약용식물 9종의 물 추출물에 대한 항산화 효과를 탐색하기 위해 in vitro 조건에서 강력한 산화력과 독성을 갖는 $ONOO^-$와 ${\cdot}$OH radical의 소거효과를 측정하였다. 그 결과, 감잎, 구기자, 꾸지뽕나무, 담쟁이덩굴, 마디풀, 비파나무, 으름덩굴, 참취 추출물은 10${\mu}g/ml$ 농도에서 50% 이상의$ONOO^$ 소거효과를 나타냈다. 이러한 $ONOO^-$ 소거효과는 양성 대조물인 penicillamine(94.08${\pm}$3.04)에 비해 낮았지만 비파나무 물 추출물(89.87${\pm}$4.57)이 다른 시료에 비해 가장 강력한 $ONOO^-$ 소거효과를 나타냈다. 또한, 가는잎쐐기풀과 감잎 물 추출물은 1mg/ml 농도에서 양성대조물인 thiourea 보다 효과적인${\cdot}$OH radical 억제효 과를 나타냈다. 결론적으로 9종의 약용식물은 $ONOO^-$와${\cdot}$OH radical과 연관된 산화적 스트레스에 의한 세포와 조직의 손상을 억제시킬 수 있는 천연 항산화제로 밝혀졌다.
약용식물 9종의 물 추출물에 대한 항산화 효과를 탐색하기 위해 in vitro 조건에서 강력한 산화력과 독성을 갖는 $ONOO^-$와 ${\cdot}$OH radical의 소거효과를 측정하였다. 그 결과, 감잎, 구기자, 꾸지뽕나무, 담쟁이덩굴, 마디풀, 비파나무, 으름덩굴, 참취 추출물은 10${\mu}g/ml$ 농도에서 50% 이상의$ONOO^$ 소거효과를 나타냈다. 이러한 $ONOO^-$ 소거효과는 양성 대조물인 penicillamine(94.08${\pm}$3.04)에 비해 낮았지만 비파나무 물 추출물(89.87${\pm}$4.57)이 다른 시료에 비해 가장 강력한 $ONOO^-$ 소거효과를 나타냈다. 또한, 가는잎쐐기풀과 감잎 물 추출물은 1mg/ml 농도에서 양성대조물인 thiourea 보다 효과적인${\cdot}$OH radical 억제효 과를 나타냈다. 결론적으로 9종의 약용식물은 $ONOO^-$와${\cdot}$OH radical과 연관된 산화적 스트레스에 의한 세포와 조직의 손상을 억제시킬 수 있는 천연 항산화제로 밝혀졌다.
The radical scavenging activities of 9 medicinal plants on peroxynitrite ($ONOO^-$) and hydroxyl (${\cdot}OH$) radical were investigated using in vitro system. The water extracts of 9 medicinal plants showed the protective effect against $ONOO^-$ and ${\cdot}OH$...
The radical scavenging activities of 9 medicinal plants on peroxynitrite ($ONOO^-$) and hydroxyl (${\cdot}OH$) radical were investigated using in vitro system. The water extracts of 9 medicinal plants showed the protective effect against $ONOO^-$ and ${\cdot}OH$ radical. In particular, Akebia quinata, Aster scaber, Cudrania tricuspidata, Diospyros kaki, Eriobotrya japonica, Lycium chinense, Parthenocissus tricuspidata and Polygonum aviculare exhibited $ONOO^-$-scavenging activity by about 50% at the concentration of $10{\mu}g/ml$. Although those $ONOO^-$-scavenging activities were lower than that of penicillamine (94.08${\pm}$3.04%) as a positive control, Eriobotrya japonica (89.87${\pm}$4.57%) was the most potent scavenger of $ONOO^-$ at the concentration of $10{\mu}g/ml$. Also, Diospyros kaki and Urtica angustifolia showed the strong${\cdot}$OH-scavenging activity than thiourea, positive control, at the concentration of lmg/ml. Our results indicate that 9medicinal plants may act as free radical scavengers and reduce damages caused by oxidative stress associated with $ONOO^-$ and${\cdot}$OH radical.
The radical scavenging activities of 9 medicinal plants on peroxynitrite ($ONOO^-$) and hydroxyl (${\cdot}OH$) radical were investigated using in vitro system. The water extracts of 9 medicinal plants showed the protective effect against $ONOO^-$ and ${\cdot}OH$ radical. In particular, Akebia quinata, Aster scaber, Cudrania tricuspidata, Diospyros kaki, Eriobotrya japonica, Lycium chinense, Parthenocissus tricuspidata and Polygonum aviculare exhibited $ONOO^-$-scavenging activity by about 50% at the concentration of $10{\mu}g/ml$. Although those $ONOO^-$-scavenging activities were lower than that of penicillamine (94.08${\pm}$3.04%) as a positive control, Eriobotrya japonica (89.87${\pm}$4.57%) was the most potent scavenger of $ONOO^-$ at the concentration of $10{\mu}g/ml$. Also, Diospyros kaki and Urtica angustifolia showed the strong${\cdot}$OH-scavenging activity than thiourea, positive control, at the concentration of lmg/ml. Our results indicate that 9medicinal plants may act as free radical scavengers and reduce damages caused by oxidative stress associated with $ONOO^-$ and${\cdot}$OH radical.
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문제 정의
, 2001). 따라서 본 실험에서는 예로부터 식용 또는 약용으로로 이용되어 안전성이 확인된 9종의 약용식물을 대상으로 반응성이 매우 크고 강력한 산화력을 갖는 ONOO-과 OH radical의 소거 활성효과를 평가하여 유용한 천연 항산화제로서의 개발 가능성을 조사하였다.
가설 설정
sample. **Thiourea is positive control.
제안 방법
5ml microtube에 넣은 후에 약용식물 물 추출물과 1mM H2O2 용액을 순차적으로 첨가한다. 5분 후에 반응액 DMPO-OH adduct 의 spin spectrum은 ESR spectrometer(JEOL FESX)를 이용하여 측정하였다. ESR spectrometer는 microwave power 1.
Fenton 반응에 의해 유리되는, OH radical은 spin-trap 제인 DMPO와 빠르게 반응하여 DMPO-OH adduct를 생성하므로 이 물질을 electron spin resonance(ESR) spectrometer를 이용하여 측정하였다(한과 강, 2002). 10% DMPO(v/v), 0.
와 .OH radical의 소거효과를 측정하였다. 그 결과, 감잎, 구기자, 꾸지뽕나무, 담쟁이덩굴, 마디풀, 비파나무, 으름덩굴, 참취 추출물은 10#/ml 농도에서 50% 이상의 ONOO- 소거효과를 나타냈다.
ONOO- 소거효과는 DHR 123이 산화되면서 방출하는 형광을 측정함으로써 평가하였다(Kooy et al., 1994). 96 Well date에 각 well당 10#씩 약용식물의 물 추출물을 넣고 90mM sodium chlorid와 5mM potassium chlorid를 함유한 50mM phosphate buffer(pH 7.
4)에 5mM DTPA와 5mM DHR 123 를 첨가하여 조제한 반응액을 각 well당 180#씩 첨가한다. 그 후에 200/ SIN-1을 첨가하여 차광상태로 실온에서 10분간 방치시킨 다음에 fluorescene spectrophotometer(DEKAN SPECTRFlour Plus)를 이용하여 형광도(Ex; 485, Em; 535 nm)를 측정하였다. ONOO- 소거효과는 대조군에 비해 감소 정도로 표시하였으며, 양성 대조물로는 penicillamine을 이용하였다.
1991). 본 연구의 ・OH radical 소거 활성효과는 Fenton 반응으로 생성된 ・OH radical을 spin trap제인 DMPO와 반응시킨 후에 ESR spectrometer를 이용하여 측정한 다음에 spectrum의 signal peak/Mn peak를 비교하여 평가하였다(Rosen and Rauckman, 1981). 그 결과, 약용식물 물 추출물을 첨가하지 않은 대조군의 signal peak/Mn peak이 2.
측정한 결과이다. 약용식물 추출물의 ONOO- 소거 활성효과는 약용식물 물 추출물을 첨가하지 않은 대조군의 형광도 값과 비교하여 계산하였다. 약용식물 물 추출물 #/ml 농도에서 ONOO- 소거 활성효과는 양성 대조물인 penicillamine 성분이 74.
대상 데이터
03sec의 조건에서 측정하였다., OH radical 소거효과의 양성 대조물로는 thiourea를 이용하였다.
Louis, MO, USA)의 제품을 구입하여 사용하였다. 5, 5-Dimethyl-1- pyrroline-N-oxide(DMPO), thiourea diethylenetriaminep enta acetic acid(DTPA) 등은 Wako사(Osaka, Japan)의 제품을 이용하였으며, 기타 용매는 덕산과학의 제품을 사용하였다.
본 실험에 사용한 약용식물은 순천 화생당과 시장으로부터구입하거나 직접 채취하여 전문가의 감정을 거친 후 실험재료로 사용하였다.
약용식물 50g을 증류수와 함께 추출용기에 넣고 60분간 가열하여 추출여과한 후 45℃ 이하의 수욕상에서 감압 농축한 다음에 동결건조 하여 분말시료를 얻어서 실험에 사용하였다.
성능/효과
또한, 가는잎쐐기풀과 감잎 물 추출물은 1mg/ml 농도에서 양성대조물인 thiourea 보다 효과적인 , OH radical 억제 효과를 나타냈다. 결론적으로 9종의 약용식물은 ONOO-와 ・OH radical과 연관된 산화적 스트레스에 의한 세포와 조직의 손상을 억제시킬 수 있는 천연 항산화제로 밝혀졌다.
OH radical의 소거효과를 측정하였다. 그 결과, 감잎, 구기자, 꾸지뽕나무, 담쟁이덩굴, 마디풀, 비파나무, 으름덩굴, 참취 추출물은 10#/ml 농도에서 50% 이상의 ONOO- 소거효과를 나타냈다. 이러한 ONOO- 소거효과는 양성 대조물인 penicillamine (94.
본 연구의 ・OH radical 소거 활성효과는 Fenton 반응으로 생성된 ・OH radical을 spin trap제인 DMPO와 반응시킨 후에 ESR spectrometer를 이용하여 측정한 다음에 spectrum의 signal peak/Mn peak를 비교하여 평가하였다(Rosen and Rauckman, 1981). 그 결과, 약용식물 물 추출물을 첨가하지 않은 대조군의 signal peak/Mn peak이 2.22로 나타났으며, 약용식물 물 추출물 1mg/ml 농도에서 가는잎쐐기풀이 1.04로 양성 대조물로 사용된 thiourea 1.16 보다더 높은 ・OH radical 소거 활성효과를 나타냈다(Fig. 1, Table
57)이 다른 시료에 비해 가장 강력한 ONOO- 소거효과를 나타냈다. 또한, 가는잎쐐기풀과 감잎 물 추출물은 1mg/ml 농도에서 양성대조물인 thiourea 보다 효과적인 , OH radical 억제 효과를 나타냈다. 결론적으로 9종의 약용식물은 ONOO-와 ・OH radical과 연관된 산화적 스트레스에 의한 세포와 조직의 손상을 억제시킬 수 있는 천연 항산화제로 밝혀졌다.
22%와 비슷한 ONOO- 소거 활성효과를 보였다. 약용식물 10#/ml 농도에서는 penicillamine 94.08% 보다는 낮지만 비파나무 89.87, 참취 81.91, 마디풀 79.46, 담쟁이덩굴 77.73, 꾸지뽕나무 76.72% 순으로 ONOO- 소거 활성효과를 나타냈다.
97%로 나타나 3종의 약용식물 물 추출물이 50% 이상의 ONOO- 소거 활성효과를 나타냈다. 약용식물 2.5#/ml 농도에서는 꾸지뽕나무, 구기자 및 마디풀을 제외한 모든 시료가 대조군에 비해 50% 이상의 ONOO- 소거 활성효과를 나타냈으나 양성 대조물인 penicillamine 보다는 ONOO-억제능이 낮게 나타났다. 약용식물 5#/ml 농도에서는 비파나무 물 추출물이 84.
약용식물 추출물의 ONOO- 소거 활성효과는 약용식물 물 추출물을 첨가하지 않은 대조군의 형광도 값과 비교하여 계산하였다. 약용식물 물 추출물 #/ml 농도에서 ONOO- 소거 활성효과는 양성 대조물인 penicillamine 성분이 74.91%로 나타난 것에 비해 비파나무, 참취 및 구기자는 각각 68.41, 64.49 및 50.97%로 나타나 3종의 약용식물 물 추출물이 50% 이상의 ONOO- 소거 활성효과를 나타냈다. 약용식물 2.
16으로 나타나 thiourea와 동일한, OH radical 소거 활성효과를 나타냈다. 이 밖에 담쟁이덩굴, 비파나무, 참취, 꾸지뽕나무, 구기자, 마디풀 및 으름덩굴 순으로 signal peak/Mn peak이 각각 1.49, 1.54, 1.72, 1.77, 1.81, 1.86 및 1.97로 나타나 양성대조 물인 thiourea 보다는 낮지만 9종의 모든 약용식물 물 추출물에서 대조군에 비하여 높은 ・OH radical 소거 활성효과를 나타냈다.
후속연구
그러나 생체내에서 강한 산화 능력을 지닌 ONOO-와 ・OH radical 소거 활성효과에 관한 연구 결과는 거의 보고된 바가 없었다. 그러므로 9종 약용식물의 ONOO-와 ・OH radical 소거 활성효과는 천연자원들로부터 안전성과 유용성을 겸비한 천연 항산화제 소재 개발을 위한 중요한 기초 자료로 활용될 수 있을 것으로 사료된다.
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