEM 배지를 이용하여 PCA를 100, 75, 50, 25, 12.5 µg/mL 농도로 처리하여 1시간 동안 배양하였다.
이후 각 well에 LPS를 1 µg/mL 농도로 처리하여 24시간 배양 후 NO 생성량을 측정하였다.
이후 각 well은 phosphate buffered saline (PBS)를 이용하여 세척 후 FBS-free DMEM 배지를 이용하여 PCA를 100, 75, 50, 25, 12.5 µg/mL 농도로 처리하여 1시간 동안 배양하였다.
7 세포배양 실험을 통하여 검토하고자 하였다. 이를 위해 gallic acid 산화물을 얻기 위한 효소적 산화모델 시스템을 검토하였고, 단리되어진 purpurogallin 유도체가 RAW264.7 세포에 있어서 nitric oxide 및 염증성 cytokine 생성에 대해 미치는 영향을 검토하였다.
컬럼크로마토그라피에 이용한 LH-20는 Amersham Bioscience사(Uppsala, Sweden)로부터 구입하였다. Thin-layer chromatography(TLC) 분석은 Silica gel 60 F₂₅₄(Merck, Darmstadt, Germany)를 이용하여 실시하였으며 spot은 UV illumination과 5%(v/v) H₂SO₄ 에탄올 용액을 스프레이하여 측정하였다. ¹H NMR 및 ¹³C NMR spectra는 Bruker Avance 300 spectromter(Billerica, MS, USA)를 이용하여 측정하였다.
Thin-layer chromatography(TLC) 분석은 Silica gel 60 F₂₅₄(Merck, Darmstadt, Germany)를 이용하여 실시하였으며 spot은 UV illumination과 5%(v/v) H₂SO₄ 에탄올 용액을 스프레이하여 측정하였다. ¹H NMR 및 ¹³C NMR spectra는 Bruker Avance 300 spectromter(Billerica, MS, USA)를 이용하여 측정하였다. 순수 분리된 화합물은 DMSO-d₆에 용해하여 측정하였고 chemical shift는 δ(ppm)로 표시하였다.
순수 분리된 화합물은 DMSO-d₆에 용해하여 측정하였고 chemical shift는 δ(ppm)로 표시하였다. LC/MS 분석은 ThermoFinnigan TSQ Quantum Ultra(Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA, USA)를 이용하여 분석을 실시하였다. Mass spectrometer는 negative-ion electrospray ionization mode에서 분석을 실시하였다.
LC/MS 분석은 ThermoFinnigan TSQ Quantum Ultra(Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA, USA)를 이용하여 분석을 실시하였다. Mass spectrometer는 negative-ion electrospray ionization mode에서 분석을 실시하였다.
Gallic acid의 산화물을 얻기 위해 hydrogen peroxide/peroxidase를 이용한 산화모델 시스템을 이용하였다. 즉, 500 mL 인산완충용액(pH 7.
0, 200 mM) 용액에 5 g gallic acid를 용해하고 미리 조제한 peroxidase 용액(1700 unit)을 첨가 후 3%(v/v) hydrogen peroxide 용액을 첨가하면서 산화반응을 진행시켰다. 반응을 진행하는 동안 반응 생성물의 생성여부는 TLC를 이용하여 확인하였고, 약 2시간의 반응 후 반응용액에 동량의 에틸아세테이트 용액을 첨가하여 반응을 정지시킨 후 분획 깔대기에 옮겨 유기용매층을 분리하여 취한 후 이를 감압농축기를 이용하여 농축하였다. 이후 농축물은 LH-20 컬럼크로마토그라피(30×450 mm)를 이용하여 95% 에탄올을 용출시키며 반응 생성물을 분리하였다.
또한 LH-20 컬럼크로마트그라피를 이용한 분리 과정을 반복 실시하여 순수한 물질을 분리하여 gallic acid 산화물인 purpurogallin carboxylic acid(PCA, 150 mg)를 얻을 수 있었다. 순수 분리된 gallic acid 산화물의 화학적 구조를 확인하기 위하여 ¹H NMR, ¹3C NMR 및 MS 분석을 이용하였다.
이후 최종 반응액으로부터 수용성 고분자화합물을 partition 방법을 이용하여 제거한 후, 분리된 유기용매층을 취하여 감압 농축하여 건조시켰으며, 이후 건조물은 컬럼크로마토그라피법(LH-20)을 이용하여 95%의 에탄올 용매를 용출하며 진한 황색의 purpurogallin 유도체를 분리 정제하였다.
RAW264.7 세포주에 LPS와 PCA 12.5, 25, 50, 75, 100 µg/mL 농도로 처리한 후 각 농도별 NO 생성 억제효과를 측정하였다.
Gallic acid의 산화물인 purpurogallin 유도체를 얻기 위하여 gallic acid를 인산완충용액에 용해 후 peroxidase와 hydrogen peroxide를 이용한 산화 모델 시스템에 적용하여 이의 산화물을 얻었다. 이후 최종 반응액으로부터 수용성 고분자화합물을 partition 방법을 이용하여 제거한 후, 분리된 유기용매층을 취하여 감압 농축하여 건조시켰으며, 이후 건조물은 컬럼크로마토그라피법(LH-20)을 이용하여 95%의 에탄올 용매를 용출하며 진한 황색의 purpurogallin 유도체를 분리 정제하였다.
RAW264.7세포에 LPS와 각기 다른 농도별 PCA(25, 50, 75, 100 µg/mL)를 처리 후 세포배양액을 취하여 PGE2 생성량을 측정하였다.
또한 PCA가 염증반응의 주요한 매개물질로 알려져 있는 IL-6와 같은 염증성 cytokine의 생성에 미치는 영향을 관찰하기 위하여 RAW264.7 세포에 LPS와 각기 다른 농도별 PCA(12.5, 25, 50, 75, 100 µg/mL)를 처리 후 세포배양액을 취하여 IL-6의 생성량을 측정하였다.
7세포에 LPS와 각기 다른 농도별 PCA(25, 50, 75, 100 µg/mL)를 처리 후 세포배양액을 취하여 PGE₂ 생성량을 측정하였다. LPS와 시료를 처리한 RAW 264.7 세포를 배양액에서 24시간 배양 후 ELISA kit를 이용하여 PGE2의 변화를 측정하였다. PCA 100 및 75 µg/mL 처리군에서 LPS만 처리한 RAW264.
특히 녹차잎에 존재하는 페놀 화합물중 하나인 gallic acid는 발효과정 중 benzotropolone 구조를 가지는 purpurogallin 유도체를 새롭게 만드는 것으로 알려져 있는데 본 연구에서는 gallic acid 화합물이 이러한 과정 중에 생성하는 산화물을 효소적 산화 모델시스템인 peroxidase/hydrogen peroxide 모델을 이용하여 산화물을 얻은 후 컬럼크로마토그라피법을 이용하여 순수 분리하였다.
특히 녹차잎에 존재하는 페놀 화합물중 하나인 gallic acid는 발효과정 중 benzotropolone 구조를 가지는 purpurogallin 유도체를 새롭게 만드는 것으로 알려져 있는데 본 연구에서는 gallic acid 화합물이 이러한 과정 중에 생성하는 산화물을 효소적 산화 모델시스템인 peroxidase/hydrogen peroxide 모델을 이용하여 산화물을 얻은 후 컬럼크로마토그라피법을 이용하여 순수 분리하였다. 이 과정에서 purpurogallin carboxylic acid(PCA)를 gallic acid의 산화물로 분리할 수 있었고 이의 구조를 ¹H NMR, ¹³C NMR 및 MS 분석방법을 이용하여 확인할 수 있었다. 이후 단리되어진 PCA의 항염증 효과를 검토하였다.
이 과정에서 purpurogallin carboxylic acid(PCA)를 gallic acid의 산화물로 분리할 수 있었고 이의 구조를 ¹H NMR, ¹³C NMR 및 MS 분석방법을 이용하여 확인할 수 있었다. 이후 단리되어진 PCA의 항염증 효과를 검토하였다. RAW264.

대상 데이터

세포배양 실험을 위한 Dulbecco’s Modified Eagle’s Medium(DMEM) 및 fetal bovine serum(FBS)는 Welgene사(Daegu, Korea)에서 구입하였다.
RAW264.7 murine macrophage는 DMEM에 10% fetal bovine serum(FBS), 100 U/mL penicillin, 100 µg/mL streptomycin을 첨가한 것을 사용하였으며 배양기(HERAcell 150, Thermo Fisher Scientific)에서 37℃와 5% CO2를 유지하며 배양하였다.
Griess reagent는 (주)인트론바이오테크놀로지(Seongnam, Korea)로부터 구입하여 사용하였고, PGE2 및 IL-6 ELISA kit는 R&D사(Minneapolis, MN, USA)에서 구입하였다.
Horseradish peroxidase, lipopolysaccharide(LPS), penicillin 및 streptomycine은 Sigma-Aldrich사(St. Louis, MO, USA)에서 구입하여 사용하였으며, gallic acid는 Yakuri Pure Chemical(Kyoto, Japan)로부터 구입하였다. 추출에 사용한 유기용매는 특급시약을 구입하여 사용하였다.
Louis, MO, USA)에서 구입하여 사용하였으며, gallic acid는 Yakuri Pure Chemical(Kyoto, Japan)로부터 구입하였다. 추출에 사용한 유기용매는 특급시약을 구입하여 사용하였다. 세포배양 실험을 위한 Dulbecco’s Modified Eagle’s Medium(DMEM) 및 fetal bovine serum(FBS)는 Welgene사(Daegu, Korea)에서 구입하였다.
Griess reagent는 (주)인트론바이오테크놀로지(Seongnam, Korea)로부터 구입하여 사용하였고, PGE₂ 및 IL-6 ELISA kit는 R&D사(Minneapolis, MN, USA)에서 구입하였다. 컬럼크로마토그라피에 이용한 LH-20는 Amersham Bioscience사(Uppsala, Sweden)로부터 구입하였다. Thin-layer chromatography(TLC) 분석은 Silica gel 60 F₂₅₄(Merck, Darmstadt, Germany)를 이용하여 실시하였으며 spot은 UV illumination과 5%(v/v) H₂SO₄ 에탄올 용액을 스프레이하여 측정하였다.

데이터처리

모든 분석항목은 3회 이상 반복 시험하여 결과는 평균±표준편차로 나타내었다.
실험결과는 SPSS 14.0판(SPSS Inc., Chicago, IL, USA)을 이용하여 ANOVA로 분석하였고, 집단 간 비교를 위한 사후분석은 Tukey로 검증하였으며 p<0.05 이상일 때만 통계적 유의성이 있는 것으로 판단하였다.

성능/효과

이후 농축물은 LH-20 컬럼크로마토그라피(30×450 mm)를 이용하여 95% 에탄올을 용출시키며 반응 생성물을 분리하였다. 또한 LH-20 컬럼크로마트그라피를 이용한 분리 과정을 반복 실시하여 순수한 물질을 분리하여 gallic acid 산화물인 purpurogallin carboxylic acid(PCA, 150 mg)를 얻을 수 있었다. 순수 분리된 gallic acid 산화물의 화학적 구조를 확인하기 위하여 ¹H NMR, ¹3C NMR 및 MS 분석을 이용하였다.
PCA 100, 75, 50 µg/mL 처리는 NO의 생성을 LPS만 처리한 세포에 비해 각각 57.6, 41.5, 21.8%를 유의적으로 저해시키는 것으로 나타났다.
그리고 negativeion electrospray ionization mode LC/MS 분석결과 화합물의 분자량이 264임을 확인할 수 있는 m/z 263 [M-H]−이온을 관찰할 수 있었다(Fig. 1).
13C NMR spectrum을 통하여 12개의 carbon signal을 확인할 수 있었고, 특히 δc 182.6을 통해 carboxylic acid 기가 존재하는 것을 확인할 수 있었다(Table 1).
최종적으로 정제된 purpurogallin 유도체의 1H NMR spectrum을 통해 benzotropolone에서 나타나는 세 개의 특이적인 aromatic proton을 나타내는 chemical shift인 δH 8.16(1H s), 7.57(1H s), 7.08(1H s) signal을 확인할 수 있었으며, 또한 δH 15.19(br s)에서 caboxylic proton을 확인할 수 있었다(Table 1).
1). 이러한 분석결과를 토대로 분리 정제되어진 purpurogallin 유도체 화합물이 최종적으로 purpurogallin carboxylic acid(PCA, Fig. 2)로 확인할 수 있었다.
5, 25, 50, 75, 100 µg/mL 농도로 처리한 후 각 농도별 NO 생성 억제효과를 측정하였다. 실험결과 PCA처리는 유의적으로 NO의 형성을 억제하는 것을 확인할 수 있었다. 특히 처리농도가 증가함에 따라 NO의 생성이 감소하는 것을 확인할 수 있었다(Fig.
실험결과 PCA처리는 유의적으로 NO의 형성을 억제하는 것을 확인할 수 있었다. 특히 처리농도가 증가함에 따라 NO의 생성이 감소하는 것을 확인할 수 있었다(Fig. 3). PCA 100, 75, 50 µg/mL 처리는 NO의 생성을 LPS만 처리한 세포에 비해 각각 57.
PCA 100, 75 µg/mL 처리군에서 LPS만 처리한 RAW264.7 세포에 비해 IL-6의 생성이 각각 43.1, 23.9% 억제되어지는 것으로 관찰되었다.
PCA 100 및 75 µg/mL 처리군에서 LPS만 처리한 RAW264.7 세포에 비해 PGE2의 생성이 각각 29.0% 및 15.4% 억제되어지는 것으로 관찰되었다(Fig. 4).
그러나 PCA 처리군 25 µg/mL 처리농도 이하에서는 저해효과는 나타나지 않는 것으로 관찰되었다. 이러한 실험결과로 PCA는 LPS를 처리한 RAW264.7 세포에서 NO의 생성을 효과적으로 억제할 수 있는 것으로 나타났다.
5, 25, 50, 75, 100 µg/mL)를 처리 후 세포배양액을 취하여 IL-6의 생성량을 측정하였다. 실험결과 PCA 처리는 IL-6의 생성을 효과적으로 억제한 것으로 나타났다(Fig. 5). PCA 100, 75 µg/mL 처리군에서 LPS만 처리한 RAW264.
Cai 등(19)은 동물실험을 통하여 theaflavin의 투여가 뇌에 있어서 염증관련 효소들인 iNOS와 COX-2의 mRNA expression을 억제하는 것으로 보고하였다. 또한 본 연구 논문에는 실험결과를 수록하지는 않았지만 PCA의 항염증 효과를 이해하기 위한 지속적인 실험과정에서 PCA는 LPS를 처리한 murine macrophage(RAW264.7)에서 효과적으로 COX-2 mRNA expression을 억제하는 것으로 나타났다.
이상의 결과를 종합하여 보면 발효차에 미량으로 존재하는 산화물의 항염증 효과를 확인할 수 있었으며, PCA의 처리는 효과적으로 NO 및 염증관련 cytokine의 분비를 억제하는 것으로 판단되어진다. 이러한 결과는 식품소재를 이용한 항염증 관련 신소재 개발 가능성을 확인할 수 있었으며 이들의 기능성 소재로의 개발 검토 및 다양한 발효차의 색소성분들에 대한 좀 더 심도있는 연구가 필요할 것으로 판단된다.
또한 유사한 경향으로 PCA 100 및 75 µg/mL 처리군에서 LPS만 처리한 RAW264.7 세포에 비해 PGE2의 생성이 각각 29.0% 및 15.4% 억제 되어지는 것으로 관찰되었다.
RAW264.7 세포를 이용하여 PCA의 항염증 효과를 검토하였는데 PCA 100, 75, 50 µg/mL 처리는 NO의 생성을 LPS만 처리한 세포에 비해 각각 57.6, 41.5, 21.8%를 유의적으로 저해시키는 것으로 나타났다.

후속연구

이상의 결과를 종합하여 보면 발효차에 미량으로 존재하는 산화물의 항염증 효과를 확인할 수 있었으며, PCA의 처리는 효과적으로 NO 및 염증관련 cytokine의 분비를 억제하는 것으로 판단되어진다. 이러한 결과는 식품소재를 이용한 항염증 관련 신소재 개발 가능성을 확인할 수 있었으며 이들의 기능성 소재로의 개발 검토 및 다양한 발효차의 색소성분들에 대한 좀 더 심도있는 연구가 필요할 것으로 판단된다.
본 연구 결과는 gallic acid의 산화물인 purpurogallin 유도체를 이용한 항염증 소재의 적용 가능성을 검토한 주요한 결과로 사료되어진다. 또한 본 연구를 통하여 발효차에 미량으로 존재하는 화합물들의 생리활성을 확인할 수 있었으며, 발효차에 포함되어 있는 미량 성분들의 항염증 관련 신소재 개발 가능성을 검토할 수 있었다.

질의응답

핵심어	질문	논문에서 추출한 답변
	녹차에 함유되어 있는 카테킨 화합물에는 무엇이 있는가?	특히 녹차와 홍차에 많이 함유되어 있는 폴리페놀 화합물들은 높은 항산화력을 가지고 있는 것으로 보고되어 있다(6-10). (-)-Epicatechin(EC), (-)-epicatechin gallate(ECG), (-)-epigallocatechin(EGC), 그리고 (-)-epigallocatechin gallate(EGCG) 화합물들은 녹차에 함유되어 있는 카테킨(flavan-3-ols) 화합물들로 녹차의 높은 항산화력을 부여하여 주는 주요한 화합물로 알려져 있다. 녹차의 카테킨 화합물들은 높은 항산화력 뿐만 아니라 발암과정의 초기 단계에 있어 주요한 인자로 알려져 있는 만성적 염증을 효과적으로 억제한다는 연구보고가 있다.
	발효차 중에 미량물질에 대한 생리 활성 연구보고가 많지 않은 이유는 무엇인가?	본 연구의 목적은 발효차 중에 미량물질로 존재하는 purpurogallin 유도체의 항염증에 대한 효과를 검토하고자 실시하였다. 특히 발효차에 존재하는 미량 성분들에 대한 생리활성 연구보고는 많지 않은데 이러한 이유는 미량성분을 기술적으로 발효차로부터 분리 정제하기가 매우 어렵기 때문으로 판단된다. 특히 녹차잎에 존재하는 페놀 화합물중 하나인 gallic acid는 발효과정 중 benzotropolone 구조를 가지는 purpurogallin 유도체를 새롭게 만드는 것으로 알려져 있는데 본 연구에서는 gallic acid 화합물이 이러한 과정 중에 생성하는 산화물을 효소적 산화 모델시스템인 peroxidase/hydrogen peroxide 모델을 이용하여 산화물을 얻은 후 컬럼크로마토그라피법을 이용하여 순수 분리하였다.
	녹차 카테킨 화합물은 무엇의 활성에 영향을 미치는가?	녹차의 카테킨 화합물들은 높은 항산화력 뿐만 아니라 발암과정의 초기 단계에 있어 주요한 인자로 알려져 있는 만성적 염증을 효과적으로 억제한다는 연구보고가 있다. 이는 녹차 카테킨 화합물이 ornithine decarboxylase(ODC), cyclooxygenase(COX), 그리고 lipoxygenase(LOX) 활성에 영향을 미치기 때문으로 알려져 있다. 녹차 카테킨은 COX-2를 down-regulating하거나, iNOS 발현을 억제함으로써 NO의 생성을 감소시킨다고 알려져 있다(11).

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Katiyar S, Mukhtar H. Inhibition of phorbol ester tumor promoter 12-O-tetradecanoylphorbol-13-acetate-caused inflammatory responses in SENCAR mouse skin by black tea polyphenols. Carcinogenesis 18: 1911-1916 (1997)

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Huang MT, Liu Y, Ramji D, Lo CY, Ghai G, Dushenkov S, Ho CT. Inhibitory effects of black tea theaflavin derivatives on 12-Otetradecanoylphorbol- 13-acetate-induced inflammation and arachidonic acid metabolism in mouse ears. Mol. Nutr. Food Res. 50: 115-122 (2006)

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표제어: PCR

동의어: Packet Collision Rate

용어 설명 출처 목록 (6)

용어 설명: PCR은 세균 특이성이 있는 primer를 이용하여 적은 수의 세균이 있을지라도 쉽게 검출할 수 있는 유용한 방법이며, 이를 이용하여 구강 내 치면세균막이나 타액에서 직접 세균을 검출할 수 있게 되었다[8].

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