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문제 정의
- 본 연구에서는 송이버섯이 자생하고 있는 토양 내에 항균 활성 능이 탁월한 토착 세균군집이 분포해 있을 것으로 추정되어 송이 자실체 기저부 토양으로부터 토착세균을 분리하기 위하여 선행연구에서 나타난 결과를 바탕으로 저영양배지를 이용한 배양법을 통해 토양세균의 순수분리를 시도하였다. 분리된 이들 저 영양성 토양세균을 대상으로 농작물의 대표적인 식물병원성 곰 (Altemaria panax, Botrytis cinerea, Colletotrichum gloeos- prioides, Fusarium oxysporum, Phytopthora capsid, Pythium ultimum, Rizoctonia solani)에 대한 항균활성을 검정하고 우수 균주를 선발하여 분류학적 특성을 검토하였다.
제안 방법
- 2) 2㎕를 첨가한 후 22, 040Xg 에서 25분간 침전시키고. 250111의 70% ethanol로 세척하여 건조시킨 후 HiDi Formamide 20㎕를 첨가하여 95℃에서 2분 동안 denaturation한 후 얼음위에서 냉각시키고 ABI PRISM 310 Genetic Analyser (Applied Biosystems)를 사용하여 16S rDNA (500-580 bp) 염기서열을 결정하였다(8).
- 취하여 10()。<2에서 10분간 유지한 후, 얼음 안에서 급속히 냉각하여 변성시키고 20㎕의 nuclease Pl을 첨가하여 50℃에서 1시간 반응하고 20 ㎕의 alkaliphosphatase 용액을 첨가하여 37℃에서 1시간 반응 후 조제한 시료를 HPLC (LC-10AD vp, Shimazu, Tokyo, Japan)로 분석하였다(8, 26).
- 5% soluble starch를 첨가하였으며, 지시약으로 Ij-KI solution!- 사용하였다(5, 15). CeUulose 분해능 측정에는 0.4% (w/v) carboxy methyl cellulose를 첨가하였으며, 지시약으로 0.1% Congo red 용액을 사용하였고, lipase 가수 분해능을 측정하기 위해 1% (w/v) glyceryl tributyrate (TBN)가 함유된 gum arabic solution를 첨가하였다(14). 그리고 chitin 가수 분해능은 1% (w/v) wet colloidal chitin을 첨가하여 사용하였다(2).
- KM1-15균주에 대하여 16S rDNA 염기서열(1, 311 bp)을을 결정하여 계통학적 위치를 검토하였다. 16S rDNA 염기서열 결과를 NCBI/ RDP/ GenBank의 database와 상동성 비교를 한 후 계통수를 작성한 결과 Bacillus 속에 속하였으며, Bacillus koguryoae1 (AY904033)와 가장 가까운 유전적 거리를 나타내었다(Fig.
- 2 ml PCR tube에 넣고 잘 혼합한 후 94°C에서 5분간 반응한 다음 94°C에서 denaturation 1분, 55℃에서 anneaUng 1분, 72°C에서 extention 1분을 30회 반복하고, 72℃에서 10분간 final extention 의 조건으로 PCR (GeneAMPR PCR System 9700, AppHed Biosystems) 반응을 실시하였다. PCR 증폭산물은 전기영동 (Mupid-21, Gel documentation system, Bio-Rad)하여 주줄 여부를 확인하였다.
- coli 16S rDNA 부분의 conserved sequence를 기초로 한 27F; 5'-AGAGnTGATCCTGGCTCAG-3' primer와 1492R; 5'-AAGGAGGTGATCCAGCCGC-3' primer를 이용하였다 (20, 22). PCR은 27 Forward primer, 1 gl; 1492 Reverse primer, 1 pl; EF-Taq polymerase (Solgent co., Korea), 0.25 )11; dNTP, 1 pl; 10X buiFer, 5 pl; band doctor, 5 |il; H2O, 36.75 |11 를 0.2 ml PCR tube에 넣고 잘 혼합한 후 94°C에서 5분간 반응한 다음 94°C에서 denaturation 1분, 55℃에서 anneaUng 1분, 72°C에서 extention 1분을 30회 반복하고, 72℃에서 10분간 final extention 의 조건으로 PCR (GeneAMPR PCR System 9700, AppHed Biosystems) 반응을 실시하였다. PCR 증폭산물은 전기영동 (Mupid-21, Gel documentation system, Bio-Rad)하여 주줄 여부를 확인하였다.
- Sequencing PCR은 BigDye 1.3 )11, T7 primer 1 ㎕ 16S rDNA sample 1 )11 (100 ng), 2X buffer 3.4 ㎕ 에 멸균 증류수 13.3 ㎕를 잘 혼합한 후 cycle sequencing 실시하였다. PCR 산물은 100% ethanol 50 贝와 3 M sodium acetate (pH 5.
- 5분 동안 침지시킨 다음 Critical Point Dryer (CPD 03())로 임계점에서 건조시킨다. 건조된 시료를 시료대에 흡착시킨 후 Sputter Coater (SCK 005)를 이용하여 금으로 coating 하여 주사 전자 현미 경으로 관찰하였다(9).
- 1% Congo red 용액을 사용하였고, lipase 가수 분해능을 측정하기 위해 1% (w/v) glyceryl tributyrate (TBN)가 함유된 gum arabic solution를 첨가하였다(14). 그리고 chitin 가수 분해능은 1% (w/v) wet colloidal chitin을 첨가하여 사용하였다(2). 상기의 각 기질을 첨가한 배지에 분리균주를 접종하여 28P에서 7 일간 배양한 후 형성된 투명환의 크기에 따라 각 고분자 화합물에 대한 가수분해능을 평가하였다(2, 9).
- 근체지방산 분석을 위하여 TSB (Trypticase Soy Broth)를 101 배로 희석하고 agar 1.5% 첨가한 평판배지에 균체를 접종하고 28℃에서 3일간 배양한 후 대수기의 균체를 회수하였다. 회수한 균체 약 50 mg (wet weight)을 teflon-lined screw cap tube (13x 100 mm, pyrex)에 옮긴 후 Ikemoto & Miyagawa의 방법 (18, 27)에 의해 균체지방산을 methyl ester화 시켜 추출하였다.
- 기저부 토양으로부터 세균을 분.리하기 위해 저영양해지를 이용하여 총 268균주를 순수분리하였다. 이들 분리균주들을 식물 병원성 곰팡이인 인삼점무늬병원균(AZfemaria panax), 잿빛곰팡이 병원균(Botrytiscinered), 인삼탄저병원규(Cp;;etptrochum gloeos- prioides), 시들음병원균(Fiwm&m oxysporum), 고주역병균 (Phytopthora capsici), 인삼모잘록병원균(Pythium ultimum), 오이모잘록병원균(Rizoctonia solani)과 각각 대치배양을 통해 길 항력을 검토하였다.
- 비교하였으며(24, 28), 고분자 화합물 protein, starch, cellulose, lipid, 그리고 chitin에 대한 가수분해능을 즉정하였다. 모든 측정 실험에는 0.02% beef extract, 0.01% NaCl, 0.02% peptone, 0.01% yeast extract를 기초배지로 사용하였다. Protein 가수분해능을 측정하기위해 1% (w/v) skim milk를 첨가하였고, starch 가수분해능은 0.
- 분리균주의 생리학적 및 생화학적 특성 조사를 위해 API 50 CHE Kit (BIOMERIEUX, France)를 이용하여 49개 당 분해능을 조사 . 비교하였으며(24, 28), 고분자 화합물 protein, starch, cellulose, lipid, 그리고 chitin에 대한 가수분해능을 즉정하였다.
- 통해 토양세균의 순수분리를 시도하였다. 분리된 이들 저 영양성 토양세균을 대상으로 농작물의 대표적인 식물병원성 곰 (Altemaria panax, Botrytis cinerea, Colletotrichum gloeos- prioides, Fusarium oxysporum, Phytopthora capsid, Pythium ultimum, Rizoctonia solani)에 대한 항균활성을 검정하고 우수 균주를 선발하여 분류학적 특성을 검토하였다.
- . 비교하였으며(24, 28), 고분자 화합물 protein, starch, cellulose, lipid, 그리고 chitin에 대한 가수분해능을 즉정하였다. 모든 측정 실험에는 0.
- 그리고 chitin 가수 분해능은 1% (w/v) wet colloidal chitin을 첨가하여 사용하였다(2). 상기의 각 기질을 첨가한 배지에 분리균주를 접종하여 28P에서 7 일간 배양한 후 형성된 투명환의 크기에 따라 각 고분자 화합물에 대한 가수분해능을 평가하였다(2, 9).
- 송이 자생군락 토양 내에는 저영양^ 세균이 다수 분포해 있다는 선행 연구의 결과(4)를 바탕으로 본 연구에서는 송이 자실체 기저부 토양으로부터 세균을 분.리하기 위해 저영양해지를 이용하여 총 268균주를 순수분리하였다.
- 순수 배양된 단일 colony를 주형으로 사용하여 직접 PCR 증폭을 하였다. E.
- 배지를 사용하였다. 순차적으로 희석한 토양시료 1ml를 DNB 평판배지에 넣고 혼합 배양하여, 28℃에서 50일 이상 장기간 배양한 후 DNB 평판배지상에 형성된 세균을 순수분리하였다(16).
- 리하기 위해 저영양해지를 이용하여 총 268균주를 순수분리하였다. 이들 분리균주들을 식물 병원성 곰팡이인 인삼점무늬병원균(AZfemaria panax), 잿빛곰팡이 병원균(Botrytiscinered), 인삼탄저병원규(Cp;;etptrochum gloeos- prioides), 시들음병원균(Fiwm&m oxysporum), 고주역병균 (Phytopthora capsici), 인삼모잘록병원균(Pythium ultimum), 오이모잘록병원균(Rizoctonia solani)과 각각 대치배양을 통해 길 항력을 검토하였다. 항균활성 검토 결과 KM1-15균주가 인삼점무늬병원균 panax) 과 인삼탄저병원균 (CColletotrichum gloeosprioides) 에 대해 가장 강한 항균력을 나타내는 것으로 최종 선발되었다(Fig.
- 인삼점 무늬 병 원균(Alternaria panax) 인삼탄저 병 원균(Collrtotrichum gloeosprioides)에 대해 강한 길항력을 나타낸 KM1-15 균주의 콜로니형태와 세포형태 특성을 조사하였다. DNB 평판배지에 형성된 콜로니의 특징은 연한 노란색의 불규칙적인 형태의 콜로니가 관찰되었고, 전자현미경하에서 세포형태를 관찰한 결과 약 0.
- 정제한 16S rDNA 를 주형으로 ABI PRISM BigDye Terminator Cycle Sequencing Ready Reaction Kit (Applied Biosystems)를 사용하여 염기서열을 결정하였다. Sequencing PCR은 BigDye 1.
- 본 실험에 사용된 균주는 인삼점무늬병원균(Alternariapanax, KACC 42141), 잿빛곰팡이병원균(Botrytis cinerea, KACC 40963), 인삼탄저병 원균(Colletotrichum gloeos- prioides, KACC 40003), 시들음병원균 oxysporum, KACC 41088), 고주역병균(Phytopthora capsid, KACC 40476), 인삼모잘록병원균(Pythiumultimum, KACC 40705), 그리고 오이모잘록병원균(Rizoctoniasolani, KACC 40117)으로 Table 1에 표기하였다. 항균활성검정은 in vitro 항균활성 확인법을 이용하여 PDA (Potato Dextrose Agar, Difco) 배지에 상기의 식물 병원균을 각각 접종한 후 분리균주를 대치배양하여 균체 주위에 형성된 생육 저지대 (growth inhibitor clear zone)의 크기에 따라 항균 활성 수준을 결정하였다(2).
대상 데이터
- 하였다. E. coli 16S rDNA 부분의 conserved sequence를 기초로 한 27F; 5'-AGAGnTGATCCTGGCTCAG-3' primer와 1492R; 5'-AAGGAGGTGATCCAGCCGC-3' primer를 이용하였다 (20, 22). PCR은 27 Forward primer, 1 gl; 1492 Reverse primer, 1 pl; EF-Taq polymerase (Solgent co.
- 경북 안동시 녹전면 내정리 용두산의 송림 내 송이 자생 군락을 조사지로 선정하였다. 용두산 송이 자생군락 내 송이 자실체 기저부 토양으로부터 시료를 채취하고 polyethylene vinyl bag과 bottle에 넣어 실험실로 운반하여 12시간 이내에 실험하였다.
- 사용하였다. 본 실험에 사용된 균주는 인삼점무늬병원균(Alternariapanax, KACC 42141), 잿빛곰팡이병원균(Botrytis cinerea, KACC 40963), 인삼탄저병 원균(Colletotrichum gloeos- prioides, KACC 40003), 시들음병원균 oxysporum, KACC 41088), 고주역병균(Phytopthora capsid, KACC 40476), 인삼모잘록병원균(Pythiumultimum, KACC 40705), 그리고 오이모잘록병원균(Rizoctoniasolani, KACC 40117)으로 Table 1에 표기하였다. 항균활성검정은 in vitro 항균활성 확인법을 이용하여 PDA (Potato Dextrose Agar, Difco) 배지에 상기의 식물 병원균을 각각 접종한 후 분리균주를 대치배양하여 균체 주위에 형성된 생육 저지대 (growth inhibitor clear zone)의 크기에 따라 항균 활성 수준을 결정하였다(2).
- 송이 자실체 기저부 토양으로부터 순수분리된 균주들의 식물 병원균에 대한 항균활성능을 검토하기 위하여 대표적인 식물 병원성 곰팡이 표준균주를 한국농업미생물자원센터 (KACC)로부터분양받아 사용하였다. 본 실험에 사용된 균주는 인삼점무늬병원균(Alternariapanax, KACC 42141), 잿빛곰팡이병원균(Botrytis cinerea, KACC 40963), 인삼탄저병 원균(Colletotrichum gloeos- prioides, KACC 40003), 시들음병원균 oxysporum, KACC 41088), 고주역병균(Phytopthora capsid, KACC 40476), 인삼모잘록병원균(Pythiumultimum, KACC 40705), 그리고 오이모잘록병원균(Rizoctoniasolani, KACC 40117)으로 Table 1에 표기하였다.
- 조사지로 선정하였다. 용두산 송이 자생군락 내 송이 자실체 기저부 토양으로부터 시료를 채취하고 polyethylene vinyl bag과 bottle에 넣어 실험실로 운반하여 12시간 이내에 실험하였다. 각 토양 시료는 1 g씩 정량하여 99㎕ 의 멸균수에 넣고 homo genizer (Ace AM-7, Nikon Seiki Co.
- 토양세균의 배양 배지로 통상농도의 육즙영양배지(Nutrient Broth, NB)를 10-2배로 희석한(Diluted Nutrient Broth: DNB) 저영양 배지를 사용하였다. 순차적으로 희석한 토양시료 1ml를 DNB 평판배지에 넣고 혼합 배양하여, 28℃에서 50일 이상 장기간 배양한 후 DNB 평판배지상에 형성된 세균을 순수분리하였다(16).
데이터처리
- 결정된 16S rDNA 염기서열의 homology는 DDBJ/ NCBV GenBank database의 BLAST program을 이용하여 비교하였다. 각 염기서열의 상동성은 aHgnment CLUSTAL X algorithm를 이용하여 병렬로 정렬하였으며 계통도의 작성은 근린 결합법에 의거하여 결정하였다(29).
이론/모형
- Isoprenoid quinone 분자종의 동정은 Collins 등의 방법(17)을 이용하여 건조균체로부터 지질혼합물을 추출하고, 이를 siUca-gel TLC plate에 전개하여 표준물질과 동일한 를 갖는 band를 확인, 채취하여 정제하였다. 이 quinone 혼합물을 Collins 등의 방법(17)에 따라 각각의 표준물질과 함께 HPLC를 이용하여 각각의 분자종을 동정하였다(8, 9).
- Phylogenetic relationships of strain KM1-15 and genera Bacillus based on similarities of 16S rDNA. The phylogenetic tree was constructed using the neighbor-joining method. Bootstrap values aid shown at nodes.
- 비교하였다. 각 염기서열의 상동성은 aHgnment CLUSTAL X algorithm를 이용하여 병렬로 정렬하였으며 계통도의 작성은 근린 결합법에 의거하여 결정하였다(29).
- 채취하여 정제하였다. 이 quinone 혼합물을 Collins 등의 방법(17)에 따라 각각의 표준물질과 함께 HPLC를 이용하여 각각의 분자종을 동정하였다(8, 9).
- 회수한 균체 약 50 mg (wet weight)을 teflon-lined screw cap tube (13x 100 mm, pyrex)에 옮긴 후 Ikemoto & Miyagawa의 방법 (18, 27)에 의해 균체지방산을 methyl ester화 시켜 추출하였다. 지방산 methyl ester의 분석에는 Microbial Identification System (MIDI; Microbial ID, Inc., Newark, USA)을 이용하여 분석하였다.
- 5% 첨가한 평판배지에 균체를 접종하고 28℃에서 3일간 배양한 후 대수기의 균체를 회수하였다. 회수한 균체 약 50 mg (wet weight)을 teflon-lined screw cap tube (13x 100 mm, pyrex)에 옮긴 후 Ikemoto & Miyagawa의 방법 (18, 27)에 의해 균체지방산을 methyl ester화 시켜 추출하였다. 지방산 methyl ester의 분석에는 Microbial Identification System (MIDI; Microbial ID, Inc.
성능/효과
- 계통학적 위치를 검토하였다. 16S rDNA 염기서열 결과를 NCBI/ RDP/ GenBank의 database와 상동성 비교를 한 후 계통수를 작성한 결과 Bacillus 속에 속하였으며, Bacillus koguryoae1 (AY904033)와 가장 가까운 유전적 거리를 나타내었다(Fig. 2) (21). 또한 Bacillus 속에 속하는 근연종들과 KM1-15 균주의 유사도를 조사한 결과, Bacillus kogutyoae1 (AY904033)와 99.
- 4). API 50CHE Kit를 이용하여 KM1-15 균주의 당 분해능을 조사한 결과, glycerol, L-arabinose, ribose, D-xylose, glucose, fructose, mannose, mannitol, sorbitol, a-methyl-D-glucoside, amygdalin, arbutin, esculin, salicin, cellobiose, maltose, melibiose, sucrose, trehalose, inulin, raffinose, starch, glycogen, gentiobiose, 그리고 D-turanose를 분해하는 특성을 나타내었다(Table 3). 계통학적으로 매우 유사한 Bacillus koguryoae^\ 경우 galactose, inositol, N-acethyl-glucosamine, xylitol, gluconate, 5-keto- gluconate에 양성반응을 나타내었으나, KM1-15 균주는 음성반응을 나타내었다.
- 콜로니형태와 세포형태 특성을 조사하였다. DNB 평판배지에 형성된 콜로니의 특징은 연한 노란색의 불규칙적인 형태의 콜로니가 관찰되었고, 전자현미경하에서 세포형태를 관찰한 결과 약 0.7X23 간균임이 관찰되었다(Fig. 3).
- Isoprenoid quinone 종의 분석결과, KM1-15 균주는 menaquinone 을 함유하고 있었으며 HPLC에 의한 정량분석 결과, MK-7이 100%로 검출되어 표준균주들과 같이 주요 퀴논종으로 동정 되었고, G+C 함량은 43.7%로 측정되었다(Table 2).
- 고분자화합물 protein, starch, cellulose, lipid, 그리고 chitin에 대한 가수분해능을 즉정한 결과, protein 가수분해능 검정 배지에 나타난 투명환의 크기는 8 mm이었으며, starch의 경우 9 mm로 protein과 starch에 대한 가수분해능이 우수한 특징을 나타냈다 (Fig. 4). API 50CHE Kit를 이용하여 KM1-15 균주의 당 분해능을 조사한 결과, glycerol, L-arabinose, ribose, D-xylose, glucose, fructose, mannose, mannitol, sorbitol, a-methyl-D-glucoside, amygdalin, arbutin, esculin, salicin, cellobiose, maltose, melibiose, sucrose, trehalose, inulin, raffinose, starch, glycogen, gentiobiose, 그리고 D-turanose를 분해하는 특성을 나타내었다(Table 3).
- 2) (21). 또한 Bacillus 속에 속하는 근연종들과 KM1-15 균주의 유사도를 조사한 결과, Bacillus kogutyoae1 (AY904033)와 99.62% 의 가장 높은 상동성을 나타내었다. KM1-15 균주의 염기서열(1, 311 bp)은 GmBank에 accession no.
- . 또한 송이 자생군락 토양 내 세균수 측정 결과 통상농도의 육즙(NB) 배지보다 희석 육즙 배지(DNB)에서 5~10배 높은 세균수가 측정되어 송이 자생군락 토양게는 저 영 양성 세균이 다수 존재해 있는 것으로 추정되 었다(4).
- 97%)를 함유하였으며, KM1-15 균주와 근연관계에 위치해 있는 Bacillus 속에 속하는 표준균주들과 균체지방산 성분을 비교한 결과, 13:0 iso 3-OH, 14:0 iso 3-OH, 15:0 iso 3- OH, 그리고 17:0 iso 3-OH와 같은 다양한 분지형 지방산을 함유하는 독특한 특성을 나타내었다. 또한 유전학적으로 가장 유사했던 Bacillus koguryoae T의 경우, 주요지방산이 15:0 iso와 15:0 anteiso로 KM1-15 균주와 차이를 보였으며, 다른 Bacillus 속 표준 균주들과도 같은 결과를 나타내는 것을 확인할 수 있었다. 이와 같은 결과는 지방산의 높은 변이성 때문으로 같은 Bacillus 속에 속하더라도 배양조건에 따라 지방산 성분이 달라질 수 있어 상기와 같은 차이가 보여지는 것이며, 이는 지방산으로는 정확한 동정이 어 렵다는 것을 시사한다(30).
- 계통학적으로 매우 유사한 Bacillus koguryoae^\ 경우 galactose, inositol, N-acethyl-glucosamine, xylitol, gluconate, 5-keto- gluconate에 양성반응을 나타내었으나, KM1-15 균주는 음성반응을 나타내었다. 반면 KM1-15의 경우 L-arabinose, cellobiose, inulin, D-turanose에는 양성반응을 나타내었으나, B. koguryoae는 음성반응을 보여 계통학적으로는 매우 유사하지만 표현형적 특성에는 차이가 있음을 확인할 수 있었다.
- 본 연구에서 송이 자실체 기저부 토양으로부터 분리된 KM1- 15 균주는 인삼에 병을 일으키는 인삼점무늬병원균(Alternaria pamx)과 인삼탄저병원균(Colletotrichum gloeosprioides)에 가장 뛰어난 항균력을 나타내었다. 인삼점무늬병을 일으키는 Altemaria panax는 바람에 의하여 전염되는 대표적인 공기 전염성으로 전국 어디에서나 많이 발생하며 전염 속도가 빠른 것이 특징이다.
- 분리균주 KM1-15의 지방산 methyl ester에 대한 균체 지방산을 분석한 결과, 주요 지방산으로 15:0 anteiso (35.78%)와 17:0 anteiso (17.97%)를 함유하였으며, KM1-15 균주와 근연관계에 위치해 있는 Bacillus 속에 속하는 표준균주들과 균체지방산 성분을 비교한 결과, 13:0 iso 3-OH, 14:0 iso 3-OH, 15:0 iso 3- OH, 그리고 17:0 iso 3-OH와 같은 다양한 분지형 지방산을 함유하는 독특한 특성을 나타내었다. 또한 유전학적으로 가장 유사했던 Bacillus koguryoae T의 경우, 주요지방산이 15:0 iso와 15:0 anteiso로 KM1-15 균주와 차이를 보였으며, 다른 Bacillus 속 표준 균주들과도 같은 결과를 나타내는 것을 확인할 수 있었다.
- 이들 분리균주들을 식물 병원성 곰팡이인 인삼점무늬병원균(AZfemaria panax), 잿빛곰팡이 병원균(Botrytiscinered), 인삼탄저병원규(Cp;;etptrochum gloeos- prioides), 시들음병원균(Fiwm&m oxysporum), 고주역병균 (Phytopthora capsici), 인삼모잘록병원균(Pythium ultimum), 오이모잘록병원균(Rizoctonia solani)과 각각 대치배양을 통해 길 항력을 검토하였다. 항균활성 검토 결과 KM1-15균주가 인삼점무늬병원균 panax) 과 인삼탄저병원균 (CColletotrichum gloeosprioides) 에 대해 가장 강한 항균력을 나타내는 것으로 최종 선발되었다(Fig. 1). 특히, Altemaria 와 Colletotrichum gloeosprioides는 인삼에 병을 일으키는 병원균으로, 본 연구에서 선발된 KM1-15균주는 국내 토양에서 분리한 토착세균으로 인삼 병 방제제에 활용가치가 높을 것으로 사료된다.
후속연구
- 환경에 대해 부담을 적게 주면서 생산성 향상과 작물의 안정성을 높일 수 있는 고품질 친환경 미생물제제의 필요성이 더욱 커지고 있다(3, 10, 11, 12). 본 연구를 통해 송이 자실체 기저부 토양으로부터 분리된 KM1-15 균주는 인삼 병원균에 대한 항균활성능이 탁월하고 고분자화합물의 분해능이 우수하여 친환경 병해충 방제제 및 토양개량제로의 활용에 기여할 수 있을 것으로 사료된다.
- 1). 특히, Altemaria 와 Colletotrichum gloeosprioides는 인삼에 병을 일으키는 병원균으로, 본 연구에서 선발된 KM1-15균주는 국내 토양에서 분리한 토착세균으로 인삼 병 방제제에 활용가치가 높을 것으로 사료된다.
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