[논문]육미지황탕(六味地黃湯)의 마우스에 대한 급성독성

전원경; 이재훈; 이지혜; 김미연; 마진열

육미지황탕(六味地黃湯)의 마우스에 대한 급성독성
Acute Toxicity of Yukmijihwang-tang in ICR Mice 원문보기

大韓韓醫學方劑學會誌 = Herbal formula science, v.17 no.2, 2009년, pp.65 - 72

전원경 (한국한의학연구원 신한방제제연구센터) , 이재훈 (한국한의학연구원 신한방제제연구센터) , 이지혜 (한국한의학연구원 신한방제제연구센터) , 김미연 (한국한의학연구원 신한방제제연구센터) , 마진열 (한국한의학연구원 신한방제제연구센터)

Abstract ▼ AI-Helper

Objectives : Yukmijihwang-tang (YJT) is known as a tonifying formula for reinforcement of yin deficiency conditions. The present study was carried out to investigate the potential acute toxicity of YJT in ICR male and female mice. Methods : We investigated the acute toxicity about boiling water-extracted YJT. The test article was orally administered once by gavage to 20 male and 20 female mice at dose levels of 0 (control group), 1250, 2500 and 5000 mg/kg body weight. Mortalities, clinical findings, autopsy and body weight changes were monitored daily for the 14 days following the administration according to the Regulation of Korean Food and Drug Administration. Results : We observed survival rates, general toxicity, change of body weight, and autopsy. Single oral administration of YJT with different dosages, no animals died of the test drug. Autopsy of animal revealed no abnormal gross finding. Therefore, $LD_{50}$ value of YJT for ICR mice was more than 5000 mg/kg on oral route. Conclusions : These results suggest that no toxic dose level of YJT in mice is considered to be more than 5000 mg/kg. Consequently, it was concluded that YJT have no effect on acute toxicity and side effect in ICR mice.

주제어

AI 본문요약
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문제 정의

이와 같이 실험적 효능연구는 문헌연구와 비교하여 많이 이루어지고 있으나 육미지황탕의 안전성에 관련된 실험적 연구는 거의 없는 것으로 조사되었으며 특히 마우스를 이용한 급성독성에 대한 연구보고는 없었다. 따라서 본 연구에서는 한방의료기관의 다빈도 처방 중에 하나인 육미지황탕을 대상으로 안전성을 평가하고자 식품의약품안전청의 「의약품 등의 독성시험 기준」³¹⁾에 따라 마우스에서 단회투여에 의한 독성시험을 실시하였다.
본 연구는 육미지황탕의 동결건조 시료에 대한 급성독성을 평가하고자 ICR 암수 마우스에게 각각 0, 1250, 2500, 5000㎎/㎏ 용량으로 단회 경구투여한 후 14일간 사망률, 일반증상, 체중변화 및 부검 소견을 관찰하였다.시험결과 마우스에서 육미지황탕의 경구투여는 모든 마우스가 생존하여 평균치사량을 산출할 수 없었으며, 임상증상 관찰 시 실험물질의 투여에 관한 어떠한 독성증상의 이상 소견이 관찰되지 않았다.

제안 방법

5로 3개 군 (1250, 2500, 5000㎎/㎏)을 각각 설정하고, 대조군 (0㎎/㎏)을 포함하여 모두 4개의 군으로 정하였다(Table3). 각 용량군의 YJT은 투여 직전에 3차 증류수에 희석하여 실험에 공시하였으며 동물을 하룻밤 절식시킨 후 배부 피부 고정법으로 고정하고 경구투여용 금속제 존데와 주사관을 이용하여 위내에 강제 경구 투여 하였다.
동물입수 시, 외관을 육안으로 검사한 다음 1주일간의 순화기간동안에 임상관찰 등을 통하여 정상적인 동물만 암⋅수 20마리씩 선발하여 체중범위에 따른 무작위법에 의하여 군 분리를 실시한 후, 본 실험에 사용하였다.
육미지황탕을 구성하고 있는 한약재를 table 2와 같이 정량한 다음 조합하여 실험에 사용하였다. 본 연구에서는 열수추출법 (한국, 경서 추출기 cosmos-600)에 의한 시험물질 조제를 실시하였으며 처방구성에 따른 육미지황탕을 25L 생수 (화이트, 경남 산청군 삼장면 덕교리 800)에 넣어 180분간 열수 추출한 후, 건조분무기 (Japan, Eyela SD-1000)를 사용하여 분말 형태로 조제하였다(수율: 36.71%).
시험에 사용된 모든 동물에 대하여 경구투여 직전과 그리고 투여 후 1일,3일,7일과 부검하기 직전인 14일째에 각각 체중을 측정하였다.
. 실험 종료 후, 에테르로 마취하여 후대정맥을 통한 방혈치사 시킨 다음 부검하여 외관 및 내부 장기의 이상 유무를 육안적 소견으로 관찰하였다.
임상 증상은 투여 직후부터 6시간 동안 매시간 관찰하였으며, 그 후 14일 (1일 1회)동안 일반증상 관찰법에 의하여 대조군과 비교 관찰하였다32).
5주령 마우스에 대한 YJT의 급성 경구독성을 평가하기 위하여 무작위법을 이용하여 군분리를 실시하였다. 투여 경로는 한방 임상에서의 주요 적용경로 중의 하나인 경구로 하였으며, 본 연구에서 설정된 투여 용량은 최고용량 5000㎎/㎏을 기준으로 하여 공비 0.5로 3개 군 (1250, 2500, 5000㎎/㎏)을 각각 설정하고, 대조군 (0㎎/㎏)을 포함하여 모두 4개의 군으로 정하였다(Table3). 각 용량군의 YJT은 투여 직전에 3차 증류수에 희석하여 실험에 공시하였으며 동물을 하룻밤 절식시킨 후 배부 피부 고정법으로 고정하고 경구투여용 금속제 존데와 주사관을 이용하여 위내에 강제 경구 투여 하였다.

대상 데이터

시험구역은 한국한의학연구원 동물실험실에서 실시하였으며, 시험동물은 4주령 암수 ICR계 마우스를 오리엔트 바이오 (경기도 성남시 중원구 상대원동 143-1)에서 분양받아 사용하였다. 동물입수 시, 외관을 육안으로 검사한 다음 1주일간의 순화기간동안에 임상관찰 등을 통하여 정상적인 동물만 암⋅수 20마리씩 선발하여 체중범위에 따른 무작위법에 의하여 군 분리를 실시한 후, 본 실험에 사용하였다.
육미지황탕 처방의 구성은 숙지황 (Rehmanniae RadixPreparat), 산약 (DioscoreaeRhizoma), 산수유 (CorniFructus),택사 (AlismatisRhizoma), 복령 (Poria),목단피 (Moutan Cortex)로^32-33) 생산자 및 재배지역이 명확한 한약재를 구입하였다 (Table 1). 육미지황탕을 구성하고 있는 한약재를 table 2와 같이 정량한 다음 조합하여 실험에 사용하였다.
생산자 및 재배지역이 명확한 한약재를 구입하였다 (Table 1). 육미지황탕을 구성하고 있는 한약재를 table 2와 같이 정량한 다음 조합하여 실험에 사용하였다. 본 연구에서는 열수추출법 (한국, 경서 추출기 cosmos-600)에 의한 시험물질 조제를 실시하였으며 처방구성에 따른 육미지황탕을 25L 생수 (화이트, 경남 산청군 삼장면 덕교리 800)에 넣어 180분간 열수 추출한 후, 건조분무기 (Japan, Eyela SD-1000)를 사용하여 분말 형태로 조제하였다(수율: 36.

데이터처리

결과의 통계처리는 SPSS 11.0 패키지 (SPSS, USA)를 이용하였으며, 모든 측정값은 평균과 표준편차로 계산하였다. 대조군과 실험군의 분석 수치에 대한 유의적 검증은 일원배치분산분석 (one-way analysis of variance,ANOVA)을 실시하였으며, 사후검증은 Duncantest에 의하여 실행하였다.
0 패키지 (SPSS, USA)를 이용하였으며, 모든 측정값은 평균과 표준편차로 계산하였다. 대조군과 실험군의 분석 수치에 대한 유의적 검증은 일원배치분산분석 (one-way analysis of variance,ANOVA)을 실시하였으며, 사후검증은 Duncantest에 의하여 실행하였다. 분석결과에 대한 p<0.
분석결과에 대한 p<0.05 수준에서 평균치에 대한 유의성을 분석하였다.

이론/모형

5주령 마우스에 대한 YJT의 급성 경구독성을 평가하기 위하여 무작위법을 이용하여 군분리를 실시하였다. 투여 경로는 한방 임상에서의 주요 적용경로 중의 하나인 경구로 하였으며, 본 연구에서 설정된 투여 용량은 최고용량 5000㎎/㎏을 기준으로 하여 공비 0.

성능/효과

시험결과 마우스에서 육미지황탕의 경구투여는 모든 마우스가 생존하여 평균치사량을 산출할 수 없었으며, 임상증상 관찰 시 실험물질의 투여에 관한 어떠한 독성증상의 이상 소견이 관찰되지 않았다. 또한 경구투여한 마우스의 체중 변화는 대조군과 시험물질 투여군 간의 유의차를 발견할 수 없었고, 모든 장기에 육안적 이상병변은 관찰되지 않았다. 이상의 결과를 종합해 볼 때 시험 물질인 육미지황탕은 암수 ICR 마우스 생체내 안전한 물질로 작용되는 것으로 생각되며 LD₅₀값은 5000 ㎎/㎏을 훨씬 상회할 것으로 사료된다.
모든 시험군에서 경구투여 후 체중이 증가하였으며 마우스에 대한 육미지황탕 3개 용량으로 경구 투여 한 군에서 대조군에 비하여 유의성 있는 차이를 나타내지 않았다.또한 투여용량군 사이의 체중 변화는 용량의존성을 나타내지 않았다(Fig.
순화 및 실험기간 동안의 사육환경은 온도 23±3℃,상대습도 50±10%,환기 횟수는 시간당 12～16회, 조명은 12시간 명암주기 (점등 7:00, 소등 19:00), 조도는 150～300 Lx로 조정하여 일정한 사육환경 조건을 유지하였다.
본 연구는 육미지황탕의 동결건조 시료에 대한 급성독성을 평가하고자 ICR 암수 마우스에게 각각 0, 1250, 2500, 5000㎎/㎏ 용량으로 단회 경구투여한 후 14일간 사망률, 일반증상, 체중변화 및 부검 소견을 관찰하였다.시험결과 마우스에서 육미지황탕의 경구투여는 모든 마우스가 생존하여 평균치사량을 산출할 수 없었으며, 임상증상 관찰 시 실험물질의 투여에 관한 어떠한 독성증상의 이상 소견이 관찰되지 않았다. 또한 경구투여한 마우스의 체중 변화는 대조군과 시험물질 투여군 간의 유의차를 발견할 수 없었고, 모든 장기에 육안적 이상병변은 관찰되지 않았다.
시험기간 중 대조군 및 육미지황탕 1250, 2500, 5000 mg/kg 투여군에서 경구투여 후 14일 동안 사망동물은 관찰되지 않았다(Table4).
실험 종료 시,모든 암수 ICR 마우스의 장기에 대하여 육안적 병변을 관찰한 결과 시험물질의 투여에 기인된 어떠한 이상 병변은 관찰되지 않았다 (Table 6).
육미지황탕을 암수 마우스에 1회 경구투여한 후 관찰한 결과, 5000mg/kg까지는 치사량(LD₅₀)이 산출되지 않아 본 시험물질인 육미지황탕은 무독성 물질로 판단되어 진다.
또한 경구투여한 마우스의 체중 변화는 대조군과 시험물질 투여군 간의 유의차를 발견할 수 없었고, 모든 장기에 육안적 이상병변은 관찰되지 않았다. 이상의 결과를 종합해 볼 때 시험 물질인 육미지황탕은 암수 ICR 마우스 생체내 안전한 물질로 작용되는 것으로 생각되며 LD₅₀값은 5000 ㎎/㎏을 훨씬 상회할 것으로 사료된다.

질의응답

핵심어	질문	논문에서 추출한 답변
	육미지황탕은 동양의학에서 어떤 용도로 사용되었는가?	중국에서 liuweidihuang-tang으로 알려져 있는 육미지황탕은 동양의학에서 腎陰을 보하는 처방으로 신장질환을 치료하기위해 주로 사용되어왔다1) . 육미지황탕은 ｢金匱要略｣에서 기원하고 八味地黃丸을 변형한 것인데 宋代의 錢乙의 ｢小兒藥證直訣｣ 에서 육계와 부자를 처방에서 제외하고 六味地黃元이라고 명명되었으며 탕제로 복용가능 하도록 조절한 처방으로 숙지황,산약,산수유,택사,복 령,목단피 등 6종의 약재로 구성되어져 있으며 지금까지 임상에서 널리 활용되어 왔다2) .
	육미지황탕은 어디에서 기원되었는가?	중국에서 liuweidihuang-tang으로 알려져 있는 육미지황탕은 동양의학에서 腎陰을 보하는 처방으로 신장질환을 치료하기위해 주로 사용되어왔다1) . 육미지황탕은 ｢金匱要略｣에서 기원하고 八味地黃丸을 변형한 것인데 宋代의 錢乙의 ｢小兒藥證直訣｣ 에서 육계와 부자를 처방에서 제외하고 六味地黃元이라고 명명되었으며 탕제로 복용가능 하도록 조절한 처방으로 숙지황,산약,산수유,택사,복 령,목단피 등 6종의 약재로 구성되어져 있으며 지금까지 임상에서 널리 활용되어 왔다2) .최근에는 한의학계를 중심으로 육미지황탕에 대해 실험적 효능연구 및 성분분석 연구 그리고 임상치료사 례에 대해 다수 보고되고 있다.
	육미 지황탕은 어떻게 구성되어 있는가?	중국에서 liuweidihuang-tang으로 알려져 있는 육미지황탕은 동양의학에서 腎陰을 보하는 처방으로 신장질환을 치료하기위해 주로 사용되어왔다1) . 육미지황탕은 ｢金匱要略｣에서 기원하고 八味地黃丸을 변형한 것인데 宋代의 錢乙의 ｢小兒藥證直訣｣ 에서 육계와 부자를 처방에서 제외하고 六味地黃元이라고 명명되었으며 탕제로 복용가능 하도록 조절한 처방으로 숙지황,산약,산수유,택사,복 령,목단피 등 6종의 약재로 구성되어져 있으며 지금까지 임상에서 널리 활용되어 왔다2) .최근에는 한의학계를 중심으로 육미지황탕에 대해 실험적 효능연구 및 성분분석 연구 그리고 임상치료사 례에 대해 다수 보고되고 있다.

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식품의약품안전청. 대한약전. 제9개정. 신일북스. 2008.

저자의 다른 논문 :

표제어: PCR

동의어: Packet Collision Rate

용어 설명 출처 목록 (6)

용어 설명: PCR은 세균 특이성이 있는 primer를 이용하여 적은 수의 세균이 있을지라도 쉽게 검출할 수 있는 유용한 방법이며, 이를 이용하여 구강 내 치면세균막이나 타액에서 직접 세균을 검출할 수 있게 되었다[8].

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