[논문]치태에서 분리된 Streptococcus mutans에 대한 서양산 고추냉이(Armoracia rusticana) 뿌리 추출물의 항균효과

김혜경; 박호원; 신일식; 이주현; 서현우

치태에서 분리된 Streptococcus mutans에 대한 서양산 고추냉이(Armoracia rusticana) 뿌리 추출물의 항균효과
THE ANTIMICROBIAL EFFECT OF HORSERADISH(ARMORACIA RUSTICANA) ROOT EXTRACTS AGAINST STREPTOCOCCUS MUTANS ISOLATED FROM HUMAN DENTAL PLAQUE 원문보기

大韓小兒齒科學會誌 = Journal of the Korean academy of pediatric dentistry, v.35 no.2, 2008년, pp.225 - 234

김혜경 (강릉대학교 치과대학 소아치과학교실 및 구강과학연구소) , 박호원 (강릉대학교 치과대학 소아치과학교실 및 구강과학연구소) , 신일식 (강릉대학교 해양생명공학부 식품미생물학연구실) , 이주현 (강릉대학교 치과대학 소아치과학교실 및 구강과학연구소) , 서현우 (강릉대학교 치과대학 소아치과학교실 및 구강과학연구소)

초록
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천연항균제의 개발에 대한 관심이 날로 증가하는 가운데, 다수의 연구들에서 Escherichia coli, Salmonella typhimurium, Pseudomonas aeruginosa, Vibrio parahaemolyticus, Staphylococcus aureus, Bacillus subtilis, Aspergillus parasiticus, Helicobacter pylori 등 다양한 세균들에 대한 서양산 고추냉이의 항균 효과가 밝혀진 바 있다. 서양산 고추냉이가 치아우식증의 원인균인 Streptococcus mutans에 대해서도 항균성을 나타낸다는 보고가 있으나, 아직까지 구강내에서 분리된 임상분리균주를 대상으로 한 연구는 미진한 실정이다. 본 연구에서는 사람의 구강내에서 분리 및 동정된 Streptococcus mutans에 대한 서양산 고추냉이 뿌리 추출물의 항균 효과를, 대표적 항균제인 클로르헥시딘과 비교하여 알아보고, Streptococcus mutans 표준균주에 대한 서양산 고추냉이 뿌리 추출물의 효과와 비교하고자 하였다. 항균 효과를 평가하기 위해 최소억제농도와 최소살균농도를 측정하여 다음과 같은 결론을 얻었다. 1. 본 연구에서 Streptococcus mutans 임상 분리균주와 표준균주에 대한 서양산 고추냉이 뿌리 추출물의 최소억제 농도는 각각 평균 $0.083{\sim}0.25%$ ($833.33{\sim}2500 ppm$), 평균 0.25%(2500 ppm)으로 나타나, 두 종류의 균주에 대한 항균 효과에는 뚜렷한 차이가 없는 것으로 나타났다. 2. 서양산 고추냉이 뿌리 추출물은 $0.083{\sim}0.25%$의 농도에서 클로르헥시딘($0.0021{\sim}0.0041%$)과 대등한 항균 효과를 가지는 것으로 나타났다.

Abstract ▼ AI-Helper

Recently interesting in development of antimicrobial agent from natural origin has been increased in these days. Many studies have been reported antimicrobial effect of Horseradish(Armoracia rusticana) root extracts against various microorganisms such as Escherichia coli, Salmonella typhimurium, Pseudomonas aeruginosa, Vibrio parahaemolyticu, Staphylococcus aureus, Bacillus subtilis, Aspergillus parasiticus, Helicobacter pylori. The main component related to antimicrobial activity in horseradish is well known as allyl isothiocyanate(AIT). In this study, we investigated the antimicrobial effects of Horseradish(Armoracia rusticana) root extracts against Streptococcus mutans isolated from human dental plaque, Streptococcus mutans reference strain and compared with that of chlorhexidine. Horseradish root extracts and chlorhexidine were tested to determine their minimum inhibitory concentration( MIC) and minimum bactericidal concentration(MBC). The result of this study can be summerized as follows; 1. Horseradish root extracts showed antimicrobial effect against both S. mutans isolated strain and reference strain, their MIC were respectively $0.083{\sim}0.25%$ ($833.33{\sim}2500 ppm$), 0.25% (2500 ppm). Horseradish root extracts showed antimicrobial effect against S. mutans isolated strain at same or slightly lower concentration compared with MIC of reference strain. 2. $0.083{\sim}0.25%$ horseradish root extracts showed similar antimicrobial effect with chlorhexidine ($0.0021{\sim}0.0041%$).

주제어

AI 본문요약
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문제 정의

서양산 고추냉이 뿌리 추출물의 S. mutans 임상 분리균주에 대한 항균 효과를 대표적인 구강용 항균제인 클로르헥시딘과 비교하여 알아보고, 표준균주에 대한 항균 효과와의 차이를 평가하기 위해 본 연구를 시행하였다. 강릉대학교 치과병원 소아치과에 내원한 12세 미만의 환아들에서 치면세균막을 채취하여 S.
이에 본 연구에서는 사람의 구강 내에서 분리된 S. mutans 에 대한 서양산 고추냉이 뿌리 추출물의 항균 효과를, 대표적 항균제인 클로르헥시딘의 항균 효과와 비교하여 알아보고, 동시에 표준균주에 대한 서양산 고추냉이 뿌리 추출물의 효과와 비교하고자 하였다.

제안 방법

CB plate에서 증식된 세균을 API 20 strep kit (BioMerieux, Marcy I’Eroile, France)를 사용하여 동정하였고, API rapid ID32 strep kit (BioMerieux, Marcy I’Eroile, France)를 사용하여 다시 한 번 동정하였으며 판독에는 mini-API (BioMerieux, Marcy I’Eroile, France)를 사용하였다.
FID(flame ionization detector)가 부착된 GC(HP 6890 series, Hewlett Packard Development Co., California, USA)로 AIT 농도를 측정하였으며, column은 HP-Innowax capillary column (30 m × 0.32 mm I.d., 0.5 um film thickness,Agilent Technologies, Inc., Palo Alto, CA, USA)을 사용하였다.
등의 방법을 사용하였다. MIC 측정 후 증식이 관찰되지 않은 배양액을 한 백금이 취하여 BHI 평판배지에 streak한 후, 37℃에서 24시간 동안 배양하여 증식유무를 확인하였다.
세균의 동정은 16s rRNA sequencing으로 이루어졌다. Sequencing은 ABI PRISM BigDyeTM Terminator Cycle Sequencing Kit (Applied Biosystems, Inc., California, U.S.A.)를 이용하여 진행하였고, PCR 반응은 PTC-225 Peltier Thermal Cycler (MJ Research, Inc., Massachusetts, U.S.A.)를 사용하였다.
각 균주를 96-well flat botton microplate (Greiner bioone GmbH, Frickenhausen, Germany)의 각 well에 5㎕씩 분주한 후, BHI 멸균배지를 50㎕씩 분주하였다. 여기에 일정 단계 희석(1, 0.
서양산 고추냉이 뿌리 추출물의 항균활성은 disk paper method를 이용하여 측정하였다. 각 균주를 전배양하여 660nm (V530 UV/VIS spectrophotometer, Jasco, Tokyo, Japan) 파장에 대한 흡광도(A660)가 0.600-0.650으로 일정하게 현탁된 배양액 100㎕를 BHI 평판배지에 분주한 후, 멸균된 spreader를 사용하여 균일하게 도말하였다. 멸균된 직경10mm filter paper disk (Whatman No.
mutans 임상 분리균주에 대한 항균 효과를 대표적인 구강용 항균제인 클로르헥시딘과 비교하여 알아보고, 표준균주에 대한 항균 효과와의 차이를 평가하기 위해 본 연구를 시행하였다. 강릉대학교 치과병원 소아치과에 내원한 12세 미만의 환아들에서 치면세균막을 채취하여 S. mutans 임상 분리균주를 얻었으며, 이들의 동정은 API kit와 16s rRNA sequencing으로 시행하였다. 이들 분리균주와 표준균주에 대한 서양산 고추냉이 뿌리 추출물의 항균 효과를 실험한 결과 다음과 같은 결론을 얻었다.
, Tokyo, Japan)에서 AIT 생산을 최대화하기 위하여 40℃로 120분간 유지시켰다. 그 후 120℃의 oil bath(C-WHT, Changshin scientific co., Seoul, Korea)에서 120분간 증류시키고, 추출액 150 mL을 분획한 후, oil을 원심분리하여 AIT 농도를 측정하였다.
이러한 와류혼합방법을 통해 고추냉이 뿌리 추출물은 분산되어 알맹이의 부유물이 되고 배지와 균일하게 혼합이 가능하였다. 또한 밀폐가 가능한 에펜도르프 튜브를 사용함으로써 휘발성이 높은 고추냉이 뿌리 추출물 성분의 손실을 방지하였다.
에탄올과 혼합한다면 균일한 희석액을 얻을 수 있으나 에탄올 자체의 항균 작용으로 인해 상승 효과가 나타날 수 있으므로, 순수하게 고추냉이 뿌리 추출물만의 항균 효과를 평가하기 위해 정유의 희석은 멸균 배지로 시행하였다. 멸균 배지와 혼합 시 고추냉이 뿌리 추출물의 침전 및 분리 현상을 방지하기 위하여, 시료와 멸균 배지를 에펜도르프 튜브에 넣어 vortexing하는 방식으로 혼합하였다. 이러한 와류혼합방법을 통해 고추냉이 뿌리 추출물은 분산되어 알맹이의 부유물이 되고 배지와 균일하게 혼합이 가능하였다.
CB plate에서 증식된 세균을 API 20 strep kit (BioMerieux, Marcy I’Eroile, France)를 사용하여 동정하였고, API rapid ID32 strep kit (BioMerieux, Marcy I’Eroile, France)를 사용하여 다시 한 번 동정하였으며 판독에는 mini-API (BioMerieux, Marcy I’Eroile, France)를 사용하였다. 보관중인 각각의 균주를 한 백금이 취해 Brain Heart Infusion agar (BHA, Difco, BD Diagnostic Systems, Sparks, MD, USA)에 streak하여 37℃, 5% CO2 세균배양기에서 24시간동안 배양한 후, 세균의 동정을 위해 마크로젠사(Microgen Co. Ltd., Seoul, Korea)에 의뢰하였다. 세균의 동정은 16s rRNA sequencing으로 이루어졌다.
따라서 현대에는 보다 정확하고 빠른 균주의 동정을 위해 면역학적 방법, 유전학적 방법, 종-특이 primer를 사용한 polymerase chain reaction(PCR) 등의 방법을 사용하는 추세가 증가하고 있다. 본 연구에서는 두 종류의 API kit를 사용하여 1차적인 동정을 시행하고, 최종적으로 유전학적 방법을 선택하여 16s rRNA sequencing을 사용한 균주의 동정을 시행하였다. 16s rRNA sequencing은 가장 정확하나 고가의 비용으로 인해 시행이 어려운 Full genome sequencing을 대신하여 최근들어 널리 사용되고 있으며, 균종간의 16s rRNA gene sequence 차이로 균주를 동정하는 방법이다.
서양산 고추냉이 뿌리 추출물 사용군과 동일한 방법으로 각 균주에 대한 클로르헥시딘의 최소살균농도를 측정하였다.∙모든 실험에서 동일한 실험을 3회 반복하여 평균과 표준편차를 산정하였다.
서양산 고추냉이 뿌리 추출물 사용군과 동일한 방법으로 각 균주에 대한 클로르헥시딘의 최소억제농도를 측정하였다. 클로르헥시딘은 5%를 원액으로 각 단계별로 멸균배지에 희석(0.
서양산 고추냉이 뿌리 추출물 사용군과 동일한 방법으로 각 균주에 대한 클로르헥시딘의 항균활성을 측정하였다.
, Seoul, Korea)에 의뢰하였다. 세균의 동정은 16s rRNA sequencing으로 이루어졌다. Sequencing은 ABI PRISM BigDyeTM Terminator Cycle Sequencing Kit (Applied Biosystems, Inc.
이러한 경우 정유와 증류수의 분리 현상으로 인해 희석 시 농도의 오차가 발생할 수 있다. 에탄올과 혼합한다면 균일한 희석액을 얻을 수 있으나 에탄올 자체의 항균 작용으로 인해 상승 효과가 나타날 수 있으므로, 순수하게 고추냉이 뿌리 추출물만의 항균 효과를 평가하기 위해 정유의 희석은 멸균 배지로 시행하였다. 멸균 배지와 혼합 시 고추냉이 뿌리 추출물의 침전 및 분리 현상을 방지하기 위하여, 시료와 멸균 배지를 에펜도르프 튜브에 넣어 vortexing하는 방식으로 혼합하였다.
각 균주를 96-well flat botton microplate (Greiner bioone GmbH, Frickenhausen, Germany)의 각 well에 5㎕씩 분주한 후, BHI 멸균배지를 50㎕씩 분주하였다. 여기에 일정 단계 희석(1, 0.5, 0.25, 0.125, 0.0625, 0.0312, 0.0156,0.0078, 0.0039, 0.0019%)한 서양산 고추냉이 뿌리 추출물을 50㎕ 분주하고, 37℃ 5% CO2에서 24시간 동안 배양하였다. 배양 후, 각 균주의 증식 유무를 micro plate reader (OD;660nm, EL800, Bio-Tek Instrument Inc.
이 때 성장한 세균 군락 중 형태가 다른 것은 다른 종으로 생각하고 각각 한 군락을 채취하여 API kit(BioMerieux, Marcy I’Eroile, France)를 사용한 균주의 동정을 위해 sheep blood가 5% 첨가된 Columbia Blood agar base(CB, Difco, Detroit, MI, U.S.A)에 접종하였고,37℃ CO2 세균배양기에서 48시간 배양하였다.
, Ltd, Kimpo, Korea)에서 1시간 동안 가열하였다. 이를 다시 실온으로 냉각하고, 헥산층 1 ㎕를 gas chromatography로 분석하였다. FID(flame ionization detector)가 부착된 GC(HP 6890 series, Hewlett Packard Development Co.
증류수를 이용하여 서양산 고추냉이에서 항균성 물질을 추출하였다. 고추냉이 분말 200 g을 증류수 550 mL와 혼합한 후, rotary evaporator (NE-1, Tokyo Rikakikai Co.
채취한 치면세균막을 수 회 vortexing 하여 생리식염수로 10배 희석한 후 15% sucrose, 0.5㎍/㎖의 bacitracin이 함유된 Mitis-Salivarius Agar (MSA, Difco, Detroit, MI, U.S.A.)에 0.1㎖씩 도말하여 37℃, 5% CO2 세균배양기에서 48시간 동안 배양하였다. 이 때 성장한 세균 군락 중 형태가 다른 것은 다른 종으로 생각하고 각각 한 군락을 채취하여 API kit(BioMerieux, Marcy I’Eroile, France)를 사용한 균주의 동정을 위해 sheep blood가 5% 첨가된 Columbia Blood agar base(CB, Difco, Detroit, MI, U.
이번 연구는 다음과 같은 몇 가지 한계점을 가지고 있다. 첫째, 본 연구에서는 사람의 구강에서 분리되어 S. mutans로 동정된 임상 분리균주 4주를 대상으로, 서양산 고추냉이 뿌리 추출물의 항균 효과를 평가하고, 그 결과를 표준균주에 대한 항균효과와 비교하였다. 이 때 실험 대상이 된 임상 분리균주의 수가 적어 모든 사람의 구강에 존재하는 S.
추출물의 AIT 농도를 측정하기 위하여 추출물 1 ㎖를 헥산(hexane) 1 ㎖와 혼합한 후, 60℃ 항온 수조(RW-3025G shaking water bath, Jeio Tech Co., Ltd, Kimpo, Korea)에서 1시간 동안 가열하였다. 이를 다시 실온으로 냉각하고, 헥산층 1 ㎕를 gas chromatography로 분석하였다.
서양산 고추냉이 뿌리 추출물 사용군과 동일한 방법으로 각 균주에 대한 클로르헥시딘의 최소억제농도를 측정하였다. 클로르헥시딘은 5%를 원액으로 각 단계별로 멸균배지에 희석(0.31, 0.16, 0.08, 0.04, 0.02, 0.01, 0.005, 0.0025, 0.0012, 0.0006%)하여 사용하였다.
강릉대학교 치과병원 소아치과에 내원한 12세 미만의 환자들중에서 구내경과 탐침(explorer)으로 검사하여 C2(C2: 상아질까지 진행된 치아우식증)이상의 우식치아를 갖고 있는 환자 중문진을 통해 전신병력이 없고 최근 2주간 항생제 치료나 불소도포를 받은 적 없는 10명의 환자들을 선별하였다. 해당 환자들의 C2 우식치아의 와동내 혹은 치면에서 멸균된 탐침을 사용하여 치면세균막을 채취하였다. 채취된 치면세균막을 0.

대상 데이터

Ltd.(Seoul, Korea)에서 구입한 중국산 분말을 사용하였으며, 항균 효과의 비교를 위해 5% 클로르헥시딘(알파헥시딘, Sungkwang Co. Ltd ., Bucheon, Korea)을 사용하였다. 서양산 고추냉이 뿌리 추출물 중의 AIT 농도 측정 시 사용한 AIT 표준용액(>98% purity)은 Fluka Co.
(Haan, Germany)의 제품을 사용하였으며, Hexane은 Showa Co.(Tokyo, Japan)의 제품을 이용하였다.
, Palo Alto, CA, USA)을 사용하였다. Injection port와 FID의 온도는 각각 250℃, 260℃였으며, carrier gas는 질소(Nitrogen)를 사용하였다.
강릉대학교 치과병원 소아치과에 내원한 12세 미만의 환자들중에서 구내경과 탐침(explorer)으로 검사하여 C2(C2: 상아질까지 진행된 치아우식증)이상의 우식치아를 갖고 있는 환자 중문진을 통해 전신병력이 없고 최근 2주간 항생제 치료나 불소도포를 받은 적 없는 10명의 환자들을 선별하였다. 해당 환자들의 C2 우식치아의 와동내 혹은 치면에서 멸균된 탐침을 사용하여 치면세균막을 채취하였다.
mutans KCTC 3065이며, 한국생명공학연구원 유전자은행(KCTC, Daejeon, Korea)으로부터 분양받아 사용하였다. 배지는 Brain Heart Infusion broth (BHI, Difco, BD Diagnostic Systems, Sparks, MD, USA)와 Brain Heart Infusion agar (BHA, Difco, BD Diagnostic Systems, Sparks, MD, USA)를 사용하였다.
본 실험에서 사용된 표준균주는 S. mutans KCTC 3065이며, 한국생명공학연구원 유전자은행(KCTC, Daejeon, Korea)으로부터 분양받아 사용하였다. 배지는 Brain Heart Infusion broth (BHI, Difco, BD Diagnostic Systems, Sparks, MD, USA)와 Brain Heart Infusion agar (BHA, Difco, BD Diagnostic Systems, Sparks, MD, USA)를 사용하였다.
이상 3회의 동정 결과 모두 Streptococcus mutans로 동정된 4개의 균주를 본 실험에 사용하였다.

데이터처리

서양산 고추냉이 뿌리 추출물 사용군과 동일한 방법으로 각 균주에 대한 클로르헥시딘의 최소살균농도를 측정하였다.∙모든 실험에서 동일한 실험을 3회 반복하여 평균과 표준편차를 산정하였다.

이론/모형

MBC의 측정은 Bamba⁴²⁾등의 방법을 사용하였다. MIC 측정 후 증식이 관찰되지 않은 배양액을 한 백금이 취하여 BHI 평판배지에 streak한 후, 37℃에서 24시간 동안 배양하여 증식유무를 확인하였다.
1). 본 실험에서는 이 추출물에 멸균 배지를 가하여 double dilution법으로 희석하여 사용하였다.
서양산 고추냉이 뿌리 추출물의 항균활성은 disk paper method를 이용하여 측정하였다. 각 균주를 전배양하여 660nm (V530 UV/VIS spectrophotometer, Jasco, Tokyo, Japan) 파장에 대한 흡광도(A660)가 0.

성능/효과

1. 본 연구에서 S. mutans 임상 분리균주에 대한 서양산 고추냉이 뿌리 추출물의 최소억제농도는 평균 0.083~0.25% (833.33~2500 ppm)이었으며, 표준균주에 대한 최소억제농도는 평균 0.25%(2500 ppm)으로 나타나, 서양산 고추냉이 뿌리 추출물은 S. mutans 임상 분리균주에 대하여 표준균주와 같거나 약간 낮은 농도에서 항균 효과를 나타냄을 확인하였다.
2. S. mutans 임상 분리균주와 표준균주에 대한 클로르헥시딘의 최소억제농도는 각각 평균 0.0021~0.0029%,0.0041%로 조사되었으며, 서양산 고추냉이 뿌리 추출물과 마찬가지로 임상 분리균주에 대한 항균 효과가 약간 더 낮은 농도에서 나타났으나 큰 차이는 없는 것으로 나타났다.
3. 서양산 고추냉이 뿌리 추출물은 0.083~0.25%의 농도에서 클로르헥시딘(0.0021~0.0041%)과 대등한 항균 효과를 가지는 것으로 나타났으며, 이후 구강 내 실험을 통하여 실제로 사용될 항균성 제재의 농도 결정이 필요할 것으로 생각된다.
Disk paper method를 이용하여 임상 분리균주에 대한 서양산 고추냉이 뿌리 추출물과 클로르헥시딘의 항균활성을 알아본 결과 두 군 모두에서 투명환을 형성하여 항균효과를 나타냄을 알 수 있다. 그러나 투명환의 모양이나 colony의 성장 양상은 두 군에서 다르게 나타났다.
Standard AIT의 농도별 gas chromatography 결과를 수식화하여 서양산 고추냉이 뿌리 추출물의 AIT 함량을 적정하였으며, 그 결과 추출물은 약 650,670.97±1,370.26 ppm 의 AIT를 함유하고 있었다(Fig. 1).
sobrinus KCTC 3088에 대해 동일한 세균 성장 억제 효과를 보였으나, 교정 환자로부터 분리된 균주들에 대한 효과에서는 차이가 있었다고 보고하였다. 그러나 본 연구에서 서양산 고추냉이 뿌리 추출물의 항균 효과는 임상 분리균주와 표준균주간간에 큰 차이가 없는 것으로 나타났다.
서양산 고추냉이 뿌리 추출물과 클로르헥시딘은 실험에 사용된 모든 임상분리균주 및 표준균주에서 paper disk 주위로 투명환을 형성하였으며(Fig. 2), 이로써 서양산 고추냉이 뿌리 추출물과 클로르헥시딘은 구강내에서 분리된 Streptococcus mutans에 대하여 항균 활성이 있음을 확인할 수 있었다.
서양산 고추냉이 뿌리 추출물의 실험 결과, 사람의 구강내에서 유래된 S. mutans 임상 분리균주의 MIC는 0.0625~0.25%, 표준균주의 MIC는 0.25%으로 나타났고, MBC의 경우에는 임상 분리균주는 0.25~1%, 표준균주는 0.5~1%의 수치를 기록하였다. 실험 대상 균주의 숫자가 적어 통계적인 분석은 시행하지 않았으나, 서양산 고추냉이 뿌리 추출물이 S.
mutans 임상 분리균주 및 표준균주에 대한 서양산 고추냉이 뿌리 추출물 MIC의 평균 및 표준편차는 Table 1과 같다. 서양산 고추냉이 뿌리 추출물의 실험 결과, 임상 분리균주에 대한 MIC는 균주마다 약간의 차이는 있었으나 총 3회의 실험 중 0.0625~0.25%의 범위에서 나타났으며, 표준균주에 대한 MIC는 0.25%로 나타났다.
5~1%의 수치를 기록하였다. 실험 대상 균주의 숫자가 적어 통계적인 분석은 시행하지 않았으나, 서양산 고추냉이 뿌리 추출물이 S.mutans 임상 분리균주에 대하여 표준균주보다 같거나 약간 낮은 농도에서 항균 효과를 나타낸다는 사실을 확인할 수 있었다. 이는 클로르헥시딘에서도 마찬가지로 임상 분리균주에 대한MIC는 약 0.
임상 분리균주 및 표준균주에 대한 클로르헥시딘의 MIC를 측정한 결과는 Table 1과 같다. 임상 분리균주에 대한 MIC는 평균 0.0025% 근처로 나타났으며 표준균주에 대한 MIC는 평균 0.0041%로 나타났다.

후속연구

mutans 임상 분리균주를 대상으로 고추냉이 뿌리 추출물의 효과를 평가하였다는 점에서 의의가 있다. S.mutans의 표준균주와 임상 분리균주간에 고추냉이 뿌리 추출물의 항균 효과가 큰 차이가 없음을 밝힘으로써 이후에 시행될 구강내에서의 고추냉이 뿌리 추출물의 항균 효과 실험에 중요한 토대가 될 것으로 생각된다.
둘째, 이번 연구에서는 치아우식증의 주요 원인균인 S. mutans만을 구강내에서 분리하여 고추냉이 뿌리 추출물의 항균효과를 실험하였으나, S. mutans 이외에도 사람의 치아우식증과 관련되어 있는 S. sobrinus, Lactobaillus 종, Actinomyces 종 등의 세균도 구강내에서 분리하여, 이들 균주에 대해서도 항균 효과를 평가할 필요가 있다. 또한 치아우식증 관련 세균 외에도 치주질환이나 치근단 병소 등 다양한 구강내 질환과 관련된 세균에 대해서도, 임상 분리균주를 대상으로 한 연구가 필요하다.
sobrinus, Lactobaillus 종, Actinomyces 종 등의 세균도 구강내에서 분리하여, 이들 균주에 대해서도 항균 효과를 평가할 필요가 있다. 또한 치아우식증 관련 세균 외에도 치주질환이나 치근단 병소 등 다양한 구강내 질환과 관련된 세균에 대해서도, 임상 분리균주를 대상으로 한 연구가 필요하다.
리스테린은 구미 국가에서는 널리 사용되고 있는 구강위생제재이나, 사용 시 맛이 좋지 않고 작열감이 심하여 국내에서는 거의 사용되지 않고 있는 실정이다. 리스테린의 항균 성분이 천연추출물이라는 점에서는 서양산 고추냉이 추출물과 유사한 점이 있으나,리스테린은 12세 미만의 아동에게는 삼킬 위험이 있어 사용이 추천되지 않는 제재임을 고려하면, 향신료로서 식품에 자유롭게 첨가가 가능한 고추냉이가 더욱 인체에 안전하면서 효과적인 항균 제재로 개발될 수 있을 것으로 생각된다.
마지막으로 본 연구에서는 서양산 고추냉이 뿌리 추출물의 효과를 클로르헥시딘과 비교하였는데, 추후 진행될 연구에서는 천연추출물을 원료로 하는 구강양치액인 리스테린(Listerine®Antiseptic, Pfizer Inc., Morris Plain, NJ, USA)과의 비교연구도 필요할 것으로 생각된다.
셋째, 또한 이번 연구는 in vitro에서 진행된 실험으로, 추후 서양산 고추냉이 뿌리 추출물을 이용한 구강용 제재의 개발을 위해서는 in vivo에서의 항균 효과도 연구되어야 할 것이다.

질의응답

핵심어	질문	논문에서 추출한 답변
	치아우식증은 어떠한 현상인가?	치아우식증은 치태 내 세균에 의해 치아 경조직이 탈회되는현상으로, 치주질환과 함께 구강 내에서 발생하는 양대 구강병의 하나로 알려져 있다. 치아우식증은 어린이에서 치아 상실의 가장 큰 원인이며, 구강 보건의 향상에 따라 선진국에서는 과거에 비해 큰 감소 추세를 보이고 있으나 우리나라를 비롯한 많은 국가에서는 아직도 구강 건강에 있어 커다란 문제가 되고 있다.
	mutans streptococci 중 사람의 구강에서 가장 많이 발견되는 것은?	MS 중에서도 S. mutans와 S. sobrinus가 사람의 구강 내에서 가장 많이 발견되고, 사람의 치아우식증과 가장 깊은 관련성을 갖고 있는 것으로 알려져 있다. 일부 연구에 따르면 S.
	치아우식증의 가장 큰 원인은 무엇인가?	치아우식증은 치태 내 세균에 의해 치아 경조직이 탈회되는현상으로, 치주질환과 함께 구강 내에서 발생하는 양대 구강병의 하나로 알려져 있다. 치아우식증은 어린이에서 치아 상실의 가장 큰 원인이며, 구강 보건의 향상에 따라 선진국에서는 과거에 비해 큰 감소 추세를 보이고 있으나 우리나라를 비롯한 많은 국가에서는 아직도 구강 건강에 있어 커다란 문제가 되고 있다.

참고문헌 (53)

Fitzgerald RJ, Keyes PH : Demonstration of the etiologic role of streptococci in experimental caries in the hamster. J Am Dent Assoc, 61:9-19, 1960.

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표제어: PCR

동의어: Packet Collision Rate

용어 설명 출처 목록 (6)

용어 설명: PCR은 세균 특이성이 있는 primer를 이용하여 적은 수의 세균이 있을지라도 쉽게 검출할 수 있는 유용한 방법이며, 이를 이용하여 구강 내 치면세균막이나 타액에서 직접 세균을 검출할 수 있게 되었다[8].

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