넙치 병원성 세균에 대한 항균제 내성율과 다제내성을 조사하고자 연구를 수행하였다. 우리나라의 양식 넙치 (Paralichthys olivaceus)에서 161균주가 분리되었고 분리균주에는 Edwardsiella tarda (n=32), Vibrio ichthyoenteri (n=37), Vibrio spp. (n=54), Streptococcus parauberis (n=28) 그리고 Streptococcus spp. (n=10)가 포함되었다. E. tarda 분리균주는 tetracycline (84.4%)과 oxolinic acid (71.9%)에 높은 내성율을 나타내었고 V. ichthyoenteri와 Vibrio spp.는 ampicillin (94.6%, 81.5%)과 tetracycline (56.8%, 42.6%) 순서로 높은 내성율을 나타내었다. S. parauberis 분리균주는 ampicillin (57.1%), tetracycline (57.1%), erythromycin (35.7%) 순서로 높은 내성율을 보였다. E. tarda의 84.4%, V. ichthyoenteri의 73.0%, Vibrio spp.의 57.4%, S. parauberis의 42.8% 그리고 Streptococcus spp.의 70.0%가 2종류 이상의 항균제에 다제내성을 나타내었다.
넙치 병원성 세균에 대한 항균제 내성율과 다제내성을 조사하고자 연구를 수행하였다. 우리나라의 양식 넙치 (Paralichthys olivaceus)에서 161균주가 분리되었고 분리균주에는 Edwardsiella tarda (n=32), Vibrio ichthyoenteri (n=37), Vibrio spp. (n=54), Streptococcus parauberis (n=28) 그리고 Streptococcus spp. (n=10)가 포함되었다. E. tarda 분리균주는 tetracycline (84.4%)과 oxolinic acid (71.9%)에 높은 내성율을 나타내었고 V. ichthyoenteri와 Vibrio spp.는 ampicillin (94.6%, 81.5%)과 tetracycline (56.8%, 42.6%) 순서로 높은 내성율을 나타내었다. S. parauberis 분리균주는 ampicillin (57.1%), tetracycline (57.1%), erythromycin (35.7%) 순서로 높은 내성율을 보였다. E. tarda의 84.4%, V. ichthyoenteri의 73.0%, Vibrio spp.의 57.4%, S. parauberis의 42.8% 그리고 Streptococcus spp.의 70.0%가 2종류 이상의 항균제에 다제내성을 나타내었다.
In this study, we carried out research on the level of single and multi-drug resistance of bacteria isolated from cultured flounder Paralichthys olivaceus. One hundred sixty one bacteria were isolated from cultured olive flounder Paralichthys olivaceus in Korea and the isolates consisted of Edwardsi...
In this study, we carried out research on the level of single and multi-drug resistance of bacteria isolated from cultured flounder Paralichthys olivaceus. One hundred sixty one bacteria were isolated from cultured olive flounder Paralichthys olivaceus in Korea and the isolates consisted of Edwardsiella tarda (n=32), Vibrio ichthyoenteri (n=37), Vibrio spp. (n=54), Streptococcus parauberis (n=28) and Streptococcus spp. (n=10). These E. tarda isolates were highly resistant in the order of tetracycline (84.4%) and oxolinic acid (71.9%). V. ichthyoenteri and Vibrio spp. showed resistance ampicillin (94.6% and 81.5%) and tetracycline (56.8% and 42.6%). S. parauberis isolates were resistant ampicillin (57.1%), tetracycline (57.1%) and erythromycin (35.7%). Of the isolates, 84.4% of E. tarda, 73.0% of V. ichthyoenteri, 57.4% of Vibrio spp., 42.8% of S. parauberis and 70.0% of Streptococcus spp. isolates exhibited multi-drug resistance against more than two antibiotics.
In this study, we carried out research on the level of single and multi-drug resistance of bacteria isolated from cultured flounder Paralichthys olivaceus. One hundred sixty one bacteria were isolated from cultured olive flounder Paralichthys olivaceus in Korea and the isolates consisted of Edwardsiella tarda (n=32), Vibrio ichthyoenteri (n=37), Vibrio spp. (n=54), Streptococcus parauberis (n=28) and Streptococcus spp. (n=10). These E. tarda isolates were highly resistant in the order of tetracycline (84.4%) and oxolinic acid (71.9%). V. ichthyoenteri and Vibrio spp. showed resistance ampicillin (94.6% and 81.5%) and tetracycline (56.8% and 42.6%). S. parauberis isolates were resistant ampicillin (57.1%), tetracycline (57.1%) and erythromycin (35.7%). Of the isolates, 84.4% of E. tarda, 73.0% of V. ichthyoenteri, 57.4% of Vibrio spp., 42.8% of S. parauberis and 70.0% of Streptococcus spp. isolates exhibited multi-drug resistance against more than two antibiotics.
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문제 정의
넙치 병원성 세균에 대한 항균제 내성율과 다제내성을 조사하고자 연구를 수행하였다. 우리나라의 양식 넙치 (Paralichthys olivaceus)에서 161균주가 분리되었고 분리균주에는 Edwardsiella tarda (n=32), Vibrio ichthyoenteri (n=37), Vibrio spp.
, 2009). 본 연구에서는 2004년과 2005년에 국내에서 양식된 넙치로부터 분리된 세균에 대해 항균제 내성 검사를 실시하고 그 결과를 국내외 연구결과와 비교하고자 하였다.
제안 방법
, 1966)을 변형하여 검사하였다. 1% NaCl이 첨가된 brain heart infusion agar (BHIA)(BD, USA)에서 순수 배양된 세균을 멸균 생리식염수 (0.85% NaCl)에 0.5 Macfarland 농도로 현탁한 후 100 ㎕ 를 1% NaCl이 첨가된 muller Hinton Agar (BD, USA)에 도말하고 그 위에 항균제 디스크를 접종하여 25℃에서 18시간 동안 배양하였다. 배양 후 나타난 발육저지대의 지름을 측정하여 NCCLS (national committee for clinical laboratory standards)의 기준으로 내성 (resistant), 중간 내성 (intermediate resistant), 감수성 (susceptible)로 구분하여 분석하였으며 표준균주는 Escherichia coli ATCC 25922를 사용하였다.
항균제 감수성은 Kirby-Bauer disc diffusion 법 (Bauer et al., 1966)을 변형하여 검사하였다. 1% NaCl이 첨가된 brain heart infusion agar (BHIA)(BD, USA)에서 순수 배양된 세균을 멸균 생리식염수 (0.
대상 데이터
항균제 disc는 Becton Dickinson (BD, USA)에서 구입하여 사용하였다. 그람음성 세균의 항균제 감수성 시험에 사용된 항균제 종류는 ampicillin (AM, 10 ㎍/disc), ciprofloxacin (CIP, 5 ㎍/disc), doxycycline (D, 30 ㎍/disc), oxolinic acid(OA, 2 ㎍/disc), tetracycline (Te, 30 ㎍/disc)의 5종류이고, 그람양성 세균에 대하여는 AM (10 ㎍/disc), CIP (5 ㎍/disc), D (30 ㎍/disc), erythromycin (E, 15 ㎍/disc), Te (30 ㎍/disc)의 5종류를 사용하였다.
이론/모형
5 Macfarland 농도로 현탁한 후 100 ㎕ 를 1% NaCl이 첨가된 muller Hinton Agar (BD, USA)에 도말하고 그 위에 항균제 디스크를 접종하여 25℃에서 18시간 동안 배양하였다. 배양 후 나타난 발육저지대의 지름을 측정하여 NCCLS (national committee for clinical laboratory standards)의 기준으로 내성 (resistant), 중간 내성 (intermediate resistant), 감수성 (susceptible)로 구분하여 분석하였으며 표준균주는 Escherichia coli ATCC 25922를 사용하였다.
분리된 E. tarda는 API 20E kit (bioMerieux sa., France)를 사용하여 동정 하였고, Vibrio 속 세균은 생화학적 성상 조사 후 Bergey’s manual에 따라 동정되었으며, 연쇄구균은 PCR 법 (Zlotkin et al., 1998; Mata et al., 2004)으로 동정하였다.
성능/효과
5종류의 항균제에 대한 E. tarda의 내성율은 Te 84.4%, OA 71.9%, D 68.8%로 3종류 항균제에 대해 50% 이상의 내성율을 보였으며 AM 43.8%그리고 CIP 12.5%로 나타났다 (Table 2). 검사된 32균주 중 1균주 (3.
S. parauberis 검사균주 28균주의 항균제 내성율은 AM (57.1%), Te (46.4%), E (35.7%), D (21.4%), CIP (14.3%)의 순서로 높게 나타났고 (Table 3) 5균주 (17.9%)는 조사된 5종류의 항균제에 대해 내성을 갖지 않았고 12균주 (42.9%)는 2종류 이상의 항균제에 내성을 갖고 있었고 1균주 (3.6%)는 5종류의 항균제에 모두 내성을 갖고 있었다 (Table 4).
6%) 순서로 높은 내성율을 나타내었다. S. parauberis 분리균주는 ampicillin (57.1%), tetracycline (57.1%), erythromycin (35.7%) 순서로 높은 내성 율을 보였다. E.
V. ichthyoenteri의 항균제 감수성 시험 결과는 AM (94.6%), Te (56.8%), D (45.9%), OA (48.6%) 그리고 CIP (32.4%)의 순서로 높은 내성율을 나타내고 있었다 (Table 2). 검사된 37균주 중 27균주 (73.
0% 순서로 높았다 (Table 3). 검사된 10균주 중 7균주 (70.0%)는 2종류 이상의 항균제에 내성을 갖고 있었고 4균주 (40.0%)는 5종류 항균제에 모두 내성을 갖고 있었다 (Table 4).
5%로 나타났다 (Table 2). 검사된 32균주 중 1균주 (3.1%) 는 5종류의 항균제에 감수성을 나타내었으며 27균주 (84.4%)는 2종류 이상의 항균제에 내성을 갖고 있었고 2균주 (6.3%)는 5종류 항균제에 모두 내성을 나타내었다 (Table 4). 2005년의 AM (75.
4%)의 순서로 높은 내성율을 나타내고 있었다 (Table 2). 검사된 37균주 중 27균주 (73.0%)는 2종류 이상의 항균제에 내성을 갖고 있었고 6균주 (16.2%)는 5종류 항균제에 모두 내성을 나타내었다 (Table 4). 2005년의 AM (88.
8%)의 순서로 높은 내성율을 나타내고 있었다 (Table 2). 검사된 54균주 중 31균주 (57.4%) 는 2종류 이상의 항균제에 내성을 갖고 있었고 5균주 (9.3%)는 5종류 항균제에 모두 내성을 갖고 있었다 (Table 4). 2005년의 AM (78.
세균은 2004년 6월부터 8월, 2005년 6월부터 8월 사이에 넙치의 신장과 비장에서 분리되었다. 분리지역은 동해안 (울산, 포항, 영덕, 울진), 남해안 (완도, 해남) 그리고 제주도며 항균제 감수성 경향을 분석한 세균은 총 161균주로, 그람 음성 세균이 123균주, 그람양성 세균이 38균주 였다 (Table 1).
parauberis 이외의 Streptococcus spp.의 항균제 내성율은 AM (70%), Te, D, E에 대하여 각각 60.0%, CIP의 50.0% 순서로 높았다 (Table 3). 검사된 10균주 중 7균주 (70.
이번 연구에서 넙치에서 분리된 E. tarda는 Te, OA, D에 68.8-84.4%의 내성율을 갖고 있어 1999-2001년에 경남 남부의 해산어류에서 분리된 에드와드균이 Te, OA와 D에 90-100%의 내성율을 갖는다고 보고 (Heo, et al., 2002)에 비해 낮았으나 유럽, 미국, 일본 등에서 수집된 E. tarda를 대상으로 조사된 자연 상태의 항균제 내성율은 Te (7.1%), D (2.4%), CIP (0%)이었다고 하는 보고 (Stock and Wiedemann, 2001)에 비해 Te은 11.9배, Doxycycline은 28.7배 이상 높았고 자연상태의 E. tarda와 달리 CIP에 내성을 갖는 세균도 발견되었다. E.
parahaemolyticus의 대부분은 β-lactamase 생성에 의해 β-lactam계 항균제에 내성을 갖는다고 하였는데 이번 연구에서 나타난 비브리오균의 AM 내성도 β-lactamase 생성능과 관련이 있을 것으로 추측된다. 이번 연구에서 비브리오균이 OA에 37-48.6%, Te에 42.6-56.8%, D에 37-45.9%의 내성율을 나타내어 남해안에서 분리된 V. parahaemolyticus가 OA에 26.8%, D, Te와 CIP에 3.6-6.7%의 내성율을 나타내었고 V. alginolyticus는 D와 Te에 11.7%, CIP에 13.3%의 내성율을 나타내었다는 보고 (Son et al., 2005)에 비해 내성율이 높았다. 이것은 Son et al.
후속연구
이번 연구에서 넙치에서 분리된 주요 어병세균은 항균제에 높은 내성율과 다재 내성이 관찰되었으며 조사된 세균의 plasmid, 내성 유전자와 연관성에 관한 조사는 이루어지지 않았기 때문에 추가적인 연구가 필요한 부분이라 하겠다.
참고문헌 (21)
Aoki, T. and Kitao, T.: Drug resistant and transferble R plamid in Edwardsiella tarda in fish culture ponds. Fish. Pathol., 15:277-281, 1981.
Akinobowale, O.L., Peng, H. and Barton, M.D.:Antimicrobial resistance in bacteria isolated from aquaculture sources in Australia. J. Applied Microbiology, 100:1103-1113, 2006.
Bauer, A.W., Kirby, W.M.M., Sherris, J.C. and Turck, M.: Antibiotic susceptibility testing by a standardized single disk method. Amer. J. Clin. Pathol., 45:493-496, 1966.
Choi, M.S., Choi. S.H., Park, K.H., Jang, S.I., Yoon, C.Y., Cho, J.G. and Song, H.J.: Survey of drug resistance in Edwardsiella tarda isolated from diseased eels (Anguilla japonica). J. Fish Pathol., 9(2):195-201, 1996.
Edward, J. N.: Fish disease. Diagnosis and treatment. Iowa state university press, p.367, 2000.
Ferrini, A.M., Mannoni, V., Suffredini, E., Cozzi, L. and Croci, L.: Evaluation of antibacterial resistance in Vibrio strains isolated from imported seafood and Italian aquaculture settings. Food Anal. Methods, 1:164-170, 2008.
Heo, J.H., Jung, M.H., Cho, M.H., Kim, G.H., Lee, K.C., Kim, J.H. and Jung, T.S.: The study on fish diseases with reference to bacterial susceptibility to antibiotics in the southern area of Kyeognam. J. Vet. Clin., 19(1):19-22, 2002.
Kim, J.H., Lee, C.H. and Kim E.H.: Transferable R plasmid of streptococci isolated from diseased olive flounder (Paralichthys olivaceus) in Jeju. J. Fish Pathol., 19(3):267-276, 2006.
Lee, H.W., Lim, S.K. and Kim, M.N.: Characteristics of ampicillin-resistant Vibrio spp. isolated from a west coastal area of Korean Peninsula. J. Kor. Fish. Soc., 42(1):20-25, 2009.
Mata, A.I., Gibella, A., Casamayor, A., Blanco, M., Dominguez, L. and Fernandez-Garayzabal, J.F.: Multiplex PCR assay for detection of bacterial pathogens associated with warm water Streptococcosis in fish. Appl. Environ. Microbiol., 70:3183-3187, 2004.
Ottaviani, D., Bacchiocchi, I., Masini, L., Leoni, F., Carraturo, A., Giammarioli, M. and Sbaraglia, G.: Antimicrobial susceptibility of potentially pathogenic halophilic vibrios isolated from seafood. International J. Antimicrobial agents, 18:135-140, 2001.
Park, Y.K., Nho, S.W., Park, S.B., Jang, H.B., Cha, I.S., Ha, M.A., Kim, Y.R., Dalvi, R.S., Kang, B.J. and Jung, T.S.: Antibiotic susceptibility and resistance of Streptococcus iniae and Streptococcus parauberis isolated from olive flounder (Paralichthys olivaceus). Veterinary Microbiology, 136:76-81, 2009.
Son, K.T., Oh, E.G., Lee, T.S., Lee, H.J., Kim, P.H. and Kim, J.H.: Antimicrobial susceptibility of Vibrio parahaemolyticus and Vibrio alginolyticus from fish farms on the Southern Coast of Korea. J. Kor. Fish Soc., 38(6):365-371, 2005.
Stock, I. and Wiedemann, B.: Natural antibiotic susceptibilities of Edwardsiella tarda, E. ictaluri, and E. hoshinae. Antimicrobial agents and chemotherapy, 45(8):2245-2258, 2001.
Treves-Brown, K.M.: Applied fish pharmacology. Kluwer Academic publishers, p.309, 2000.
Zanetti, S., Spanu, T., Deriu, A., Romano, L., Sechi, L.A. and Fadda, G.: In vitro susceptibility of Vibrio spp. isolated from the environment. International J. Antimicrobial agents, 17:407-409, 2001.
Zlotkin, A., Hershko, H. and Eldar, A.: Possible transmission of Streptococcus iniae from wild fish to cultured marine fish. Appl. Environ. Microbiol., 64:4065-4067, 1998.
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