국내산 밤 일부 품종의 기능성 성분분석과 항산화 및 대식세포 활성 Antioxidative and Macrophage Phagocytic Activities and Functional Component Analyses of Selected Korean Chestnut (Castanea crenata S. et Z.) Cultivars원문보기
국내산 밤 일부 품종(단택, 대보, 석추, 옥광, 병고)의 기능성 성분 분석과 이들 물질들의 항산화력 및 밤 추출물이 대식세포 활성에 미치는 영향력을 알아보았다. 국내산 밤 일부 품종의 내피와 과육에서 coumarin, gallic acid 그리고 catechin이 HPLC에 의해 검출되었다. 밤 내피에 가장 풍부한 기능성 성분은 catechin이고 그 다음 gallic acid와 coumarin 순이었으나, 과육에서는 gallic acid만 검출되었다. 따라서 밤의 기능성 성분인 gallic acid와 catechin의 항산화력을 DPPH radical 소거작용과 SOD 유사활성을 통해 알아보았다. Gallic acid과 catechin을 6.0 mg/100 g 처리하였을 때 DPPH radical 소거작용이 각각 69.4%와 38.3%였으며, gallic acid의 DPPH radical 소거작용은 농도 의존적이었다. Gallic acid를 동일한 농도의 catechin과 비교하면 모든 농도 구간에서 catechin보다 gallic acid가 높은 DPPH radical 소거활성을 나타내었다. 그러나 SOD 유사활성은 gallic acid보다 catechin이 높았다. 더하여 밤의 과육, 노란과육 및 흰과육 추출물들이 대식세포 활성에 미치는 영향력을 알아보았다. 병고 흰과육 추출물은 현저하게 대식세포 활성을 증가시켰고, 병고, 단택, 대보 및 옥광의 노란과육 추출물 역시 아무 것도 처리하지 않은 세포와 비교하여 현저히 대식세포를 활성화시켰다. 노란과육 추출물이 흰과육 추출물보다 더욱 더 대식세포 활성을 증가시켰고, 5품종 중 병고가 대식세포 활성을 가장 증가시켰다.
국내산 밤 일부 품종(단택, 대보, 석추, 옥광, 병고)의 기능성 성분 분석과 이들 물질들의 항산화력 및 밤 추출물이 대식세포 활성에 미치는 영향력을 알아보았다. 국내산 밤 일부 품종의 내피와 과육에서 coumarin, gallic acid 그리고 catechin이 HPLC에 의해 검출되었다. 밤 내피에 가장 풍부한 기능성 성분은 catechin이고 그 다음 gallic acid와 coumarin 순이었으나, 과육에서는 gallic acid만 검출되었다. 따라서 밤의 기능성 성분인 gallic acid와 catechin의 항산화력을 DPPH radical 소거작용과 SOD 유사활성을 통해 알아보았다. Gallic acid과 catechin을 6.0 mg/100 g 처리하였을 때 DPPH radical 소거작용이 각각 69.4%와 38.3%였으며, gallic acid의 DPPH radical 소거작용은 농도 의존적이었다. Gallic acid를 동일한 농도의 catechin과 비교하면 모든 농도 구간에서 catechin보다 gallic acid가 높은 DPPH radical 소거활성을 나타내었다. 그러나 SOD 유사활성은 gallic acid보다 catechin이 높았다. 더하여 밤의 과육, 노란과육 및 흰과육 추출물들이 대식세포 활성에 미치는 영향력을 알아보았다. 병고 흰과육 추출물은 현저하게 대식세포 활성을 증가시켰고, 병고, 단택, 대보 및 옥광의 노란과육 추출물 역시 아무 것도 처리하지 않은 세포와 비교하여 현저히 대식세포를 활성화시켰다. 노란과육 추출물이 흰과육 추출물보다 더욱 더 대식세포 활성을 증가시켰고, 5품종 중 병고가 대식세포 활성을 가장 증가시켰다.
Antioxidative and macrophage phagocytic activities and contents of functional component in selected Korean chestnuts (Dantaek, Daebo, Okkwang, Seokchu, Byunggo) were evaluated. Coumarin, gallic acid and catechin in inner skin and whole kernel of selected Korean chestnuts were detected by HPLC. The p...
Antioxidative and macrophage phagocytic activities and contents of functional component in selected Korean chestnuts (Dantaek, Daebo, Okkwang, Seokchu, Byunggo) were evaluated. Coumarin, gallic acid and catechin in inner skin and whole kernel of selected Korean chestnuts were detected by HPLC. The predominant functional components in inner skin of chestnut were catechin, followed by gallic acid and coumarin. However, the whole kernel had only gallic acid. Thus, the antioxidant properties of gallic acid and catechin were evaluated through DPPH radical-scavenging activity and SOD like activity. Gallic acid and catechin at 6.0 mg/100 g exhibited 69.4% and 38.3% of scavenging activities on DPPH radical, respectively. DPPH radical-scavenging activity of gallic acid increased in a concentration-dependent manner. Gallic acid was found to possess higher DPPH radical-scavenging activity than equivalent amount of catechin at all concentrations, whereas catechin was found to have higher SOD like activity than gallic acid. In addition, pre-incubation of macrophage with white kernel extract from Byunggo resulted in a significant increase of phagocytic activity and yellow kernel extracts from Byunggo, Dantaek, Daebo and Okkwang, leading to an increase in phagocytic activity compared with untreated cells. Yellow kernel extracts was found to have higher phagocytic activity than white kernel extracts. Byunggo had the highest phagocytic activity. The results suggest that the Korean chestnut may provide a natural source of antioxidants and active immunity.
Antioxidative and macrophage phagocytic activities and contents of functional component in selected Korean chestnuts (Dantaek, Daebo, Okkwang, Seokchu, Byunggo) were evaluated. Coumarin, gallic acid and catechin in inner skin and whole kernel of selected Korean chestnuts were detected by HPLC. The predominant functional components in inner skin of chestnut were catechin, followed by gallic acid and coumarin. However, the whole kernel had only gallic acid. Thus, the antioxidant properties of gallic acid and catechin were evaluated through DPPH radical-scavenging activity and SOD like activity. Gallic acid and catechin at 6.0 mg/100 g exhibited 69.4% and 38.3% of scavenging activities on DPPH radical, respectively. DPPH radical-scavenging activity of gallic acid increased in a concentration-dependent manner. Gallic acid was found to possess higher DPPH radical-scavenging activity than equivalent amount of catechin at all concentrations, whereas catechin was found to have higher SOD like activity than gallic acid. In addition, pre-incubation of macrophage with white kernel extract from Byunggo resulted in a significant increase of phagocytic activity and yellow kernel extracts from Byunggo, Dantaek, Daebo and Okkwang, leading to an increase in phagocytic activity compared with untreated cells. Yellow kernel extracts was found to have higher phagocytic activity than white kernel extracts. Byunggo had the highest phagocytic activity. The results suggest that the Korean chestnut may provide a natural source of antioxidants and active immunity.
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문제 정의
국내산 밤 일부 품종(단택, 대보, 석추, 옥광, 병고)의 기능성 성분 분석과 이들 물질들의 항산화력 및 밤 추출물이 대식세포 활성에 미치는 영향력을 알아보았다. 국내산 밤 일부 품종의 내피와 과육에서 coumarin, gallic acid 그리고 catechin이 HPLC에 의해 검출되었다.
그러나 SOD 유사활성은 gallic acid보다 catechin이 높았다. 더하여 밤의 과육, 노란과육 및 흰과육 추출물들이 대식세포 활성에 미치는 영향력을 알아보았다. 병고 흰과육 추출물은 현저하게 대식세포 활성을 증가시켰고, 병고, 단택, 대보 및 옥광의 노란과육 추출물 역시 아무것도 처리하지 않은 세포와 비교하여 현저히 대식세포를 활성화시켰다.
항산화력과 면역증감작용은 위 보호(13), 노화방지(14) 그리고 신경보호 효과(15) 등 다양한 질병들과 관련하여 상관관계가 있는 것으로 알려져 있다. 따라서 본 연구에서는 항산화 물질을 다량 함유하고 있고, 주로 식용하거나 일부 한약재 및 앙금 등의 가공식품으로 이용되고 있는 밤 과육이 갖는 면역증감작용 효과를 대식세포의 활성화에 미치는 영향을 연구하므로 알아보았다. 이와 같은 연구들을 통해 한국산 밤의 우수한 기능성을 증명하여 국내외 밤 소비확대와 새로운 건강식품 및 건강 기능성 소재 개발에 활용하기 위한 기초자료를 제공하고자 하였다.
이와 같은 연구들을 통해 한국산 밤의 우수한 기능성을 증명하여 국내외 밤 소비확대와 새로운 건강식품 및 건강 기능성 소재 개발에 활용하기 위한 기초자료를 제공하고자 하였다. 또한 밤 가공공정 중 대량 폐기되고 있는 밤 내피에 함유된 생리활성 물질을 분석한 후 주요 물질들의 항산화성을 조사하여, 밤 내피가 항산화 기능성 소재로서 활용할 수 있을지에 대한 가능성을 알아보았다.
따라서 본 연구에서는 항산화 물질을 다량 함유하고 있고, 주로 식용하거나 일부 한약재 및 앙금 등의 가공식품으로 이용되고 있는 밤 과육이 갖는 면역증감작용 효과를 대식세포의 활성화에 미치는 영향을 연구하므로 알아보았다. 이와 같은 연구들을 통해 한국산 밤의 우수한 기능성을 증명하여 국내외 밤 소비확대와 새로운 건강식품 및 건강 기능성 소재 개발에 활용하기 위한 기초자료를 제공하고자 하였다. 또한 밤 가공공정 중 대량 폐기되고 있는 밤 내피에 함유된 생리활성 물질을 분석한 후 주요 물질들의 항산화성을 조사하여, 밤 내피가 항산화 기능성 소재로서 활용할 수 있을지에 대한 가능성을 알아보았다.
지금까지 밤의 생리활성에 관한 연구는 밤나무 잎차의 항알레르기 효과(6), 밤 귀피의 용매분획별 항산화 활성과 항산화 물질의 분리(7) 등이 있으며, 저장(4), 가공식품 제조(8), 밤 전분의 제조(9), 변색(10) 등에 대한 연구들이 이루어져 왔다. 이와 같이 밤에 대한 다양한 연구들이 진행되어져 오고 있으나, 현재 식품은 맛과 기호성과 더불어 식품의 3차 기능인 면역력의 증진, 질병의 예방이나 회복, 노화억제 등 복잡한 생명활동을 조절하는 기능성식품으로 중요성이 강조되고 있어 본 연구에서는 국내산 밤의 기능성을 알아보았다.
가설 설정
2)Korean name. 3)Means with different letters differ significantly from different cultivars in the same column (p<0.
제안 방법
DPPH(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl)의 환원에 의한 free radical 소거활성을 관찰하기 위하여 Chung 등(18)의 방법을 변형하여 측정하였다. 다양한 농도(0, 1.
7 대식세포는 Korea Cell Line Bank(KCLB)로부터 구입하여 사용하였고, 측정방법은 12 well plate에 배지(RPMI 1640에 10% FBS, 1% 항생제 포함)에 1 mL 세포액(1×105 cell/mL)을 넣고 12시간 동안 37℃, 5% CO2에서 배양하였다. 각 well의 상층액을 제거한 후 국내산 밤 단택, 대보, 석추, 옥광, 병고의 노란과육이나 흰과육의 물 추출물(0.2 mg/mL)을 함유하고 있는 RPMI 1640를 2 mL씩 첨가하여 다시 6시간 동안 배양하였다. 그 후 각 well의 배지를 제거한 후 FITC-dextran(1 mg/mL)를 1 mL 처리하여 30분 동안 어두운 상태로 배양한 후, FITC 용액을 모두 제거한 후 차가운 PBS로 4번 세척하였다.
SOD 유사활성은 Chung 등(19)의 방법에 따라 측정한다. 다양한 농도(0, 1.0, 1.5, 2.0, 2.5, 3.0, 4.0, 5.0, 6.0)의 gallic acid와 catechin 용액 0.2 mL에 pH 8.5로 조정한 tris-HCl 완충용액 3.0 mL와 7.2 mM pyrogallol 0.2 mL를 가하여 25℃에서 10분간 반응시킨 후 1 N HCl 0.1 mL를 가하여 반응을 정지시키고 반응액 중 산화된 pyrogallol의 양을 420nm에서 측정한다. SOD 유사활성은 시료용액의 첨가구와 무첨가구의 흡광도 감소율로 나타내었다.
밤 내피에 가장 풍부한 기능성 성분은 catechin이고 그 다음 gallic acid와 coumarin 순이었으나, 과육에서는 gallic acid만 검출되었다. 따라서 밤의 기능성 성분인 gallic acid와 catechin의 항산화력을 DPPH radical 소거작용과 SOD 유사활성을 통해 알아보았다. Gallic acid과 catechin을 6.
밤나무의 밤 귀피, 밤잎차 및 밤꽃의 항산화 효과(7,11,12)가 이미 보고되어 있어, 국내산 밤의 내피와 과육에도 항산화 기능을 갖는 물질이 풍부할 것이라고 사료되어, 먼저 본 연구에서는 국내산 밤의 내피와 과육에 함유된 기능성 물질을 분석하였고, 이들 물질들의 항산화 효과를 알아보았다. 항산화력과 면역증감작용은 위 보호(13), 노화방지(14) 그리고 신경보호 효과(15) 등 다양한 질병들과 관련하여 상관관계가 있는 것으로 알려져 있다.
더하여 밤의 과육, 노란과육 및 흰과육 추출물들이 대식세포 활성에 미치는 영향력을 알아보았다. 병고 흰과육 추출물은 현저하게 대식세포 활성을 증가시켰고, 병고, 단택, 대보 및 옥광의 노란과육 추출물 역시 아무것도 처리하지 않은 세포와 비교하여 현저히 대식세포를 활성화시켰다. 노란과육 추출물이 흰과육 추출물보다 더욱 더 대식세포 활성을 증가시켰고, 5품종 중 병고가 대식세포 활성을 가장 증가시켰다.
그 후 각 well의 배지를 제거한 후 FITC-dextran(1 mg/mL)를 1 mL 처리하여 30분 동안 어두운 상태로 배양한 후, FITC 용액을 모두 제거한 후 차가운 PBS로 4번 세척하였다. 차가운 PBS 1 mL를 넣고 scraper로 긁어서 15 mL tube에 옮기고 1200 rpm에서 5분 동안 원심분리한 후 PBS를 제거하고 고정액(3.7% formaldehyde가 포함된 PBS) 1 mL 넣고 좌우로 흔들면서 mesh에 걸러서 Flow cytometry system tube에 옮기고 Flow cytometry system(DB model FACScan, USA)으로 촬영하였다.
대상 데이터
단택은 공주, 충주, 대보는 공주, 부여, 산청, 옥광은 공주, 청양, 충주, 부여, 석추는 충주 그리고 병고는 공주와 부여에서 각각 10 kg씩 수집하였다. 밤은 외피(outer skin), 내피(inner skin)를 제거한 후 전체 식용 과육의 가운데를 잘라 외부를 둘러싸고 있는 노란과육과 내부에 존재하는 흰과육으로 분리하였다.
사용된 세포주 RAW 264.7 대식세포는 Korea Cell Line Bank(KCLB)로부터 구입하여 사용하였고, 측정방법은 12 well plate에 배지(RPMI 1640에 10% FBS, 1% 항생제 포함)에 1 mL 세포액(1×105 cell/mL)을 넣고 12시간 동안 37℃, 5% CO2에서 배양하였다.
데이터처리
3)Means with different letters differ significantly from different cultivars in the same column (p<0.05), as determined by Duncan's multiple range test, n=3.
모든 실험은 3회 반복하였으며 실험치는 평균값과 표준편차로 나타내었고, SPSS program 중에서 분산분석(ANOVA)을 실시하여 유의성이 있는 경우 Duncan’s multiple range test에 의해 검정하였다.
이론/모형
Column은 LUNA C-18 column(4.6×250 mm I.D., 5 μm)을 사용 하였으며, 이동상의 조성과 용매구배 조건은 Uzelac 등(16)의 방법과 Kubola와 Siriamornpun(17)의 방법에 의해 분리하였다.
SOD 유사활성은 Chung 등(19)의 방법에 따라 측정한다. 다양한 농도(0, 1.
페놀 화합물 추출은 Uzelac 등(16)의 방법에 따라 추출하였고, HPLC로 분석하였다. Column은 LUNA C-18 column(4.
성능/효과
3% 증가하였다. Catechin 함량이 2 mg/100 g일 때 39% SOD 유사활성이 증가하였고, 2.5 mg/100 g에서는 50%이상 SOD 유사활성이 증가하였으며, 6.0 mg/100 g에서는 59.1% SOD 유사활성 증가하였다.
Coumarin은 과육에서는 검출되지 않았고, 내피에서만 검출되었는데 단택에서 1.35±0.13 mg/100 g으로 가장 높은 함량을 나타내었고 가장 적은 양이 검출된 옥광(0.15±0.02)과 비교하면 9배 높은 함량이었다.
3%였으며, gallic acid의 DPPH radical 소거작용은 농도 의존적이었다. Gallic acid를 동일한 농도의 catechin과 비교하면 모든 농도 구간에서 catechin보다 gallic acid가 높은 DPPH radical 소거활성을 나타내었다. 그러나 SOD 유사활성은 gallic acid보다 catechin이 높았다.
3, 4에 나타내었다. 국내산 밤 주요 품종(단택, 대보, 석추, 옥광, 병고) 중 병고가 가장 높은 활성을 나타내었고, 노란과육 추출물이 흰과육 추출물보다 대식세포 활성을 더욱 더 증가시켰다(Fig. 3A, B). 전체 과육 추출물은 병고, 단택 그리고 대보 순으로 높은 대식세포 활성을 보여 주었다(Fig.
병고 흰과육 추출물은 현저하게 대식세포 활성을 증가시켰고, 병고, 단택, 대보 및 옥광의 노란과육 추출물 역시 아무것도 처리하지 않은 세포와 비교하여 현저히 대식세포를 활성화시켰다. 노란과육 추출물이 흰과육 추출물보다 더욱 더 대식세포 활성을 증가시켰고, 5품종 중 병고가 대식세포 활성을 가장 증가시켰다.
모든 결과를 종합해보면 본 연구는 국내산 밤 과육과 내피으로부터 기능성 특수 성분 분석 및 건강 기능성을 증명하여 국내외 식용밤의 소비 확대 유도와 함께 식·의약 소재로 활용 가능성을 제시하였다.
국내산 밤 일부 품종의 내피와 과육에서 coumarin, gallic acid 그리고 catechin이 HPLC에 의해 검출되었다. 밤 내피에 가장 풍부한 기능성 성분은 catechin이고 그 다음 gallic acid와 coumarin 순이었으나, 과육에서는 gallic acid만 검출되었다. 따라서 밤의 기능성 성분인 gallic acid와 catechin의 항산화력을 DPPH radical 소거작용과 SOD 유사활성을 통해 알아보았다.
2에 나타내었다. 생체 내에서 super-oxide radical을 과산화수소로 전환시키는 SOD 유사활성은 gallic acid를 2.5 mg/100 g 가했을 때까지는 영향을 나타내지 않았지만 3 mg/100 g 농도의 gallic acid에 의해 SOD 유사활성이 17.3% 증가하였다. Catechin 함량이 2 mg/100 g일 때 39% SOD 유사활성이 증가하였고, 2.
3A, B). 전체 과육 추출물은 병고, 단택 그리고 대보 순으로 높은 대식세포 활성을 보여 주었다(Fig. 4).
후속연구
또한 밤의 과육에는 gallic acid만 함유되어 있었지만 폐기되고 있는 밤의 내피에서 gallic acid, coumarin과 catechin이 모두 함유되어 있고, 고가의 천연항산화제인 catechin을 다량 함유하고 있으므로 밤 내피를 이용하여 항산화제를 개발한다면 농산물 가공 부산물을 이용한 농가 수입에 많은 공헌을 할 수 있을 것이다. Catechin은 녹차에 다량 함유된 기능성 물질로 알려져 있으나(25-27) 녹차를 이용하여 항산화제를 개발하는 것보다는 국내의 미활용 농산자원의 가공 부산물인 밤내피를 이용하는 것이 산업적 경제성을 높여줄 수 있을 것으로 사료된다.
특히 식용으로 사용하는 밤의 과육은 gallic acid가 다량 함유되어 있고, gallic acid의 강한 항산화력은 유해성 활성산소로부터 국민 건강을 지켜줄 수 있는 새로운 건강식품으로 추천할 수 있을 것이다. 또한 밤의 과육에는 gallic acid만 함유되어 있었지만 폐기되고 있는 밤의 내피에서 gallic acid, coumarin과 catechin이 모두 함유되어 있고, 고가의 천연항산화제인 catechin을 다량 함유하고 있으므로 밤 내피를 이용하여 항산화제를 개발한다면 농산물 가공 부산물을 이용한 농가 수입에 많은 공헌을 할 수 있을 것이다. Catechin은 녹차에 다량 함유된 기능성 물질로 알려져 있으나(25-27) 녹차를 이용하여 항산화제를 개발하는 것보다는 국내의 미활용 농산자원의 가공 부산물인 밤내피를 이용하는 것이 산업적 경제성을 높여줄 수 있을 것으로 사료된다.
즉, gallic acid와 catechin이 강한 항산화력을 가지고 있다는 것은 gallic acid와 catechin을 다량 함유하고 있는 밤을 섭취하므로 소비자에게 좋은 항산화 급원을 제공하여 줄 수 있을 것이라는 것을 시사하고 있다. 특히 식용으로 사용하는 밤의 과육은 gallic acid가 다량 함유되어 있고, gallic acid의 강한 항산화력은 유해성 활성산소로부터 국민 건강을 지켜줄 수 있는 새로운 건강식품으로 추천할 수 있을 것이다. 또한 밤의 과육에는 gallic acid만 함유되어 있었지만 폐기되고 있는 밤의 내피에서 gallic acid, coumarin과 catechin이 모두 함유되어 있고, 고가의 천연항산화제인 catechin을 다량 함유하고 있으므로 밤 내피를 이용하여 항산화제를 개발한다면 농산물 가공 부산물을 이용한 농가 수입에 많은 공헌을 할 수 있을 것이다.
Monobe 등(34)은 강한 항산화력을 가진 녹차 catechins의 농도가 증가할수록 대식세포 활성이 증가하였다고 하였고, 녹차잎 추출물들도 대식세포 활성을 증가시켰다고 보고하였다. 항산화력과 면역증강능을 가진 천연기능성 소재들은 다양한 질병을 예방(13,15)하거나 노화억제에 효과(14)가 알려져 있으므로, 천연항산화제를 함유하고 있고 면역증강능을 가진 대보, 단택 그리고 병고의 과육은 면역력의 증진, 질병의 예방이나 회복, 노화 억제 등 신체 조절기능을 갖는 기능성식품으로서 이용될 수 있을 것이다.
질의응답
핵심어
질문
논문에서 추출한 답변
밤나무란?
밤나무는 참나무과에 속하는 낙엽교목으로 우리나라 전역에 걸쳐 자생 또는 재배되고 있으며 과실은 주로 식용, 약용, 가공식품 등으로 이용하고 있다(1-3). 2000년 이상의 재배역사를 가진 것으로 추정되는 밤(Castanea crenata S.
밤 내피가 항산화 기능성 소재로서 활용할 수 있을지에 대한 가능성을 알아보기 위한 실험에서 내피에 풍부하게 들어있는 기능성 성분은?
국내산 밤 일부 품종(단택, 대보, 석추, 옥광, 병고)의 기능성 성분 분석과 이들 물질들의 항산화력 및 밤 추출물이 대식세포 활성에 미치는 영향력을 알아보았다. 국내산 밤 일부 품종의 내피와 과육에서 coumarin, gallic acid 그리고 catechin이 HPLC에 의해 검출되었다. 밤 내피에 가장 풍부한 기능성 성분은 catechin이고 그 다음 gallic acid와 coumarin 순이었으나, 과육에서는 gallic acid만 검출되었다.
밤의 생리활성에 관한 연구는?
지금까지 밤의 생리활성에 관한 연구는 밤나무 잎차의 항알레르기 효과(6), 밤 귀피의 용매분획별 항산화 활성과 항산화 물질의 분리(7) 등이 있으며, 저장(4), 가공식품 제조(8), 밤 전분의 제조(9), 변색(10) 등에 대한 연구들이 이루어져 왔다. 이와 같이 밤에 대한 다양한 연구들이 진행되어져 오고 있으나, 현재 식품은 맛과 기호성과 더불어 식품의 3차 기능인 면역력의 증진, 질병의 예방이나 회복, 노화억제 등 복잡한 생명활동을 조절하는 기능성식품으로 중요성이 강조되고 있어 본 연구에서는 국내산 밤의 기능성을 알아보았다.
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