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문제 정의
- 이용되고 있다[28]. 본 연구에서는 다시마 추출물을 난소를 절제하여 갱년기 장애를 유도한 흰쥐에 투여함으로써 난소절제에 의한 estrogen결핍에서 발생되는 지질 농도의 변화에 미치는 영향을 알아보고자 한다.
- 있다. 이에 본 연구에서는 갱년기를 유도한 흰쥐에 다시마 추출물을 투여하여 체내 지질 함량 변화에 대해 그 효과를 검토하였다.
가설 설정
- 2)Values are mean±S.D. (n=7).
제안 방법
- 1주일 동안 주위환경에 적응시켜 난괴법에 의해 군을 나누어 난소 절제 수술을 실시하였다. 수술은 ether 마취 후 심마취기에 이르면 늑골하부를 절개하여 난소를 제거하고 절개부는 봉합하였다.
- 동결 건조, 분쇄하여 사용하였다. 건조 시료에 80% ethanol 21를 가해 3회 열 추출(78℃)하여 감압 농축기로 농축한 후 분말로 만들어 증류수에 녹여 동물실험에 사용하였다.
- 산출하였다. 동물 실험실의 사육조건은 온도 24±2℃, 습도 55~60%을 유지 시키며 물과 식이는 자유 공급하였고, 실험시료는 증류수에 용해하여 매일 1 ml씩 경구 투여 하였고, 대조군은 동일 용량의 증류수를 투여하였다.
- 난소 절제 수술을 실시하였다. 수술은 ether 마취 후 심마취기에 이르면 늑골하부를 절개하여 난소를 제거하고 절개부는 봉합하였다. 시술 후 3일부터 매일 다시마 시료를 6주간 경구 투여 하였다.
- 수술은 ether 마취 후 심마취기에 이르면 늑골하부를 절개하여 난소를 제거하고 절개부는 봉합하였다. 시술 후 3일부터 매일 다시마 시료를 6주간 경구 투여 하였다.
- 나누었다. 즉 실험동물은 난소절제 대조군(OVX-con- trol), 비난소절제군(Sham), 다시마 추출물 50 mg/kg투여군 (OVX-ST50) 및 200 mg/kg투여군(OVX-ST200)으로 나누어 실험하였다 (Table 1).
- 체중은 실험 사육 기간 중에 격일로 일정 시간에 측정하고, 식이 섭취량은 매일 식이 잔량을 측정하여 산출하였다. 동물 실험실의 사육조건은 온도 24±2℃, 습도 55~60%을 유지 시키며 물과 식이는 자유 공급하였고, 실험시료는 증류수에 용해하여 매일 1 ml씩 경구 투여 하였고, 대조군은 동일 용량의 증류수를 투여하였다.
- 혈액은 실험동물을 해부 전 24시간 절식 시킨 후 ether 마취 하에서 개복한 후 대동맥에서 채취하였고, 혈청 중의 효소 활성 및 지질 농도는 실온에서 한 시간 방치 후 3, 000 rpm, 4℃에서 10분간 원심 분리하여 분석에 사용하였다.
- 혈청 중 glutamic oxaloacetic transaminase (GOT)와 glutamic pyruvic transaminase (GPT)의 효소활성과 혈청 중 총콜레스테롤, HDL-콜레스테롤, 중성지방 함량은 자동 측정용 slide (FUJI FILM, Japan)를 이용하여 Dry chemistry analyzer 3500i (FUJI, Japan)로 측정하였다.
대상 데이터
- 본 실험에서 사용된 다시마(sea tangle, ST)는 2007년 부산광역시 기장군 대변항에서 채취된 다시마를 광명제약에서 구입하여 물로 3~4회 채로 씻어 내어 염분과 불순물의 제거하고 동결 건조, 분쇄하여 사용하였다. 건조 시료에 80% ethanol 21를 가해 3회 열 추출(78℃)하여 감압 농축기로 농축한 후 분말로 만들어 증류수에 녹여 동물실험에 사용하였다.
- 실험동물은 체중이 평균 180 g(8주)되는 Sparague-dawley 계 암컷 흰쥐를 (주)오리엔트바이오(경기도, 성남시) 로부터구입하여 본 실험실에서 고형사료(삼양유지)로 사육하였고, 실험 시작 1주일 동안 적응시킨 후 동물의 체중에 따라 4군으로 나누었다. 즉 실험동물은 난소절제 대조군(OVX-con- trol), 비난소절제군(Sham), 다시마 추출물 50 mg/kg투여군 (OVX-ST50) 및 200 mg/kg투여군(OVX-ST200)으로 나누어 실험하였다 (Table 1).
데이터처리
- 3)Values with different alphabets are significantly different by Duncan's multiple range test.
- 4)Values with different alphabets are significantly different by Duncan's multiple range test.
- 4)Values with different alphabets are significantly different by Duncan's multiple range test.
- 본 실험에 대한 모든 결과는 mean±SD치로 나타내었고, 통계적 처리는 SAS프로그램을 이용하여 ANOVA test 후 유의성 검증에는 Duncan's new multiple range test를 이용하여 상호비교 하였다.
성능/효과
- 않았다. GOT 활성에서는 난소를 절제한 OVXYontrol군이 난소를 절제하지 않은 Sham군에 비해 GOT 활성이 증가하였으나, 난소를 절제한 후 다시마 추출물 투여에 의해 난소를 절제하지 않은 Sham군보다 GOT 활성이 더 감소하는 결과가 나타났다. GPT 활성에서는 난소를 절제 한 후 다시마 추출물을 투여 한 군에서는 OVXYontrol군에 비해 감소하는 경향을 보였는데, 특히 OVX-ST200군에서 감소하는 결과가 나타났다.
- 29]. GOT 활성에서는 난소를 절제한 OVXvontrol군이 난소를 절제하지 않은 Sham군에 비해 GOT 활성이 증가하였고, 난소를 절제한 후 다시마 추출물을 농도별로 투여한 OVX-ST50 군과 OVX-ST200군 모두 난소를 절제하지 않은 Sham군보다 GOT 활성이 감소하는 결과가 나타났다. GPT 활성 또한 난소를 절제한 OVXvontrol군이 난소를 절제하지 않은 Sham 군에 비해 GPT 활성이 증가하였고, 난소를 절제 한 후 다시마 추출물을 투여한 군에서는 OVX-control군에 비해 감소하는 경향을 보였다.
- GOT 활성에서는 난소를 절제한 OVXvontrol군이 난소를 절제하지 않은 Sham군에 비해 GOT 활성이 증가하였고, 난소를 절제한 후 다시마 추출물을 농도별로 투여한 OVX-ST50 군과 OVX-ST200군 모두 난소를 절제하지 않은 Sham군보다 GOT 활성이 감소하는 결과가 나타났다. GPT 활성 또한 난소를 절제한 OVXvontrol군이 난소를 절제하지 않은 Sham 군에 비해 GPT 활성이 증가하였고, 난소를 절제 한 후 다시마 추출물을 투여한 군에서는 OVX-control군에 비해 감소하는 경향을 보였다. 일반적인 흰쥐의 GOT, GPT 활성도는 각각 50-90 unit/ml, 5~40 unit/ml이라고 알려져 있다[1].
- GOT 활성에서는 난소를 절제한 OVXYontrol군이 난소를 절제하지 않은 Sham군에 비해 GOT 활성이 증가하였으나, 난소를 절제한 후 다시마 추출물 투여에 의해 난소를 절제하지 않은 Sham군보다 GOT 활성이 더 감소하는 결과가 나타났다. GPT 활성에서는 난소를 절제 한 후 다시마 추출물을 투여 한 군에서는 OVXYontrol군에 비해 감소하는 경향을 보였는데, 특히 OVX-ST200군에서 감소하는 결과가 나타났다. 난소 절제 후 다시마 추출물 투여는 난소 절제로 인해 야기되는 혈중 총 콜레스테롤의 함량 및 혈청 지질 농도의 증가를 감소시켰다.
- 그 결과 난소를 절제한 OVX-control군이 난소를 절제하지 않은 Sham군보다 체중이 뚜렷이 증가하는 경향을 보였으며, 다시마 추출물이 체중감소에는 크게 영향을 미치지 않았다. GOT 활성에서는 난소를 절제한 OVXYontrol군이 난소를 절제하지 않은 Sham군에 비해 GOT 활성이 증가하였으나, 난소를 절제한 후 다시마 추출물 투여에 의해 난소를 절제하지 않은 Sham군보다 GOT 활성이 더 감소하는 결과가 나타났다.
- GPT 활성에서는 난소를 절제 한 후 다시마 추출물을 투여 한 군에서는 OVXYontrol군에 비해 감소하는 경향을 보였는데, 특히 OVX-ST200군에서 감소하는 결과가 나타났다. 난소 절제 후 다시마 추출물 투여는 난소 절제로 인해 야기되는 혈중 총 콜레스테롤의 함량 및 혈청 지질 농도의 증가를 감소시켰다. 또한, HDL-콜레스테롤은 난소절제 군에 비해 난소절제 후 다시마 추출물을 투여하였을 때 혈중 함량이 증가하였다.
- Estrogen은 지방조직의 지단백 리파아제(lipoprotein lipase)의 활성을 저하시키고 호르몬 민감성 리파아제(hormone sensitive lipase) 활성을 증가시켜 체 지방 축적을 억제한다고 알려져 있다 [30, 35], OVX-control군이 Sham 군에 비해 체중이 증가하는 것은 여성호르몬 부족으로 인한 체내 지방조직의 증가에 의한 것이며, 또한 지방 조직에서도 여성호르몬을 생성 할 수 있는 기능을 갖고 있기 때문에 지방 조직에서 난소의 기능을 대체 하고자 하는 체내의 비상 대책으로 여겨진다. 난소 절제 후 다시마를 투여한 모든 군에서 Sham군과 비교해 높은 체중 증가량을 나타내어 다시마 추출물이 체중감소에는 크게 영향을 미치지 않았다.
- 실험기간동안 실험동물의 체중 증가량 및 식이 효율을 Table 2에 나타내었다. 난소를 절제한 OVX-control군이 난소를 절제하지 않은 Sham군보다 몸무게가 증가하는 경향을 보여 난소절제로 인한 체중 증가 현상이 나타났다. 한편 식이 섭취량에 대한 몸무게 증가량을 나타내는 식이효율 (body weight gain/food intake; FER)에 있어서도 난소 절제 군에 비하여 난소 비절제군이 낮게 나타났다.
- 3은 혈중 HDL-콜레스테롤 함량을 나타낸 것이다. 난소를 절제한 OVXYontr이군에 비해 Sham군이 5% 수준에서 유의적으로 증가하였으며, 다시마 추출물 투여에 의해서 HDL- 콜레스테롤은 OVX-control 군과 비교해 농도별로 각각 OVX-ST50군과 OVX-ST200군에서 증가하는 것을 볼 수 있었다. 이것은 폐경기 여성을 대상으로 한 다수의 연구에서 에스트로겐을 투여하면 HDL■콜레스테롤 농도가 증가하고, LDL.
- 1은 난소를 절제한 흰쥐에 다시마 추출물 투여 후 중성지방 함량을 나타낸 것이다. 난소절제에 의해 OVX-con- trol군이 난소를 절제하지 않은 Sham군과 비교해 중성 지방함량이 증가하였고, 난소절제 후 다시마 추출물을 투여한 OVX-ST50군과 OVX-ST2(X)군 모두 OVXvontrol 보다 감소하였다. Fig.
- 2는 난소 절제한 흰쥐에 다시마 추출물 투여 후 총 콜레스테롤 함량을 나타낸 것이다. 난소절제에 의해 OVX-control군은 Sham군과 비교해 5%수준에서 유의적으로 증가하였다. 이에 반해 난소 절제 후 다시마 추출물의 농도별 투여군인 OVX-ST50군과 OVX-ST200군은 Sham군에는 미치지 못하나 OVXYontrol군에 비해 유의적으로 감소하였다.
- 일반적인 흰쥐의 GOT, GPT 활성도는 각각 50-90 unit/ml, 5~40 unit/ml이라고 알려져 있다[1]. 따라서 본 연구결과 각 군간 유의성은 나타났으나, 모두 정상 범위에 속하므로 난소절제로 인하여 GOT 및 GPT 활성에는 크게 영향을 주지 않는 것으로 추측된다.
- 난소 절제 후 다시마 추출물 투여는 난소 절제로 인해 야기되는 혈중 총 콜레스테롤의 함량 및 혈청 지질 농도의 증가를 감소시켰다. 또한, HDL-콜레스테롤은 난소절제 군에 비해 난소절제 후 다시마 추출물을 투여하였을 때 혈중 함량이 증가하였다. 이상의 결과에서 다시마 추출물이 갱년기 장애 시발생할 수 있는 혈 중 지질 함량 변화에 효과가 있는 것으로 나타나 혈류 관련 질환에 대한 개선 식품으로의 활용이 기대된다.
- 난소절제에 의해 OVX-control군은 Sham군과 비교해 5%수준에서 유의적으로 증가하였다. 이에 반해 난소 절제 후 다시마 추출물의 농도별 투여군인 OVX-ST50군과 OVX-ST200군은 Sham군에는 미치지 못하나 OVXYontrol군에 비해 유의적으로 감소하였다. 지방질 운반에 관여하는 또 다른 지단백질에는 단백질 함량이 높은 고밀도 지단백(HDLvholesterol)이 있다.
후속연구
- 콜레스테롤 농도가 증가하였다. 따라서 이상의 결과로부터 다시마 추출물 투여가 난소 절제에 의해 에스트로겐 분비가 저하된 상태에서 지질대사에 유익한 영향을 주어 심혈관계 질환 개선에 도움을 줄 것으로 기대된다.
- 또한, HDL-콜레스테롤은 난소절제 군에 비해 난소절제 후 다시마 추출물을 투여하였을 때 혈중 함량이 증가하였다. 이상의 결과에서 다시마 추출물이 갱년기 장애 시발생할 수 있는 혈 중 지질 함량 변화에 효과가 있는 것으로 나타나 혈류 관련 질환에 대한 개선 식품으로의 활용이 기대된다.
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