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문제 정의
- 국내에서만 주로 사용되고 있는 구리합금 청동 놋그릇유기소재의 표면에서 Salmonella spp., E. coli 0157, E. sakazakii, B. cereus 식중독 세균이 노출되었을 때 이들의사멸율을 비교하여 이 합금을 식품제조 환경에서 활용하여 교차오염을 줄일 수 있는지에 대한 연구를 수행하였다.
제안 방법
- 냉동건조된 균주를 brain heart infusionbroth (Difco, Becton, Dickinson and Company Sparks,MD, USA)에서 37 E로 활성화하여 사용하였다. Tryptic soy broth (TSB, BD, New Jersey, USA)에서 배양된 배양액을 각각의 금속표면에 떨어뜨려 일정시간이 지난 후에 다시 회수하여 선택배지에서 생균수를 측정하였다. 선택및 선별배지로는 SS agar (Difco), EMB agar (Difco), MYP agar (Difco)와 DFI agar (Oxoid Ltd.
- 스테인레스 스틸은 74% Fe, 18% Cr, 8% Sn로이루어져 있고 놋쇠는 78% Cu와 22% Sn로 구성되어 있으며, 주석과 구리쿠폰은 각각 100% 주석과 구리로 만들어져 있다. 이때 사용한 청동합금으로 방짜유기를 사용하였으며 정확히 계량된 구리와 주석을 불에 달구어 메질 (망치질)을 되풀이해서 얇게 늘여가며 형태를 잡아가는 기법으로 제작되었다.
- 금속쿠폰에 20 讪씩을 떨어뜨렸다. 0시간부터 72시간까지 상온에서 방치하여 24시간별로 각각 50 nl 멸균증류수로 20회씩 pippeting 하여 건조된 세균을 2회 회수하여 TSA에 도말한 후 3*>7C 에서 24시간 동안 회복 및 배양을 하여 형성된 집락을 계수하였다. 각 대상균주를 3반복 실험하여 그 평균과 표준 오차를 계산하였다.
- 45 μm membrane filter (Sartorius, Hannover, Germary)에 여과시켰다. 그 여과액을 최종 농도가 0, 10, 25, 50 ppm이 되도록 CuSO4 수용액 1 mL을 7 log CFU/ mL 수준의 9mL의 0.85% NaCl에 혼합하여 시험 용액을 만들었다. 시험 용액은 상온에서 0, 0.
- 85% NaCl에 혼합하여 시험 용액을 만들었다. 시험 용액은 상온에서 0, 0.5, 1, 2, 6, 24, 72시간 방치 하였으며 후에 각각 100|丑씩 회수하여 TSA에 도말한 후 37℃에서 24시간동안 회복 및 배양을 하여 형성된 집락을 계수 하였다. 희석이 필요한 경우 10진 희석법을 이용하였다.
- 합금이다'5). 따라서 본 실험에는 유기 항균 성분을 알기 위해 대조구 금속으로 스테인레스 스틸, 방짜유기,100% 주석, 100% 구리쿠폰(7X7cm2) 상에서 노출시간에 따른 생균수를 측정하였다. 대상 균주로는 총 8개의 균주이며 각각 두 종의 S.
- 구리이온에 대한 각각의 세균 저해농도를 알기위해 증류수에 용해한 CuSO4 수용액 ImL을 9mL의 세균 함유액과 혼합하여 저해농도를 최종 농도가 0, 10, 25, 50 ppm 이 되도록 조정하였다. 대상 균주는 S.
대상 데이터
- 한국인의 식생활에서 사용되어 왔던 놋그릇은 유기라고도 불리우며 구리합금인 청동(bronze)으로 제작되었으며, 스테인레스 그릇이 출현하기 이전부터 오랫동안 사용되어왔다. 바로 얼마 전에도 제사 등 특수한 경우에 사용되었고 일부 한식 음식점등에서는 아직도 사용되고 있으나 그의 활용은 점점 더 미약한 수준이 머물고 있다.
- subsp. Typhimurium ATCC 12023, S. Typhimurium ATCC 14028, E. coli O157:H7 NCTC 12079, E. coli O157:H7 505B, E. sakazakii ATCC 51329, E. sakazakii NCTC 2949, B. cereus KCCM 1094, B. cereus KCCM 40935등이 사용되었다. 냉동건조된 균주를 brain heart infusionbroth (Difco, Becton, Dickinson and Company Sparks,MD, USA)에서 37 E로 활성화하여 사용하였다.
- cereus KCCM 40935등이 사용되었다. 냉동건조된 균주를 brain heart infusionbroth (Difco, Becton, Dickinson and Company Sparks,MD, USA)에서 37 E로 활성화하여 사용하였다. Tryptic soy broth (TSB, BD, New Jersey, USA)에서 배양된 배양액을 각각의 금속표면에 떨어뜨려 일정시간이 지난 후에 다시 회수하여 선택배지에서 생균수를 측정하였다.
- 4가지의 금속쿠폰을 사용하였다. 스테인레스 스틸, 주석, 구리, 청동 구리합금을 일정크기(7cm X 7cm)로 만들어 사용하였다.
- 4가지의 금속쿠폰을 사용하였다. 스테인레스 스틸, 주석, 구리, 청동 구리합금을 일정크기(7cm X 7cm)로 만들어 사용하였다. 스테인레스 스틸은 74% Fe, 18% Cr, 8% Sn로이루어져 있고 놋쇠는 78% Cu와 22% Sn로 구성되어 있으며, 주석과 구리쿠폰은 각각 100% 주석과 구리로 만들어져 있다.
- 구리이온의 미생물 저해농도를 측정하기 위한 시험으로대상 균주는 S. Typhimurium ATCC 14028, B. cereus KCCM 40935, E. coli 0157: H7 505B, E. sakazakii ATCC 51329와 E. sakazakii NCTC 2949 를 사용하였다.
- 따라서 본 실험에는 유기 항균 성분을 알기 위해 대조구 금속으로 스테인레스 스틸, 방짜유기,100% 주석, 100% 구리쿠폰(7X7cm2) 상에서 노출시간에 따른 생균수를 측정하였다. 대상 균주로는 총 8개의 균주이며 각각 두 종의 S. Typhimurium, E. coli O157:H7, B. cereus, E. sakazakii 공시균주를 3반복 실험하였다. S.
- Survial profile of Salmonella Typhimurium exposed on the stainless steel, bronze, copper, and tin copouns at different times. S. Typhimurium ATCC 12023 and S. Typhimurium ATCC 14028 were used.
- coli 0157 exposed on the stainlesssteel, bronze, copper, and tin coupons at different times. E. coli-sAO157:H7 NCTC 12079 and E. coli 0157 : H7 5O5B were used.
- sakazakii exposed on the stainless steel, bronze, copper, and tin coupons at different times. E. sakazakii ATCC 51329 and E. sakazakii NCTC 2949 were used.
- cereus exposed on the stainless steel, bronze, copper, and tin coupons at different times. B. cereus KCCM 1094 and B. cereus KCCM 40935 were used.
- 되도록 조정하였다. 대상 균주는 S. Typhimurium ATCC 14028, B. cereus KCCM 40935, E. coli O157:H7 505B, E. sakazakii ATCC 51329를 사용하였다. 결과를 보면 각각 구리 (*) CiF 이온의 최소생육저해농도는 S.
- Tryptic soy broth (TSB, BD, New Jersey, USA)에서 배양된 배양액을 각각의 금속표면에 떨어뜨려 일정시간이 지난 후에 다시 회수하여 선택배지에서 생균수를 측정하였다. 선택및 선별배지로는 SS agar (Difco), EMB agar (Difco), MYP agar (Difco)와 DFI agar (Oxoid Ltd., Hampshire,England)가 사용되었다. 이때 사용된 시약은 모두 특급시약을 사용하였다.
데이터처리
- 0시간부터 72시간까지 상온에서 방치하여 24시간별로 각각 50 nl 멸균증류수로 20회씩 pippeting 하여 건조된 세균을 2회 회수하여 TSA에 도말한 후 3*>7C 에서 24시간 동안 회복 및 배양을 하여 형성된 집락을 계수하였다. 각 대상균주를 3반복 실험하여 그 평균과 표준 오차를 계산하였다.
이론/모형
- 5, 1, 2, 6, 24, 72시간 방치 하였으며 후에 각각 100|丑씩 회수하여 TSA에 도말한 후 37℃에서 24시간동안 회복 및 배양을 하여 형성된 집락을 계수 하였다. 희석이 필요한 경우 10진 희석법을 이용하였다.
성능/효과
- sakazakii 공시균주를 3반복 실험하였다. S. Typhimurium의 경우 100% 구리에서 24시간에 8 log CFU/ mL 모두 사멸하는 것으로 나타났고 유기는 24시간째에 4 log CFU/mL의 생균수를 보이다가 그 후 시간이 지날수록 약간 증가하는 것으로 나타났다. 스테인레스 스틸과 주석 쿠폰에서는 완만한 기울기로 72시간이 지난 후에도 6 log CFU/mL의 생균수를 유지해 약간만 사멸이 일어난 것으로 보이는데 이는 금속의 영향보다는 건조에 의한 사멸이 있는 것으로 사료되었다(Fig.
- 1). E. coli O157:H7 은전반적으로 급격한 기울기를 보이며 생균수의 감소를 나타내었는데 구리와 유기에서 모두 48시간 이내에 사멸하는 것으로 나타났으며 스테인레스 스틸과 주석 쿠폰에서는 72시 간까지 1~2 log CFU/mL의 생균이 측정 되 었다(Fig. 2). E.
- 3). 결과를 종합해 볼 때 Gram(-) 세균인 S. Typhimurium과 E. coli, E. sakazakii는 100% 구리 >> 방짜유기>100%주석 > 스테인레스 스틸 순으로 항균성이 높은 것으로 나타났다. Wan등기)의 결과에 의하면 구리를 의료 기구에 ion implantation 시켰을 때 99%이상의 항균 효과가 나타났다고 보고하여 본 연구와 일치하는결과를 나타내었다.
- 위의 결과를 볼 때 유기는 스테인레스 스틸보다는 오염된 세균을 사멸하는 효과가 클 것으로 보이며 식품 제조가공 공간에서의 활용으로 교차오염을 줄일 수 있을 것으로 보인다.
- sakazakii ATCC 51329를 사용하였다. 결과를 보면 각각 구리 (*) CiF 이온의 최소생육저해농도는 S. Typhimurium 의 경우 25 ppm, B. cere切s는 50 ppm, E. coli 0157: H7과 E. sakazakii ATCC 51329는 25 ppm으로 나타났다. Jung 등15)은 구리이온이 e.
- Carlos와 Felix끼는 구리 농도에 따른 저항에 관여하는 세포의 기작 기능은 하나이상일 것으로 예상하였다. Gram(+) 균인 B.cerei爲와 S.aurens는 비교적 생육저해농도가 높아 구리이온에 저항성이 큰 것으로 나타났다.
- 힘들 것으로 사료된다. 따라서 강한 경도를 갖고 있으며 변색이 적고 사용할수록 광이 나는 방짜유기를 산업환경에 적용시킬 경우 E. sakazakii를 포함한 Gram(-) 세균의 효과적인 제어를 도모할 수 있을 것으로 사료된다. 전통 식기인 유기 소재로 항 미생물 특성을 연구하기 위해 7~8 log CFU/mL의 초기균수로 이들 합금표면에서 의 건조한 후 생존력 즉정결과 Gram(+) 세균인 B.
- sakazakii를 포함한 Gram(-) 세균의 효과적인 제어를 도모할 수 있을 것으로 사료된다. 전통 식기인 유기 소재로 항 미생물 특성을 연구하기 위해 7~8 log CFU/mL의 초기균수로 이들 합금표면에서 의 건조한 후 생존력 즉정결과 Gram(+) 세균인 B. cerews는 24시간째 이후로 3~4 log CFU/mL로 생균수를 유지하고 있어 금속의 종류와 관계없이 높은 생존율을 보여 주었다.
- 그러나 Gram(-) 세균인 S. Typhimurium, E. coli, E.sakazakii는 구리표면 >> 방짜유기표면 > 주석표면>스텐인레스 스틸 표면 순으로 항균성이 높은 것으로 나타났다.
- 그러므로 전통적으로 우리가 사용해 왔던 청동 놋그릇유기소재에 S.Typhimurium, E.coli 0157, E.sakazakii, 등의식중독 세균이 노출시 스테인레스 스틸보다는 사멸이 잘 일어나기 때문에 이 합금을 식품제조 환경에서의 활용하여 교차오염을 줄일 수 있을 것으로 사료된다.
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