BCG가 Ehrlich 암세포를 이식한 생쥐의 위점막 상피세포의 DNA합성 및 미세구조에 미치는 영향 Effects of BCG on the DNA Synthesis and Ultrastructure of Mouse Gastric Mucosal Epithelial Cells Inoculated with Ehrlich Carcinoma Cells원문보기
이 실험은 Ehrlich 종양세포를 이식한 후 BCG를 투여하였을 때, 위점막 상피세포의 형태학적 변화와 DNA합성능의 변화를 연구하고자 시행하였다. 실험동물로는 체중 25 g 내외의 성숙한 생쥐(ICR계통)를 정상대조군, 종양세포이식대조군(종양대조군), 종양세포이식후 BCG투여군(BCG투여군)으로 구분하였다. 종양대조군과 BCG투여군 동물들은 샅부위 피하에 각각 $1{\times}10^7$의 Ehrlich 종양세포를 이식한 후, 다음날부터 BCG ($0.6{\times}10^8{\sim}6.4{\times}10^8$CFU, 27 mg/vial, Connaught Lab., Canada)를 하루건너 한 번씩 피부밑조직에 주사하였으며, 종양대조군은 종양세포이식 후에 BCG 대신 0.2mL의 생리식염수를 피부밑조직에 주사하였다. 자기방사법적 관찰을 위해서는 BCG를 마지막으로 주사한 다음날 $^3H$-thymidine (methyl-$^3H$-thymidine: specific activity 25 Ci/mmol, Amersham Lab., England) 0.7${\mu}Ci/gm$를 꼬리정맥에 주사하고, 70분 후 도살하여 위조직을 떼어내어 10% formalin에 고정하였다. 자기방사표본관찰은 위점막 조직이 세로로 잘 절단된 부위를 택하여 점막근육판을 따라 점막길이 3.5mm의 위점막 조직에 분포하는 $^3H$-thymidine 표지세포의 수를 계수하였으며, 일반조직 관찰을 위해서는 hematoxylin-eosin (H-E)염색을 시행하였다. 전자현미경 관찰을 위해서는 떼어낸 위조직을 2.5% glutaraldehyde-1.5% paraformaldehyde 혼합액에 고정한 후, 1% osmium tetroxide 액에 다시 고정하였으며, 고정이 끝난 조직은 탈수과정을 거쳐 araldite 혼합액에 포매하였다. 광학현미경적 관찰에서 종양대조군과 BCG투여군은 위점막 조직에서 형태적으로 큰 변화를 볼 수 없었다. 전자현미경적 관찰에서 BCG투여군의 점액상피세포는 전체적인 모습이 정상대조군과 종양대조군의 소견과 유사하였으나 정상대조군과 종양대조군에 비해 수초구조와 뭇소포체(multivesicular body) 및 전자밀도가 높은 큰 미토콘드리아속과립이 자주 관찰되었다. 자기방사법적 관찰에서 정상대조군, 종양대조군, BCG투여군은 점막길이 3.5 mm 당 출현하는 표지세포수가 각각 380.2 (${\pm}31.35$), 426.1 (${\pm}28.43$) 및 301.8 (${\pm}34.63$)개이었으며, BCG투여군은 정상대조군과 종양대조군에 비하여 표지된 은입자의 수가 매우 적어서 표지과립이 겨우 구별될 정도의 세포가 많이 관찰되었다. 이상의 결과를 종합해보면 Ehrlich 종양세포를 이식한 동물에 BCG를 반복 투여하면 위점막 상피세포의 DNA합성을 효과적으로 억제하면서도 형태적인 변화가 매우 경미하였으며, 이러한 결과는 BCG가 항암치료 시 보조제로 사용할 수 있는 좋은 약제라고 생각된다.
이 실험은 Ehrlich 종양세포를 이식한 후 BCG를 투여하였을 때, 위점막 상피세포의 형태학적 변화와 DNA합성능의 변화를 연구하고자 시행하였다. 실험동물로는 체중 25 g 내외의 성숙한 생쥐(ICR계통)를 정상대조군, 종양세포이식대조군(종양대조군), 종양세포이식후 BCG투여군(BCG투여군)으로 구분하였다. 종양대조군과 BCG투여군 동물들은 샅부위 피하에 각각 $1{\times}10^7$의 Ehrlich 종양세포를 이식한 후, 다음날부터 BCG ($0.6{\times}10^8{\sim}6.4{\times}10^8$ CFU, 27 mg/vial, Connaught Lab., Canada)를 하루건너 한 번씩 피부밑조직에 주사하였으며, 종양대조군은 종양세포이식 후에 BCG 대신 0.2mL의 생리식염수를 피부밑조직에 주사하였다. 자기방사법적 관찰을 위해서는 BCG를 마지막으로 주사한 다음날 $^3H$-thymidine (methyl-$^3H$-thymidine: specific activity 25 Ci/mmol, Amersham Lab., England) 0.7${\mu}Ci/gm$를 꼬리정맥에 주사하고, 70분 후 도살하여 위조직을 떼어내어 10% formalin에 고정하였다. 자기방사표본관찰은 위점막 조직이 세로로 잘 절단된 부위를 택하여 점막근육판을 따라 점막길이 3.5mm의 위점막 조직에 분포하는 $^3H$-thymidine 표지세포의 수를 계수하였으며, 일반조직 관찰을 위해서는 hematoxylin-eosin (H-E)염색을 시행하였다. 전자현미경 관찰을 위해서는 떼어낸 위조직을 2.5% glutaraldehyde-1.5% paraformaldehyde 혼합액에 고정한 후, 1% osmium tetroxide 액에 다시 고정하였으며, 고정이 끝난 조직은 탈수과정을 거쳐 araldite 혼합액에 포매하였다. 광학현미경적 관찰에서 종양대조군과 BCG투여군은 위점막 조직에서 형태적으로 큰 변화를 볼 수 없었다. 전자현미경적 관찰에서 BCG투여군의 점액상피세포는 전체적인 모습이 정상대조군과 종양대조군의 소견과 유사하였으나 정상대조군과 종양대조군에 비해 수초구조와 뭇소포체(multivesicular body) 및 전자밀도가 높은 큰 미토콘드리아속과립이 자주 관찰되었다. 자기방사법적 관찰에서 정상대조군, 종양대조군, BCG투여군은 점막길이 3.5 mm 당 출현하는 표지세포수가 각각 380.2 (${\pm}31.35$), 426.1 (${\pm}28.43$) 및 301.8 (${\pm}34.63$)개이었으며, BCG투여군은 정상대조군과 종양대조군에 비하여 표지된 은입자의 수가 매우 적어서 표지과립이 겨우 구별될 정도의 세포가 많이 관찰되었다. 이상의 결과를 종합해보면 Ehrlich 종양세포를 이식한 동물에 BCG를 반복 투여하면 위점막 상피세포의 DNA합성을 효과적으로 억제하면서도 형태적인 변화가 매우 경미하였으며, 이러한 결과는 BCG가 항암치료 시 보조제로 사용할 수 있는 좋은 약제라고 생각된다.
This experiment was performed to evaluate the morphological responses of the gastric epithelial cells of the mouse, inoculated with Ehrlich carcinoma cells in the inguinal area, following administration of BCG. Healthy adult ICR mice weighing 25 gm each were divided into normal and experimental grou...
This experiment was performed to evaluate the morphological responses of the gastric epithelial cells of the mouse, inoculated with Ehrlich carcinoma cells in the inguinal area, following administration of BCG. Healthy adult ICR mice weighing 25 gm each were divided into normal and experimental groups (tumor control group and BCG-treated group). In the experimental groups, each mouse was inoculated with $1{\times}10^7$ Ehrlich carcinoma cells subcutaneously in the inguinal area. From next day after inoculations, 0.2 mL of saline or BCG (0.5 mL/25 g B.W.: $0.03{\times}10^8{\sim}0.32{\times}10^8$ CFU) were injected subcutaneously to the animals every other day, respectively. The day following the 7th injection of saline or BCG, each mouse was injected with a single dose of 0.7 ${\mu}Ci/g$ of methyl-$^3H$-thymidine (25 Ci/mmol, Amersham Lab., England) through tail vein. Seventy minutes after the thymidine injection, animals were sacrificed, and gastric tissues were taken and fixed in 10% neutral formalin. Deparaffinized sections were coated with autoradiographic emulsion EM-1 (Amersham Lab., England) in a dark room. The number of labeled epithelial cells in the gastric mucosae (mean number of labeled epithelial cells per 3.5 mm length of mucosa) were observed and calculated. And for electron microscopic observation, gastric tissues were prefixed with 2.5% glutaraldehyde-1.5% paraformaldehyde solution, followed by post-fixation with 1% osmium tetroxide solution. On the light microscopic study, gastric mucosae had no morphological changes following the injection of BCG. On the electron microscopic study, in the BCG-treated mice, myelin figures and multivesicular bodies within the gastric epithelial cells were observed more frequently than in those of the normal control ones. On the autoradiographic study, number of the labeled cells of normal control, tumor control and BCG-treated mice were 380.2 (${\pm}31.35$), 426.1 (${\pm}28.43$) and 301.8 (${\pm}34.63$), respectively. In the BCG-treated mice, poorly-labeled cells containing only a few silver grains of 3H-thymidine were observed more frequently as compared in those of the normal control and tumor control ones. From the above results, BCG may suppress the DNA synthesis of the gastric epithelial cells, but does not results severe fine structural defect on the gastric epithelial cells. These results suggest that BCG is expected as one of the effective supplemental anticancer drugs.
This experiment was performed to evaluate the morphological responses of the gastric epithelial cells of the mouse, inoculated with Ehrlich carcinoma cells in the inguinal area, following administration of BCG. Healthy adult ICR mice weighing 25 gm each were divided into normal and experimental groups (tumor control group and BCG-treated group). In the experimental groups, each mouse was inoculated with $1{\times}10^7$ Ehrlich carcinoma cells subcutaneously in the inguinal area. From next day after inoculations, 0.2 mL of saline or BCG (0.5 mL/25 g B.W.: $0.03{\times}10^8{\sim}0.32{\times}10^8$ CFU) were injected subcutaneously to the animals every other day, respectively. The day following the 7th injection of saline or BCG, each mouse was injected with a single dose of 0.7 ${\mu}Ci/g$ of methyl-$^3H$-thymidine (25 Ci/mmol, Amersham Lab., England) through tail vein. Seventy minutes after the thymidine injection, animals were sacrificed, and gastric tissues were taken and fixed in 10% neutral formalin. Deparaffinized sections were coated with autoradiographic emulsion EM-1 (Amersham Lab., England) in a dark room. The number of labeled epithelial cells in the gastric mucosae (mean number of labeled epithelial cells per 3.5 mm length of mucosa) were observed and calculated. And for electron microscopic observation, gastric tissues were prefixed with 2.5% glutaraldehyde-1.5% paraformaldehyde solution, followed by post-fixation with 1% osmium tetroxide solution. On the light microscopic study, gastric mucosae had no morphological changes following the injection of BCG. On the electron microscopic study, in the BCG-treated mice, myelin figures and multivesicular bodies within the gastric epithelial cells were observed more frequently than in those of the normal control ones. On the autoradiographic study, number of the labeled cells of normal control, tumor control and BCG-treated mice were 380.2 (${\pm}31.35$), 426.1 (${\pm}28.43$) and 301.8 (${\pm}34.63$), respectively. In the BCG-treated mice, poorly-labeled cells containing only a few silver grains of 3H-thymidine were observed more frequently as compared in those of the normal control and tumor control ones. From the above results, BCG may suppress the DNA synthesis of the gastric epithelial cells, but does not results severe fine structural defect on the gastric epithelial cells. These results suggest that BCG is expected as one of the effective supplemental anticancer drugs.
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문제 정의
이 실험에서도 점액상피세포는 있는 위치에 따라 다소 모습이 달라 점막표면이나 위오목의 위쪽부분에 위치하는 세포는 세포사이공간이 넓고 불규칙하였으나, 위오목의 아래쪽부분에 위치하는 세포들은 밀접하게 배열되어 있어 세포 사이공간이 거의 없고 세포질돌기들이 손가락을 낀 모양으로 배열되어 있었다. 그러므로 이 실험에서는 가급적 점막 내의 위치에 따른 세포형태의 차이를 줄이기 위해 벽세포가 관찰되는 위오목의 바닥쪽부위에 위치하는 점액상피세포들을 대상으로 관찰하였다. 생쥐 위점막의 표면점액세포는 원주형으로서 높이 20~40 μm, 폭 6 μm 정도이며 자유면에는 짧은 미세융모가 성글게 나 있고 그 표면은 당질층(glycocalyx)으로 덮여 있었으며, 세포의 가쪽에는 불규칙한 세포질 돌기가 짧게 형성되어 있었고 자유면 쪽 가까이에는 연접복합체가 잘 이루어져 있었다.
위점막을 이루는 상피세포들은 세대교체기간이 빠르기 때문에 점막 표면에 위치하는 세포들은 수명이 거의 다한 탈락 직전의 세포로 볼 수 있다. 그러므로 이 실험에서는 점막 내의 위치에 따른 세포형태의 차이를 없애기 위해 벽세포가 위치하는 위오목의 바닥부위에 위치하는 점액상피세포들을 대상으로 관찰하였다. 일반적으로 표면점액세포는 원주형으로서 높이가 20~40 μm이며 자유면에는 짧은 미세융모가 성글게 나 있고 그 표면은 당질층(glycocalyx)으로 덮여 있다.
, 1993)는 보고 등으로 보아 종양세포를 이식한 후 BCG만을 투여하였을 경우에도 위점막 점액상피세포의 기능적 및 형태학적 변화가 예상된다. 따라서 Ehrlich 종양세포를 샅부위에 이식한 후 고농도의 BCG를 피부밑조직에 반복 투여하였을 때 위점막 점액상피세포에 미치는 영향을 형태학적 변화뿐 아니라 DNA합성능을 비교 관찰하여 종양치료과정에 따른 위점막의 변화를 확인하고자 이 실험을 시행하였다.
제안 방법
BCG투여군은 종양세포이식 다음날부터 방광암 치료용으로 제조된 농축 건조된 BCG (0.6×108~6.4×108 CFU, 27 mg/vial, Connaught Lab., Canada)를 10 mL의 생리식염수에 용해시킨 다음, 일정량(0.5 mL/25 g B.W.: 0.03×108~0.32×108 CFU)을 하루건너 한 번씩 피부밑조직에 주사하였다.
포매된 조직은 1 μm 두께의 절편을 만든 후 toluidine blue로 염색하여 위점막이 잘 절단된 부위를 택하여 60~70 nm 두께의 얇은 절편을 만들었다. 각 절편은 uranyl acetate 액과 lead citrate 액으로 대조염색한 후, JEM 100CX-II 전자현미경으로 비교 관찰하였다.
실험동물로는 체중 25 g 내외의 ICR생쥐를 사용하였으며 이들을 정상대조군, 종양세포이식대조군(종양대조군) 및 종양세포이식후 BCG투여군(BCG투여군)으로 나누었다. 정상대조군 이외의 종양대조군과 BCG투여군의 동물들은 샅부위 피하에 각각 1×107의 Ehrlich 종양세포를 이식하였다.
자기방사법적 관찰을 위해서는 BCG를 마지막으로 주사한 다음날 3H-thymidine (methyl-3H-thymidine: specific activity 25 Ci/mmol, Amersham Lab., England) 0.7 μCi/gm를 꼬리에 정맥주사하고, 70분 후 도살하여 위조직을 떼어내어 10% formalin에 고정하였다.
점막상피세포의 DNA합성정도를 관찰하기 위하여 상피세포에 은입자가 표지된 세포의 수를 헤아렸다. 정상대조군을 포함한 실험군의 위점막 상피세포는 은입자들이 세포핵위에서 관찰되었으며, 표지세포들은 대부분 잘록부분과 목부분에서만 관찰되었고 표면점액세포로 이루어진 위오목에서는 거의 관찰되지 않았다.
이 실험에 사용된 동물들은 모두 희생시키기 전날 저녁부터 사료는 주지 않고 물만 공급하였으며, 다음날 오전 10~11시 사이에 희생시켰다. 종양대조군과 BCG투여군은 각각 7회씩 생리식염수 또는 BCG를 투여한 다음날 ether마취하에 앞배벽을 열어 위조직을 절취하였다. 자기방사법적 관찰을 위해서는 BCG를 마지막으로 주사한 다음날 3H-thymidine (methyl-3H-thymidine: specific activity 25 Ci/mmol, Amersham Lab.
32×108 CFU)을 하루건너 한 번씩 피부밑조직에 주사하였다. 종양대조군은 종양세포이식 후에 0.2 mL의 생리식염수를 하루건너 한 번씩 피부밑조직에 주사하였고 정상대조군은 종양세포를 이식하지 않은 동물을 사용하였으며 각 군당 5마리씩 사용하였다. 이 실험에 사용된 동물들은 모두 희생시키기 전날 저녁부터 사료는 주지 않고 물만 공급하였으며, 다음날 오전 10~11시 사이에 희생시켰다.
포매된 조직은 1 μm 두께의 절편을 만든 후 toluidine blue로 염색하여 위점막이 잘 절단된 부위를 택하여 60~70 nm 두께의 얇은 절편을 만들었다.
대상 데이터
정상대조군 위점막의 표면과 위오목(gastric pit)은 단층원주상피인 표면점액세포(surface mucous cell)로 구성되어 있었으며, 위몸통 부위의 점막은 거의 위샘(gastric gland)으로 채워져 있었고 위샘 사이에 소량의 고유판이 존재하였다. 위샘의 길이는 위오목에 비하여 현저히 길고, 위샘은 위오목에 열려 있었다.
데이터처리
* Difference between normal control and BCG-treated groups is significant at p⁄0.05 from the results of One-way ANOVA.
7 μCi/gm를 꼬리에 정맥주사하고, 70분 후 도살하여 위조직을 떼어내어 10% formalin에 고정하였다. 자기방사표본관찰은 위점막 조직이 세로로 잘 절단된 부위를 택하여 점막근육판을 따라 점막길이 3.5 mm의 위점막 조직에 분포하는 3H-thymidine 표지세포의 수를 계수하였으며, 통계분석은 SPSS (Ver 13.0)을 이용하여 일원배치분산분석(One-way ANOVA)을 시행하였고 일반조직 관찰을 위해서는 hematoxylin-eosin (H-E)염색을 시행하였다.
성능/효과
BCG투여군의 점액상피세포는 전체적인 모습이 종양대조군의 소견과 유사하였으나 종양대조군에 비해 용해소체와 수초구조가 더 자주 관찰되었으며, 특히 뭇소포체(multivesicular body)가 자주 관찰되었다. 또한 미토콘드리아 속에 전자밀도가 높은 과립모양의 구조가 정상대조군과 종양대조군에 비해 자주 관찰되었는데 세포에 따라서는 미토콘드리아 속의 과립의 크기가 미토콘드리아 지름의 절반이 넘을 정도로 큰 것도 관찰되었다(Figs.
, 1993)와는 달랐다고 추측된다. 그러나 이 실험에서 BCG투여부위와 떨어져 있는 위점막상피세포의 DNA합성지수가 유의하게 감소하였는데, 이와 같은 결과는 이 실험에서 사용한 양 정도의 BCG를 반복투여하면 위점막상피세포의 DNA합성능에는 영향을 주나 점막고유판에 분포하는 림프구나 호산성백혈구의 분포 등 광학현미경적구조에 영향을 미칠 정도는 아닌 것으로 추측된다.
BCG투여군의 점액상피세포는 전체적인 모습이 종양대조군의 소견과 유사하였으나 종양대조군에 비해 용해소체와 수초구조가 더 자주 관찰되었으며, 특히 뭇소포체(multivesicular body)가 자주 관찰되었다. 또한 미토콘드리아 속에 전자밀도가 높은 과립모양의 구조가 정상대조군과 종양대조군에 비해 자주 관찰되었는데 세포에 따라서는 미토콘드리아 속의 과립의 크기가 미토콘드리아 지름의 절반이 넘을 정도로 큰 것도 관찰되었다(Figs. 11, 12).
종양대조군의 점액상피세포는 그 모습이 정상대조군의 소견과 유사하였으나 골지복합체의 수조는 정상군의 것에 비해 다소 더 납작한 모습을 보이는 경우가 자주 관찰되었으며, 골지복합체의 자유면 쪽에는 전자밀도가 다소 다른 구형 또는 난원형의 분비과립들이 모여 있었다. 또한 정상대조군에 비해 세포질 또는 과립 속에서 수초구조가 자주 관찰되었다. 이웃하는 세포의 전자밀도가 달라 밝은 세포와 어두운 세포가 구별되었으며 미세융모속의 액틴미세섬유가 뚜렷이 구별되지 않는 세포들이 자주 관찰되었다(Figs.
세포의 미세구조 가운데 뭇소포체(multivesicular body)는 단위막으로 둘러싸인 액포상의 바탕질 속에 여러 개의 작은 소포들이 들어있는 독특한 형태로서 간세포, 태아흰쥐의 샘창자상피세포, 신경세포, 부고환관 상피세포, 융합영양막, 큰허파꽈리세포 등에서 종종 관찰된다. 뭇소포체는 기원, 운명 및 기능에 대해서는 아직 확실히 밝혀져 있지 않으나 그 바탕질에 산성포스파타제(acid phosphatase)와 같은 가수분해 효소들이 포함되어 있음이 확인되었다. 뭇소포체는 세포막에서 포음작용으로 생겨난 섭취소체(endosome)가 세포 속으로 이동하여 트랜스골지망에서 기원한 일차용해소체와 융합함으로 형성되고, 그 과정에 바탕질 속의 작은 소포들은 섭취소체 막의 합입에 의해 생긴 것으로 알려졌으므로 뭇소포체는 이차용해소체의 한 형태로 간주하고 있다.
생쥐 위점막의 표면점액세포는 원주형으로서 높이 20~40 μm, 폭 6 μm 정도이며 자유면에는 짧은 미세융모가 성글게 나 있고 그 표면은 당질층(glycocalyx)으로 덮여 있었으며, 세포의 가쪽에는 불규칙한 세포질 돌기가 짧게 형성되어 있었고 자유면 쪽 가까이에는 연접복합체가 잘 이루어져 있었다.
이 실험에서 BCG투여군의 경우 비교적 큰 뭇소포체가 정상대조군과 종양대조군에 비해 자주 관찰되었는데, 이와 같은 결과는 확인하기는 어려우나 뭇소포체가 세포막의 순환에 관여하고, 일부 세포에서는 생산된 분비과립을 자가포식함으로써 분비과정에도 관여한다는 주장(Ghadially, 1997; Chung, 2006)에 비추어 볼 때 BCG의 반복적 투여가 점액상피세포의 점액 분비기능 등에 다소 억제적으로 작용한 것으로 추측된다.
이 실험에서 BCG투여군의 경우 정상대조군과 종양대조군에 비해 큰 미토콘드리아속과립이 자주 관찰되었는데 이와 같은 결과는 큰 미토콘드리아속과립이 암세포 또는 변성 거대미토콘드리아에서 자주 관찰된다는 주장(Ghadially, 1997)에 비추어 볼 때 확인하기는 어려우나 BCG의 반복적 투여가 점액상피세포의 활성 등에 영향을 주어 지방성분의 큰 미토콘드리아속과립이 자주 출현한 것으로 추측된다.
수초구조(myelin figures)는 glutaraldehyde 고정을 오래한 표본이나 또는 지방성분이 용해소체와 결합할 때 형성되는데 노화세포와 질병상태의 세포에서 자주 관찰된다(Ghadially, 1997). 이 실험에서 정상대조군과 종양대조군에 비하여 BCG투여군에서 수초구조가 더 자주 많이 관찰된 것으로 보아 고정에 의한 영향보다는 세포 자체의 활성도와 관계가 있다고 생각된다. 즉 이물질(BCG)의 반복투여로 형성된 과민반응이 위점막 점액상피세포의 활성에 영향을 주었기 때문이라고 추측된다.
이상의 결과를 종합해보면 Ehrlich 종양세포를 이식한 동물에 BCG를 반복 투여하면 위점막 점액상피세포의 DNA합성을 유의하게 억제하면서도 형태적인 변화가 매우 경미하였으며, 이러한 결과는 BCG가 항암치료 시 보조제로 사용할 수 있는 좋은 약제라고 생각된다.
점막상피세포의 DNA합성정도를 관찰하기 위하여 상피세포에 은입자가 표지된 세포의 수를 헤아렸다. 정상대조군을 포함한 실험군의 위점막 상피세포는 은입자들이 세포핵위에서 관찰되었으며, 표지세포들은 대부분 잘록부분과 목부분에서만 관찰되었고 표면점액세포로 이루어진 위오목에서는 거의 관찰되지 않았다. 그러나 드물게 바닥부분에서도 표지세포들이 관찰되었는데 상피세포의 형태를 보이는 세포도 있었지만 대부분 비교적 가늘고 긴 세포들이 관찰되었다.
4). 종양대조군은 점막길이 3.5 mm 당 426.1개로 정상대조군에 비하여 112%가 관찰되어 통계적으로 유의하게 증가하였으며(Table 1), 은입자를 헤아리기 힘들 정도로 밀집되어 있는 세포가 많았으며 표지세포의 분포양상은 정상대조군과 유사하였다(Fig. 5). 한편 BCG투여군은 표지세포수가 점막길이 3.
즉 100 mg (9.6×108 CFU)의 BCG를 생쥐의 복강 내에 주사하였을 때 실험동물들이 5일 안에 모두 사망하였으나, 50 mg (4.8×108 CFU) 이하를 투여한 동물은 체중은 감소했으나 모두 생존하였으며, 주사 후 15일 정도 지나면 체중도 정상으로 회복되었다.
세포질에는 긴 난원형 미토콘드리아와 납작한 수조의 과립세포질세망, 소수의 용해소체, 미세섬유 및 약간의 리보소체가 널리 분포하며, 골지복합체는 핵상부에 위치하였다. 특히 자유면 쪽 세포질에는 미세융모 속의 액틴미세섬유들이 뚜렷이 관찰되었으며 미토콘드리아와 과립세포질세망과 같은 세포소기관들이 거의 분포하지 않고 미세섬유기 많은 종말그물(terminal web)부분이 뚜렷이 구별되었으며, 점액원과립(mucigen granule)은 이 부위에 많이 모여 있었다. 이 분비과립들은 구형, 난원형, 원반형 등 다양한 모습으로 단위막에 싸여 있으며 그 바탕질은 비교적 전자밀도가 높았다(Figs.
, 2005). 한편 이 실험에서 종양세포와 BCG를 샅부위에 투여한 경우 종양대조군은 DNA합성지수가 정상대조군에 비해 유의하게 증가하였으나 BCG 투여군은 DNA합성지수가 정상대조군에 비해 유의하게 감소하였다. 이와 같은 결과는 종양세포와 BCG를 위조직에 직접 이식하지 않고 샅부위에 이식하였으나, 종양세포의 이식으로 인한 자극으로 위점막 상피세포의 DNA합성능이 다소 활성화되나 BCG를 반복 투여하면 위점막 상피세포의 DNA합성능이 억제되었기 때문이라고 생각된다.
후속연구
, 1993)에 비추어 볼 때, 이 실험에서 위점막 점액상피세포에 용해소체와 수초구조가 골지복합체 주위와 과립주위에서 자주 관찰된 결과는 BCG를 반복 투여함으로 유발된 과민반응으로 위점막 점액상피 세포의 기능이 억제되었기 때문이 아닌가 추측된다. 그러나 이와 같은 결과가 과민반응에 의한 결과인지 또는 BCG 자체의 독성에 의한 것인지를 밝히기 위해서는 좀 더 자세한 연구가 필요하다고 생각된다.
이와 같은 결과는 종양세포와 BCG를 위조직에 직접 이식하지 않고 샅부위에 이식하였으나, 종양세포의 이식으로 인한 자극으로 위점막 상피세포의 DNA합성능이 다소 활성화되나 BCG를 반복 투여하면 위점막 상피세포의 DNA합성능이 억제되었기 때문이라고 생각된다. 그러나 이와 같은 결과가 위점막상피세포에만 한정하는 것인지 또는 다른 장기들에도 영향을 주는지에 대해서는 좀 더 광범위한 연구가 뒤따라야 된다고 생각된다.
질의응답
핵심어
질문
논문에서 추출한 답변
이 실험에서는 점막 내의 위치에 따른 세포형태의 차이를 없애기 위해 벽세포가 위치하는 위오목의 바닥부위에 위치하는 점액상피세포들을 대상으로 관찰한 이유는?
그러므로 점액상피세포는 있는 위치에 따라 다소 모습이 달라 점막표면이나 위오목의 위쪽부분에 위치하는 세포는 자유면 가까이에는 폐쇄띠(zonula occludens)와 부착띠(zonula adherens)로 이루어진 연접복합체(junctional complex)가 발달되어 있으나 부착반점(macula adherens, desmosome) 이하 부위는 이웃세포사이의 세포사이간극이 넓고 불규칙한 세포질돌기들이 돌출되어 있다. 그러나 위오목의 아래쪽부분에 위치하는 세포들은 서로 밀접하게 배열되어 있어 세포사이간극이 거의 없고 세포질돌기들이 손가락을 낀 모양으로 배열되어 있었다. 위점막을 이루는 상피세포들은 세대교체기간이 빠르기 때문에 점막 표면에 위치하는 세포들은 수명이 거의 다한 탈락 직전의 세포로 볼 수 있다. 그러므로 이 실험에서는 점막 내의 위치에 따른 세포형태의 차이를 없애기 위해 벽세포가 위치하는 위오목의 바닥부위에 위치하는 점액상피세포들을 대상으로 관찰하였다.
생쥐 위점막의 미성숙 표면점액세포는 어떻게 소멸하는가?
생쥐 위점막의 미성숙 표면점액세포는 미세과립을 포함한 Golgi 소포를 갖고 있으며 잘룩부분에서 위오목 쪽으로 이동함에 따라 전자밀도가 높은 점액과립을 포함하는 표면점액세포가 되며 점차 점막표면 쪽으로 이동한 후 속공간으로 탈락되어 사라진다(Karam & Leblond, 1995). 생쥐의 위오목을 이루는 표면점액세포에 대한 전자현미경적 및 자기방사법적 연구에서 전자밀도가 높은 점액과립은 세포표면 가까이에 세포소기관이 적은 부위에 밀집되어 있으며, 미분화표면점액세포는 점액과립의 양이 적고 세포질에 분산되어 있으나 점차로 분화됨에 따라 표면 쪽으로 이동하여 성숙한 표면점액세포가 된다.
BCG 접종을 하는 이유는?
BCG 접종이 사람과 실험동물의 일부 항원에 대한 allergy로서의 위험을 감소시킨다. BCG를 접종하였을 때 창자점막 내 상피내임프구(intraepithelial lymphocyte (IEL))가 증가하고 호산성백혈구의 침윤을 유도하여 고유판 내 mononuclear 감염세포가 증가하며 혈장 내 IgE 농도를 감소시킨다(Rytkonen et al.
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