[논문]Monascus pilosus 균사체 및 배양여액의 항산화 및 항균활성

김재원; 이상일; 김성환; 이예경; 김순동

[국내논문] Monascus pilosus 균사체 및 배양여액의 항산화 및 항균활성
Antioxidative and Antimicrobial Activities of Monascus pilosus(Corn Silage Mold) Mycelial Extract and Its Culture Filtrate 원문보기

한국식품저장유통학회지 = Korean journal of food preservation, v.17 no.5, 2010년, pp.741 - 751

김재원 (대구가톨릭대학교 외식식품산업학부 식품가공학) , 이상일 (계명문화대학교 식품영양조리학부) , 김성환 (경북보건환경연구원) , 이예경 (대구가톨릭대학교 외식식품산업학부 식품가공학) , 김순동 (대구가톨릭대학교 외식식품산업학부 식품가공학)

초록
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M. pilosus를 액침배양하여 얻은 균사체의 ethanol 추출물(MEM)과 그 배양여액(CFM)의 monacolin K 및 citrinin 함량과 항산화 및 항균활성을 조사하였다. MEM과 CFM 동결건조 분말의 수율은 4.02% 및 3.35% 이었다. 색소함량($OD_{500}$)은 MEM (0.79)이 CFM (0.63)보다 25%가 높았으나 시판홍국미 에탄올추출물(EERB) 0.87 보다는 낮았으며 L*값, a*값, b*값 및 hue angle의 결과와 일치하였다. Total monacolin K의 함량은 MEM (24.91 mg%)이 CFM (1.27mg%) 및 EERB (15.03 mg%)에 비하여 높았으나 활성형 monacolin K의 함량은 EERB (5.48 mg%), MEM (3.35 mg%), CFM (0.40 mg%)으로 EERB가 높았다. Citrinin은 모든 시료에서 검출되지 않았다. Total polyphenol 함량은 MEM (4.68%, w/w), CFM (4.29%, w/w), EERB (3.70%, w/w)로 MEM과 CFM에서 높았다. 그러나 total flavonoid 함량은 EERB(4.46%, w/w), MEM(0.64%, w/w), CFM (0.66%, w/w)으로 EERB에서 높았다. 총 항산화능은 CFM이 3.51%(w/w)로 MEM (2.74%, w/w) 및 EERB (1.69%, w/w)보다 높았다. 1%에서의 전자공여능은 MEM (72.25%), CFM (86.20%), BHT (72.25%), EERB (44.82%)로 MEM과 CFM이 BHT보다 높거나 유사하였으며, 환원력도 비슷한 결과를 나타내었다. SOD 유사활성은 MEM (39.85%) > BHT (37.68%) > EERB (26.70%) > CFM (21.35%)순이었으며 아질산염소거능은 CFM (79.42%) > EERB (74.37%) > MEM (62.78%) > BHT (48.46%) 이었다. TBARS(%)는 MEM이 BHT보다 다소 낮았으나 CFM과 EERB보다 높았다. B. brevis와E. coli에 대한 항균성은 CFM이 MEM보다 높았으며 B. subtilis, L. monocytogenes, S. aureus, S. epidermidis, S. enteritidis에 대한 항균성은 MEM이 CFM보다 높았으나 EERB 및 BHT 경우보다는 낮았다.

Abstract ▼ AI-Helper

We evaluated the nutritional value of a Monascus pilosus mycelial ethanolic extract (MEM) and culture filtrate (CFM) by determining the contents of monacolin K and citrinin, and by measuring antioxidant and antimicrobial activities. The yields of freeze-dried MEM and CFM powder were 4.02% and 3.35% of wet weight, respectively. Pigment content ($OD_{500}$ value) of MEM (0.79) and CFM (0.63) were lower than those of commercial rice beni-koji ethanolic extracts (EERB) (0.87), but were in good agreement with the L*, a*, and b* values and the hue angles of the products. The total monacolin K content of MEM (24.91 mg%) was higher than those of CFM (1.27 mg%) and EERB (14.65 mg%). However, the active monacolin K content of EERB (5.48 mg%) was higher than those of MEM (3.35 mg%) and CFM (0.4 mg%). Citrinin was not detected in any sample. The total polyphenol content of MEM (4.68%, w/w) was similar to that of CFM (4.29%, w/w), thus 13.75.20.94% higher than that of EERB. The total flavonoid content of EERB was 6.8.7.0-fold higher than those of MEM (0.64%, w/w) and CFM (0.66%, w/w). The total antioxidant capacity of CFM (3.51%, w/w) was 1.62.2.08-fold higher than those of MEM (2.74%, w/w) and EERB (1.69%, w/w). The electron-donating capacities of 1% (w/v) solutions of CFM, MEM, BHT, and EERB were 86.20%, 77.25%, 77.25%, and 44.82%, respectively, and the corresponding reducing powers ($OD_{700}$ values) were 2.1, 2.4, 1.1, and 1.6, respectively. SOD(superoxide dismutase)-like activities were in the order MEM (39.85%) > BHT (37.68%) > EERB (26.70%) > CFM (21.5%). Although the TBARS (% value) of MEM was a little lower than that of BHT, it was higher than those of CFM and EERB. The antibacterial activities of CFM acting on Bacillus brevis and Escherichia coli were somewhat higher than those of MEM, whereas the activities of MEM on Bacillus subtilis, Listeria monocytogenes, Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis, and Salmonella enteritidis were higher than those of CFM. However, the antibacterial activities of MEM and CFM were less than those of EERB and BHT. In conclusion, although further studies are needed, we offer experimental evidence that the by-products of M. pilosus MEM and CFM contain significant antioxidant and antimicrobial activities that may be useful in the development of healthy foods.

주제어

AI 본문요약
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문제 정의

그러나 배양액이나 이를 번식시킨 홍국에 관한 연구는 다수가 보고되어 있으나 균사체가 가지는 특성이나 균사체를 완전히 제거시킨 배양여액을 중심으로 한 연구는 미흡하다. 본 연구에서는 M. pilosus를 액침배양하여 얻은 균사체의 ethanol 추출물과 그 배양여액의 monacolin K 및 citrinin 함량을 조사하는 한편 항산화 및 항균활성을 조사함으로서 이의 활용성을 검토 하였다.

제안 방법

M. pilosus를 액침배양하여 얻은 균사체의 ethanol 추출물(MEM)과 그 배양여액(CFM)의 monacolin K 및 citrinin 함량과 항산화 및 항균활성을 조사하였다. MEM과 CFM 동결건조 분말의 수율은 4.
2% BHT (dibutylhydroxytoluene) 50 μL을 가하여 반응을 정지시켰다. 다음에 35% TCA와 0.75% TBA (thiobarbituric acid) 1 mL씩 가하여 100℃ 수욕상에서 15분간 가열한 다음 3,000 rpm에서 15분간 원심분리 하였으며 상징액의 흡광도를 531 nm에서 측정하여 계산식, TBARS(%) = (1 - 시료흡광도/대조구흡광도) x 100에 의하여 산출하였다. Linoleic acid의 경우는 fish oil emulsion대신에 linoleic acid를 사용하였다.
4 mL을 순차적으로 가한 후 실온에서 15분간 방치, 520nm에서 흡광도를 측정하였다. 대조구는 Griess reagent 대신 증류수를 사용하였으며 계산식, nitrite scavenging activity(%) = 100 - [(시료 첨가구의 흡광도/무첨가구의 흡광도) x 100]에 의하여 산출하였다.
통기량은 manometer를 부착하여 10 L/min으로 조절하였다. 배양이 종료된 배양액은 3겹의 면포로 여과하여 여액은 동결건조 하였고(CFM), 분리된 균사체는 동결건조 한 후 5배량의 70% ethanol을 가하여 실온에서 하룻밤 추출, 농축한 후 동결건조 하여 MEM (mycelial ethanolic extracts of M. pilosus)을 제조하였다.
0)(30)에 이식하여 30℃의 shaking incubator (150 rpm)에서 10일간 배양하여 사용하였다. 본 배양은 동일배지 15 L을 넣은 20 L 유리병을 121℃에서 60분간 autoclaving 한 후 냉각하고, starter 1 L을 혼합, air filter (50JFO20AN, Toyo Rashi kaisha Ltd., Tokyo, Japan)와 air pump (DY-60, Dongyangsa, Kyungkido Sungnham, Korea)를 부착하여 30℃로 15일간 통기배양 하였다. 통기량은 manometer를 부착하여 10 L/min으로 조절하였다.
색상은 색차계(Chromameter CR-200 Minolta, Tokyo, Japan)로 측정하였으며, 밝기를 나타내는 L* (lightness), 적색도를 나타내는 a*(redness), 황색도를 나타내는 b*(yellowness) 및 H°(hue angle value)를 측정하였다.

대상 데이터

균주는 gram 양성균으로 Bacillus brevis KCTC 3498, Bacillus subtilis KCTC 1021, Listeria monocytogenes ATCC 19111, Staphylococcus aureus KCTC 1621, Staphylococcus epidermidis ACTC 12228을, gram 음성균으로 Escherichia coli ATCC 11775 및 Salmonella enteritidis ATCC 13076을 사용하였다. 항균력은 paper disc (Advantec Toyo Roshi Kaishi, Ltd.
1 mL을 가하여 37℃의 water bath에서 1시간 동안 반응시킨 후 420 nm에서 흡광도를 측정하였다. 대조구는 시료 대신에 50% methanol을 사용하였으며, 표준품 naringin (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA)의 검량선에 의하여 함량을 산출하였다.
실험에 사용한 균주는 한국종균협회에서 분양받은 Monascus pilosus KCCM 60084를 사용하였으며, 대조군으로는 홍국미 (Myco Co., Ltd, Gyeongbuk Gyeongju, Korea)를 사용하였다.
Reingard와 Zimmerli(35)의 방법을 기본으로 HPLC로 분석 하였다(Table 2). 표준용액은 citrinin (Sigma-Aldrich, St, MO, USA) methanol 용액을 사용하였으며 검량선 y=81097.48x-15.97에 의하여 함량을 산출하였다.
홍국미의 에탄올 추출물은 균질기 (Nihonseiki, Kaisha Ltd., Tokyo, Japan)를 사용하여 분쇄한 후 5배량의 70% ethanol을 가하여 실온에서 24시간 동안 추출한 후 Whatman No. 1 여과지로 여과하여 40℃에서 ethanol을 유거시킨 후 동결건조하여 EERB (ethanol extracts of rice beni-koji) 분말을 제조하였으며 -70℃에 두면서 실험에 사용하였다.

데이터처리

모든 실험은 3회 반복으로 행하여 평균치와 표준편차로 나타내었고, 유의성 검증은 version 12의 SPSS (Statistical Package for Social Sciences, SPSS Inc., Chicago, IL, USA) software package program을 이용하여 Duncan's multiple range test 및 t-test를 행하였다.

이론/모형

Blois (36)의 방법에 따라 시액 0.2 mL에 0.4 mM DPPH(1,1diphenyl-2-picryl-hydrazyl)용액 0.8 mL를 가하여 vortex 상에서 가하고 10분간 방치 한 다음 525 nm에서 흡광도를 측정하였으며 계산식, electron donating ability(%) = [1 - (시료흡광도/대조구흡광도)] x 100에 의하여 활성도를 산출하였다.
Kato 등(39) 및 Kim 등(40)의 방법에 따라 1 mM NaNO₂ 용액 1 mL에 시액 1 mL를 가하고 0.1 N HCl과 0.2 M citrate buffer (pH 2.5)를 가하여 총 부피를 10 mL로 조정하였다. 다음에 37℃에서 1시간 반응시킨 후 1 mL를 취하여 2% 초산용액 3 mL와 30% 초산용액으로 용해한 Griess reagent (1% sulfanilic acid : 1% naphthylamine = 1 : 1) 0.
Marklund와 Marklund(38)의 방법에 따라 시액 200 μL에 pH 8.5로 조정한 tris-HCl buffer 용액 3 mL와 7.2 mM pyrogallol 200 μL을 가하고 25℃에서 10분간 반응시킨 후 1 N HCl 1 mL를 가하여 반응을 정지시키고 420 nm에서 흡광도를 측정하였으며 계산식, SOD-like activity(%) = 100 - [(OD of sample/OD of control ) x 100]에 의하여 활성을 산출하였다.
Reingard와 Zimmerli(35)의 방법을 기본으로 HPLC로 분석 하였다(Table 2). 표준용액은 citrinin (Sigma-Aldrich, St, MO, USA) methanol 용액을 사용하였으며 검량선 y=81097.
Thiobarbituric acid reactive substances(TBARS)는 fish oil과 linoleic acid를 기질로 하여 Buege와 Aust(41)의 방법에 따라 측정하였다. Fish oil 0.
수분함량은 적외선 수분측정기 (HG53, Mettler Toledo, USA)를 사용하여 측정하였으며, 색소함량은 Kang과 Jung(31)의 방법에 따라 균사체와 배양여액 각 10 g(mL)에 95% ethanol 50 mL을 가하여 균질기(Nihonseiki, Kaisha Ltd., Tokyo, Japan)로 12,000 rpm에서 5분간 파쇄한 후 15분간 추출하여 Whatman No. 1로 여과한 여액의 흡광도를 500 nm에서 측정하였다.
총 폴리페놀 함량은 Dewanto 등(32)의 방법에 따라 시액 100 μL에 2% sodium carbonate 2 mL과 50% Folin-Ciocalteu reagent 100 μL을 가한 후 720 nm에서 흡광도를 측정하였으며 gallic acid (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA)의 검량선에 의하여 함량을 산출하였다.
총 항산화 활성은 Prieto 등(33)의 방법에 따라 배양여액 및 균사체 추출액 0.1 mL에 0.6 M sulphuric acid, 28 mM sodium phosphate 및 4 mM ammonium molydate(1:1:1, v/v) 혼합용액 1 mL를 가하여 95℃에서 90분간 반응시킨 후 실온으로 냉각시켜 695 nm에서 흡광도를 측정 하였으며 표준품 α-tocopherol (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA)의 검량선에 의하여 함량을 산출하였다.
항균력은 paper disc (Advantec Toyo Roshi Kaishi, Ltd., Tokyo, Japan)법으로 측정하였으며(42), 배지는 DifcoTM nutrient broth 및 agar (Becton, D Kkison & CO., Sparks, MD, USA)를, 도말균수는 107 cells/mL, 시료의 농도는 100 µg/disc로 하였다.

성능/효과

69%, w/w)보다 높았다. 1%에서의 전자공여능은 MEM (72.25%), CFM (86.20%), BHT (72.25%), EERB (44.82%)로 MEM과 CFM이 BHT보다 높거나 유사하였으며, 환원력도 비슷한 결과를 나타내었다. SOD 유사활성은 MEM (39.
모두 농도가 증가함에 따라 비례적인 증가를 나타내었다. 10 mg%의 낮은 농도에서는 2.0~3.7%를 나타내었으며 1000 mg%에서는 MEM 72.25%, CFM 86.20%, BHT 79.17%, EERB 44.82%로 CFM에서 가장 높았으며 MEM은 BHT와 유사하였고 EERB에서 가장 낮았다. 1000 mg% 에서의 환원력(OD₇₀₀)은 MEM 2.
1000 mg%에서의 아질산염소거능은 CFM (79.42%) > EERB (74.37%) > MEM (62.78%)> BHT (48.46%) 순으로 MEM, CFM 및 EERB 모두가 BHT 보다 높은 활성을 나타내었다.
TBARS(%)는 MEM이 BHT보다 다소 낮았으나 CFM과 EERB보다 높았다. B. brevis와 E. coli에 대한 항균성은 CFM이 MEM보다 높았으며 B. subtilis, L. monocytogenes, S. aureus, S. epidermidis, S. enteritidis에 대한 항균성은 MEM이 CFM보다 높았으나 EERB 및 BHT 경우보다는 낮았다.
7과 같다. B. brevis와 E. coli에 대한 항균성은 CFM이 MEM보다 다소 높았으나 B. subtilis, L. monocytogenes, S. aureus, S. epidermidis, S. enteritidis에 대한 항균성은 MEM이 CFM보다 높은 경향을 보였다. 그러나 이들의 항균성은 EERB보다 낮았으며, EERB는 B.
MEM 및 CFM의 SOD 유사활성 및 아질산염소거활성은 모두 농도증가에 비례하여 활성이 증가 되었으며 1000 mg%에서의 SOD 유사활성은 MEM (39.85%) > BHT (37.68%) > EERB (26.70%) > CFM (21.35%) 순으로 MEM은 BHT보다 다소 높은 활성을 나타내었다.
MEM, CFM, EERP, BHT가 불포화지방산이 많이 함유된 fish oil 및 linoleic acid의 과산화를 억제하는 정도(TBARS%)를 측정한 결과(Fig. 6), MEM은 fish oil과 linoleic acid 모두에서 BHT보다는 다소 낮은 값을 보였으나 CFM과 EERB보다는 높은 값을 나타내었다.
49%가 낮았다. TF 함량은 EERB (4.46%, w/w)가 MEM (0.64%, w/w) 및 CFM (0.66%, w/w)보다 현저히 높았다. 총 항산화능은 CFM (3.
MEM, CFM 및 EERB의 total polyphenol (TP), total flavonoid (TF) 함량 및 총 항산화능을 조사한 결과는 Table 5와 같다. TP 함량은 MEM 4.68%(w/w), CFM 4.29%(w/w)로 유사하였으나 EERB는 3.70%(w/w)으로 CFM 및 MEM 보다 15.95~26.49%가 낮았다. TF 함량은 EERB (4.
87 보다는 낮았으며 L*값, a*값, b*값 및 hue angle의 결과와 일치하였다. Total monacolin K의 함량은 MEM (24.91 mg%)이 CFM (1.27 mg%) 및 EERB (15.03 mg%)에 비하여 높았으나 활성형 monacolin K의 함량은 EERB (5.48 mg%), MEM (3.35 mg%), CFM (0.40 mg%)으로 EERB가 높았다. Citrinin은 모든 시료에서 검출되지 않았다.
Citrinin은 모든 시료에서 검출되지 않았다. Total polyphenol 함량은 MEM (4.68%, w/w), CFM (4.29%, w/w), EERB (3.70%, w/w)로 MEM과 CFM에서 높았다. 그러나 total flavonoid 함량은 EERB(4.
enteritidis에 대한 항균성은 MEM이 CFM보다 높은 경향을 보였다. 그러나 이들의 항균성은 EERB보다 낮았으며, EERB는 B. subtilis, S. aureus, E. coli에 대한 clear zone이 BHT보다 현저하였다.
7배 높았다. 그러나 활성형의 함량은 EERB 5.48 mg%, MEM 3.35 mg%, CFM 0.40 mg%로 EERB가 MEM보다 높았으며, 비활성형의 함량은 MEM이 EERB에 비하여 2.3배가 높았으나 CFM에서는 현저히 낮았다. Citrinin은 MEM, CFM, EERB 모두에서 검출되지 않았다.
또 Holasova 등(55)은 phenol성 물질의 함량이 높을수록 항산화력이 증가한다고 하였다. 따라서 M. pilosus 균사체와 그 배양여액의 전자공여능과 환원력이 홍국미 또는 BHT와 대등하거나 높은 현상은 이들의 생리적 기능성이 항산화력에 의한 효과임을 시사한다.
TBARS는 지질과산화물의 분해로 생성된 aldehyde의 생성도를 나타내는 지표로 수치가 높을수록 과산화물의 생성도가 낮음을 의미한다(61). 따라서 상기의 결과는 M. pilosus 균사체 추출물과 그 배양여액이 지방산의 산화를 억제함으로서 산화적 스트레스로 인한 세포 조직의 손상을 경감하거나 식품의 보존성 증진에 효과가 있음을 나타낸다.
35% 이었다. 색소함량(OD500)은 MEM (0.79)이 CFM (0.63)보다 25%가 높았으나 시판홍국미 에탄올추출물(EERB) 0.87 보다는 낮았으며 L*값, a*값, b*값 및 hue angle의 결과와 일치하였다. Total monacolin K의 함량은 MEM (24.
pilosus 균사체와 균사체를 제거시킨 여액을 동결건조 하였을 때의 수율과 색소 함량을 시판 홍국미와 비교한 결과는 Table 3과 같다. 수율은 MEM (mycelial ethanolic extracts of M. pilosus), CFM (culture filtrate of M. pilosus) 및 EERB (ethanol extracts of rice beni-koji) 각각 4.02%, 3.35% 및 2.46%이었다. 색소 함량(OD₅₀₀)은 MEM(0.
66%, w/w)보다 현저히 높았다. 총 항산화능은 CFM (3.51%, w/w)이 MEM (2.74%, w/w) 및 EERB (1.69%, w/w)에 비하여 1.6~2.1배가 높았다.
66%, w/w)으로 EERB에서 높았다. 총 항산화능은 CFM이 3.51%(w/w)로 MEM (2.74%, w/w) 및 EERB (1.69%, w/w)보다 높았다. 1%에서의 전자공여능은 MEM (72.
3). 활성형과 비활성형을 합한 total monacolin K의 함량은 MEM이 24.91 mg%로 CFM의 1.27 mg%에 비하여 19.6배가 높았으며 EERB보다는 1.7배 높았다. 그러나 활성형의 함량은 EERB 5.

질의응답

핵심어	질문	논문에서 추출한 답변
	Monascus속의 곰팡이란?	Monascus속의 곰팡이는 진균류문 Ascomytina강 Plectomycete목 Monascaseae과에 속하는 미생물(1)로 유성생식과 무성생식을 통해 생육하며 2차대사산물로 monacolin K(mevinolin), dihydromonacholin L, 3-hydroxy dihydromonacholin L, monacholin L, monacholin J, monacholin X 등의 polyketides (2,3)와 monascin, ankaflavin, monascorubin, rubropunctatin, monascorubramine 및 rubropunktatamine 등의 색소 및 GABA와 같은 기능성 성분을 생성하는 특성을 지니고 있다(4). Monacolin K는 항진균(5), 혈당상승억제(6), 혈압조절과 콜레스테롤 생합성 억제(7) 및 항암(8) 효과가 있으며 색소는 돌연변이원성 heterocyclicamine을 분해하는 항돌연변이원 효과(9,10)가, GABA는 항고혈압효과(11)가 있는 것으로 보고되어 있다.
	Monascus속의 곰팡이의 2차 대사산물 중 monacolin K는 어떤 효과가 있는가?	Monascus속의 곰팡이는 진균류문 Ascomytina강 Plectomycete목 Monascaseae과에 속하는 미생물(1)로 유성생식과 무성생식을 통해 생육하며 2차대사산물로 monacolin K(mevinolin), dihydromonacholin L, 3-hydroxy dihydromonacholin L, monacholin L, monacholin J, monacholin X 등의 polyketides (2,3)와 monascin, ankaflavin, monascorubin, rubropunctatin, monascorubramine 및 rubropunktatamine 등의 색소 및 GABA와 같은 기능성 성분을 생성하는 특성을 지니고 있다(4). Monacolin K는 항진균(5), 혈당상승억제(6), 혈압조절과 콜레스테롤 생합성 억제(7) 및 항암(8) 효과가 있으며 색소는 돌연변이원성 heterocyclicamine을 분해하는 항돌연변이원 효과(9,10)가, GABA는 항고혈압효과(11)가 있는 것으로 보고되어 있다. 따라서 이들균을 쌀에 번식시킨 홍국(rice beni-koji)은 홍주, 홍두부, 육류가공 및 음식물의 착색제 등으로 이용되며(12) 의약품 또는 건강보조식품의 이용에 관한 연구들이 활발하게 이루어지고 있다(13,14).
	Monascus속의 곰팡이는 어떻게 생육 되는가?	Monascus속의 곰팡이는 진균류문 Ascomytina강 Plectomycete목 Monascaseae과에 속하는 미생물(1)로 유성생식과 무성생식을 통해 생육하며 2차대사산물로 monacolin K(mevinolin), dihydromonacholin L, 3-hydroxy dihydromonacholin L, monacholin L, monacholin J, monacholin X 등의 polyketides (2,3)와 monascin, ankaflavin, monascorubin, rubropunctatin, monascorubramine 및 rubropunktatamine 등의 색소 및 GABA와 같은 기능성 성분을 생성하는 특성을 지니고 있다(4). Monacolin K는 항진균(5), 혈당상승억제(6), 혈압조절과 콜레스테롤 생합성 억제(7) 및 항암(8) 효과가 있으며 색소는 돌연변이원성 heterocyclicamine을 분해하는 항돌연변이원 효과(9,10)가, GABA는 항고혈압효과(11)가 있는 것으로 보고되어 있다.

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저자의 다른 논문 :

표제어: PCR

동의어: Packet Collision Rate

용어 설명 출처 목록 (6)

용어 설명: PCR은 세균 특이성이 있는 primer를 이용하여 적은 수의 세균이 있을지라도 쉽게 검출할 수 있는 유용한 방법이며, 이를 이용하여 구강 내 치면세균막이나 타액에서 직접 세균을 검출할 수 있게 되었다[8].

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