어수리 어린 잎으로부터 Peroxynitrite 소거활성을 나타내는 플라보노이드 성분의 분리 및 함량분석 Isolation and Quantitative Analysis of Flavonoids with Peroxynitritescavenging Effect from the Young Leaves of Heracleum moellendorffii원문보기
식용으로 사용되는 산채의 일종인 어수리의 지상부로부터 peroxynitrite 소거활성을 나타내는 성분을 분리한 결과 플라보노이드 성분인 hyperoside와 astragalin이 분리되었다. 특히, 높은 활성을 보였던 hyperoside는 이 식물재료 중 함량도 높아 어수리 잎은 peroxynitrite 과잉생산시 유발될 수 있는 당뇨병, 비만, 고지혈증, 심장질환 등의 예방과 치료에 유익한 식품이라 할 수 있을 것이다.
식용으로 사용되는 산채의 일종인 어수리의 지상부로부터 peroxynitrite 소거활성을 나타내는 성분을 분리한 결과 플라보노이드 성분인 hyperoside와 astragalin이 분리되었다. 특히, 높은 활성을 보였던 hyperoside는 이 식물재료 중 함량도 높아 어수리 잎은 peroxynitrite 과잉생산시 유발될 수 있는 당뇨병, 비만, 고지혈증, 심장질환 등의 예방과 치료에 유익한 식품이라 할 수 있을 것이다.
Naturally occurring substances which strongly scavenge peroxynitrite(ONOO-) are evaluated to be beneficial for cardiovascular, diabetic, hypercholesterolemic and obese disease. To search for bioactive substances with peroxynitritescavenging activity from the young leaves of Heracleum moellendorffii(...
Naturally occurring substances which strongly scavenge peroxynitrite(ONOO-) are evaluated to be beneficial for cardiovascular, diabetic, hypercholesterolemic and obese disease. To search for bioactive substances with peroxynitritescavenging activity from the young leaves of Heracleum moellendorffii(Umbelliferae) used for a mountainous vegetable, the experiment on peroxynitrite-scavenging assay, phytochemical isolation and HPLC analysis were undertaken. Activity-guided fractionation led to the separation of astragalin and hyperoside which were identified by physicochemical and spectroscopic data. The $IC_{50}$ values of astragalin and hyperoside were shown as $5.80{\pm}0.62$ and $0.560{\pm}0.26\;{\mu}M$, respectively, in the assay. The HPLC analysis led to the quantitative determination of astragalin and hyperoside by $30.0{\pm}0.01$ and $17.0{\pm}0.02\;mg/g$ dried weight, respectively.
Naturally occurring substances which strongly scavenge peroxynitrite(ONOO-) are evaluated to be beneficial for cardiovascular, diabetic, hypercholesterolemic and obese disease. To search for bioactive substances with peroxynitritescavenging activity from the young leaves of Heracleum moellendorffii(Umbelliferae) used for a mountainous vegetable, the experiment on peroxynitrite-scavenging assay, phytochemical isolation and HPLC analysis were undertaken. Activity-guided fractionation led to the separation of astragalin and hyperoside which were identified by physicochemical and spectroscopic data. The $IC_{50}$ values of astragalin and hyperoside were shown as $5.80{\pm}0.62$ and $0.560{\pm}0.26\;{\mu}M$, respectively, in the assay. The HPLC analysis led to the quantitative determination of astragalin and hyperoside by $30.0{\pm}0.01$ and $17.0{\pm}0.02\;mg/g$ dried weight, respectively.
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문제 정의
매우 강한 활성을 보였던 hyperoside 관련한 생리활성 보고를 고찰하였다. Hypericum perforatum(St.
제안 방법
0.3N NaOH 용액에 10 μM peroxynitrite의 추가 여하에 따른 처리 후 최종의 형광 강도를 측정하였다.
BuOH 분획물 8.20 g으로부터 화합물을 분리하기 위하여 silica gel column chromatography로 수행하였다. Silica gel 772 g을 이용하여 column size 55 mm × 32 cm를 만든 후 CHCl3-MeOH-H2O(7:3:1, 하층)의 전개용매를 이용하여 용출시키고 60 ml씩 분취하였다.
, Winooski, VT, USA)를 이용하여 각각 480 nm와 530 nm의 excitation과 emission에서 측정 하였다. Peroxynitrite 소거활성은 DHR 123 산화의 검출을 통하여 최종 형광강도 값에서 바탕 형광(background fluorescence) 값을 빼서 산출하였다. L-Penicillamine은 양성 대조약물로 사용하였다.
3N NaOH 용액에 10 μM peroxynitrite의 추가 여하에 따른 처리 후 최종의 형광 강도를 측정하였다. 산화된 DHR 123의 형광강도는 microplate fluorescence reader FL 500(Bio-Tek Instruments Inc., Winooski, VT, USA)를 이용하여 각각 480 nm와 530 nm의 excitation과 emission에서 측정 하였다. Peroxynitrite 소거활성은 DHR 123 산화의 검출을 통하여 최종 형광강도 값에서 바탕 형광(background fluorescence) 값을 빼서 산출하였다.
어수리 잎 382 g을 9 L의 메탄올을 사용하여 환류 하에 3회 반복하여 추출하였다. 추출액을 여과하고 진공농축기를 이용하여 감압 하에 농축하였다.
효력이 높은 화합물이라 할지라도 그 화합물의 함량이 높아야 식물 섭취시 그 기능성을 나타낼 것이므로 함량분 석을 위하여 HPLC 분석을 실시하였다. HPLC 분석을 위해 사용한 UV 검출기의 파장은 364 nm이었다.
대상 데이터
Perxoynitrite 소거효과 실험에 사용된 시약인 dihydrorhodamine 123(DHR 123)과 peroxynitrite는 각각 Molecular Probes(Eugene, OR, USA)와 Cayman Chemical Co.(Ann Arbor, MI, USA)로부터 구입한 것을 사용하였다. Column chromatography 분리를 위한 정지 상으로 독일 Merck사의 silica gel(Art No.
Column chromatography 분리를 위한 정지 상으로 독일 Merck사의 silica gel(Art No. 7729, Merck, Germany, Φ5 cm × 40 cm)을 사용하였다.
HPLC 분석에 사용한 컬럼은 Shiseido(Chouoku, Tokyo, Japan)사의 Capsel Pak C18 column(5 μm, 250 mm × 4.6 mm I.D.)이었다.
Peroxynitrite 소거활성은 DHR 123 산화의 검출을 통하여 최종 형광강도 값에서 바탕 형광(background fluorescence) 값을 빼서 산출하였다. L-Penicillamine은 양성 대조약물로 사용하였다. 이 활성실험의 데이터를 평균 ± SEM으로서 추출물과 표준 화합물의 결과를 Table 1에 나타내었다.
강원도 평창군 농촌진흥청 고령지농업연구센터에서 재배 중인 어수리의 어린 잎을 5월 중 채집한 것을 농촌진흥청 국립원예특작과학원의 김원배 박사로부터 제공받아 실험에 사용하였다. 이 식물을 그늘에서 충분히 건조하고 세절하여 추출을 위한 식물재료로 사용하였다.
성분 분석에 사용한 HPLC system은 Prostar 210 solvent delivery module, Prostar 325 UV-Vis detector와 20 μ L sample loop(Rheodyne, Rohnert Park, CA, USA)로 구성된 Varian사 제품(Walnut Creek, CA, USA)을 사용 하였다.
식물 추출물은 10% DMSO(f.c. 5 μg/mL)에 녹여 사용하였다.
성능/효과
998 이상이었다. 각각의 식물의 건물당 함량으로 hyperoside는 17.0 mg/g, astragalin은 30.0 mg/g의 함량수준을 보여 어수리 잎 중 플라보노이드 함량은 상당히 높은 것으로 나타났다. 또, 메탄올 추출물중 함유량(%)은 astragalin이 15.
0 mg/g의 함량수준을 보여 어수리 잎 중 플라보노이드 함량은 상당히 높은 것으로 나타났다. 또, 메탄올 추출물중 함유량(%)은 astragalin이 15.5%, hyperoside가 9.80% 로 각각 나타나 역시 메탄올 추출물 중에도 그 함유량이 높았다.
메탄올 추출물로부터 분획하여 얻은 BuOH 분획은 2 μg/ml 농도에서 평균 77.3%의 억제 효과를 나타내었다.
어수리 잎으로부터 메탄올 추출물을 제조하여 peroxynitrite 소거효과를 실험하였을 때 2 μg/ml에서 평균 41.9%의 소거효과를 나타내었다.
질의응답
핵심어
질문
논문에서 추출한 답변
과잉생성된 peroxynitrite는 체내에 어떤 영향을 끼치는가?
, 2002). 그러나 과잉생성된 peroxynitrite는 지질과 단백질에 대한 과산화및 세포독성을 일으킬 수 있으며(Virlag et al., 2003) 나아가 고콜레스테롤증, 동맥경화, 당뇨병, 비만 등 질환을 일으킬 수 있다(Korda et al., 2008; Patcher et al.
Peroxynitrite는 어떤 잔기를 산화시켜 단백질을 변형시키는가?
, 2001). Peroxynitrite 는 또한 단밸질 중 메티오닌, 시스테인, 트립토판, 티로신 잔기에 대한 산화를 일으켜 단백질을 변형시킨다고 알려져 있다(Virag et al., 2003).
어수리 열매의 외형적 특징은?
중심부의 꽃은 꽃잎 5개, 같은 모양이나, 주변 부의 것은 꽃잎의 크기나 모양이 다르다. 열매는 편평하고 넒은 난형, 길이 7-8 mm이다. 염색체 수는 2n=22이다(Ko et al.
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